pT1-4aN0M0胃癌淋巴结微转移检测的临床意义

目的：探讨淋巴结微转移及临床病理因素对 pT1-4aN0M0期胃癌患者术后5年无瘤生存率的影响。 方法：纳入2008年1月—9月期间pT1-4aN0M0期胃癌患者行根治术者45例849枚HE染色阴性淋巴结,应用免疫组化法检测这些淋巴结中CK19表达,观察其淋巴结发生微转移情况,并分析发生微转移胃癌患者的临床病理特征及微转移的发生对患者5年无瘤生存率的影响。 结果：经免疫组化染色,849枚HE常规染色阴性淋巴结中CK19阳性表达率为8.13%（69/849）;有31.11%（14/45）患者的淋巴结CK19表达阳性。术后随访时间13~69个月（平均随访时间55.08个月）,淋巴结中CK19阴性表达、阳性表达患者的5年总生存率分别为83.87%、42.86%;两者无瘤生存率差异有统计学意义（χ2=9.112,P=0.003）。淋巴结CK19阳性表达与胃癌患者的肿瘤直径（P=0.007）、浸润胃壁深度（P=0.032）有关,5年无瘤生存率与临床病理因素无关（P>0.05）。Cox生存回归分析显示淋巴结微转移为独立预后因素,14例患者被检测出微转移,建议重新分期,重新分期率为31.11%（14/45）。 结论：胃癌pT1-4aN0M0期患者,免疫组化染色能检出常规HE染色阴性淋巴结中的微转移,有助于细化分期、判断预后及指导治疗。     

CK19mRNA测定在乳腺癌腋淋巴结微转移诊断中的应用

研究敏感的方法检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移。方法:对15例乳腺癌者的61个腋淋巴结和5个正常对照淋巴结同时进行HE染色组织学检查和CKl9逆转录-聚合酶链式反应(CK19RT-PCR)检测。结果:15例乳腺癌组织均有CK19mRNA表达,而5个正常淋巴结中均末见表达。61个腋窝淋巴结中7个组织学检查证实转移,其CK19mRNA亦表达阳性。组织学检测无转移的54个淋巴结中有12个CK19RT-PCR表达阳性,42个阴性;提示该12个淋巴结存在微转移只能用CK19RT-PCR方法检测出。经统计学分析,CK19RT-PCR与组织学检查二者有显著差异(X~2检验,P<0.01)。结论:CK19表达于恶性乳腺细胞,正常淋巴细胞无表达,CK19能作为组织特异基因进行RT-PCR扩增以检测乳腺癌腋淋巴结微转移。CK19 RT-PCR方法比组织学方法更敏感,特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的病人将有实用价值。     

CK在Ⅰ期非小细胞肺癌患者淋巴结中的表达及其临床意义

目的通过检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者淋巴结中细胞角蛋白(CK)的表达,确定微转移灶的存在及其与肿瘤复发、转移和预后的关系。方法以CK作为肿瘤标记物,应用免疫组化链霉亲生物素-生物素-过氧化酶复合物(Streptavidin biotin-peroxidase complex,SABC)法,检测根治术后常规病理HE染色阴性的33例Ⅰ期NSCLC患者的246枚淋巴结中的微转移灶。结果33例患者246枚淋巴结中有10例(30.3%)患者的12枚(4.9%)淋巴结中CK阳性表达。有或无CK阳性表达的患者复发转移率差异有统计学意义(80.0%vs.26.1%,χ2=7.015,P=0.016),CK阳性表达患者的中位生存期显著短于CK阴性表达者(21个月vs.60个月,P=0.016);Cox单因素风险模型(P=0.004)和多因素风险模型(P=0.004)均显示存在淋巴结微转移的期NSCLC患者预后不良。结论CK免疫组化染色可以作为检测和判定肺癌淋巴结微转移的有效方法。CK免疫组化染色检测淋巴结微转移与Ⅰ期NSCLC复发转移相关,有助于更加精确的分期,可以作为Ⅰ期NSCLC患者根治术后的一个预后指标,并为其综合治疗提供理论依据。     

