零陵香挥发性成分的SPME-GC/MS分析

目的采用固相微萃取-气相/质谱(SPME-GC/MS)联用技术分析零陵香挥发性成分。方法利用75μm碳分子筛/聚二甲基硅氧烷(75μm CAR/PDMS)、65μm二乙烯基苯/聚二甲基硅氧烷(65μm DVB/PDMS)、85μm聚丙烯酸酯(85μm PA)和100μm聚二甲基硅氧烷(100μm PDMS)共4种不同涂层的固相微萃取(SPME)萃取头,在最佳条件下,分别对零陵香挥发性成分进行萃取,并通过气相/质谱(GC/MS)联用分析检测其化学成分。结果零陵香挥发性成分SPME关键参数为:萃取温度80℃、时间50 min。4种萃取头共检出零陵香挥发性成分10类103种,酚类、酯类和烃类化合物是零陵香挥发性成分的主要化学类型。4种萃取头检出共有成分6种,分别为葫芦巴内酯、二氢猕猴桃内酯、(+)-雪松醇、植酮、菲、3-氨基-4,5-二甲基-2(5H)-呋喃酮;各萃取头中75μm CAR/PDMS萃取头检出挥发性成分数量最多。结论本文首次采用SPME-GC/MS对零陵香挥发性成分进行测定。该方法简单、快速、准确,为零陵香物质基础研究提供参考借鉴。     

顶空固相微萃取-气相色谱法测定水中的硝基苯

本文采用顶空固相微萃取-相色谱联用技术测定了水中硝基苯的含量。使用聚二甲基硅氧烷（PDMS涂层）商品固相微萃取进样器,气-液平衡时间30min,萃取时间为25min,温度为60℃。色谱柱为2m×3mmi．d．的不锈钢柱;内填充GDX-102（60—80目）。硝基苯测定结果的相对标准偏差（RSD）为0．18％,在0．01～0．1mg·L^-1时,色谱峰高与质量浓度之间相关系数（r^2）为0．9909,检出限为0．015mg·L^-1     

Graves病患者治疗前后细胞因子的变化

目的　测定 Graves病 (GD)患者血清肿瘤坏死因子(TNF- α)、白细胞介素 1(IL- 1)、白细胞介素 2 (IL- 2 )、白细胞介素 6 (IL - 6 )的水平及在抗甲状腺药物治疗过程中的变化 .方法　 32例 GD患者在确诊时、治疗约 6周和 6月时用放射免疫法测定血清 TNF- α,IL- 1,IL- 2 ,IL- 6 ,TSH,TT3,TT4的水平 . 2 5例年龄与性别相匹配的健康志愿者作为正常对照 .结果　 1与正常对照组相比 ,TNF- α在缓解前明显降低 (1.0 1± 0 .18)μg· L- 1 (P<0 .0 0 1) ,缓解中开始升高(1.2 7± 0 .19)μg· L- 1 ,缓解后继续升高 (1.42± 0 .17)μg·L- 1 ,但仍低于正常对照组 (1.6 9± 0 .15 ) μg· L- 1 ;IL- 1,IL-6在缓解前明显升高 (0 .39± 0 .0 9)μg· L- 1 ,(1.79± 0 .2 1)μg· L- 1 (P<0 .0 1) ,缓解中即降低 (0 .2 8± 0 .0 7) μg· L- 1 ,(1.5 1± 0 .19) μg· L- 1 ,缓解后 (0 . 2 1± 0 . 0 7) μg· L- 1 ,(1.40± 0 .2 1)μg· L- 1 与正常对照组 (0 .2 0± 0 .0 6 )μg· L- 1 ,(1.41± 0 .16 )μg· L- 1 无显著差异 ;IL - 2在缓解前明显降低(4 .2± 1.2 ) μg· L- 1 (P<0 .0 1) ,缓解中即升高 (5 .0± 1.7)μg· L - 1 ,缓解后 (6 .1± 2 .7) μg· L- 1与正常对照组 (6 .3± 2 .3)μg· L- 1无显著     

