黄芪多糖对2型糖尿病早期大鼠视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响

目的:探讨黄芪多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响。方法:雄性SPF级SD大鼠随机分为:正常对照组(C组,n=10),黄芪多糖对照组(CA组,n=10),饲以正常饲料;通过高脂饮食加小剂量STZ诱导复制2型糖尿病大鼠模型,将血糖>13.9 mmol/L者随机分为糖尿病组(DM组,n=8)及黄芪多糖治疗组(DA组,n=8)。治疗前后观察血糖、口服葡萄糖耐量变化。从4组大鼠视网膜提取总mRNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Kir2.1 mRNA的表达。结果:DM组血糖显著高于C组,同时伴有明显的糖耐量下降(P<0.01),经黄芪多糖治疗8周后,DA组血糖降低,与DM组比较糖耐量改善(P<0.01)。RT-PCR扩增的Kir2.1 cDNA产物在DM组表达比在C组下降,而在CA组表达较DM上升(P<0.05),但在C组与CA组中未出现这种显著性的改变(P>0.05)。结论:黄芪多糖能够降低血糖,糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1蛋白表达下降,而黄芪多糖对于逆转这一早期的改变可能起到一定作用,从而起到减少糖尿病视网膜病变发病率的作用。     

慢性脑低灌注白质损伤后脑周细胞Kir6.1、Kir6.2的表达

目的：探讨慢性脑低灌注白质损伤后脑周细胞Kir6.1、Kir6.2的表达情况。方法：采用蛋白免疫印迹（Westernblot）方法检测慢性脑低灌注白质损伤模型大鼠脑周细胞Kir6.1、Kir6.2在不同时间点（术后第7d、14d、30d、60d）的表达变化。结果：（1）模型组在不同时间点Kir6.1蛋白表达均升高,于30d达到高峰,与假手术对照组相比差异有统计学意义（P﹤0.001）;（2）模型组在不同时间点Kir6.2蛋白表达与假手术对照组相比差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论：慢性脑低灌注白质损伤后脑周细胞Kir6.1表达增强,这提示Kir6.1/K-ATP通道可能参与了慢性脑白质损伤的病理生理过程;Kir6.1、Kir6.2的表达在脑周细胞出现了明显的异质性。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

近年来 ,临床和动物实验研究发现黄芪多糖 (ＡＰＳ)对糖尿病及其肾脏病变有降低血糖、减少蛋白尿等作用[1 ,2 ] 。本研究旨在观察黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响。材料与方法一、材料1.实验动物 :2月龄健康雄性ＳＤ大鼠 (清洁级 ) ,体重180～ 2 0 0 ｇ ,由上海市计划生育研究所ＢＫ公司提供 ,实验期间饲养于计划生育研究所动物房。2 .实验试剂 :链脲佐菌素 (ＳＴＺ)购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ,ＡＰＳ由中国科学院上海生理研究所提供。二、ＳＴＺ 糖尿病大鼠模型的建立ＳＤ大鼠禁食约 12ｈ后 ,左下腹腔内注射ＳＴＺ溶液 (ｐＨ4.2 ,0 .…     

大鼠Kir6.2基因真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的 克隆Kit6.2基因,构建真核表达载体pcDNA3.0/Kir6.2,将重组质粒转染HEK293细胞获得高表达Kir6.2基因的细胞克隆.方法 从SD大鼠脑组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得Kit6.2基因的全长cDNA,插入TI-simple克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pcD...     

