高效液相色谱法测定人血浆中的百草枯

目的 建立人血浆中百草枯的高效液相色谱快速测定方法。方法 用正交试验优化色谱条件,流动相为甲醇-缓冲液(10:90,v/v),缓冲液为20 mmol/L的十二烷基庚烷磺酸钠(含20 mmol/L磷酸,用三乙胺调节pH为3.5),检测波长:256 nm,流速:0.80 ml/min,柱温为室温。样品依次用乙腈、二氯甲烷处理沉淀血浆中蛋白质并除去脂溶性杂质,取20 μl上清液进样测定。结果 血浆百草枯在0.1 μg/ml到10 μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为y= 6442.6x + 44.47(r = 0.9992),平均回收率为93.8％-101.1％,日内RSD为3.08％,日间RSD为3.92％。结论 该方法简便快速、准确灵敏,适用于人血浆中百草枯快速检测,为百草枯中毒患者的临床诊断提供参考依据。     

反相高效液相色谱法测定佛手散醇提物中川芎嗪、阿魏酸的方法学建立

目的:建立佛手散乙醇提取物中的川芎嗪、阿魏酸方法学,为该方有效部位的药效学研究提供依据。方法:采用高效液相色谱法测定,川芎嗪及阿魏酸色谱条件分别为:甲醇-水-冰醋酸(35∶65∶0.5,v∶v∶v),柱温:25℃,检测波长:290 nm;甲醇-水-冰醋酸(27∶73∶0.5,v∶v∶v),柱温:30℃,检测波长:320 nm;计算两者方法回收率,考察精密度并进行重现性、稳定性实验。结果:川芎嗪在2μg/ml～64μg/ml线性范围内呈良好线性关系(r=0.9996),RSD为3.75%;阿魏酸在0.08μg/ml～2.56μg/ml线性范围内,线性范围内呈良好线性关系(r=0.9997),RSD为4.57%。结论:RP-HPLC对佛手散醇提物中川芎嗪、阿魏酸的测定专一性强,灵敏度高,样品较稳定,精密度和回收率好,操作简便易行,方法可靠。     

高效液相色谱法测定人体血浆中的头孢噻利浓度

目的:建立高效液相-紫外(HPLC-UV)法测定人血浆中头孢噻利的浓度。方法:血浆样品经高氯酸沉淀蛋白处理后,用阿司匹林作为内标进行HPLC-UV检测;色谱柱采用Diamonsil C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱;流动相为:乙腈+20 mmol/L醋酸铵(8+92,v/v),用冰醋酸调pH至5.20;检测波长为254 nm;结果:在选定的色谱条件下,头孢噻利与血液中的杂质分离良好。头孢噻利在血浆中的线性范围为0.2μg/ml～50.0μg/ml,最低检测浓度(LLOQ)为0.2μg/ml,日内和日间的精密度(RSD)均小于10%,准确度为96%～102%,提取回收率均大于80%。结论:该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于人血浆中头孢噻利浓度的测定和药代动力学研究。     

乙酰乙酸甲酯紫外衍生—高效液相色谱法测定室内空气中的甲醛

摘要:目的　建立室内空气中甲醛的乙酰乙酸甲酯紫外衍生—高效液相色谱测定方法。方法　空气中甲醛经装于多孔玻板吸收管中的乙酰乙酸甲酯-乙酸铵缓冲液吸收,于70℃水浴反应10 min后,用C18柱分离,紫外检测器检测。色谱条件:流动相为1 ml/min的甲醇∶水（80∶20,v/v）,柱温为25℃,检测波长为373 nm。结果　甲醛在0.05～2.50 μg/ml范围内线性相关系数为0.9996,方法检出限（S/N＝3）和定量限（S/N＝10）分别为0.009 μg/ml和0.015 mg/m3,方法加标回收率为89.2%～114%,方法精密度（n＝6）为1.07%。结论　本法快速、灵敏、准确,适用于室内空气中微量甲醛的快速测定。     

