5一羟色胺对人胎盘滋养细胞L-型钙通道的影响

目的探讨5一羟色胺对胎盘滋养细胞钙通道的影响。方法将体外培养的胎盘滋养细胞分为对照组和低（1．01xmol／L）、高（10．0μmol／L）浓度5一羟色胺组。采用全细胞膜片钳实验方法,在待测胎盘滋养细胞外液中分别加入Nimodpine（10μmol／L）、Flunarizne（10μmol／L）和替曲朵辛（Trxl01．Lmol／L）,进行电流检测;同样的实验条件和方法,在待测胎盘滋养细胞外液中分别加入5-TH（1μmol／L和101xmol／L）,测试电流值;在细胞外液中分别加入5-TH（μmol／L）和Nimodpine（10μmol／L）、5-TH（10μmol／L）和Nimodpine（10μmol／L）后再检测电流。结果胎盘滋养细胞L-型钙通道开放在一60--50mV之间,最大峰值电流在一40～30mV为82．31±6．46（pA）。加入Nimodpine（10μmol／L）。可阻断此电流大部分成份。Flunarizne（10Ixmol／L）和’兀X（10肛m0ⅣL）不能抑制该电流成份。加入5-TH（1μmol/L和10μmol／L）峰值电流明分别为104．77±10．84（pA）和117．16±9．67（pA）,与对照组相比有显著差异（P〈0．05）;加入5-TH（1μmo]／L）和Nimodpine（101xmol／L）、5一TH（10μmol／L）和Nimodpine（10μmol／L）后;峰值电流分别为85．35±6．54（pA）、89．42±7．62（pA）,与对照组相比无显著差异（P〉0．05）。结论5-TH可激动胎盘滋养细胞L-型钙通道,促使钙电流值增加。     

闹羊花毒素Ⅲ对豚鼠心室乳头肌收缩力和离子流的作用

目的研究闹羊花毒素Ⅲ对豚鼠心室乳头肌收缩力和心室肌细胞钠电流、钙电流和钠-钙交换电流的作用。方法采用离体器官实验法记录心室乳头肌收缩力;采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞钠电流、钙电流和钠-钙交换电流。结果①闹羊花毒素Ⅲ(0.1、0.3、1.0μmol/L)对心室乳头肌有浓度依赖性的正性肌力作用,乳头肌收缩力分别增加(27.0±8.2)%(、56.0±16.6)%和(102.0±38.4)%(n=6,均P<0.01),更高浓度时(3.0μmol/L)则诱发节律异常。3.0μmol/L河豚毒素可对抗这些作用。②在钳制电压为 50 mV时,1.0μmol/L闹羊花毒素Ⅲ使钠-钙交换电流由(123±30)pA增至(232±49)pA(n=5,P<0.01)。③1.0μmol/L闹羊花毒素Ⅲ抑制钠电流,使钠电流峰值由(3.58±0.86)nA降至(1.30±0.38)nA(n=5,P<0.01),而对钙电流无影响[给药前为(852±260)pA,给药后为(818±226)pA,n=5,P>0.05]。结论闹羊花毒素Ⅲ的正性肌力作用机制主要是促进钠-钙交换电流,而不是增加钙电流。     

胡椒碱对H2O2所致兔心房肌细胞瞬时外向钾电流异常的保护作用

目的研究胡椒碱对H2O2引起的兔单个心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)异常的保护作用。方法采用全细胞膜片钳技术分析50μmol/L的H2O2对兔单个心房肌细胞Ito的影响,并研究预先应用7μmol/L的胡椒碱对其的保护作用。结果 7μmol/L胡椒碱对正常兔心房肌细胞Ito及其通道动力学无显著影响。在50μmol/L H2O2作用下,兔心房肌细胞Ito峰值由(39.3±5.4)pA/pF降低至(32.8±2.0)pA/pF(P<0.05),电流-电压曲线下移,通道稳态激活曲线右移,通道稳态失活曲线及恢复时间不变,关闭态失活加速。预先给予7μmol/L胡椒碱,明显减轻H2O2对Ito的抑制作用(P<0.01),并可减轻H2O2对瞬时外向钾通道动力学的异常影响。结论胡椒碱可减轻氧化应激对心房肌细胞Ito的影响。     

