氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏核因子-κB表达的影响

采用糖尿病大鼠模型，以核因子（NF）－κB亚型P65多抗为抗体，应用免疫组织化学染色法观察氯沙坦（losartan)对糖尿病大鼠肾脏NF－κB表达的影响，并进一步分析NF－κB表达与肾小球内粘附分子（ICAM－1）蛋白表达、单核细胞浸润及肾脏功能和结构损害的关系。结果表明：糖尿病大鼠肾小球NF－κB正常较正常肾组织增高，氯沙坦可显著降低NF－κB的表达。且NF－κB阳性细胞数与肾小球ICAM－1蛋白表达，单核细胞浸润、肾脏功能和结构损害显著相关。结果提示氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏保护作用可能通过抑制血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)引起的NF－κB活化，下调受NF－κB调控的ICAM－1表达，减轻单核细胞浸润而实现。     

温脾汤对大鼠残余肾组织中核转录因子-κB/IκB表达的影响

目的了解5/6肾切除大鼠残余肾组织核转录因子κappaB(NF-κB/IκBα)的表达与肾功能损害的关系,并观察温脾汤对NF-κB/IκBα的影响。方法采用5/6肾切除方法建立肾纤维化大鼠模型,以NF-κB p65亚基单抗及IκBα多抗为一抗,采用二步法免疫组化染色检测大鼠残余肾脏中NF-κB p65/IκBα的表达,结合血清肌酐、尿素氮、24 h蛋白尿等肾功能指标及肾脏病理损害情况,分析它们在肾脏损害中的作用,在此基础上阐明温脾汤肾保护作用与核转录因子-κB/IκB的关系。结果模型组肾组织中NF-κB p65的表达较正常组织显著增高,与尿蛋白及血肌酐增高呈正相关关系,而IκBα表达明显低于正常肾组织。与模型组相比,温脾汤可上调IκBα的表达,抑制NF-κB p65的过度活化。结论温脾汤能减轻5/6肾切除对大鼠肾功能的损伤,这一作用与其能降低肾组织NF-κB表达的异常增强有关。     

NF-κB/IκB信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞促炎性细胞因子表达

目的：探讨核因子—κB(NF—κB)／IκB信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜细胞促炎性细胞因子表达中的作用。方法：应用核酸酶保护法检测系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF—α)、IL-1α和IL-1β mRNA表达；应用凝胶电泳迁移率和Western blot检测肾小球系膜细胞中NF—κB活化、p65亚基核转位以及IκBα和IκBβ的降解。结果：正常培养状态下，系膜细胞可组成型表达TNF—α和IL—1β，而不表达IL-1αmRNA，AngⅡ刺激后促炎性细胞因子表达显著上调，NF—κB特异性抑制剂2-硫代氨基甲酸吡咯烷显著抑制AngⅡ诱导的促炎性细胞因子基因表达；AngⅡ诱导系膜细胞NF—κB活化，p65核转位及胞质内IκBα和IκBα的降解。结论：AngⅡ诱导肾小球系膜细胞中促炎性细胞因子表达可能通过NF—κB／IκB信号转导通路来实现。     

培哚普利对自发性高血压大鼠肾脏核因子-κB表达的影响

目的 :探讨培哚普利对自发性高血压大鼠肾脏核因子 -κB表达的影响。方法 :采用自发性高血压大鼠 ( SHR)模型 ,以核因子 ( NF) -κB亚基 P65多抗为抗体 ,应用免疫组织化学染色法观察培哚普利对 SHR肾脏 NF-κB表达的影响 ,并进一步分析 NF-κB表达与肾小球内粘附分子 - 1 ( ICAM- 1 )蛋白表达、单核细胞浸润及肾脏功能和结构损害的关系。结果 :SHR肾小球 NF-κB表达较正常肾组织增高 ,培哚普利可显著降低 NF-κB表达。且 NF-κB阳性细胞数与肾小球 ICAM- 1蛋白表达、单核细胞浸润、肾脏功能和结构损害显著相关。结论 :培哚普利对 SHR肾脏保护作用可能通过抑制血管紧张素 引起的 NF-κB活化 ,下调受 NF-κB调控的 ICAM- 1表达 ,减轻单核细胞浸润而实现。     