黄芪多糖对2型糖尿病早期大鼠视网膜Muller细胞Kir2．1表达的影响

目的：探讨黄芪多糖对链脲佐菌素（STZ）诱导的2型糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响。方法：雄性SPF级SD大鼠随机分为：正常对照组（C组,n=10）,黄芪多糖对照组（CA组,n=10）,饲以正常饲料;通过高脂饮食加小剂量STZ诱导复制2型糖尿病大鼠模型,将血糖〉13.9 mmol/L者随机分为糖尿病组（DM组,n=8）及黄芪多糖治疗组（DA组,n=8）。治疗前后观察血糖、口服葡萄糖耐量变化。从4组大鼠视网膜提取总mRNA,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测Kir2.1 mRNA的表达。结果：DM组血糖显著高于C组,同时伴有明显的糖耐量下降（P〈0.01）,经黄芪多糖治疗8周后,DA组血糖降低,与DM组比较糖耐量改善（P〈0.01）。RT-PCR扩增的Kir2.1 cDNA产物在DM组表达比在C组下降,而在CA组表达较DM上升（P〈0.05）,但在C组与CA组中未出现这种显著性的改变（P〉0.05）。结论：黄芪多糖能够降低血糖,糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1蛋白表达下降,而黄芪多糖对于逆转这一早期的改变可能起到一定作用,从而起到减少糖尿病视网膜病变发病率的作用。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

目的 观察黄芪多糖（APS）对链脲左菌素（STZ）糖尿病大鼠物质代谢、心肌超微结构的影响。方法 SD大鼠腹腔注射STZ以建立糖尿病模型（DM）,成模后分组,APS组每日给予黄芪多糖灌胃,DM组每日给予生理盐水灌胃作为对照。另设一正常对照组。实验6周后采血,测血糖、血脂,电镜观察心肌超微结构,原子吸收光谱测心肌钙含量。结果 APS组的血糖、三酰甘油水平和心肌钙含量较DM组明显降低,电镜下心肌超微结构的异常明显减轻。结论 APS可以改善STZ糖尿病大鼠的物质代谢,对其心肌超微结构也有保护作用。     

针刺结合蹊径通脉汤对心肌梗死大鼠ATP敏感性钾离子通道相关蛋白Kir6.1、Kir6.2的影响

目的：以“针药结合对心肌梗死（MI）大鼠ATP敏感性钾离子通道相关蛋白Kir6.1、Kir6.2表达的影响”为研究目的,研究针药结合对心肌梗死改善的可能机制,为实现研发心肌梗死新治疗手段提供实验数据基础。方法：65只健康雄性SD大鼠,随机选择10只作为对照组。其余大鼠饲以高脂肪食物,共3周,对照组大鼠皮下多点注射生理盐水,其余大鼠按相同方式注射盐酸异丙肾上腺素。通过心电图对比,将造模成功的40只MI大鼠随机分为模型组、针刺组、西药组、针药结合组,每组10只。分别给予相应治疗后,观察各组大鼠心电图变化,用HE染色观察大鼠心肌细胞的病理改变,以Western blot检测技术检测ATP敏感性钾离子通道（Kir6.1、Kir6.2）蛋白的表达量。结果：与对照组相比,实验组的40份实验标本在心肌细胞蛋白（Kir6.1、Kir6.2）的表达量上都有所提高,差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后,与模型组相比,西药组、针刺组、针药结合组的心肌细胞Kir6.1、Kir6.2的蛋白表达量均呈下降趋势,其中针药结合组下降程度最明显,差异具有统计学意义（P<0.05）。针刺组和西药组的下降...     

中药黄芪多糖对糖尿病大鼠心肌GLUT4表达的影响

目的:探讨黄芪多糖(APS)对糖尿病大鼠的治疗作用以及对心肌组织葡萄糖转运蛋白(GLUT)4表达的影响。方法:Wistar大鼠40只,雄性,随机分为4组,每组10只:正常对照组、糖尿病组(高热量饮食+小剂量链脲佐霉素35mg·kg-1,尾静脉注射)、APS组(正常对照组+APS)和APS+糖尿病组(APS400mg·kg-1·d-1,溶液灌胃)。给药5周后观察动物一般情况,检测血糖和血清胰岛素水平,取心脏包埋制片用免疫荧光法检测GLUT4表达。结果:糖尿病组动物血糖水平及体重显著高于其他3组(P<0.01),APS+糖尿病组血糖水平高于正常对照组(P<0.01),血清胰岛素水平变化无统计学差异(P>0.05),心肌GLUT4表达量明显低于其他各组(P<0.01);APS组血糖,体重及血清胰岛素水平与正常对照组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:APS具有降低糖尿病大鼠血糖和改善心肌胰岛素抵抗的作用,其机理可能与增强心肌组织中GLUT4的表达有关。     

