直接免疫荧光法检测儿童多种呼吸道病毒抗原的临床应用

目的探索一种高效、快速检测呼吸道病毒抗原的方法,为儿童呼吸道病毒感染诊断提供帮助。方法采用直接免疫荧光法D3 UhraTMDFA试剂盒,对400例住院呼吸道感染患儿呼吸道分泌物中合胞病毒（RSV）、副流感病毒（pinf-1,pinf-2,pinf-3）、流感病毒（inf-A,inf-B）、腺病毒3（ADV3）抗原进行检测。结果（1）在400例呼吸道感染患儿,呼吸道病毒抗原阳性者140例,阳性检出率为35％。其中RSV78例（55．7％）、ADV6例（4．3％）、pinf-12例（1．4％）、pinf-22例（1．4％）、pinf-34例（2．9％）、inf-A28例（20．O％）、inf-B14例（10．0％）、混合型6例（4．3％）;（2）冬季是最易好发季节;（3）〈3岁的患儿病毒检出率最高。结论（1）直接免疫荧光法是一种高效、快速检测呼吸道病毒抗原的方法,适合基层医院普及。（2）运用D3Ultra TMDFA试剂,直接免疫荧光法,可同时检测多种呼吸道病毒抗原,灵敏度高。     

深圳市儿童腹泻标本病毒病原学初步分析

目的 对深圳市腹泻儿童中轮状病毒、肠道腺病毒、星状病毒、诺瓦克类病毒的感染进行调查和初步分析.方法 采用酶联免疫技术(ELISA)和核酸扩增检测技术(PCR)对2007年8月～2008年3月的82份腹泻标本进行病毒检测,PCR阳性标本进行测序,并与GenBank中公布的基因进行同源性比较.结果 82份标本病毒抗原酶联免疫检测总阳性率为64.6%(53/82),病毒核酸检测总阳性率为67.1%(55/82).其中酶联免疫法轮状病毒、星状病毒、诺瓦克病毒、肠道腺病毒的阳性率分别为54.9%,0,7.3%,4.9%.PCR法轮状病毒、星状病毒、诺瓦克病毒、肠道腺病毒的阳性率分别为50%,1.2%,11%,12.2%.测序比较结果表明轮状病毒,星状病毒,诺瓦克病毒,肠道腺病毒与GenBank中公布的基因序列同源性比较符合率分别为92%～100%,90%～100%,94%～100%,90%～100%.结论 深圳市儿童腹泻的病毒感染率比较高.酶联免疫技术的灵敏度和准确度低于核酸检测技术,酶联免疫技术检测病毒抗原适合于基层医院使用.耍幼儿腹泻标本病毒检测对降低耍幼儿死亡率有重要的作用.     

直接免疫荧光法检测病毒抗原在小儿呼吸道感染性疾病诊断中的价值研究

目的 探究小儿呼吸道感染性疾病诊断中应用直接免疫荧光法检测病毒抗原的效果.方法 回顾性选取2020年7月—2021年6月贺州广济医院呼吸道感染的住院患儿1503例,均行直接免疫荧光法检测病毒抗原,分析患儿检测结果.结果 经统计,纳入患儿共计诊出254例(16.90％)小儿呼吸道病毒感染性疾病,以呼吸道合胞病毒(RSV)...     

乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值

目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值。方法将临床样本分为3组,同时进行ELISA法与PCR检测HBV-DNA含量水平的测定。第1组为HBsAg(阳性)、HBeAg(阳性)、抗-HBc(阳性)的患者。第2组为HBsAg(阳性)、抗-HBe(阳性)、抗-HBc(阳性)的患者,第3组为HBsAg(阳性)、抗-HBc(阳性)的患者,组与组之间进行阳性率及HBV-DNA含量的t检验。结果 228例临床样本的检测结果显示,第1组患者HBV-DNA阳性率为100%,显著高于其他各组,差异有统计学意义(P0.01)。HBV-DNA平均含量为7.53×108copy/mL。第2组患者HBV-DNA阳性率低于第1组,两组比较差异有统计学意义(P0.01),但平均HBV-DNA含量为9.58×107copy/mL,与第1组比较差异无统计学意义(P0.05)。第3组患者HBV-DNA阳性率为51.8%,与第1组比较差异有统计学意义(P0.01),但与第2组比较差异无统计学意义(P0.05),患者的HBV-DNA含量为7.74×107copy/mL,与第1、2组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论实时荧光定量PCR所测HBV-DNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对抗病毒药物的选择和判断疾病的预后有一定的临床价值。     

双抗原夹心ELISA检测抗HIV的临床诊断价值

目的 分析双抗原夹心ELISA检测抗HIV的临床诊断价值.方法 选取2018年1月～2019年6月我院检验科提供的25份抗HIV血清为观察组,选取同期健康体检的150份血清作为对照组,分别采用双抗原夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)、间接酶联免疫吸附实验(ELISA)及金标免疫层析实验等,对比不同检测方式诊断阳性率.结...     