肾癌组织中NF—κB信号分子的表达及As2O3对人肾癌786—0细胞中NF—κB信号通路影响的研究

目的：探讨NF—κB信号通路与肾癌发生和发展的关系以及三氧化二砷（As2O3）对人肾癌细胞系786—0的NF—κB信号转导的影响。方法：采用ICC、ISH、Westernblot和EMSA技术检测15例肾癌组织和10例正常肾组织中NF—κB信号分子IKKα／β、IκBα、p65和ICAM-1的表达和NF—KBDNA结合活性；As2O3处理肾癌786—0细胞后NF—κB信号分子蛋白表达、p65mRNA表达和NF—κBDNA结合活性的改变。结果：肾癌组织中NF—κB DNA结合活性及p65、IKKα／B和ICAM-1蛋白表达量升高（R〈0．01），但IKB仅蛋白明显降低（P〈0．01）；经2μmol／L浓度As2O3处理786-0细胞72h后，p65mRNA含量、NF—κBDNA结合活性及p65、IKKα/β、IκBα和ICAM-1蛋白的表达量均降低（P〈0．01）。结论：NF—κBDNA结合活性及p65、IKKα/β和ICAM-1蛋白增加可能与肾癌的发生和进展有关；2μmol／L以上浓度As2O3可以全面抑制786—0细胞中p65、IKKα/β、IκBα和ICAM-1蛋白和p65mRNA的表达，抑制NF—κBDNA结合活性，可能是As2O3抑制786—0细胞增殖的另一种机制，NF-κB有可能成为抗肾癌治疗的靶点之一。     

肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及其意义

目的：探讨肾毒血清性肾炎大鼠肾组织核因子—κB(NF—κB)活化及其意义。方法：肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和Western blot检测。肾毒血清。肾炎大鼠。肾组织中NF-κB活化及IκBα和IκBβ的降解；采用核酸酶保护法检测肾组织中IL-8表达，并分析其与NF—κB活化的关系。结果：模型组肾组织中IL-8表达显著高于正常对照组；肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF—κB活化显著增强，p65由胞质转移至咆核．咆质内IκBα和IκBβ降解明显增加；NF-κB活化与IL-8表达呈显著正相关。结论：NF—κB／IκB信号通路介导小球肾炎肾组织中IL-8表达。     

尿激酶联合黄芪对环孢素A大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB表达的影响及意义

目的探讨尿激酶（uPA）联合黄芪（AM）对环孢素A（CsA）大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB（NF-κB）表达的影响及意义。方法采用1：7服灌胃CsA（25mg·kg^-1·d^-1）制备大鼠慢性肾纤维化模型,将大鼠随机分为5组：对照组、模型组、uPA组、AM组及联合治疗组,4周末取标本。HE染色观察肾脏组织结构变化;采用试剂盒测定肾组织羟脯氨酸的含量;应用免疫荧光观察P-p65的表达及定位;采用Western印迹法检测大鼠肾组织P—065、p65、IκBα和IκBβ的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组肾小管损伤程度加重,羟脯氨酸含量增加,肾组织中NF-κB活化显著增强,p65由细胞质转移至细胞核,P-p65表达显著上调,IκBα降解明显增加（P均〈0．05）。与模型组相比,各治疗组肾小管损伤程度减轻,羟脯氨酸含量减少,P-p65表达被显著抑制,IκBα降解减少（P均〈0．05）,且联合组的治疗效果更显著。IκBβ的蛋白表达水平各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NF-κB信号通路介导了肾脏纤维化的发生发展,uPA与AM能减轻肾脏纤维化,这可能与其能抑制NF-κB通路激活有关。     

