液基细胞学技术与HPV导流杂交在筛查宫颈癌中的应用价值

目的探讨液基细胞学技术(TCT)与人乳头状病毒(HPV)检测对筛查宫颈癌的临床价值。方法对妇科门诊患者分别做TCT检查或HPV导流杂交反斑点印迹(Reverse dot blot,RDB)快速基因分型检测及宫颈活检,并对进行TCT和HPV检测的患者进行统计分析。结果 TCT检查对活检诊断≥宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)宫颈病变的敏感度为58.39%,特异度65.36%,高危型HPV-DNA检测分别为72.34%和57.63%,高危型HPV-DNA检测敏感度较TCT检查高,而TCT检查特异度高于高危型HPV-DNA检测(P均0.01)。结论 TCT检查和HPV导流杂交快速基因分型检测方法在宫颈癌及癌前病变筛查中的联合应用,提高了宫颈癌和癌前病变的灵敏度和特异性,明显提高了宫颈癌筛查的检出率。     

人乳头瘤病毒6/11、16/18型的检测及临床意义

目的 用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测低危型人乳头瘤病毒(HPV)(如6/11)和高危型HPV(如16/18),探讨其在宫颈癌防治方面的意义.方法 采用实时荧光定量PCR对2 162例不同年龄组患者进行HPV-DNA(6/11、16/18)检测.结果 低危型HPV的感染率为11.78%,高危型 HPV的感染率为11.40%,二者的感染率差别不大.结论 HPV为泌尿生殖道感染的重要病原,对妇女进行高危及低危型HPV-DNA检测对早期诊断、治疗具有重要的指导意义,高危型HPV在宫颈癌早期病变的筛查中具有风险提示作用.     

TCT和HPV-DNA配合阴道镜在宫颈病变中的临床意义

目的 探讨液基薄层细胞学检查技术(TCT)结合乳头瘤病毒定性检测(HPV-DNA)23型对宫颈癌前病变的诊断价值.方法 收集本院2006年8月至2007年8月妇科门诊TCT检查结合HPVt-DNA检测1128例,对TCT阳性、HPV阳性病例及临床高度怀疑者377例行阴道镜下活检.结果 随着细胞学诊断级别的升高,HPV感染率上升.随着病理诊断级别的升高,高危型HPV感染率上升,低危型HPV感染多见于CIN I及其以下病变.结论 采用TCT结合HPV-DNA分型初筛,异常者行阴道镜下活检,能提高病变检出率.对于HPV高危型感染者需密切随访.     

两种用于人乳头瘤病毒检测方法的比较分析

目的通过对核酸快速导流杂交基因芯片技术与荧光PCR技术检测人乳头瘤病毒的结果进行比较,为临床人乳头瘤病毒的诊断提供恰当的检测方法。方法采用人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统和荧光PCR技术对78例子宫颈癌患者的宫颈脱落细胞进行人乳头瘤病毒检测。结果基因芯片分型检测总阳性率为91.03%(71/78),且均为高危型。单一感染52例,其中HPV16型阳性率为61.54%,HPV18阳性率为11.54%,其他类型感染阳性率26.92%。荧光PCR法检测总阳性率为93.59%(73/78),其中HPV16阳性检出率45.21%,HPV18阳性检出率9.59%。两种检测方法的符合率为97.4%。结论 HPV导流杂交基因芯片技术和荧光PCR技术两者具有良好的符合性,两者都适用于临床检测,荧光PCR技术更适用与宫颈癌的大范围筛查。     