细胞角蛋白7、18、19在壶腹周围癌淋巴结微转移灶的检测及临床意义

目的探讨细胞角蛋白对壶腹周围癌淋巴结微转移的检出率,并分析淋巴结微转移与临床预后的关系,为提高临床综合疗效提供理论依据。方法应用细胞角蛋白(CK7、CK18、CK19)单克隆抗体,对45例壶腹周围癌根治术后经病理常规HE染色阴性的186枚淋巴结进行免疫组织化学技术(S P法)检测,结合随访资料进行临床预后分析。结果45例壶腹周围癌根治术后HE染色阴性的186枚周围淋巴结中,有9例(20%、9/45)34枚(18.3%、34/186)淋巴结中检出微小转移灶。免疫组化诊断微转移阳性组和阴性组的1年复发率分别是88.9%(8/9)和16.7%(6/36),两组间有显著性差异(P<0.05)。不同单克隆抗体(CK7、CK18、CK19)检测发现,CK19在壶腹周围癌186枚淋巴结的检出率高达15.6%(29/186),CK19与壶腹周围癌淋巴结微转移关系密切(P<0.05)。结论对常规病理检查阴性的壶腹周围癌淋巴结进行CK7、CK18、CK19检测有助于发现微转移灶,为提高淋巴结微转移诊断的准确性、判断临床分期、估计预后及选择辅助治疗提供理论依据。CK系列单抗联合检测可提高淋巴结微转移阳性检出率。     

早期胃癌CD44v6的表达及与淋巴结微转移的关系

目的：研究早期胃癌组织CD44v6的表达及与淋巴结微转移的关系,并探讨其临床意义。方法：对64例早期胃癌患者手术切除的原发灶行CD44v6免疫组化检测,对清扫的常规HE染色阴性的782个淋巴结行CK20免疫组化检测。结合临床病理学指标,对CD44v6在原发灶的表达和淋巴结微转移与肿瘤直径、组织学类型及侵犯深度等的关系,以及CD44v6的表达与淋巴结微转移之间的关系进行分析。结果：64例早期胃癌患者23例CD44v6染色阳性,6例14个淋巴结内有微转移。23例CD44 v6表达阳性的患者中4例（17.39%）发生微转移,31例CD44v6表达阴性的患者中2例（6.45%）发生微转移。结论：淋巴结微转移与肿瘤直径、组织学类型及侵犯深度相关。CD44v6染色阳性与肿瘤直径和组织学类型无关,但与侵犯深度相关。原发灶CD44染色阳性与淋巴结微转移有相关性。     

CK18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移中的表达及其意义

为探讨CK 18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移中的表达及其意义 ,笔者检测了CK 18和PNA受体在大肠癌患者淋巴结微转移灶中的表达。结果 :(1) 60例大肠癌患者的 2 3 4枚淋巴结中 ,共有 2 2例 (3 6.67% ) 3 9枚 (16.67% )淋巴结存在微转移 ,主要以单个散在和小团状分布于淋巴结的边缘窦内。 (2 )CK 18蛋白表达阳性率为 14 .10 % (3 3 / 2 3 4) ,除 1枚淋巴结外 ,HE染色阳性者CK 18染色均阳性 ;PNA受体表达阳性率为 13 .2 5 % (3 1/ 2 3 4) ,HE染色阳性者PNA染色均阳性。CK 18蛋白和PNA受体阳性表达率明显高于HE染色阳性者 (P <0 .0 1)。 (3 )CK 18和PNA受体共同表达阳性率为 10 .68% (2 5 / 2 3 4) ;CK 18表达阳性而PNA受体阴性的淋巴结 8枚 ,占 3 .42 % ;PNA受体表达阳性而CK 18表达阴性的淋巴结 6枚 ,占 2 .5 6% ;但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 (4 )淋巴结微转移灶的检出率与患者年龄、性别、病理类型、分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ,而与Dukes分期有关 ,C期明显高于A和B期 (P <0 .0 1)。提示CK 18和PNA联合应用可提高微转移的检出率     

胃癌腹腔微转移检测及其临床意义

摘要：目的 探讨胃癌检测胃癌腹腔微转移的作用及临床意义。方法 选择 50例术前及术中检查均未发现腹膜转移的胃癌病例, 术中行道格拉斯窝处的腹膜活检并行HE常规染色和CK 20免疫组化染色检查，同时用RT PCR方法检测胃癌腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的表达。结果 全部患者道格拉斯窝活检腹膜HE染色均为阴性。CK 20免疫组化检查的阳性率为24.0％（12/50）；RT PCR检测腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的阳性率为36.0％（18/50）；CK 20免疫组化检查阳性的12例患者腹腔冲洗液中CK 20 mRNA检查均为阳性。CK 20 mRNA阳性率与胃癌浸润深度、组织学类型和淋巴结转移数目有关(P<0.05)。CK 20 mRNA阳性和阴性胃癌患者3年生存率分别为22.2％和62.5％(P<0.01)。结论 术前检查或术中探查未发现腹膜转移的胃癌患者,可行腹腔冲洗液RT PCR检查以发现有无腹腔微转移，该项检查可为胃癌正确分期、腹腔内辅助化疗及预后判断提供证据。     