肾移植术后FK506血药谷浓度的临床观察

目的 :建立FK5 0 6理想治疗窗谷浓度范围 ,初步了解影响FK5 0 6谷浓度的因素以及FK5 0 6谷浓度与急性排斥反应和肾中毒的关系 .方法 :78例同种尸肾移植受者应用FK5 0 6 +骁悉 (MMF) +强的松 (Pred)三联免疫抑制治疗 ,采用竞争性酶联免疫吸附法 (ELISA)测定服药 12h后FK5 0 6的全血浓度 (即谷浓度 ) ,对术后不同时期的FK5 0 6血药浓度进行分析 .结果 :FK5 0 6的全血谷浓度 ,正常组术后 1mo内(13.1± 2 .6 ) μg·L-1,2mo (10 .9± 2 .4 ) μg·L-1,3mo (10 .6± 1.9) μg·L-1,4 / 6mo (8.2± 1.2 ) μg·L-1,7mo以后 (6 .6± 1.1) μg·L-1.抗痨组术后 3mo内FK5 0 6谷浓度显著低于正常组 ,肝功损害组术后各时期的FK5 0 6谷浓度显著高于正常组 .急性排斥反应 1例 ,FK5 0 6谷浓度为 3.2 μg·L-1.急性肾中毒 6例 ,平均谷浓度为 18.7μg·L-1.结论 :FK5 0 6理想的全血谷浓度治疗窗范围为 :术后 1mo内 10～ 15 μg·L-1,术后 2～ 3mo 9～ 12 μg·L-1,4～ 6mo 7～ 10 μg·L-1,7mo以后5～ 8μg·L-1.肝损害可显著提高FK5 0 6血药浓度 ,利福平显著降低FK5 0 6血药浓度 .FK5 0 6低浓度易致急性排斥反应 ,高浓度可致急性肾中毒     

血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用

目的　观察血小板源性生长因子 (PDGF)对人视网膜色素上皮细胞 (hRPE)增殖和移行能力的影响 .方法　将体外培养的第 46代人视网膜色素上皮细胞分为DMEM组(改良型Eagle培养液 )和含有 2 0mL·L-1小牛血清的DMEM组(2 0 g·L-1DMEM ) ,每组分别加入不同浓度 (0 .1,1,5 ,10 ,5 0和 10 0 μg·L-1)的PDGF ,然后采用MTT比色法观察分析其对hRPE的增殖作用 ;应用hRPE损伤模型 ,计数进入缺损区的细胞 ,定量观察PDGF对hRPE移行的影响 .结果　①增殖作用 :0 .110 0 μg·L-1的PDGF均能促进hRPE的增殖 ,DMEM组 10 μg·L-1时促增殖作用最明显 ,增殖率达15 3% ;2 0 g·L-1DMEM组 5 0 10 0 μg·L-1的增殖率为 174% ,作用最强 .②移行作用 :PDGF能够显著促进hRPE的移行 ,并呈剂量依赖性 ,5 0 10 0 μg·L-1时促移行能力最强 ,DMEM组移行率为 5 10 % ,2 0mL·L-1FBS +DMEM组达 6 40 % .结论　PDGF能够促进hRPE的增殖和移行 ,有血清时可以加强这种作用 ,提示它在PVR的发病过程中可能发挥了重要作用     

多西紫杉醇对人血管肉瘤细胞株增殖的抑制作用

目的 :观察多西紫杉醇 ( docetaxel,DTX)对人血管肉瘤细胞株 ( ISOHAS)的增殖抑制作用。方法 :采用人血管肉瘤细胞株 ISOHAS进行培养 ,在培养液中分别加入不同浓度的 DTX,作用1、3、6和 9h后 ,观察 ISOHAS细胞形态的变化 ,并通过 Alamar Blue法测定 ISOHAS对抗肿瘤药的感受性。结果 :1 0 0μg· L-1浓度 DTX和 5 0 0μg· L-1浓度 DTX,作用 3h、6h的抑制率差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;DTX作用 1、3、6和 9h时 ,5 0 μg· L-1浓度 DTX的抑制率与 1 0 0 μg· L-1DTX和 5 0 0 μg·L-1DTX的抑制率差异均有显著性 ( P<0 .0 1 )。结论 :DTX对 ISOHAS细胞具有较强的增殖抑制作用 ,在血管肉瘤的治疗方面是一种有应用前景的抗肿瘤药物     