高危型HPV E6/E7 mRNA与HC2 HPV-DNA联合检测在宫颈病变筛查中价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)E6/E7 mRNA与HC2 HPV-DNA联合检测在宫颈病变筛查中的价值。方法行宫颈筛查患者869例,均行宫颈脱落细胞液基细胞学检查、HC2 HPV-DNA、高危型HPV E6/E7 mRNA检测和阴道镜活检组织病理检查,组织病理结果为正常、炎症、低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions, LSIL)为LSIL(-),高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions, HSIL)、鳞癌、腺癌为HSIL(+)。以组织病理结果为金标准,评估HC2 HPV-DNA、高危型HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中的价值。结果 869例患者中HPV E6/E7 mRNA阳性率为46.1%,HPV-DNA阳性率为61.3%,HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA阳性率均随细胞学和宫颈病变级别升高而增高(P0.05);HPV E6/E7 mRNA检测HSIL(+)的灵敏度(97.4%)和特异度(64.9%)均高于HPV-DNA检测(89.0%、44.6%)(P0.05);HPV E6/E7 mRNA联合HPV-DNA检测HSIL(+)的灵敏度为99.3%,特异度为56.7%;HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA检测HSIL(+)的总体符合率(87.6%)和阳性一致率(87.0%)均高于检测LSIL(-)(70.5%、30.5%)(P0.05)。结论HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA阳性表达均与宫颈病变程度相关,2种方法联合检测在宫颈病变筛查中具有较高灵敏度。     

宫颈炎患者高危型人乳头瘤病毒的检测

目的了解深圳地区宫颈炎患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况.方法以荧光PCR技术同时应用两种检测不同数量型别的试剂盒检测100例(宫颈炎组77例和正常对照组23例)宫颈分泌物标本.结果100例妇女宫颈分泌物样本中,宫颈炎组和正常对照组高危型HPV感染率分别为16.9%和4.3%.两种试剂检测结果不一致的标本用DNA测序法检测均证实存在高危型HPV感染.结论宫颈炎患者高危型HPV感染率较高,正常人也有感染.荧光PCR技术检测高危型HPV与DNA测序法结果一致.     

人乳头瘤529例病毒基因分型检测及临床分析

目的探讨我院就诊患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别分布比率和年龄特征以及HPV-DNA精细分型的临床应用价值。方法采用中山大学达安基因股份有限公司生产的基于HPV多型别通用引物的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(简称"组合分型试剂"),对529例21～77岁有性生活史的门诊患者进行HPV-DNA10种亚型组合分型筛查。采用上海之江生物科技技术有限公司生产的"高危型人乳头病毒分型核酸测定试剂盒"(简称"精细分型试剂"),随机抽取51例组合分型试剂筛检阳性患者进行HPV-DNA13种亚型精细分型,以期探讨我院HPV-DNA亚型分布情况。结果组合分型试剂检测的HPV-DNA总感染率:18.34%(97/529)。3种组合型别均有检出:6/11型(1.51%,8/529),HR(16/18/31/33/45/52/56/58)型(17.39%,92/529),16/18型(5.67%,30/529)。529例HPV感染高峰年龄在21～40岁(占24.58%),40～60岁HPV感染者占15.67%,年龄大于60岁感染率占0.10%,各年龄组之间HPV感染率频数分布有统计学差异(P=0.021<0.05),且随着年龄的增高HPV的感染率呈下降趋势。精细分型试剂结果:试剂所囊括的13种HPV亚型均有检出,其中检出率最高的型别是52型(33.33%,17/51),其次为58型(25.50%,13/51);多重感染中以二重感染(27.45%,14/51)较为多见,最多检出五重感染(1.96%,1/51)。两种方法检测HPV型别比对一致性Kappa检验:Z=7.0474,P<0.05,95%置信区间(0.6471,0.9266),表明两种检测方法在HPV-DNA分型检测方面具有很较高的一致性。McNemarχ2差异性检验:P=0.4795>0.05,说明两种检测方法在HPV-DNA分型检测方面的差别没有统计学意义。结论我院HPV-DNA分型检出率为18.34%,感染高峰集中于21～40岁。其中HPV52型检出率最高,多重感染以二重感染为主,最多检出五重感染,精细法与组合法在HPV高危型初筛中具有较高的一致性。     

