脐血CD34+造血干/祖细胞及其亚群的研究

近年来,脐血在肿瘤、白血病和放射病的临床治疗中初步显现出广阔的前景。为进一步探讨脐血造血干/祖细胞(ＨＳＣ/ＨＰＣ)的生物学特性,本文作者采用单克隆抗体技术及流式细胞术检测了脐带血ＣＤ34 细胞及其亚群的分布,并与成人外周血和骨髓进行了比较,以期为脐血的合理使用提供实验资料。一、材料和方法1试剂与仪器:异硫氰酸荧光素(ＦＩＴＣ)标记的小鼠抗人ＣＤ34单克隆抗体(ＭｏＡｂ),藻红蛋白(ＰＥ)标记的小鼠抗人ＣＤ38ＭｏＡｂ,分别以ＦＩＴＣ及ＰＥ标记的小鼠ＩｇＧ1ＭｏＡｂ(均为美国Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ出品)。ＦＡＣＳｃａｎ型流式…     

人脐静脉内皮细胞支持体外造血和造血干／祖细胞扩增

目的 :研究人脐静脉内皮细胞 (humanumbilicalveinendothelialcell ,HUVEC)对体外造血和造血干 /祖细胞扩增的支持作用 ,为造血干 /祖细胞体外扩增提供新的实验资料。方法 :用甲基纤维素集落形成实验检测集落形成情况 ,采用HUVEC与脐血单个核细胞和CD34+细胞直接接触共培养的方法观察HUVEC对体外造血和造血干 /祖细胞扩增的支持作用。结果 :HUVEC上清具有集落刺激活性。将HUVEC与脐血单个核细胞直接接触共培养 ,结果表明HUVEC能维持脐血单个核细胞体外存活至少 4周。将脐血CD34+细胞与HUVEC直接接触共培养 ,动态地观察有核细胞扩增倍数、CD34+细胞扩增倍数、CD4 1a+细胞百分比和CFU GM扩增倍数的变化。结果发现 ,有核细胞扩增倍数、CD34+细胞扩增倍数和CD4 1a+细胞百分率均在第 3周达最高 ,分别为 (6 8.1± 14.8)倍、(6 .6± 1.4 )倍和 15.6 % ,而CFU GM扩增倍数则于第 2周达最高 ,为 (5.7± 2 .1)倍。结论 :HUVEC能支持体外造血和造血干 /祖细胞扩增并具有促进巨核系细胞分化的能力     

骨髓和动员外周血中CD34+细胞基因表达差异的研究

为探讨骨髓的造血干细胞和动员的外周血造血干细胞在基因表达水平是否有差别，作者以CD34抗原作为造血干细胞的标记，筛选出同一个供者的静息散骨髓和经G－CSF（granulocyte colony-stimulating factor）动员后的外周血CD34^ 细胞，用抑制性消减杂交（suppression subtractive hybridization,SSH）技术检测两种来源的CD34^ 细胞的基因表达差异。结果发现，动员外周血CD34^ 细胞有１１个高表达基因，主要涉及的基因有核蛋白、转录调节因子、锌指蛋白和干扰素相关的分析。提示动员外周血CD34^ 细胞与静息期骨髓CD34^ 细胞基因表达谱并不完全相同，从而导致其生物学行为的差异。因此，进一步的研究可能对造血干细胞的迁移、归巢过程有更深的了解，对如何加速造血干细胞移植后造血功能的恢复具有一定的意义。     

胎肝及骨髓来源造血干/祖细胞电离辐射敏感性的比较研究

目的研究电离辐射对胎肝与骨髓来源造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)的影响差异。方法取14.5 d小鼠胎肝及8周龄小鼠骨髓, 分选c-Kit+细胞体外接受60Co单次5、10 Gy照射, 检测HSPCs中细胞凋亡、线粒体活性氧(ROS)水平、集落形成能力、DNA损伤情况。将12只CD45.1背景的C57BL/6J小鼠按随机数表法分成骨髓组(BM)和胎肝组(FL), 60Co全身照射, 第1次4.5 Gy照射, 间隔30 min后再进行第2次5 Gy剂量照射, 6 h后进行移植, 12周后检测嵌合率、谱系分化以及细胞周期。分选胎肝及骨髓的c-Kit+细胞检测线粒体压力。结果与骨髓HSPCs相比, 照射后胎肝HSPCs的细胞凋亡比例显著升高(t=16.21、12.27, P<0.05), ROS水平显著增加(t=68.72、18.89, P<0.05);集落形成能力显著降低, 在5 Gy时胎肝HSPCs成集落能力显著降低, 照射剂量为10 Gy时完全不能形成集落(t=12.41、15.67、9.46, P...     