转录因子—κB活性与2糖尿病肾脏病变的关系

目的：探讨2型糖尿病患者外周血单个细胞中转录因子－κB（Noclear factor kappa B,NF-κB)的活性与肾功能损害的关系。方法：应用凝胶电泳迁移率实验（EMSA）了41例2型糖尿病患者（A组）和10例健康正常人（D组）外周血单个核细胞中NF－κB的活性，并根据有无肾脏病变将糖尿病患者分为糖尿病无肾病组（B组）和糖尿病肾病组（C组）。结果：与D组比较，A，B，C三组NF－κB活性显著较增强（P均＜0．05），其中C组活性最高，B，C两组间NF－κB活性也有差别（P＜0．05）。结论：2型糖尿病患者外周血单个核细胞中NF－κB活性显著增强，尤其是伴有肾脏病变的患者，NF－κB与糖尿病肾病的发生，发展有关。     

大肠腺癌组织中细胞核因子κB的表达及意义

目的：探讨细胞核因子κB（NF－κB）表达与大肠腺癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测NF－κB p65在52例大肠腺癌、21例大肠腺瘤及10例正常大肠粘膜中的表达情况。结果：52例大肠癌中34例NF－κB p65阳性，阳性产物主要定位于肿瘤细胞胞浆。21例大肠腺瘤中10例NF－κB p65阳性，10例正常大肠组织中NF－κB p65无1例阳性表达。NF－κB p65的表达与患的性别、大肠癌组织学分型、淋巴结转移、Dukes'分期无关。结论：NF－κB p65是大肠癌相关的一种癌蛋白；NF－κB p65蛋白表达可能是大肠癌形成的一个早期事件，它可做为大肠癌的一个新的潜在的诊断标志物。     

阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子—kB活化与肾小管间质损害的关系

目的：探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子－kB（NF－kB）活化及其与蛋白尿、肾小管间质损害和趋化因子表达之间的关系。方法：阿霉素肾病模型采用尾静脉注射阿霉素（6mg/kg）制备。应用免疫组化和图像分析系统观察肾皮区小管间质损害程度、NF－kB活化及单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）表达。结果：阿霉素肾病大鼠出现大量蛋白尿及明显的皮质区肾小管间质损害。肾皮质区NF－kB活化及MCP－1表达显著增强,且与蛋白尿及肾小管间质损害程度显著相关。结论：NF－kB活化介导出非免疫性慢性肾小球炎时皮质区肾小管间质损害及诱导趋化因子的产生。     

氧化苦参碱对阿霉素大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB表达的影响

目的 探讨氧化苦参碱(OM)对大鼠慢性肾纤维化组织中核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 实验第1天、第21天尾静脉注射阿霉素(2 mg/kg)建立慢性肾纤维化大鼠模型,分为模型组、苯那普利治疗组和OM治疗组.正常对照组给予等量生理盐水尾静脉注射.检测各组的24 h尿蛋白含量、血生化及肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学法检测肾组织内NF-κB、抑制性κB(IκB)蛋白的表达,并进一步分析NF-κB与IκB蛋白的表达、肾脏病理改变及肾功能损害的关系.结果 苯那普利治疗组、OM治疗组的肾脏病理改变、肾功能损害均轻于模型组,第2次注射后8周时组织内NF-κB蛋白的表达轻于模型组,而IκB蛋白的表达高于模型组,但两者之间差异无显著性.模型组大鼠肾组织中NF-κB与IκB成负相关,而与肾脏病理改变及肾功能损害成正相关.结论 OM可能通过下调阿霉素大鼠肾组织中NF-κB的表达而抑制肾纤维化的发生,从而起到保护肾脏的作用.     

NF-κBp65在主动性Heymann肾炎肾小球损伤中的作用

目的：探讨主动性Heymann肾炎(AHN)肾小球内NF—κBp65的活化及意义。方法：8—10周龄Wistar雌性大鼠20只平均分2组，肾炎模型组予皮下免疫FxlA／CFA，对照组予皮下注射CFA。免疫组化染色观察大鼠肾小球内NF—κBp65的活化及其与肾组织病理和生化指标改变的相互关系。结果：与对照组比较，肾炎模型组大鼠肾小球基底膜((GBM)明显增厚、肾小球NF—κBp65的话化明显增加，差异有显著性(P＜0．01)；肾小球内NF—κBp65的活化与GBM增厚程度呈明显的直接正相关(P＜0．05)。结论：NF—κBp65的话化参与了AFN的肾小球的病理损害过程。     