黄芪多糖和大豆异黄酮对糖尿病大鼠糖代谢的影响

目的 探讨黄芪多糖和大豆异黄酮对糖尿病大鼠糖代谢的影响.方法 选择健康成年SD大鼠60只,采用随机数字表法分成5组,每组12只,雌雄各半,单笼饲养,自由饮水和摄食.链尿佐菌素(streptozotocin, STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型,分别为普通饲料组、黄芪多糖高剂量组、黄芪多糖低剂量组和大豆异黄酮组干预动物喂养4、8周后,测定血糖、糖化血红蛋白、尿糖及血脂含量.结果 黄芪多糖高剂量组、黄芪多糖低剂量组以及大豆异黄酮组对DM大鼠喂养8周后,血糖、糖化血红蛋白、尿糖及TC、TG、LDL、VLDL明显低于DM模型组(P＜0.05),HDL明显高于DM模型组(P＜0.05).结论 黄芪多糖、大豆异黄酮均有降血糖和血脂功能的作用.     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏保护作用

目的研究黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法以链脲佐菌素（STZ）诱导产生糖尿病大鼠模型，将模型大鼠随机分为糖尿病模型组及黄芪多糖组，另设正常对照组，连续灌胃4wk。观察治疗后大鼠体重、血糖、尿微量白蛋白排出量及肾皮质Na^＋,K^＋-ATPase活性的改变。结果糖尿病组大鼠体重明显下降，血糖显著升高，尿微量白蛋白排出量增加，肾皮质Na^＋，K^＋—ATPase活性增加；黄芪多糖治疗后，体重增加，血糖降低，尿微量白蛋白排出量减少，肾皮质Na^＋,K^＋—ATPase活性增加受抑制。结论黄芪多糖对糖尿病肾脏病变有防治作用，对肾脏有保护作用。     

黄芪多糖对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

目的 探讨黄芪多糖对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用。方法 比较APS预免疫组NOD小鼠和NS对照组NOD小鼠DM发病率、血清C-P和GAD-Ab水平、脾脏T细胞亚群比例、胰岛组织病理学和免疫组化。结果 APS组与NS组比较,DN发病率显著降低,血清C-P水平显著增高,胰岛炎症程度减轻,CD8T细胞亚群比例显著增高,CD4/CD8比值显著降低。结论 早期应用黄芪多糖预免疫可以预防或延缓NOD小鼠1型糖尿病的发病。     

黄芪多糖对大鼠肌组织能量代谢的影响

目的 观察黄芪多糖(APS)对游泳大鼠糖代谢相关酶的影响,探讨APS对大鼠能量代谢影响的作用机制.方法 采用实验法检测腹腔注射APS大鼠(APS组)游泳力竭时间和不同状态下骨骼肌琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及乳酸水平的动态变化,并与腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液的大鼠(对照组)进行比较.结果 (1)对照组(24只)和APS组(24只)大鼠游泳力竭时间分别为(6.1±1.8)h和(9.3±2.9)h,差异有统计学意义(t=2.35,P＜0.05).(2)对照组大鼠安静状态下骨骼肌SDH活性[(12.2±2.8)U/mgprot]、MDH活性[(0.56±0.05)U/mgprot]及力竭即刻骨骼肌乳酸水平[(0.74±0.21)mmol/gprot]与ASP组[分别为(15.7±2.9)U/mgprot、(0.77±0.10)U/mgprot和(0.42±0.09)mmol/gprot]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)对照组大鼠游泳力竭即刻SDH活性[(9.3±1.1)U/mgprot]、运动1 h时MDH活性[(0.68±0.11)U/mgprot]、力竭即刻MDH活性[(0.44±0.04)U/mgprot]、力竭即刻LDH活性[(191±22)U/100 gprot]与安静状态下SDH、MDH、LDH活性[分别为(12.2±2.8)U/mgprot、(0.56±0.05)U/mgprot和(258±50)U/100 gprot]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 APS可以提高大鼠机体有氧代谢酶SDH、MDH的活性,使能源物质得到充分利用的同时减少了对机体有危害的代谢产物的生成,从而维持更长时间的运动;APS对骨骼肌LDH活性、LD水平影响不明显,但有利于代谢产物乳酸的清除,从而可以延缓疲劳的产生.     