中低位直肠癌区域淋巴结微转移

目的：观察中低位直肠癌区域淋巴结的微转移。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,扩增角蛋白19（K19）,对15例Duke B期中低位直肠癌患者的癌组织样本和127枚组织学阴性淋巴结进行检测,藉此了解区域淋巴结的微转移状态。结果：15例癌组织均有K19 mRNA表达,127枚病理检查未发现转移的淋巴结中,经RT-PCR检测有13枚存在微转移。另送8枚淋巴结病理组织学阳性,K19 mRNA均表达阳性,良性病人送检11枚淋巴结均不表达K19。结论：中低位Duke B期直肠癌区域淋巴结常规病理学检查阴性,存在10.2%（13/127）微转移。为患者术后辅助治疗及预后判断提供资料。     

早期胃癌淋巴结微转移的临床研究

目的 探讨早期胃癌的病理及淋巴结微转移情况.方法 收集本院2005年1月至2006年12月之间共249例胃癌手术切除标本中的36例早期胃癌病例,用常规病理学方法(HE染色)及免疫组化方法(CK染色)对497个淋巴结(平均每例13.8个淋巴结)标本进行回顾性临床分析.结果 常规病理学方法检测发现4个病例共6枚淋巴结出现转移,而免疫组化方法发现8个病例(包括HE染色发现的4例)共20枚淋巴结出现转移,并且8例淋巴结微转移阳性的病例中2例癌组织位于黏膜层,6例癌组织侵及黏膜下层,提示早期胃癌淋巴结微转移与肿瘤浸润深度有关(P<0.05),并且免疫组化方法对淋巴结微转移的检出率高于常规HE染色(4.02%与1.21%;P<0.05).结论 免疫组化(CK染色)方法检测淋巴结微转移优于常规病理检查.肿瘤侵犯黏膜下层的早期胃癌更易发生淋巴结转移.     

MUC1 mRNA和CK19 mRNA在胃癌淋巴结表达的意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移的基因诊断方法,分析CK19 mRNA、MUC1 mRNA作为胃癌微转移检测分子标志物的可行性。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测52例胃癌462枚常规病理阴性淋巴结中黏蛋白1（MUC1）mRNA、细胞角蛋白19（CK19）mRNA表达;对照组为4例胃良性病变患者的38枚淋巴结。结果 胃良性病变患者38枚淋巴结中CK19 mRNA和MUC1 mRNA表达均为阴性;CK19、MUC1 mRNA在胃癌患者462枚常规病理阴性的淋巴结中223枚（48.3%）阳性表达,其中180枚（39.0%）淋巴结CK19 mRNA阳性表达,136枚（29.4%）MUC1 mRNA阳性表达,CK19 mRNA和MUC1 mRNA均为阳性者有125枚（27.0%）。不同组织类型淋巴结CK19、MUC1 mRNA阳性率差异无显著性（P〉0.05）,不同肿瘤浸润层次、原发肿瘤大小、肿瘤位置的阳性率差异有显著性（P〈0.05）。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PCR法检测胃癌患者淋巴结微转移的分子标志物。     

直肠癌淋巴结微转移标志物的比较研究

目的：评价直肠癌淋巴结CK20、CK19、CEA诊断微转移的敏感性、特异性，探讨微转移的临床病理意义。方法：采用免疫组织化学染色方法，以CK20、CK19、CEA为指标，检测36例直肠癌患者手术区域252枚淋巴结的微转移，对照组为淋巴结反应性增生的标本15例。结果：常规HE检测淋巴结转移阳性率7．94％，CK19、CK20、CEA阳性率分别为20．63％、23．02％、17.46％，均高于HE检测结果（P〈0．01）。三种抗体在淋巴结微转移阳性率存在统计学差异。19枚对照组淋巴结CK19阳性率47.37％，CEA阳性率10．53％．CK20表达阴性。CK20、CK19、CEA淋巴结微转移阳性率与3年复发率无统计学差异（P〉0.05）。结论：对常规病理检测未发现区域淋巴结转移的直肠癌，有必要辅以免疫组化方法检测其微转移，CK20是首先标志物。     