尼莫地平在健康人体内的药动学和相对生物利用度

目的 :研究尼莫地平在健康人体内的药动学和相对生物利用度。方法 :8名健康受试者单剂量随机交叉口服尼莫地平标准参比制剂和待测制剂 1 2 0mg,采用HPLC法测定用药后不同时间的血药浓度。结果 :2种制剂的体内过程均符合一房室开放模型 ,AUC分别为 (1 4 3.1± 9.9) μg·h·L-1 和 (1 37.0± 7.3) μg·h·L-1 ,Cmax分别为 (83.1±7.4 ) μg·L-1 和 (80 .8± 4 .6 ) μg·L-1 ,Tmax分别为 (1 .0 0± 0 .0 0 )h和 (1 .0 6± 0 .1 7)h。待测制剂的相对生物利用度为 (96 .0± 5 .9) %。经双向单侧t检验证明 ,2种制剂的AUC、Cmax相比 ,差异均无统计学意义。结论 :2种制剂具有生物等效性。     

地尔硫(艹卓)缓释片在健康人体的药物动力学

目的 :研究地尔硫 卓艹 缓释片在健康人体的药物动力学及相对生物利用度。方法 :以上海产地尔硫 卓艹 缓释片为参比制剂 ,焦作市第二制药厂产地尔硫卓艹 缓释片为受试制剂 ,分别进行单次和多次用药试验 ,12名受试者采用随机交叉口服单剂量 (12 0mg)和多剂量 (6 0mg ,3次 /d ,共用 5d)地尔硫卓艹 缓释片。高效液相色谱 (HPLC)法测定用药后不同时间血清中地尔硫 卓艹质量浓度 ,用 3P87软件处理药 时数据。结果 :单次用药后 ,2制剂的体内过程均符合一房室开放模型 ,血药浓度分别在用药后 (2 .0 0± 0 .5 2 )h和 (1.88± 0 .43)h达峰值 (131± 17) μg·L-1和 (12 2± 11)μg·L-1,药时曲线下面积 (AUC)分别为 (112 2± 2 5 6 ) μg·L-1和 (110 9± 2 32 ) μg·h·L-1,受试制剂的相对生物利用度为(10 0 .0± 11.9) % (84.4%～ 117.5 % ) ;多次用药血药浓度达稳态后 ,峰浓度 (Cmax)分别为 (111± 8) μg·L-1和 (10 9± 9)μg·L-1,谷浓度 (Cmin)分别为 (35± 9) μg·L-1和 (38± 10 ) μg·L-1。两者血药浓度波动系数 (FI)分别为 (1.2 3± 0 .2 9)和 (1.12± 0 .2 3)。结论 :受试制剂在健康人体具有明显的缓释特征 ,且和参比制剂具有生物等效性。     

格列吡嗪片健康人体生物等效性研究

目的　研究格列吡嗪片在健康人体内的生物等效性。方法　 9名健康受试者单剂量随机交叉口服格列吡嗪片参比制剂和被试制剂 5mg,采用HPLC法测定用药后不同时间的血药浓度。结果　二制剂健康人体的体内过程均符合一房室开放模型 ,Tmax分别为 (3 0± 0 )h和 (3 0± 0 )h ,Cmax分别为 (30 5± 2 2 ) μg·L-1和 (2 99± 13) μg·L-1;T1/2 分别 (3 2 4± 0 37)h和 (3 2 2± 0 4 0 )h ;AUC分别为 (14 90± 70 ) μg·h·L-1和 (14 90± 70 ) μg·h·L-1。被试制剂的相对生物利用度为 (10 0 4± 7 8) %。结论　方差分析和单双侧t检验证明 ,两种制剂具有生物等效性     