液相芯片技术检测宫颈HPV感染及基因型分布

目的探讨液相芯片(Luminex)技术检测宫颈人乳头瘤病毒(HPV)基因型的应用价值。方法用液相芯片技术对1 450例妇女进行宫颈脱落细胞HPV DNA基因分型检测,并对HPV感染率、亚型分布进行统计分析。结果 1 450例妇女中共检出404例HPV DNA阳性,总检出率为27.9%;共检出25种亚型(HPV 73型未检出),其中高危亚型感染占83.4%(337/404),低危亚型感染占10.6%(43/404),高危亚型、低危亚型混合感染占5.9%(24/404);HPV 16、58、52型是最常见的高危亚型,感染率分别为5.7%(83/1 450)、4.7%(68/1 450)、4.6%(66/1 450),HPV 61和6型是最常见的低危亚型,感染率分别为1.6%(23/1 450)和1.2%(17/1 450);≤24岁组妇女宫颈HPV感染率(46.0%)及HPV多重亚型感染率(47.8%)均为最高,各年龄组间HPV感染率差异显著(P均<0.01)。结论液相芯片技术可用于检测宫颈HPV感染及基因型分布。     

人乳头瘤病毒分型检测在宫颈疾病筛查中的应用

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)型别检测在宫颈疾病筛查中的意义。方法 选取该院687例妇科就诊患者,对其进行HPV-DNA基因分型检测荧光实时定量PCR(FQ-PCR)检测;选取同期于该院进行妇科体检的389例健康体检妇女,对其进行HPV-DNA定量检测(FQ-PCR),检测结果大于5.0×102 IU/mL者再进行HPV-DNA基因分型检测。结果 687例患者中,HPV阳性者共164例,占23.9%;其中,单一感染者占74.3%,复合型别感染者占25.6%;复合型别感染中可见二重至四重感染,其中以二重感染最为多见。常见的型别为HPV16、52、58、35高危型。389例健康体检妇女中HPV阳性者共29例,占7.5%;其中单一感染占79.3%,复合型别感染者占20.7%,复合型别感染中可见二至三重感染,其中以二重感染最为多见。常见的型别为HPV、52、58、16、18高危型。结论 HPV感染是引起宫颈癌的主要原因,进行HPV检测和分型有助于宫颈癌的筛查和预防。     

流式荧光杂交法检测26种HPV亚型在不同程度宫颈病变中的分布规律

目的分析不同程度宫颈病变患者中人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型的分布规律,探讨HPV分型检测对宫颈癌防治的价值。方法对403例阴道镜活检病理诊断为不同宫颈病变的患者,用流式荧光杂交技术进行HPV分型检测。结果 403例标本中共检出20种亚型,高危亚型检出率为94.9%(451/475),低危亚型检出率为5.1%(24/475)。检出频率前6位亚型为:HPV 52、16、58、33、18和39型。HPV 16型在宫颈癌中检出率高达94.7%,且随宫颈病变级别加重感染率呈上升趋势(P<0.01)。HPV 52型总检出率最高,但检出率随宫颈病变严重程度的升高而降低(P<0.01)。结论广州地区宫颈病变常见的HPV感染亚型是HPV 52、16、58、33、18和39型。HPV分型与宫颈病变程度密切相关。     

多重PCR法和HPV分型基因芯片法在高危型人乳头瘤病毒感染检测中的应用

目的评价高危型人乳头瘤病毒（HPV）多重核酸扩增荧光检测法和HPV分型基因芯片检测法在HPV感染女性患者标本基因分型的临床应用效果。方法应用13种高危型HPV多重PCR荧光检测法对在深圳市人民医院进行宫颈癌筛查的653例疑似HPV感染女患者的宫颈细胞样本进行检测,并与HPV分型基因芯片检测法的检测结果进行比较,2种方法检测13种高危型HPV不一致的样本经序列分析方法进一步验证。结果13种高危型HPV多重PCR荧光检测法检测HPV阳性样本,阳性检出率为21．5％（140／653）;用HPV分型基因芯片检测法验证,与13种高危型HPV多重PCR荧光检测法一致的阳性样本占20．4％（133／653）,总一致率为98．2％。2种方法的检测结果具有高度一致性（kappa值一o．945）;用HPV分型基因芯片检测法检出：HPV单一型别感染占59．4％（79／133）,主要的高危HPV型别为HPV16、52、39、68、33和59型,6种高危型占总数的87．3％（69／79）,其中HPV16和HPV52为主要感染,占44．9％。结论高危型HPV多重PCR荧光检测法和HPV分型基因芯片检测法在13种高危型HPV的检结果具有高度一致性;多重PCR荧光检测法覆盖主要的13种高危型HPV,分型基因芯片检测法可进行具体的单一型别分型。2种检测方法的联合应用,对宫颈癌筛查和预防具有较高的临床应用价值,同时可为HPV分子流行病学和HPV疫苗的应用研究提供依据。     