甲状腺滤泡状癌淋巴结微转移与中央组淋巴结处理的探讨

目的 从淋巴结微转移的角度探讨甲状腺滤泡状癌中央组(Ⅵ组)淋巴结处理的意义.方法 选择细胞角蛋白(CK-19)单克隆抗体,应用免疫组化SP法对68例326枚常规病理检查阴性的颈淋巴结(pN0)进行检测,确定其微转移情况并与临床及随访资料进行对比分析.结果 326枚pN0淋巴结中微转移阳性46枚,包括Ⅱ组4枚(4/42),Ⅲ组5枚(5/34),Ⅳ组5枚(5/49),Ⅴ组1枚(1/17),Ⅵ组31枚(31/184).在淋巴结微转移阳性的14例中6例(6/14)出现局部复发或远处转移,而54例微转移阴性病人中仅3例(3/54)复发或远处转移(P＜0.01).结论 甲状腺滤泡状癌Ⅵ组淋巴结是容易发生微转移的区域淋巴结;且淋巴结微转移与肿瘤复发及转移有密切关系.甲状腺滤泡状癌手术时应常规清扫Ⅵ组淋巴结.     

逆转录-聚合酶链反应检测乳腺癌腋淋巴结微转移的研究

目的探讨乳腺癌患者淋巴结内癌微转移灶的临床意义。方法采用逆转录－聚合酶链反应技术,扩增细胞骨架角蛋白１９（ＣＫ１９）,对１５例乳腺癌患者的癌组织及其６１个腋窝淋巴结进行检测。结果１５例患者乳腺癌组织均有ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达,５个正常淋巴结均无表达。６１个淋巴结同时进行逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及组织学检查,７个淋巴结病理证实有转移,其ＣＫ１９ｍＲＮＡ亦都表达阳性;病理未发现转移的５４个淋巴结中有１２个ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达阳性。结论ＣＫ１９ＲＴ－ＰＣＲ方法检测乳腺癌腋淋巴结癌微转移比组织学检查敏感（χ２检验,Ｐ＜０．０１）,特别在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的患者具有实用价值。     

RT-PCR�����θ���ܰͽ�΢ת��

目的应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胃癌淋巴结微转移，探讨淋巴结微转移与胃癌生物学行为的关系。方法对中山大学附属第一医院2003年12月至2004年4月间行手术切除的30例胃癌共850枚淋巴结采用CK-20mRNA RT-PCR扩增检测微转移，分析微转移的临床病理特点。结果14例(46．7％)77枚(12．5％)淋巴结检出淋巴结微转移。弥漫型胃癌的微转移阳性率为63．2％(12／19)，明显高于肠型胃癌的18．2％(2／11，P＜0．05)。肿瘤浸润深度越深，微转移的检出率越高。结论CK-20mRNA RT-PCR法可以检测出常规病理学检查遗漏的淋巴结微转移，可显著提高淋巴结转移的检出率。淋巴结微转移与Lauren分型和浸润深度密切相关。     

Immunohistochemistry analysis of micrometastasis in pretreatment lymph nodes from patients with esophageal cancer

BACKGROUND: With recent advances in neoadjuvant therapy in esophageal cancer, pretreatment lymph node staging has become increasingly important in stratifying patients to appropriate treatment regimens and for prognostication. Immunohistochemical analysis (IHC) using epithelial markers has been shown to identify micrometastases in histologically negative lymph nodes. We performed this study to evaluate if IHC analysis in thoracoscopic/laparoscopic (Ts/Ls) pretreatment staging lymph nodes can reveal additional diagnostic information to routine histopathology. METHODS: Specimens of 106 patients with esophageal cancer who had pretreatment Ts/Ls staging were retrospectively studied. Lymph node biopsies were obtained for IHC staining using cytokeratin (CK) of AE1/AE3. IHC staining for p53, an apoptosis protein associated with poor prognosis in esophageal cancer, was also performed. RESULTS: 331 Ts/Ls staging lymph node biopsies were collected from 106 patients. A total of 15.4% (51/331) of the lymph nodes or 34.9% (37/106) of patients were found to have metastatic deposits by routine histology. All the histologically positive lymph nodes were CK positive. Among the remaining 280 histologically negative lymph nodes, 11(3.9%) were found to have micrometastasis by CK staining. Three patients (4.3%, 3/69) were upstaged from N0 to N1. They died of early recurrences after treatment. A total of 67.6% (25/37) of the patients with histologically positive lymph node were p53 positive. No histologically negative lymph node was found to be p53 positive in this series. CONCLUSIONS: Immunohistochemical analysis for CK can detect micrometastatic involvement of lymph nodes that are missed on routine pathologic examination, and, therefore, can improve lymph node staging. Its clinical significance in esophageal cancer warrants further study.     