血清sICAM-1测定在判定乙型肝炎不同临床类型中的意义

目的 :观察血清sICAM - 1水平在HBV感染者不同临床类型中的变化及其意义 .方法 :采用双抗体夹心ABC -ELISA法 ,对 74例不同临床类型HBV感染者及 10例正常对照者血清中可溶性细胞间粘附分子 - 1(sICAM 1)进行了定量测定 .结果 :急性肝炎 13例血清中sICAM - 1含量 (680± 2 4 8)μg·L-1明显高于正常对照组 (2 0 4± 4 6) μg·L-1(P <0 0 1) ;4 6例慢性肝炎患者血清中sICAM - 1含量 (675± 3 11) μg·L-1明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;其中慢性肝炎轻度 19例 ,sICAM - 1含量 (445± 12 0 ) μg·L-1;慢性肝炎中度 18例 ,sICAM - 1含量为 (63 4± 182 ) μg·L-1,明显高于慢性轻度组 (P<0 0 1) ;慢性肝炎重度 9例 ,sICAM 1含量 (93 1± 2 80 ) μg·L-1,明显高于慢性轻度组 (P <0 0 1) .5例无症状携带者sICAM 1含量 (2 12± 72 ) μg·L-1,与正常对照组差别无显著性 (P >0 0 5 ) ;10例自然恢复组含量为 (2 4 3± 86) μg·L-1,与正常对照组差别无显著性 .血清中sICAM 1含量与ALT含量呈明显正相关 ;而E抗原阳性组与E抗原阴性组差异无显著性 .结论 :血清中sICAM - 1水平测定可作为判别乙型肝炎临床类型的指标 ;sICAM 1含量与肝脏损伤程度成正比 ,sICAM 1含量与病毒复制状态无关     

卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及DEHP、MEHP对其增殖功能的影响

目的：建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系，探讨邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）及其活性中间产物邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯（MEHP）对原代培养的卵巢颗粒细胞增殖作用的影响。方法：选用21～25日龄未成年雌性Wistar大鼠，皮下注射孕马血清（PMSG），48h后断头处死，收集卵巢颗粒细胞，在DMEM—F12培养液中培养。卵巢颗粒细胞原代培养体系建立成功后分别将不同剂量的DEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）和MEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）作用细胞24h及48h，以CCK-8法检测细胞增殖情况。结果：DEHP作用卵巢颗粒细胞24h时，1μM DEHP和100μM DEHP均能明显抑制卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0．05）。DEHP作用卵巢颗粒细胞48h时，1μM DEHP和100μMDEHP均能明显促进卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0.05）。而MEHP作用卵巢颗粒细胞24h及48h，MEHP各染毒剂量组均无统计学差异（P〉0．05）。结论：DEHP能促进卵巢颗粒细胞增殖，并且和作用时间长短有关。MEHP在观察剂量下，尚未显示有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用。     

邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯遗传毒性研究进展

邻苯二甲酸酯类化合物,尤其是邻苯二甲酸（2-乙基已基）酯,作为塑料行业广泛使用的增塑剂和众多消费品生产的原料,人类可以通过食物、饮水、医疗诊治等多种途径持续不断的与之接触,其对环境的污染和生物体的潜在危害日益受到人们关注。本文以近年来国内外学者的研究资料为依据,详尽地阐述了邻苯二甲酸（2-乙基已基）酯的理化性质、环境暴露、生物转化代谢,遗传毒性及其可能机制等。尽管一些研究结论尚不确定,但这些资料对于进一步深入研究该类化合物的遗传毒性,探讨其毒作用敏感指标及毒作用机制具有重要的指导意义。     