他克莫司在临床检测中的方法学比较

目的通过方法学比较为临床推荐一种更精确可靠的检测方法并为临床用药提供科学客观的参考依据。方法以目前常用的酶联免疫法（ELISA）和微粒子酶免疫（MEIA）技术，检测58例肝移植和肾移植患者血清中他克莫司的浓度，比较两者间的相关性。结果统计分析显示两种方法之间有较好的相关性（r=0.972），但两组结果比较有显著性差异（P〈0.01），MEIA法检测值普遍比前者高。结论两种方法之间有较好的相关性，适合临床批量样本测试。但两种方法的检测结果没有可比性，不应互相比较。     

EB病毒6项抗体联合检测在临床诊断中的应用

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测EB病毒抗体谱的临床应用价值。方法采用ELISA法对2 526例该院住院患者进行EB病毒6项抗体联合检测,结合病理诊断结果对EB病毒6项抗体联合检测结果进行统计分析,探讨EB病毒感染与疾病的关系。结果 2 526例住院患者中有32例经病理诊断为鼻咽癌,占1.27%。抗EB病毒衣壳抗原抗体IgA(EBVCAIgA)、抗EB病毒早期抗原抗体IgG(EBVEA-IgG)、抗EB病毒早期抗原抗体IgA(EBVEA-IgA)阳性共18例,阳性率为56.25%;EBVCA-IgA、EBVEA-IgG阳性10例,阳性率为31.25%;EBVCA-IgA、EBVEA-IgA阳性3例,阳性率为9.38%。2 526例住院患者中有52例为儿童患者,上述3种抗体阳性模式所涉及的疾病主要为呼吸、消化、血液等系统疾病,且以呼吸系统疾病为主(57.7%),但均未诊断为鼻咽癌。结论 EB病毒抗体阳性模式中EBVCA-IgA、EBVEA-IgG、EBVEA-IgA阳性或EBVCA-IgA、EBVEA-IgG阳性或EBVCA-IgA、EBVEA-IgA阳性在成年人中可诊断为鼻咽癌,而在儿童中出现以上检测结果,则不一定能诊断为鼻咽癌。但EB病毒6项抗体联合检测对儿童EB病毒感染引起的相关疾病具有参考价值。     

酶联免疫法在HIV感染诊断中的应用价值

目的探讨酶联免疫法在HIV感染诊断中的应用价值。方法对收治的106例高危人群(吸毒或男性同性恋者)、临床上怀疑HIV感染的患者分别应用酶联免疫法(ELISA)及胶体金法进行HIV抗体的检测,比较两种检测方法的检测效果。结果 ELISA复查,阳性51例,阳性率为98.09%,特异性为98.07%,敏感性为86.15%;胶体金法复查阳性47例,阳性率为90.38%%,特异性为78.96%,敏感性为76.15%;两种方法阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论酶联免疫法具有高敏感性和特异性,可用于高危人群HIV感染的诊断,可作为临床上快速筛查HIV感染者的有效方法。     

干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值

目的 探讨干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值。方法 收集疑似HIV感染患者血清样本351例,分别采用干式荧光发光法、ELISA进行检测,以免疫印迹法作为HIV的确证试验（金标准）,分析2种检测方法的敏感度、特异性、准确性、阴性预测值、阳性预测值、符合率和一致性。结果 ELISA的S/CO值显著高于干式荧光发光法（P<0.001）。趋势分析结果显示,干式荧光发光法的S/CO值随ELISA S/CO值的升高而升高,呈正相关（r=0.658,P<0.001）。351例样本中,干式荧光发光法阳性165例、阴性186例,ELISA阳性168例、阴性183例。2种方法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义（P>0.05）。干式荧光发光法与ELISA的阳性符合率为95.83%,阴性符合率为97.27%,总符合率为96.58%,一致性好（Kappa=0.931）。结论 干式荧光发光法检测快速、操作简便,与ELISA有较高的一致性,适用于基层医疗机构对HIV感染的快速筛查。     