浑源黄芪中黄芪多糖提取条件的优选

目的通过试验优选黄芪多糖的提取工艺。方法先选择单因素水平,考察水回流提取、水浸、碱水回流提取三种方法对多糖提取量的影响;考察后采用正交试验设计,考察溶剂用量、提取时间、提取次数三因素（分别设三水平）对黄芪多糖提取率的影响。以葡萄糖为指标,采用比色法进行含量测定,优选提取工艺。结果单因素考察结果显示,水回流提取最佳;因此对水回流提取方法进行优化,正交试验最终确定最佳提取工艺为A3B1C3,即溶剂用量为20倍量水,提取次数为3次,每次提取1 h,作为最佳提取工艺。结论该工艺提取效率高,方法的稳定性和精密度均符合试验要求,仪器常见,操作简单,成本低廉。     

黄芪多糖对小鼠肾小球足细胞Nephrin、Desmin表达的影响

目的:观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对阿霉素(adriacin doxorubicin,ADR)诱导的肾小球足细胞损伤中足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin及骨架蛋白Desmin表达的影响。方法:通过体外培养小鼠肾小球足细胞,以ADR诱导制作足细胞损伤模型,分为对照组、ADR损伤组(0.5 mg·L~(-1) ADR)、APS干预组(0.5 mg·L~(-1) ADR+0.8 g·L~(-1)APS)。MTT比色法检测3组细胞活力;免疫荧光染色观察3组Nephrin、Desmin表达;Western blot检测Nephrin、Desmin蛋白表达;RT-PCR检测Nephrin、Desmin mRNA水平。结果:APS干预组、对照组细胞活力[(87.25±11.14)%、(97.05±12.67)%]高于ADR损伤组[(58.62±7.93)%](P<0.05)。免疫荧光显示:APS干预组足细胞Nephrin表达少于对照组,但明显强于ADR损伤组(P<0.05);而足细胞Desmin少量表达,且明显少于ADR损伤组(P<0.05)。对照组、APS干预组足细胞Nephrin蛋白含量及Nephrin mRNA水平高于ADR损伤组(P<0.05),Desmin蛋白含量及Nephrin mRNA水平低于ADR损伤组,差异有统计学意义(P<0.05);而APS干预组与对照组足细胞Nephrin、Desmin蛋白及Nephrin、Desmin mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪多糖对ADR诱导的肾小球足细胞损伤具有保护作用,其机制可能与上调Nephrin表达、下调Desmin表达有关。     

黄芪多糖对肾盂肾炎大鼠肾脏TLR4表达的影响

目的:探讨toll样蛋白4(TLR4)在正常及急性肾盂肾炎大鼠肾脏中的表达及其与炎症的关系,并观察黄芪多糖对TLR4表达的影响。方法:24只SPF级成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常组、假手术组、急性肾盂肾炎组和急性肾盂肾炎+黄芪多糖治疗组。膀胱内注射大肠杆菌法制作急性肾盂肾炎动物模型。HE染色观察和评价炎症程度。免疫组化SP法检测肾组织TLR4的表达部位和强度并分析其与炎症程度的关系。逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组TLR4 mRNA的表达。结果:正常组未见炎症改变,假手术组炎症浸润不明显,两者无统计学差异,肾盂肾炎组炎症显著高于正常组(P<0.05),治疗组较肾盂肾炎组炎症减轻。各组肾组织均表达TLR4,正常组和假手术组主要表达于远曲小管上皮细胞,肾盂肾炎组TLR4表达程度显著高于正常组和假手术组(P<0.05),除远曲小管外,也表达于部分近曲小管上皮细胞。治疗组TLR4表达较肾盂肾炎组增强。TLR4 mR-NA表达变化与TLR4蛋白表达变化一致。结论:本实验证实了肾组织TLR4主要表达于小管上皮细胞,TLR4在急性肾炎肾炎发病过程中起着重要作用,黄芪多糖可能通过增加TLR4表达而减轻肾盂肾炎的炎症反应。     