核因子κB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用

目的：研究NF－κB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用。方法：改良Kamada法建立同种大鼠原位肝脏移植模型，实验分对照组和二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC组），对照组供肝于4℃乳酸林格液中保存6h,PDTC组供肝于乳酸林格冷保存液中加入0.1mol/L PDTC，于再灌注早期分析测定供肝组织中NF－κB的结合活性（EMSA法）、TNF-α和ICAM－1的mRNA转录水平（RT－PCR）以及ALT和LDH的活性变化。结果：供肝组织的NF－κB在移植后再灌注早期明显激活；再灌注1h,PDTC组的NF－κB活性较对照组显著降低，但6h后两组NF－κB活性未见明显差异。再灌注早期TNF－α和ICAM－1mRNA转录水平上调以及ALT和LDH活性升高，但PDTC组明显低于对照组（P＜0.05)。结论：供肝组织中NF－κB的活性抑制可显著降低再灌注早期供肝组织中炎症介质的转录表达，并有效改善供肝的再灌注损伤。针对NF－κB的靶向治疗可能是供肝保护的一条新途径。     

NO对内毒素诱导的肺泡巨噬细胞核因子-κB活化和TNF -α的调节

目的 探讨一氧化氮对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导肺泡区噬细胞核因子－κB（NF－κB）活化及肿瘤坏死因子α（TNF－α）基因表达的调节。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞（pulmonary alveolar Macrophages,PAM）进行培养，分正常对照组，LPS组，NO＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和ELISA法分别检测核提取物中NF－κB活性和细胞培养上清中TNF－α含量。结果 LPS组NF－κB活性和TNF－α含量在刺激24h后明显高于正常对照组（P＜0.01）；NO＋LPS组NF－κB活性和TNF－α含量均显低于LPS组（P＜0.01）。结论 LPS诱导PAM的NF－κ活化，导致TNF－α基因表达增强；NO可抑制NF－κB活化而减少TNF－α的释放。     

核转录因子NF—κB在血管内皮细胞组织因子表达中的作用

目的：探讨核转录因子NF－κ在肿瘤坏死因子α（TNF－α）,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管内皮细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法：用发色底物法测定血管内皮细胞表面TF活性。分别采用凝胶电泳迁移率改变法（EMSA）和Western 鲩迹法检测血管内皮细胞核转录因子NF－κB的DNA结合活性和含量。结果：100U／ml TNF-α,^-6mol/l Ang II作用下,内皮细胞表面TF活性明显增高。分别较对照增高1＝65倍和1．61倍,TNF－α,AngⅡ处理后细胞核内NF－κB含量明显增加,分别为正常对照组的1．77倍和1．52倍。结论：TNF－α,AngⅡ可增强内皮细胞TF活性,这可能与其促进内皮细胞核转录因子NF－κB的核转位和DNA结合活性有关,进一步证实NF－B在内皮细胞TF诱导表达中的重要作用。     

NF-κB与心脏移植

1 NF～κB概述 核因子-κB（nuclear factor—κB NF-κB）首先是由Sen和Baltimore于1986年报道，NF-κB是一组真核细胞转录因子，由NF—κB／Rel蛋白家族成员NF—κB1（p50，其前体p105），NF-κB2（p52，前体p100），RelA（p65），RelB和C—Rel以同源或异源二聚体形式组成，不同的NF—κB／Rel蛋白双双结合形成不同的NF—κB，以p50／p65发现最早，分布和作用最广泛，是通常所说的NF-κB。通常情况下，大多数细胞中的NF—κB与其抑制因子（IκB）蛋白家族成员（包括bcBα，IκBβ，IβBγ和BcL-3等，其中M3a是最重要的NF-κB活性调控成员）相结合，     