瘦素对单核细胞THP1分泌趋化因子的影响及其作用机制

目的：探讨瘦素促进单核细胞THP1分泌趋化因子的作用及其相关机制,为研究瘦素调节机体免疫功能提供依据。方法：采用RT-PCR法和流式细胞术检测 THP1细胞瘦素受体 (Ob-Rb和Ob-Rt) 表达。选取对数生长期THP1细胞,随机分为空白对照组和10、50、100及200 μg•L^-1瘦素组,采用Transwell实验检测各处理组穿膜细胞数。THP1细胞分为空白对照组和100 μg•L^-1瘦素组,采用Western blotting法检测信号通路关键分子p-AKT、 p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平。THP1细胞分为空白对照组、100 μg•L^-1瘦素组、100 μg•L^-1瘦素+DMSO组、100 μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组、100 μg?L-1瘦素+10 μmol•L^-1 LY294002组和100 μg•L^-1瘦素+10 mol•L^-1PD980590组,采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组细胞因子IL-8表达水平。结果：瘦素长受体Ob-Rb和短受体Ob-Rt在THP1细胞中均有高表达。与空白对照组比较,50、100和200 μg•L^-1瘦素组穿膜细胞数明显增加(P<0.05)。与空白对照组比较,100 μg•L^-1瘦素组THP1细胞中p-AKT、p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平明显升高 (P<0.05)。与空白对照组比较,50、100和200 μg•L^-1瘦素组THP1细胞中IL-8表达水平明显升高(P<0.05);与100 μg?L-1瘦素组比较,100 μg•L^-1瘦素+10 μmol•L^-1 LY294002组和100 μg?L-1瘦素+10 mol•L^-1 PD980590组THP1细胞中IL-8表达水平明显降低(P<0.05),而100 μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组IL-8表达水平变化不明显 (P>0.05)。结论：瘦素能促进单核细胞T
HP1分泌趋化因子,其机制可能与 PI3K/AKT和MAPK/ERK 1/2信号通路有关。     

高效液相色谱法测定三叶保健吸品主要成分含量

目的：建立三叶保健吸品主要成分山奈酚、异鼠李素、槲皮素和甜菜碱的高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。方法：山奈酚、异鼠李素和槲皮素测定： hypersil C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相甲醇-0.4%磷酸溶液（60∶40,V∶V）,检测波长360nm,流速1.2ml·min^-1。甜菜碱测定：hypersil C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相50mmol/L KH2PO4(pH4.45,含0.3%辛烷磺酸钠）,检测波长200nm,流速0.7ml·min^-1。结果：山奈酚、异鼠李素、槲皮素和甜菜碱在0.2～4.8μg·ml^-1,0.1～2.4μg·ml^-1,0.025～0.8μg·ml^-1和1.0～32.0μg·ml^-1范围内线性关系良好。方法精密度分别为1.5%,2.1%,1.6% 和 2.2%。三叶保健吸品中山奈酚、异鼠李素、槲皮素和甜菜碱含量分别为0.00242%,0.000849%,0.000249%和0.00636%。结论：本研究所建方法简便,快速,准确,适用于三叶保健吸品主要成分含量测定,可用于其质量控制。     

Phthalate exposure and human semen quality in Shanghai: a cross-sectional study

Objective To monitor the level of phthalates in human semen samples and to analyze the relationship between phthalate levels and semen parameters. Methods Concentrations of three kinds of commonly used phthalates （di-ethyl phthalate, DEP; di-n-butyl phthalate, DBP; di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP） were measured using reversed-phase HPLC. Semen parameters were measured by computer aided sperm analysis （CASA）. Results The three phthalates were detected in most of the biological samples, with median levels of 0.30 mg/L （0.08-1.32 mg/L） in semen specimens. There was a significant positive association between liquefied time of semen and phthalate concentrations of semen. The correlation coefficient was 0.456 for DEP, 0.475 for DBP, and 0.457 for DEHP, respectively. There was no significant difference between phthalate concentrations of semen and sperm density or livability, though the correlation coefficients were negative. Conclusion These results suggest that people who reside in Shanghai are exposed to phthalates, especially to DBP and DEHP. Although the level of phthalates is relatively mild, an association of phthalate levels and reduced quality of human semen has been shown in the present study.     