通络药物对心肌细胞钠钙离子通道的影响

目的观察通络药物参松养心胶囊提取干粉溶液对单个豚鼠J0室肌细胞膜钠通道电流（INa）、L型钙通道电流（ICa,L）的影响。方法用钙外液将参松养心胶囊干粉配制成不同浓度（1％、0．5％、0．25％）。用酶解法分离单个心室肌细胞,并用全细胞膜片钳记录技术记录电流。结果当药物浓度0．5％时,可以使INA峰值电流密度从（27．2±5．4）pA／pF降至（14．9±2．8）pA／pF,平均抑制率为44．8％±7．7％（n=5,P〈0．05）;药物浓度为1％,0．5％,0．25％时,分别对ICa,L的峰值电流密度的抑制率为50．7％±5．6％,44．8％±6．5％,和19．2％±1．1％,（n=5,P〈0．05）。药物可以使INA、ICa,L的电流密度-电压曲线上移,但均不改变其激活、峰值和反转电位。结论参松养心胶囊提取干粉溶液对,INA、ICa,L具有阻滞作用,这可能是其抗心律失常和心肌保护作用药理机制的一部分。     

氯胺酮对大鼠海马神经元高电压激活钙电流的作用

目的 观察氯胺酮对大鼠海马神经元高电压激活钙电流(ICa(HVA))的影响.方法 培养Wistar大鼠海马神经元,采用全细胞膜片钳技术测定ICa(HVA).加用不同浓度(10、30、100、300、1000μmol/L)氯胺酮后,计算ICa(HVA)抑制率,建立氯胺酮的浓度-效应曲线,选择100μmol/L氯胺酮作ICa(HVA)稳态激活(及失活)曲线.结果 10 μmol/L 的氯胺酮对ICa(HVA)的电流幅度无影响;30、100、300和1000μmol/L的氯胺酮对ICa(HVA)的电流幅度抑制率分别为(17.5±4.5)%、(25.5±6.9)%、(38.5±4.1)%和(42.3±4.6)%.拟合后的浓度-效应曲线的半数最大抑制浓度为68.2μmol/L,希尔系数为0.47.激活曲线的最大激活膜电位由(5.4±0.9)mV 变为(5.3±0.8)mV;失活曲线的半数最大激活膜电位从(-26.7±3.9) mV移动到(-32.8±4.2)mV,斜率从-0.0067±0.0002变为-0.0076±0.0002.结论 氯胺酮对ICa(HVA)通道有抑制作用,氯胺酮对中枢神经系统的作用可能与ICa(HVA)抑制有关.     

五甲基槲皮素对豚鼠心肌收缩力和电生理特性的影响

目的比较研究五甲基槲皮素（PMQ）和槲皮素（QUE）对离体豚鼠心肌收缩力和电生理特性的影响并探讨其机制。方法测定离体豚鼠右心房肌自律性及左心房肌收缩力;同步记录豚鼠心乳头肌动作电位和收缩力;全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞L型钙电流（ICa.1）。结果10、30、100μmol／LPMQ和QUE均可增强左心房肌收缩力;PMQ对右心房自律性无明显作用,QUE则可提高右心房自律性。30、100μmol／LPMQ对豚鼠心乳头肌动作电位无明显影响,QUE可延长豚鼠心室肌动作电位时程;QUE增强乳头肌收缩力的作用强于PMQ。PMQ与QUE均抑制ICa.L,后者作用更强。结论PMQ与QUE均可增强豚鼠心肌收缩力;PMQ与QUE对豚鼠右心房自律性的作用趋势相反;PMQ对乳头肌动作电位无明显作用,对心室肌细胞ICa.L的抑制作用弱于QUE。首次揭示了PMQ在心脏方面的作用,为该类药物在临床的应用提供了有价值的参考信息。     

淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

心房肌电重构能促进房颤吗？

心房颤动（AF,简称房颤）电重构被认为是促进房颤的适应性结果。然而,房颤时INa、ICa通道蛋白表达下调与细胞内相应离子浓度增高诱导有关,利于极性维持;ITo为1相外向瞬时K＋电流,IKur为1相和2相重要外向K＋电流,IKr、IKs为2相主要外向电流,均于房颤时其相应通道蛋白表达下调,延长心房肌有效不应期（AERP）,不利于折返形成;IK1、IKAch、IKATP＋作用于动作电位3相,其通道蛋白上调增大心肌舒张电位．降低心肌兴奋性,减少异位激动。因此．房颤时心房肌电重构并非为适应房颤,而是恢复生理功能。房颤促房颤形成是因为房颤可致心房结构重构。而结构重构又使房颤易于发生和维持,两者相互作用并最终加重心房肌损伤,诱导心肌电紊乱。     

过氧化氢对大鼠心室肌细胞钠通道电流的影响

目的 研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响.方法 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流,观察1 mmol/L H2O2引起单个大鼠心室肌细胞INa改变.结果 在1 mmol/L H2O2作用下,大鼠心室肌细胞INa峰值电流密度从(19.95±4.58)pA/pF减少至(15.19±4.15)pA/pF(n=8,P＜0.05),电流-电压曲线上移,翻转电位左移,但对激活电位、峰电位无明显影响;H2O2对INa稳态激活曲线无明显改变,V0 5从(-64.54±0.16)mV左移至(-66.28±0.32)mV(n=8,P＞0.05),对其稳态失活曲线无明显改变,V0 5从(-91.46±0.17)mV左移至(-94.52±0.25)mV(n=8,P＞0.05);H2O2对INa失活后再激活曲线有明显改变,对照组τ为(6.43±1.04)ms,H2O2组τ为(8.31±1.48)ms(n=6,P＜0.05).结论 过氧化氢可以减少大鼠心肌细胞INa,且使其复活明显减慢.     

哇巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌细胞钠电流的作用

目的 观察哇巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌细胞钠电流的作用,探讨二药诱发心律失常的机制.方法 用全细胞膜片钳技术分别记录豚鼠和大鼠单个心肌细胞钠电流.结果 在-40mV电压下,哇巴因5μmol/L使Ina从(-48.3±8.9)pA/pF减少到(-22.6±5.6)pA/pF(抑制60.1%,n=5,P＜0.01);乌头碱1μmol/L使Ina从(-21.8±5.8)pA/pF增加到(-67.3±7.8)pA/pF(增加208.7%,n=4,P＜0.01).结论 哇巴因抑制豚鼠心肌细胞钠电流而乌头碱增加大鼠心肌细胞钠电流.不论是抑制还是促进钠电流,二药均使离子通道失衡,这是其诱发心律失常的重要机制.     

莲心碱对豚鼠心室肌细胞动作电位及钠与钙电流的影响

为探讨莲心碱 (liensinine,L ien)对心肌离子流的影响及抗心律失常作用机制。采用全细胞膜片钳技术 ,记录了 L ien对单个豚鼠心肌细胞动作电位 (AP)及纳电流 (INa)与 L -型钙电流 (ICa- L)的影响。 L ien 3～ 30μmol/ L 可剂量依赖性地降低 AP幅度 (APA)、静息电位 (RP) ,延长 AP时程。 L ien10 ,30 μm ol/ L 分别使 INa及 ICa- L从给药前的 (8.6± 2 .3) n A和 (75 8± 177) p A降至 (5 .4± 1.7)、(2 .2± 1.6 ) n A和 (335± 12 2 )、(137±10 0 ) p A。L ine10 μmol/ L 抑制 INa和 ICa- L的 I- V曲线并使后者的峰值电流电位略右移。结果表明 L ien有钠、L -型钙通道阻滞作用 ,这些可部分解释其抗心律失常作用机制     

The Effect of Levobunolol Hydrochloride on the Calcium andPotassium Channels in Isolated Ventricular Myocytes of Guinea Pig