放射损伤病人的造血干／祖细胞移植研究进展

随着核能与核技术的发展,以及放射性核素的应用日益广泛,为核战争条件下急性放射病病人以及和平利用原子能中意外核事故受害者的治疗提供及时、有效的造血干／祖细胞移植,是极其重要的研究课题。     

正常人骨髓CD34~＋造血干／祖细胞的超微特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的超微特征１０００３９北京军事医学科学院附属医院奚永志，张双喜，江飞子，唐佩弦，魏文，孔繁华关键词造血于细胞；超微结构中国书资料分类号Ｒ３２９．２４经典的干细胞概念仅基于细胞的功能方面，无任何形态学的特征。那么ＨＳ...     

G-CSF对健康人骨髓和外周血CD34+细胞和T细胞亚群影响的动态观察

目的 :探讨G -CSF对健康人骨髓及外周血CD3 4 + 细胞和T细胞亚群的影响。方法 :对 12例健康人 ,以G -CSF15 0 μg/ 12h ,皮下注射 ,连用 6d。应用流式细胞仪测定CD3 4 + 和T细胞亚群。结果 :应用G -CSF4 8h后 ,骨髓CD3 4 + 细胞开始明显增加 ,72h后外周血CD3 4 + 细胞开始明显增加 ,96h后两者达峰值 ,均较应用前差异显著 (P <0 .0 1)。T淋巴细胞亚群变化不明显 (P>0 .0 5 )。结论 :健康人应用G -CSF后骨髓及外周血CD3 4 + 细胞逐渐增加并于 96h后达到高峰 ,T细胞亚群则无明显变化。     

rhM-CSF扩增的基质细胞联合造血干/祖细胞输注对小鼠造血重建作用的初步观察

增殖期造血细胞是机体中对辐射最敏感的细胞。各种急、慢性放射病 ,都直接或间接地与造血功能的改变 ,包括因造血功能衰竭所引起的出血和感染有关 ,造血干 祖细胞移植是改善急性放射损伤所致造血功能障碍的主要方法之一。骨髓基质细胞是组成骨髓造血微环境的主要细胞成份 ,由其产生的多种细胞因子对造血细胞归巢、增殖和分化产生关键的作用。有研究报道[1 ,2 ] 基质细胞与骨髓造血干 祖细胞(ＨＳＣ)联合回输可加快骨髓造血重建 ,但由于基质细胞来源困难 ,限制了该方法的应用。笔者应用ｒｈＭ ＣＳＦ体外有效地扩增小鼠骨髓来源基质细胞 ,继…     

不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34+造血干细胞死亡规律

目的 探讨不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞的死亡规律。方法 以流式细胞术PE－CD34^ ／FITC－AmnexinV/7AAD三色荧光法、多参数分析了受不同剂量γ射线照射后,不同时间点的胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞凋亡、坏死和存活的时效和量效变化特点。结果 受大剂量率γ射线1次5Gy和8Gy照射后,和骨髓CD34^ 造血干细胞的死亡是在照射后为期1周的连续性死亡,既有凋亡又有坏死,但是以凋亡为主;受大剂量率γ射线1次10Gy和12Gy照射后,胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞则在受照后当天即大量坏死,在持续1周内全部死亡。结论 受大剂量率γ射线1次照射后,造血干细胞在1周内发生了增殖期死亡而连续性空出所占据的龛位。     

SDF—1的生物学功能及在干／祖细胞归巢中的作用

造血干/祖细胞归巢的分子机制尚不清楚。近年来的研究发现，基质细胞来源的细胞因子或称为趋化蛋白SDF-1及其配体CXCR4参与了趋化造血干/祖细胞向骨髓的迁徒、与骨髓微血管内皮的粘附、穿内皮迁徒、与骨髓基质细胞粘附的归巢全过程，在干/祖细胞归巢过程中可能有关键性的作用。     

替代微量脐血CD34^＋造血干细胞含量公认检测方法的分析

脐血CD34^＋造血干细胞含量的测定一般采用流式细胞仪进行检测,而同一份脐血采用不同的实验方法可能得出不同的结果。ISHAGE方法是一种公认的准确性高、重复性好的检测造血干细胞含量的方法，但是所需费用较高，国内使用这种方法的实验室还不多。因此，文献另外选择4种检测方法对同一样品的检测结果与ISHAGE方法进行比较，     

流式细胞术对免疫磁珠法富集的CD34^＋造血干／祖细胞分析与鉴定

流式细胞术对免疫磁珠法富集的ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞分析与鉴定１００８５０北京军事医学科学院张双喜，奚永志，唐佩弦关键词造血干细胞；流式细胞术；细胞分离术中国图书资料分类号Ｑ３３ＣＤ３４＋造血细胞为造血调控的基础研究、骨髓移植与基因治疗的最理想的靶...