贵州地区8102例就诊妇女21种HPV亚型检测结果分析

目的：分析贵州地区8102例就诊妇女人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况、亚型分布特点。方法采用填写调查表方式,对受检妇女的一般情况、宫颈病变病理分级及HPV感染的高危因素进行调查;采用凯普核酸分子导流杂交基因芯片技术进行21种HPVDNA亚型分析。结果8102例就诊妇女21种HPV型别全部检出,阳性率为34．47％,高危型HPV阳性率29．60％,低危型为5．20％,高危型检出率的前3位是HPV16、52和58亚型,低危型以HPV11和6亚型为主。3040例宫颈炎患者中检出944例HPV阳性,阳性率为31．05％,高危型HPV阳性率26．64％,低危型HPV阳性率3．68％,高危型中检出率前6位的是HPV16、52、58、33、18和31亚型,低危型以11和6亚型为主;433例宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ～Ⅲ患者共检出240例HPV高危型阳性,阳性率为55．43％,检出率前6位是16、58、52、33、18和51亚型;249例宫颈癌患者共检出196例HPV高危型阳性,阳性率78．71％,检出率前6位是16、58、18、52、33和31亚型;宫颈炎、CINⅠ～Ⅲ和宫颈癌组均以单一型感染为主。受检者不同初次性生活年龄、伴侣个数、妊娠次数、生育次数的HPV感染率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论贵州地区就诊妇女HPV感染率较高,16、52、58和18亚型为较常见高危亚型,6和11亚型为较常见低危亚型。     

新疆地区妇女宫颈病变组织中HPV感染与分型研究

目的探讨人乳头瘤状病毒（human papillomavirus,HPV）型别在宫颈病变中分布情况。方法采用基因芯片技术对239例宫颈癌前病变或宫颈鳞癌患者的石蜡组织标本进行23种HPV基因型别检测。结果检测出20种基因型,HPV总感染率为90．0％（215／239）;单一感染中高危型HPV16感染率为84．2％（117／139）,低危型中HPV11感染检出1例;多重感染率为35．3％（76／215）,64例为HPV16与其他高危病毒的复合感染,5例为HPV16与低危病毒（6,11,43）的复合感染,7例为低危病毒与低危病毒的复合感染。结论高危型HPV16感染是新疆地区妇女宫颈病变中常见亚型,多重感染可能与宫颈病变进展无关。     

武汉市人乳头瘤病毒感染基因型调查分析

目的调查武汉市及周边区域就诊患者人乳头瘤病毒（HPV）感染及基因型的流行病学情况。方法采用基因芯片检测方法检测2718例宫颈分泌物人乳头瘤病毒并进行基因分型。结果经过对日常医院门诊妇科就诊患者人乳头瘤病毒的检测,发现人乳头瘤病毒感染在送检2718例标本中,有1272例分别为HPVDNA不同亚型阳性,所占比例达46.8％（1272／2718）。其中低危型占400例,高危型占872例。结论一些常见的低危和高危基因型分布情况与其它省份报道基本相似,本次调查中未检测出44型感染的阳性病例,在其他地区感染比较少的56、59、66、68几个亚型,在武汉感染率较高,对区域性人乳头瘤病毒进行基因分型流行病学调查,对临床在进行预防和治疗HPV病毒感染将起到重要指导作用。     