HPLC法同时测定八号烧伤膏中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定八号烧伤膏中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent TC-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）为固定相;以甲醇-0.1%磷酸（85∶15,V∶V）为流动相;流速为1.0 ml.min-1;柱温为25℃;检测波长为254 nm。结果大黄素在16.4～82.0μg.ml-1（r=0.9999）,大黄酚在17.60～90.00μg.ml-1（r=0.9999）,大黄素甲醚在16.16～80.80μg.mL-1（r=0.9999）范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为101.40%、99.88%和99.74%;相对标准偏差分别为2.48%、2.28%和1.93%。结论该方法简便、可靠、准确,可作为八号烧伤膏的质量控制方法。     

硝基左旋精氨酸甲脂对碱烧伤后角膜新生血管作用的实验研究

目的:探讨碱烧伤后角膜新生血管形成过程中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及作用;观察局部应用硝基左旋精氨酸甲脂(LNAME)对角膜新生血管形成的影响。方法:采用碱烧伤诱导角膜新生血管模型,将50只SD大鼠随机分成5组:A组为治疗I组,B组为治疗Ⅱ组,C组为治疗Ⅲ组,D组为对照组和E组为正常组。治疗组(A、B、C组)碱烧伤后分别滴用0.3%,1%,3%的硝基左旋精氨酸甲脂滴眼液,对照组(D组)滴赋形剂,E组滴用30g·L-1的硝基左旋精氨酸甲脂滴眼液。采用裂隙灯照相,免疫组化染色,多媒体彩色图像病理分析系统分别计算8h、1,4,7,14,28d共6个不同时间点的角膜新生血管面积和诱导型一氧化氮合成酶免组染色的平均光密度值。并观察局部用药的毒副反应。结果:碱烧伤后大鼠角膜上诱导型一氧化氮合成酶主要表达于基质层中浸润的炎性细胞和新生血管内皮细胞。iNOS的表达与角膜新生血管面积在治疗组B、C组与治疗组A和对照组之间在统计学上的差异有显著意义(P<0.05)。重复局部给药良好耐受。结论:局部应用LNAME对炎性角膜新生血管有一定的治疗作用;iNOS表达水平与炎性角膜新生血管明显相关;局部应用LNAME无明显毒副作用,是安全有效的给药方式。     

Association between Phthalate Exposure and the Use of Plastic Containers in Shanghai Adults

Objective Consuming phthalates may be due to the presence of food contact materials, such as plastic containers. In this study, we investigated the association between plastic container use and phthalate exposure in 2,140 Shanghai adults. Methods Participants completed a questionnaire on the frequency of using plastic containers in different scenarios in the previous year (e.g., daily, weekly) and on the consumption of plastic-packaged foods in the previous three days (yes or no). Urinary phthalate metabolites were used to assess the association between phthalate exposure and the use of plastic containers. Results The metabolites of di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) were the most frequently detected in urine. The results revealed that phthalate exposure was associated with consumption of plastic-packaged breakfast or processed food items in the previous three days. The consumption of these two food items had strong synergistic effects on increasing urinary concentrations of most phthalate metabolites. Conclusion Our results of plastic-packaged breakfast and processed food may be explained by the use of flexible plastic containers, indicating the importance of risk assessment for the application of flexible plastic containers.     

溶剂萃取法提取氨基酸

以二（２－乙基己基）磷酸（Ｐ２０４）为萃取剂，从沉淀胱氨酸后的毛发水解母液中提取复合氨基权。萃取过程的最佳工艺条件为：萃取剂组成Ｐ２０４（０．７５）－磺化煤油（０．１５）－乙基己醇（０．１０），室温，初始水相的ｐＨ值为２．５；用去离子水反萃取，萃取及反萃取的理论级数分别为８级和９级。