非小细胞肺癌淋巴结微转移的临床病理研究

目的 探讨免疫组化染色检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的可行性。方法 将25例肺癌患者术中获取的淋巴结标本进行石蜡包埋,然后连续切片,6～10张不等,切片厚为5μm。选择第1和倒数第2张切片进行苏木精伊红染色,剩余切片用于免疫组化染色。免疫组化所选抗体为鼠抗人细胞角蛋白19单克隆抗体。结果 195枚淋巴结接受了苏木精伊红染色检查。9例患者共30枚淋巴结中发现有显性转移,无一例患者的淋巴结中检测出微转移。135枚苏木精伊红染色阴性的淋巴结又进行了免疫组化染色检查,有31枚淋巴结病理切片中显现出了癌微转移。16例常规病理PN0期患者中,5例患者肺门淋巴结出现了微转移;另9例常规病理PN1期患者中,4例出现了纵隔淋巴结的微转移,差异有统计学意义（x^2=52．900,P=0．0193）。结论 普通苏木精伊红染色能准确地检测出非小细胞肺癌淋巴结中的显性转移灶,而不易发现隐匿性微转移灶。免疫组化染色能提高非小细胞肺癌淋巴结微转移的检出率,并可对部分Ⅰ、Ⅱ期患者重新进行TNN分期。     

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目的　研究角蛋白19(Keratin 19)的表达与直肠癌所导致直肠系膜内淋巴结微转移的关系。探讨其在预测直肠癌淋巴结微转移中的应用价值。方法　用免疫组化SP法检测2 0 0 2年3～8月收治的80例DukesA ,B ,C ,D期直肠癌组织及其系膜内12 0枚和直肠系膜外5 1枚转移淋巴结中Keratin 19的表达情况,分析其与直肠癌淋巴结转移的相关性。结果　(1)在80例直肠癌病人中,5 7例腺癌上皮Keratin 19表达强于其正常直肠腺上皮Keratin 19的表达,免疫组化染色转移淋巴结的表达程度强于其癌组织表达(P <0 .0 1) ;(2 )有2 5例直肠癌病人直肠系膜内淋巴结HE染色阴性,而免疫组化Keratin 19蛋白染色于其中9例病人的系膜内和系膜外淋巴结分别有11枚(9. 17% )和5枚(9 8% )染色阳性;(3) 80例直肠癌病人直肠系膜淋巴结内癌细胞免疫组化染色平均灰度值与直肠癌原发灶癌细胞免疫组化染色平均灰度值相关性分析显示有相关性(P <0 . 0 1)。结论　80例直肠癌病人直肠系膜淋巴结内转移癌细胞Keratin 19蛋白表达强于直肠癌原发灶癌细胞的表达,直肠癌细胞Ker atin 19蛋白的阳性表达与直肠癌淋巴结微转移呈正相关关系。Keratin 19在DukesC/D期直肠癌内的表达显著高于其在DukesA/B期内的表达。Keratin 19在直肠癌细胞内的表达与病人年龄无明显关     

术中美蓝染色及抗细胞角蛋白20检测淋巴结及其微转移在直肠癌患者中的临床应用

目的探讨术中经直肠上动脉注射美蓝行直肠系膜及淋巴结染色检测淋巴结及其微转移方法的临床意义。方法对30例行根治性手术治疗的直肠癌患者,术中经直肠上动脉插管注射美蓝6ml(美蓝染色组),使直肠系膜及各组淋巴结染色以统计淋巴结数目,同时行抗细胞角蛋白20(CK20)免疫组织化学(免疫组化)染色,检测其微转移情况;并与同期32例行直肠癌根治术患者术中常规手检法(常规手检组)检出的淋巴结数目进行对比。结果美蓝染色组肠旁淋巴结、肠系膜淋巴结、肠系膜根部淋巴结检出数目均明显多于常规手检组(P均=0.000)。美蓝染色组淋巴结常规病理检查阴性者,经CK20免疫组化染色,其转移阳性率增加17.7%;14例DukesB期患者(46.7%)经淋巴结CK20免疫组化染色需重新确定为DukesC期,11例患者(36.7%)出现跳跃淋巴结微转移现象。结论术中经直肠上动脉注射美蓝行淋巴结染色能提高淋巴结检出率。对常规病理检查阴性的淋巴结行CK20免疫组化染色检查其微转移灶,能提高淋巴结阳性检出率,使病理分期更准确。