血浆醋氯芬酸测定方法的改进

目的为提高血浆醋氯芬酸的分离效果,对高效液相色谱(HPLC)测定方法进行改进.方法血浆中醋氯芬酸经盐酸酸化后用乙醚萃取浓缩,以Hypersil-C18(4.6mm× 250mm,10μm)为色谱柱;以甲醇:水:冰醋酸(70:30:0.5,V/V为流动相,流速为1.5ml/min;检测波长为276 nm.结果醋氯芬酸浓度在0.1～100μg/ml范围内线性关系良好(r=0.996 1);最低检出限为0.1 μg/ml;平均回收率为(101.17±1.17)%,日内、日间精密度分别为(6.04±2.45)%和(5.01±1.39)%.结论改进后的方法简便、准确可靠、灵敏,适用于人血浆醋氯芬酸浓度的测定和药代动力学研究.     

盐酸二甲双胍血药浓度的HPLC-UV测定

〔目的〕建立了一种直接测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度的高效液相色谱-紫外检测法。〔方法〕血浆中加入内标吗啉双胍后用体积分数为60%的高氯酸(HClO4)沉淀去蛋白,进行高效液相色谱-紫外检测。采用ShimadzuODS柱(4.6mmID*150mmL),流动相为甲醇-0.01mol/LNaH2PO4(内含1mmol/L离子对试剂十二烷基硫酸钠)(40:60),流速1.0ml/min,检测波长为232nm。〔结果〕血浆中盐酸二甲双胍的最低检出量为20μg/ml,线性范围为0.02￣10μg/ml,日内和日间精密度均低于9%,平均回收率为102.04%。〔结论〕该方法简便,专属性强。     

高效液相色谱法测定保健食品中天麻素含量

目的:建立保健食品中天麻素的高效液相色谱测定方法。方法:样品以甲醇提取,中性氧化铝柱净化,ZORBAXEclipse Plus C18(4.6×250 mm)柱分离,流动相为甲醇-磷酸盐溶液-水(7:3:90),流速:1.0 ml/min,紫外检测器检测,波长:223 nm。结果:天麻素在5~25μg/ml有良好的线性关系,相关系数为0.9995。检出限为0.04μg/ml,最低检出浓度为0.08 mg/kg。样品测定的精密度为2.8%~3.0%;样品加标回收率为95.6%~96.6%,平均回收率为96.0%。结论:本方法简便快速、检测灵敏度高,适用于保健食品中天麻素的测定。     

HPLC法测定血清肉碱的研究

目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定血清中肉碱浓度的方法。方法:血清样品用乙腈、甲醇沉淀蛋白,加入肉碱衍生剂,60℃恒温水浴2h后进样10μl。色谱柱为AtlantisC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇∶异丙醇∶乙腈(35∶45∶20,v/v),流速1.0ml/min,紫外检测波长260nm。结果:在上述色谱条件下,血清肉碱分离良好,回归方程为Y=8490X-48200,r=0.9999,线性范围为12.5~400μmol/L。最低检测浓度为12.5μmol/L。日内精密度1.6%~13.2%,日间精密度(%)1.8%~12.1%,回收率98.5%。结论:通过加入肉碱衍生剂,建立了HPLC法测定血清中肉碱浓度的方法。此法操作简单,耗时少,有良好的准确度,适用于临床检测。     

LC-ESI-MS测定人血浆中丙戊酸钠浓度

目的:建立检测一种人血浆中丙戊酸钠液相色谱-质谱联用(LC-ESI-MS)的方法。方法:血浆中的药物用乙腈沉淀法去蛋白。采用Agilent Zorbax SB-C18(2.1 mm×100 mm,3.5μm)柱,流动相为乙腈-水(60:40,v/v)。采用电喷雾离子源(ESI),负离子检测,选择性离子监测(selected ion monitoring,SIM)方式定量分析丙戊酸钠,监测离子峰是m/z 143。结果:血浆中丙戊酸钠检测方法的线性范围为0.5μg/ml～100μg/ml,最低检测限为0.1μg/ml,平均回收率在89.7%～93.3%之间,日内和日间精密度RSD都小于8%。结论:本方法简单、灵敏、快速,可用于药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定重症患者血浆中伏立康唑浓度