Kir6.2构成的ATP敏感性钾通道在苯环己哌啶诱导的精神分裂症阴性症状中的作用（英文）

目的：ATP敏感性钾（K-ATP）通道对多巴胺和谷氨酸能传导具有重要的调节作用,而多巴胺和谷氨酸能传导之间相互作用是精神分裂症病理机制的重要神经化学基础。因此,我们应用Kir6.2（主要表达在神经元的K-ATP亚基）敲除小鼠,通过苯环己哌啶诱导强迫游泳不动时间的延长,模拟精神分裂症的阴性症状,从而研究K-ATP通道在其中的作用。方法：连续注射14d苯环己哌啶（10 mg.kg-1,i.p.）后,通过观察强迫游泳实验中小鼠不动时间的长短,评价Kir6.2敲除对精神分裂症阴性症状中抑郁样表现的影响;应用高效液相色谱联合电化学检测法观察纹状体多巴胺及其代谢产物、多巴胺更新率的改变;应用溴脱氧尿嘧啶核苷插入法观察海马齿状回颗粒下区神经干细胞增殖的改变;应用Western blot技术观察磷酸化Akt水平的变化。结果：Kir6.2敲除取消了苯环己哌啶引起的强迫游泳不动时间的延长。不仅如此,Kir6.2敲除还抑制了苯环己哌啶诱导的纹状体多巴胺更新率的增加、海马齿状回颗粒下区神经干细胞增殖的减弱,以及磷酸化Akt水平升高。结论：Kir6.2组成的K-ATP通道参与了苯环己哌啶诱导的精神分裂症阴性症状,阻断K-ATP通道有望成为治疗精神分裂症的新策略。     

糖尿病与胰腺癌发生发展的关系

糖尿病尤其是病程5年以上的糖尿病是胰腺癌发生的一个重要危险因素,胰岛素抵抗及其介导的高胰岛素血症通过激活胰岛素/胰岛素样生长因子受体信号通路,促进细胞恶性增殖、侵袭及转移,诱使胰腺癌的发生发展。而胰腺癌合并糖尿病的患者,其糖尿病多数是在胰腺癌确诊前的3年内被发现或与胰腺癌同时诊断,很可能是胰腺癌的一个早期表现。因此针对新发糖尿病(病程在3年以内)或长期罹患糖尿病的患者应提高警惕,必要时进行相关辅助检查,有助于胰腺癌的及早诊断。     

从IL—1探讨黄芪和黄芪多糖的免疫调节作用

本文报道了黄芪和黄芪多糖对正常和大黄脾虚模型小鼠巨噬细胞产生IL—1的影响。实验结果表明:黄芪(0.5kg/L,体内)、黄芪多糖(1.25×10~4mg/L,体外)可协同LPS使正常小鼠IL—1活性提高;大黄脾虚小鼠IL—1活性此正常小鼠低;黄芪(0.5～2kg/L体内)、黄芪多糖(1.25×10~4～1.00×10~3mg/L体外)均可协同LPS使脾虚低下的IL—1明显提高;黄芪或黄芪多糖分别单独作用于正常及大黄脾虚小鼠,未测出有意义的IL—1活性。本研究为黄芪在临床上的运用提供了部分科学依据,也有助于进一步认识脾虚机体的免疫功能变化机理。     

丝胶预处理对糖尿病大鼠胰岛细胞蛋白表达的影响

目的观察彩色蚕茧提取物——丝胶对糖尿病大鼠胰岛细胞Bax、Bcl-2、胰岛素及神经肽Y(NPY)蛋白表达的影响。方法将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组和丝胶组。模型组和丝胶组大鼠均建立链脲佐菌素(STZ)糖尿病动物模型,丝胶组于注射STZ前给予丝胶灌胃35 d。采用酶法检测血糖,免疫印记法观察Bax、Bcl-2蛋白的表达,免疫组化法观察胰岛素、NPY蛋白的表达。结果与模型组大鼠相比,丝胶组大鼠血糖、Bax和NPY蛋白表达明显降低(P<0.01),Bcl-2和胰岛素蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论丝胶预处理可抑制胰岛β细胞凋亡,上调胰岛素表达,下调NPY表达,对糖尿病胰岛损伤具有明显预防作用。