Summary The effects of levobunolol hydrochlorid (Bun) on the type L calcium channel currents (I_ca and delayed rectifier potassium channel currents (I_k) in isolated ventricular myocytes of guinea pig were studied by using patch clamp whole cell recording techniques. The results were showed that: 1) Bun caused a dosedependent decrease in I_ca and a dose-dependent increase in I_k of the ventricular myocytes. The threshold concentrations of Bun for I_ca and I_k were 10⁻⁸ mol/L and 10⁻⁷ mol/L respectively. The maximum effective concentration of Bun for both I_ca and I_k was 3 × 10⁻⁵ mol/L, and half-maximal concentration Was 3 × 10⁻⁶ mol/L; 2) I_k was blocked by 2 × 10⁻⁶mol/L tetraethylammonium (TEA). A concentration of 3 × 10⁻⁶ mol/L Bun showed a decreasing effect on the Ic as revealed by the current-voltage relationship curve, i.e., Bun caused an elevation of the curve; 3) When I_ca was blocked by 2X10⁻⁶ mol/L Isoptin (Verapamil), at a concentration of 3 × 10⁻⁶ mol/L Bun showed an increasing effect on Ik and the effect could be blocked by TEA- The above-mentioned results indicated that Bun had an inhibitory effect on I_ca and a fascilitatory effect on I_k. The results suggested that the molecular mechanisms of antihypertensive, heart rate slowing and β-receptor blocking effects of Bun might be due to decrease of I_ca and increase of I_k. This project was supported by Science Committee of Hubei Province (No. 95 JJ9-29).     

Possible function of outward potassium currents in isolated Deiters’cells of guinea pig cochlea

Objective To study potassium currents in isolated Deiters’ cells of guinea pig cochlea and explore possible function of potassium current in Deiters’ cell.Methods The whole cell patch clamp recording technique was used to study potassium currents of Deiters’ cells in normal external solution and solutions with different K(+) concentrations. We also studied the effects on reversal potentials and outward potassium currents. Results Isolated Deiters’ cells possess voltage dependent, outwardly rectifying ion channels, which are K(+) selective. 50mmol/L K(+) and 150mmol/L K(+) in external solution reduced I［K-max］ from (10.06±2.2)nA (n=13) in normal external solution to (6.43±1.67)nA (n=6, P&lt;0.05) and (5.49±1.33)nA (n=6, P&lt;0.05), respectively. While the amplitude of tailcurrents decreased from （468.76±61.76）pA in 5mmol K(+) external solution to （224.74±35.89）pA (P&lt;0.05) in 50mmol/L K(+) and to （-911.59±78.17）pA (P&lt;0.01) in 150mmol/L K(+) external solution. Conclusions Outwardly rectifying potassium in Deiters’ cells could buffer extracellular K(+) in the small space between Deiters’ cells and outer hair cells or neural fibers and participate in the diffusion of K(+) from endolymph to perilymph.     

雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的影响

目的 研究雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的影响.方法 运用全细胞膜片钳记录方法了解雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的作用,并了解其是否存在使用依赖性阻滞作用.结果 30μmol/L雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流有明显的抑制作用,其IC50为(39.3±2.0)μmol/L,并且随着刺激频率的增加其作用加强,存在使用依赖性.结论 雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流有一定的抑制作用,其存在使用依赖性阻滞作用.     

窦房结细胞自律性与超极化激活起搏电流关系的研究进展

窦房结是正常心脏活动的起搏点,在心脏传导系统中自律性最高,窦房结细胞的自动除极是其自律性产生的基础,多种离子通道及相应电流参与窦房结细胞自律性活动,其中超极化激活环核苷酸门控通道(HCN)及其电流(If)在窦房结细胞自律性产生过程中起着重要作用,HCN通道共有HCN1~4四个亚型,在心脏窦房结细胞中HCN4是主要的亚型,负责形成If,HCN4及相关If对窦房结自律性有着重要的影响。     

EFFECT OF COXSACKIEVIRUS B3 ON ION CHANNEL CURRENTS IN RAT VENTRICULAR MYOCYTES

Objective. To investigate the effects of coxsackievirus B3 ( CVB3 ) on ion channel currents in rat ventricular my-ocytes. Methods. Rat hearts were isolated with collagenase to acquire single ventricular myocytes, L-type voltage-depen-dent calcium channel( VDCC) current (ICa),Na^ current (INa), outward potassium current (Iout), inwardly rectifying potassium current(IKI) were recorded using whole cell patch clamp techniques. Results. CVB3 infection increased Ica and Iout, while decreased IKI; but it had no obvious effect on INa. Conclusion. The effects of CVB3 on ICa,Iout, IKI may be one of the mechanisms of myocytes damage and the oc-currence of abnormal electroactivities induced by CVB3 infection.     