目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)监测重症患者血浆中伏立康唑浓度,为临床个体化用药提供科学依据。方法以Agilent ZORBAX SB-C18柱(4. 6×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(60∶40,v/v),流速为1. 0 mL·min~(-1),检测波长:255 nm,柱温为35℃,血样经甲醇沉淀蛋白后直接进样。结果伏立康唑色谱峰分离良好,血浆中无内源性杂质干扰;回归方程为y=36. 676x+9. 705 9 (r=0. 999 8),血浆中伏立康唑浓度在0. 3～12. 0μg·mL~(-1)内呈良好的线性关系;日内、日间精密度(RSD)均<10%,血样经室温放置24 h,反复冻融3次及-20℃冷冻4周,处理后,不同浓度的血浆样品稳定性均良好(RSD <15%)。用本方法检测31例使用伏立康唑预防或治疗的重症患者血浆谷浓度,范围为0. 37～11. 55μg·mL~(-1),其中11例患者的血药浓度不在推荐治疗浓度范围内。结论本方法灵敏、快速、准确,操作简便,线性范围宽,适用于临床伏立康唑血药浓度的测定。     

高效液相色谱法测定保健食品中松果菊苷

目的:建立高效液相色谱法测定保健食品中松果菊苷的方法。方法:样品经50%甲醇提取,以0.2%磷酸-乙腈为流动相,流速为1.0 ml/min,Intersil C18柱分离(柱温为35℃),在331 nm处检测。结果:被测组分在28μg/ml～280μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999);加标回收率为89.3%～101.2%,相对标准偏差(RSD)2.92%～3.50%(n=6)。方法检出限为0.84μg/ml,方法定量限为2.81μg/ml。结论:本方法快速、灵敏、重现性好,适用于保健食品中松果菊苷的测定。     

高效液相色谱法测定保健食品中阿魏酸含量的方法研究

目的:建立保健食品中阿魏酸的高效液相色谱测定方法。方法:采用WATERS Xterra RP18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱分离;流动相为乙腈:0.5%冰醋酸=28:72(v/v);流速1.00 ml/min;2487紫外检测器322 nm测定。结果:阿魏酸在0.005μg/ml～80μg/ml时,浓度与峰面积呈良好的线形关系(r=0.9999),检出限为5.0μg/L,加标回收率在98.0%～100.8%之间,相对标准偏差RSD在1.10%～1.81%之间。结论:该方法简便、快速、准确,适用于保健食品中阿魏酸含量的测定。     

固相萃取-反相高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中叶酸的含量

目的建立了快速、灵敏的检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的方法。方法使用高氯酸在超声波条件下提取配方乳粉中的叶酸,取一定量的滤液经过含有C18填料的固相萃取小柱进行除杂,再经过高锰酸钾衍生后利用反相高效液相色谱测定叶酸的含量。流动相选用pH5.0的浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液,流动相流速为1.0ml/min,经BDSC18色谱柱进行分离(柱温为30℃)。结果方法在0.005～1.5μg/ml范围内线性良好,方法的平均回收率为91.7%～98.3%,RSD%为2.5%,检出限为0.005μg/ml,定量限为0.017μg/ml。结论应用本方法检测婴幼儿配方乳粉中的叶酸,具有操作简单、精密度高、准确度好、容易推广等优点。     

超高效液相色谱-二极管距阵检测器法同时测定水中7种有机酚

目的:建立水中7种有机酚类污染物的超高效液相色谱-二极管距阵检测器测定方法。方法:水样经OasisHLB小柱富集,利用ACQUITY UPLCBEH C8(50 mm×2.1 mm×1.7μm)色谱柱分离,以甲醇和0.1%乙酸溶液为流动相进行梯度淋洗,流速0.25 ml/min,采用PDA检测器,在波长275 nm和303 nm进行测定,外标法定量。结果:7种酚类化合物在0.05 mg/L～5.0 mg/L浓度范围呈线性关系,其相关系数均大于0.999,检出限为15.0μg/L～25.0μg/L,方法回收率在86.9%～104.1%,相对标准差均小于5%。结论:该法灵敏、高效、准确,适用于水中七种酚类污染物的测定。     