时间分辨荧光免疫法检测乙型肝炎病毒标志物的效果评价

目的评价时间分辨荧光免疫法检测乙型肝炎病毒标志物的效果。方法用时间分辨荧光免疫法（TRFIA）和酶联免疫吸附试验法（ELISA）两种方法分别对330例疑为乙肝的血清标本进行检测,并进行对比分析。结果两组的乙型肝炎病毒标志物的符合率分别为：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）96．0％、乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）95．3％、乙型肝炎e抗原（HBeAg）95．4％、乙型肝炎e抗体（抗-HBe）93．0％、乙型肝炎核心抗体（抗-HBe）83．4％,经配时卡方检验P〈0．05,差异有统计学意义（TRFIA法的阳性预示值比率高于ELISA法）。结论TR—FIA法检测乙型肝炎病毒标志物准确度高、特异性好、可定量等优点,具有良好的应用价值。     

腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原快速检测及其临床意义

目的 探讨粪便中轮状病毒抗原对临床诊断的价值。方法 以520例秋冬季腹泻患儿为研究对象,应用轮状病毒单克隆抗体检测病毒抗原的方法,测定其大便中轮状病毒抗原。结果 检出轮状病毒抗原阳性患儿315例,阳性率为60.6％。将6 mo~2 y婴幼儿组与<6 mo婴儿组、2~6 y幼儿组作比较(x2检验)P<0.05及P<0.01,表明6 mo~2 y婴幼儿为轮状病毒感染的高发期。同一年龄组男女患儿间阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论 粪便中轮状病毒抗原检测是诊断轮状病毒肠炎较敏感的方法,对临床诊断该病提供了有价值的依据。     

时间分辨荧光免疫技术在检测HBV血清学标志物中的应用

目的比较时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)和ELISA法在检测HBV血清学标志物的价值。方法分别采用TRFIA和ELISA法检测359例低浓度乙肝表面抗原(HBsAg)标本的HBV血清学标志物,比较两种方法的检测结果的差异。结果TRFIA法检测HBV血清学标志物的各项结果阳性率均高于ELISA法,HBsAg、乙肝e抗原(HBeAg)和乙肝核心抗体(HBcAb)阳性率结果差异有统计学意义(P<0.05),而乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗体(HBeAb)阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论与ELISA法相比,TRFIA在检测含有低浓度HBsAg标本时具有更高的灵敏度,具有良好的临床应用价值。     

丙肝病毒核心总抗原定量检测的临床应用

目的 探讨定量检测丙型肝炎病毒核心总抗原（total HCV-cAg,tHCV-cAg）在丙型肝炎诊断中的作用及与病毒载量的相关性.方法 随机选取广州军区武汉总医院2010年10月-2013年3月丙肝患者血清标本66例,分别采用化学发光法检测血清tHCV cAg,酶联免疫法（ELISA）检测血清丙型肝炎游离核心抗原（free HCV-cAg,fHCV-cAg）及丙型肝炎抗体（hepatitis C virus antibody,HCV-Ab）,实时荧光定量PCR方法检测血清HCV-RNA,全自动生化分析仪检测血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）.比较HCV-RNA,tHCV-cAg及fHCV-cAg阳性率差异,同时分析tHCV-cAg与HCV-RNA及ALT相关性,探讨tHCV-cAg联合检测HCV-Ab与HCV-RNA检测符合率.结果 66例丙型肝炎患者血清中,tHCV-eAg阳性率与HCV-RNA阳性率差异无统计学意义（χ^2=0.165,P＞0.05）;tHCV-cAg量与HCV-RNA呈正相关：logHCV Ag=0.81 log HCV RNA-1.31（γ=0.83,P＜0.05）.tHCV-cAg阳性率与fHCV cAg阳性率差异有统计学意义（χ^2 =12.53,P＜0.05）.HCV-cAg阳性组ALT值异常率与HCV-eAg阴性组ALT值异常率差异有统计学意义（P＜0.05,χ^2=17.47）.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab符合率与HCV-RNA检测达100.00％.结论 化学发光法定量检测血清tHCV-cAg阳性率显著高于fHCV-cAg,与HCV RNA阳性符合率达96.08％ （49/51）,是丙型肝炎早期诊断的特异性指标.tHCV-cAg和HCV-RNA呈正相关性,与肝功能损害相关,是反映病毒的复制指标.tHCV-cAg联合检测HCV-Ab可减低丙型肝炎的漏诊率.     

丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值

目的通过同时检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)两项指标,且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测,探讨HCV-cAg检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对90例HCV-Ab阳性的感染者血清以及391例丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高但HCV-Ab阴性的高危人群血清同时检测HCV-cAg,其中高危人群组中有2例为阳性,对其做HCV-RNA定量检测。结果 90例丙肝抗体阳性组中,34例为HCV-cAg阳性,阳性率为37.78%;391例丙肝抗体阴性的高危人群组中,2例为HCV-cAg阳性,阳性率为0.51%,此2例经HCV-RNA定量检测确证为1例阳性,1例阴性。结论丙型肝炎病毒核心抗原检测能够有效缩短窗口期,操作简便,费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。     

三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析

目的：初步探讨三种方法对低浓度乙肝表面抗原（HBsAg）定性与定量检测的结果并进行对比分析。方法分别用酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与时间分辨荧光免疫法（TRFIA）测定2013年10月～2014年4月间于湖南旺旺医院就诊及体检的85例低浓度 HBsAg（ELISA法0.6＜S／CO≤3.0）标本,三种方法测定低浓度 HBsAg定性结果分为0.6＜S／CO≤1.0,0.6＜S／CO≤3.0两组采用检出阳性率进行χ2检验;HBsAg定量结果分为0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0,0.6＜S／CO≤3.0四组采用配对样本t检验进行两两比较;HBsAg含量相关性采用相关系数t检验进行两两分析。结果①HBsAg检出阳性率0.6＜S／CO≤1.0组 CMIA法（64.0％）和TRFIA法（54.0％）两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.333,P＞0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组 ELISA 法（70.6％）与CMIA法（89.4％）及TRFIA法（87.1％）之间差异有统计学意义（χ2值分别为9.412,6.907,P均＜0.05）,CMIA法和TR-FIA法两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.227,P＞0.05）。HBsAg检出阳性率 CMIA＞TRFIA＞ELISA。②HBsAg含量测定0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0三组除在2.0＜S／CO≤3.0组 ELISA法与 CMIA法之间,ELISA法与TRFIA法之间差异均有统计学意义（t值1.743～3.671,P均＜0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组三种方法之间差异均有统计学意义（t值分别为2.053,2.766,4.459,P均＜0.05）,总体含量CMIA＞TRFIA＞ELISA。③三种方法测定HBsAg含量之间均呈正相关关系（t值分别为2.928,2.939,60.915,P均＜0.05）,其中 CMIA法与 TRFIA法之间相关性最好（r＝0.989）。结论低浓度 HBsAg检测应首选 CMIA法,TRFIA法次之。对于 ELISA法检测低浓度 HBsAg标本应向临床建议用CMIA法或TRFIA法复查,避免漏检;并且不建议临床对不同方法测定定量或半定量结果间进行横     

中学生乙型肝炎病毒前S1抗原与乙型肝炎两对半检测结果分析

目的了解中学生乙型肝炎病毒（HBV）感染情况,对中学生乙型肝炎（下称乙肝）预防控制提供依据,并探讨HBV前S1抗原和乙肝两对半组合模式的关系及意义。方法采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）对1368例中学生进行乙肝两对半和前S1抗原检测,并对检测结果进行分析。结果1368例中,健康者1337例,占97．73％,其中6项全阴者544例,单项乙肝病毒表面抗体（抗-HBs）阳性者793例。感染者31例,感染率2．27％,在感染者中大三阳和小三阳各3例,阳性率9．68％,占总检测人数0．22％,其中前S1抗原检出率与大小三阳检出率分别为3／3、2／3。表面抗原阴性者中未检出前S1抗原。男女感染率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论两对半和前S1抗原联合检测是对中学生乙肝疫苗接种、复种和HBV携带者管理的可靠依据。前S1抗原检测是对乙肝两对半的完善和补充,对HBV感染、复制及预后有重要意义。     

Application of a new enzyme-linked immunosorbent assay for detection of total hepatitis C virus core antigen in blood donors