Effects of 2-APB on Store-operated Ca^2＋ Channel Currents of Hepatocytes after Hepatic Ischemia／Reperfusion Injury in Rats

Summary The effects of hepatic ischemia/reperfusion (I/R) injuries on hepatocellular viability and store-operated calcium current (Isoc) in isolated rat hepatocytes and the effects of 2-APB on store-operated calcium current (Isoc) in isolated rat hepatocytes after hepatic ischemia/reperfusion injuries were studied. Hepatic ischemia and reperfusion injury model was establised and whole cell patch-clamp techniques were used to investigate the effects of 2-APB on Isoc. The results showed that ischemia/reperfusion injuries could significantly reduce hepatocellular viability and further increase Isoc in hepatocyte and 2-APB (20, 40, 60, 80, 100 μmol/L) produced a concentration-dependent decrease of Isoc with IC₅₀ value of 64.63±10.56 μmol/L (n=8). It was concluded that ischemia/ reperfusion injuries could reduce hepatocellular viability, probably through increased Isoc in hepatocytes and 2-APB had a protective effect on ischemia/reperfusion-induced liver injury, probably though inhibiting Isoc. Huang Changzhou, male, born in 1965, M. D., Ph.D. This project was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30270532), the Trans-Century Excellent Talent Development Plan Fund of Ministry of Education of China (Official Letter No. 2002-48) and Shuguang Program Project of Shanghai Educational Committee (No. 02SG20).     

酚类抗炎物质增强家兔在体内源性前列环素的生成

麻醉兔静脉注射血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）可使血浆前列环素（ＰＧＩ２）的代谢产物６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α的水平由２４１±６０增加到６１２±１０８ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝８），在此基础上酚类抗炎物质ＭＫ－４４７可使６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α的血浆水平进一步升高到１００７±２１８ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝８）。ＭＫ－４４７本身并不影响血浆６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α的水平。另外，血浆血栓素代谢产物（ＴＸＢ２）的水平均不受ＡⅡ和ＭＫ－     

水杨酸钠对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞外向延迟整流钾电流及其尾电流的影响

目的 采用全细胞膜片钳技术记录耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion neurons,SGNs)外向整流钾电流及其尾电流,分析水杨酸钠对耳蜗SGNs外向整流钾电流及其尾电流的影响,初步探讨其耳毒性机制.方法 采用全细胞膜片钳技术记录急性分离并进行细胞短时间(2～3 h)血清培养后,耳蜗SGNs外向延迟整流钾电流及其尾电流曲线,同时记录不同浓度水杨酸钠(0.01、0.1、0.5、1、10 mmol/L)对2种电流的影响.结果耳蜗SGNs上可记录到外向电流,该电流对4-氨基吡啶(4-AP)敏感,证明其为钾电流,该钾电流具有延迟整流特性;1 mmol/L水杨酸钠能明显抑制耳蜗SGNs外向延迟整流钾电流;+50 mV的去极化电压刺激可使最大稳态电流幅值减少(46.3±2.0)%,水杨酸钠对此电流的抑制具有浓度依赖性,外液洗脱后耳蜗SGNs外向延迟整流钾电流可基本恢复正常.另外,可记录出耳蜗SGNs延迟整流钾电流的尾电流曲线;水杨酸钠可降低此尾电流峰值,并缩短尾电流的时间常数,加速尾电流的失活.结论 钾电流在耳蜗SGNs正常电生理活动中有重要作用.水杨酸钠抑制耳蜗SGNs外向整流钾电流及其尾电流,并加速尾电流的失活,这种作用可导致耳蜗SGNs的电生理活动异常,从而引发水杨酸钠对听觉功能的损害.     

Effects of 2-APB on Store-operated Ca~(2+) Channel Currents of Hepatocytes after Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury in Rats

In clinical practice of hepatobiliary surgery,various factors, such as shock, inflammation, he patic trauma, the operations of liver and biliarytract (in case of necessities of interrupting hepaticportal), liver transplantation, are mutually relatedto commonly pathophysiological procedures,named hepatic ischemia/reperfusion injury, whichcauses Ca2+ overload of hepatocytes and hepatocel lular apoptosis and necrosis and eventually leads toliver dysfunction ( and even …