非发酵性豆制品中柠檬黄、胭脂红和日落黄的测定

目的:建立准确简便的用于非发酵性豆制品中柠檬黄、胭脂红和日落黄含量检测的高效液相色谱分析方法。方法:将样品粉碎均匀,加入乙醇+氨水+水(7+2+1)的提取液直接提取样品中的色素,采用反相高效液相色谱法,以甲醇-0.02 mol/L乙酸铵水溶液梯度洗脱,二极管阵列检测器检测。结果:柠檬黄、胭脂红、日落黄三种色素在浓度范围为0.1μg/ml～50μg/ml线性良好,样品加标回收率为84.1%～104.4%,方法相对标准偏差RSD<5%,方法最低定量限为柠檬黄0.15 mg/kg、胭脂红0.30 mg/kg、日落黄0.25 mg/kg。结论:该方法前处理简单、检测灵敏度高、重现性好。     

气相色谱-氮磷检测器测定牛奶及奶粉中三聚氰胺

目的:建立应用气相色谱-氮磷检测器测定牛奶及奶粉中三聚氰胺含量的方法。方法:样品用三氯乙酸提取,MCX阳离子固相萃取柱净化后,采用DB-1701毛细管柱和氮磷检测器进行检测。结果:方法线性范围在0.05μg/ml～5μg/ml,定量限为0.1 mg/kg(牛奶)和0.25 mg/kg(奶粉),相对标准偏差为2.1%～7.9%,回收率为86.4%～108%。结论:本方法不经衍生化处理直接测定三聚氰胺,简便、快速,灵敏度较高。     

高效液相色谱法测定辣椒粉中的碱性橙

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)测定辣椒粉中的碱性橙。方法:称取样品于50 ml塑料离心管中,加入10 ml提取液,超声、离心后,取上清液过膜进样。采用XDB-C18色谱柱(5μm,4.6×250 mm),流动相为乙腈+乙酸铵(75+25),流速1.0 ml/min,二极管阵列检测器检测。结果:碱性橙在1.0μg/ml～50.0μg/ml范围内线性良好(r=0.9992),且峰形较好,回收率为93.4%,精密度RSD=0.61%,最低检出限为0.3μg/ml。结论:高效液相色谱法测定辣椒粉中的碱性橙,方法定性准确、灵敏度高、回收率和重现性好,操作快速,结果准确可靠。     

QuEChERS净化—液相色谱串联质谱法测定血浆中8种抗凝血灭鼠剂

摘要:目的 建立QuEChERS净化,同位素稀释液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）测定血浆中大隆、溴敌隆、杀鼠醚、杀鼠灵、氯杀鼠灵、敌鼠、氯敌鼠、杀鼠酮抗凝血灭鼠剂的检测方法。方法 血浆样品经QuEChERS方法前处理,以杀鼠灵-D5作为同位素内标,采用BDS HYPERSIL C18(4.6 mm i.d×100 mm, 2.4 μm)分离,以甲醇-乙酸铵缓冲液梯度洗脱,流速为0.50 ml/min。采用电喷雾电离(ESI)负离子质谱在多反应监测(MRM)模式下检测。结果 8种抗凝血灭鼠剂在0.20 μg /L～25.0 μg /L(或者0.50 μg/L～25.0 μg/L)范围内有良好的线性关系(r＞0.999),检测限为0.044～0.19 μg /L,平均加标回收率为70.4%～101.5%（n=7）,相对标准偏差1.7%～8.9%（n=7）。结论 该方法快速、简单,灵敏度高,可应用于中毒病人血样中8种抗凝血灭鼠剂的同时检测。