NF—κBp 65和HIF-1α在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨宫颈鳞癌组织中NF-κBp65、HIF-1α的蛋白表达水平及临床病理意义。方法采用免疫组织化学（PowerVision TM）二步法对56例宫颈鳞癌和25例正常宫颈组织进行NF—κBp65、HIF-1α蛋白检测。结果宫颈鳞癌组织NF—κBp65、HIF-1α的表达均高于对照组正常宫颈组织（P〈0．01）。NF—κBp65的蛋白表达与患者的病理分级及有无淋巴转移存在相关性（P〈0．05）；HIF-1α的蛋白表达与患者的临床分期及有无淋巴转移存在相关性（P〈0．05）。NF—κBp65和HIF-1α的蛋白表达呈正相关（r=0．439，P〈0．01）。结论联合检测NF—κBp65和HIF-1α蛋白表达对诊断宫颈鳞癌的意义优于单纯检测NF—κBp65或HIF-1α蛋白表达。     

喉癌NF-κB信号转导通路的免疫组化研究

目的 :探讨NF -κB信号转导通路中的IKK、IκB、NF -κBP6 5在喉癌组织中的表达情况及意义。方法 :采用免疫组织化学染色S -P法检测 4 0例喉癌组织、2 0例正常喉粘膜组织的IKKα、IκBα、NF -κBP6 5的表达水平。结果 :喉癌组织中IKKα、NF -κBP6 5的表达水平明显高于正常组织 ,IκBα的表达水平明显低于正常组织 (P <0 .0 5 )。有颈淋巴结转移的喉癌组织中IKKα、NF -κBP6 5表达水平比无转移的喉癌组织表达明显增强 ,IκBα表达水平则明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :NF -κB信号转导通路可能在喉癌的发生、发展及转移中发挥重要作用。     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过IκBα的降解活化NF-κB

目的　阐明鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化核转录因子NF κB的机制。方法　利用强力霉素Dox诱导表达LMP1的鼻咽癌细胞株Tet on LMP1 HNE2为实验模型 ,首先应用免疫印迹方法测定Dox诱导后不同时相LMP1的表达动力学以及IκBs蛋白量及功能的改变。进而用间接免疫荧光法检测NF κB的亚细胞定位。最后采用瞬间共转染及报道基因活性分析分析NF κB的活性。结果　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,Dox处理 15分钟后LMP1的表达迅速升高并维持与较高水平直至 12 0分钟。LMP1的诱导性表达导致IκBα的磷酸化并降解 ,但IκBα蛋白总量无改变。继IκBα的磷酸化并降解 ,NF κB(P6 5 )自胞浆易位至胞核且活性升高。IκBα的显性负性突变子抑制NF κB(P6 5 )的核易位及报道活性。LMP1的诱导性表达并未引起IκBβ蛋白水平变化。结论　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,EB病毒LMP1通过IκBα的磷酸化并降解激活核转录因子NF κB的活性 ,并且 ,LMP1诱导的NF κB活性能被IκBα的显性负性突变子完全抑制。IκBβ在此信号传导途径中无改变。LMP1表达前后IκBα蛋白总量维持恒定可能是由于NF κB的活化迅速启动了IκBα的重头合成这一自身调节环路所致。     

血必净对梗阻肾间质炎性损害的干预实验

目的动态观察单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）模型肾间质炎性损害病理改变及核因子-κB（NF～κB）、转化生长因子一β1（TGF-β1）在肾间质的表达,探讨血必净对肾间质炎性损害的干预机制。方法Sprague—Dawley（简称SD）清洁级健康大鼠雌雄各半共60只,随机分为三组：假手术组（SOR组）、模型组（MOD组）、血必净治疗组（XBJ组）。每组20只;建立UUO模型,分别于手术后第7d、第14d各组随机选取10只大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE、MASSON染色及免疫组化染色。观察肾脏间质病理变化以及NF—κBp65和TGF一β1在肾间质的表达。结果血必净能减轻UUO大鼠肾间质炎性损害（第7d、第14d肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积P〈0．05）;血必净能下调肾组织间质NF—κBp65及TGF-β1的的表达（P〈0．05）有统计学意义。结论血必净减轻肾间质炎性损害,其机制可能通过抑制肾组织间质NF-κBp65及TGF-β1的的表达,并对早期肾间质纤维化有抑制作用。