Recent studies have shown that total hepatitis C virus (HCV) core antigen, both free and antibody bound, is an accurate indirect marker of viral replication that can be used in clinical practice. The aim of the present study was to evaluate the performance of a new total HCV core antigen enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection and quantification of total core antigen in blood donors, testing positive for anti-HCV antibodies and for prospective low-risk population screening. A population comprising 257 samples, from blood donors detected reactive for anti-HCV antibodies [137 recombinant immunoblot assay (RIBA) positive and 120 RIBA indeterminate], were tested by using a new total HCV core antigen ELISA. HCV-RNA was quantified by using quantitative polymerase chain reaction (PCR) assays in all RIBA-positive samples and RIBA-indeterminate samples that were positive for the total core antigen. Specificity of the assay was studied in 1070 healthy blood donors negative for anti-HCV antibodies. Compared with quantitative PCR assays, the total HCV core antigen assay showed 97.37% sensitivity. The three HCV-RNA-positive samples, which tested negative for the total core antigen, had a low viral load (< 1.4 x 10(4) IU mL(-1)). All samples with more than 1.4 x 10(4) IU mL(-1) of viral RNA were positive for total core antigen, independent of the HCV genotype. Concentration of total core antigen correlated significantly with those of HCV-RNA (r = 0.614, P < 0.0001). Overall specificity in freshly collected blood donor specimens was 99.63%. Our data indicate that the total HCV core antigen ELISA has a sensitivity close to PCR assays in diagnosing HCV infection in blood donors with anti-HCV antibodies and shows an excellent specificity in volunteer donors. This assay, in combination with anti-HCV antibodies screening tests, could be an alternative to molecular assays for HCV infection screening in blood donors.     

乙型肝炎病毒感染者前S1抗原检测的临床意义

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）前S1抗原（PreS1Ag）与其他HBV标志物的关系,并探讨其相应的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和聚合酶链反应（PCR）方法对218例乙型肝炎（下称乙肝）患者和30例健康者进行HBV血清标志物、HBVPreS1Ag和HBVDNA检测。结果在所检人群中PreS1Ag和HBVDNA的检出率分别为62．5％和63．7％。在乙肝e抗原（HBeAg）阳性组和阴性组中PreS1Ag阳性率为87．2％和59．8％,HBVDNA阳性率为95．7％和57．1％。PreS1Ag和HBVDNA的阳性率相似。结论PreS1Ag是HBV感染、复制的指标,与HBV血清标志物联合检测可为乙肝的诊断和治疗提供可靠依据。     

3种方式检测乙型肝炎病毒前S1抗原的比较研究

目的探讨3种方式检测乙型肝炎病毒前S1(PreS1)抗原的异同,为检测方法的合理选用提供依据。方法用全自动酶免分析仪、时间分辨荧光分析法、手工酶联免疫吸附测定(ELISA)3种方式对乙型肝炎患者血清进行PreS1抗原检测;选择PreS1抗原强阳性血清和弱阳性血清分别用3种方式检测15次,对重复性进行比较;升高和降低反应孵育温度±3℃检测,对阳性率进行比较。结果 3种方式阳性检出率分别为93.53%,92.81%,92.81%;重复性自动酶免分析仪检测强阳性和弱阳性标本的变异系数(CV)分别为3.62%和13.42%;时间分辨荧光分析法检测强阳性和弱阳性标本的CV分别为5.10%和7.92%,手工ELISA检测强阳性和弱阳性标本的CV分别为11.10%和29.88%。改变反应孵育温度3℃,全自动酶免分析仪测得的所有检测标本S/CO值下降,增大了假阴性的概率,手工ELISA和时间分辨荧光分析法所有检测标本的S/CO值升高,增大了假阳性几率。结论全自动酶免分析仪的检出率和重复性较好,时间分辨荧光分析法次之,手工方法较差。     

化学发光微粒子免疫测定技术对低风险人群HCV感染确证的应用价值

目的应用化学发光微粒子免疫测定(CMIA)技术检测一种酶联免疫吸附试验(ELISA1)反应性样本,通过HCV核酸和蛋白检测参考标准分析CMIA在献血者HCV感染确证中的应用价值。方法 102例ELISA1反应性献血者血液样本补充核酸3项联检、另一种酶联免疫吸附试验(ELISA2)、丙型肝炎病毒抗体补充试验(Western Blot法)和CMIA试验。结果 102例抗-HCV阳性献血者中,32例(31.37%,32/102)HCV RNA反应性样本,50例(49.02%,50/102)ELISA2及Western Blot均为反应性。以HCV核酸检测结果为参考标准,CMIA与之低度相关(Spearman相关系数rs=0.395,P0.01),Kappa检验两者一致性弱(Kappa=0.270,P0.01)。以ELISA2及Western Blot蛋白检测结果为参考标准,CMIA与之结果高度相关(Spearman相关系数rs=0.713,P0.01),Kappa检验两者高度一致性(Kappa=0.674,P0.01)。结论 CMIA作为HCV感染后蛋白标记物的检测方法,对低风险人群HCV病毒感染的确证有较大的应用价值。