外阴、阴道和宫颈尖锐湿疣组织中HPV感染的对比研究

目的研讨外阴、阴道和宫颈尖锐湿疣(CA)组织中人乳头瘤病毒(HPV)感染型别的分布状况以及临床意义。方法应用基因芯片结合PCR技术对63例外阴尖锐湿疣、61例阴道尖锐湿疣和65例宫颈尖锐湿疣组织行23种HPV基因型检测,并分析患者的临床病理资料。结果 63例外阴尖锐湿疣组织中检出HPV阳性者56例,HPV感染率为88.89%(56/63);61例阴道尖锐湿疣组织中检出HPV阳性者55例,HPV感染率为90.16%(55/61);65例宫颈尖锐湿疣组织中检出HPV阳性者62例,HPV感染率为95.39%(62/65)。结论 HPV感染与外阴、阴道和宫颈尖锐湿疣的发病密切相关,HPV6和11是主流型别,以外阴尖锐湿疣最为常见。基因芯片结合PCR技术是适合应用于临床行HPV分型诊断的一种方法,具有敏感性好、特异性高的特点。对女性外阴、阴道和宫颈尖锐湿疣的临床诊断、治疗及其疫苗的研究具有重要的意义。     

1268例慢性宫颈炎患者人乳头瘤病毒感染与基因型分布

目的调查慢性宫颈炎患者人乳头瘤病毒(HPV)感染及其基因型的流行分布状况。方法采用基因芯片技术对1268例慢性宫颈炎患者宫颈分泌物进行18种高危型HPV基因型和5种低危型HPV基因型的检测,分析其流行分布特点。结果 HPV阳性430例,占33.91%,高危型HPV感染占HPV阳性的82.93%,以HPV16为主,其次为HPV58、HPV18、HPV56。低危型感染占17.07%,以HPV11最高,其次为HPV6;单一感染占74.65%,重复感染占25.35%;高危型复合感染占66.06%,低危型+高危型复合感染占31.19%,单纯低危型的复合感染占2.75%。慢性宫颈炎患者HPV感染率以50岁组最高。结论慢性宫颈炎患者HPV的感染率较高,以高危型HPV基因型为主,临床应重视HPV感染的筛查、监测与治疗,防治宫颈癌。     

第二代杂交捕获法与多重荧光PCR在检测高危型人乳头瘤病毒中的应用比较

目的探讨第2代杂交捕获法（HC2）和多重荧光聚合酶链反应（PCR）在女性生殖道高危型人乳头瘤病毒（HPV）中的检测性能。方法随机选择267例宫颈疾病患者，采集宫颈部位分泌物，运用美国食品药品监督管理局（FDA）认证的HC2和多重荧光PCR分别检测标本中的HPV，并将2种方法检测结果不一致的标本进行测序分析。结果HC2和多重荧光PCR检测高危型HPV的阳性率分别为33．33％和31．46％；HC2和多重荧光PCR对高危型HPV感染的诊断敏感性分别为85．88％和90．32％，特异性分别为91．21％和99．43％。结论与HC2相比，多重荧光PCR检测高危型HPV的敏感性和特异性均有提高。     

Analytical comparison of the cobas HPV Test with Hybrid Capture 2 for the detection of high-risk HPV genotypes

Human papillomavirus (HPV) is a causal agent of cervical cancer, and persistent HPV16 or HPV18 infection carries a particularly high risk. The cobas HPV Test (cobas) provides individual HPV16/HPV18 genotyping with a simultaneous result for 12 other high-risk HPV (hrHPV) genotypes. Its analytical performance for hrHPV genotype detection was retrospectively evaluated against the digene Hybrid Capture 2 HPV DNA test (HC2), in three European centers, in 1360 cervical samples. Both HPV tests performed similarly, with no significant difference in the number of positive and negative samples identified by each test and good agreement between the tests was observed. Discordant samples were analyzed with the Linear Array HPV genotyping test. More low-risk HPV (lrHPV) genotypes were detected in HC2-positive/cobas-negative samples compared with HC2-negative/cobas-positive samples. Conversely, more hrHPV genotypes were detected in HC2-negative/cobas-positive samples compared with HC2-positive/cobas-negative samples. Eight HC2-negative/cobas-positive samples were positive for HPV16 compared with five HC2-positive/cobas-negative samples; HPV18 was detected in one HC2-negative/cobas-positive sample and one HC2-positive/cobas-negative sample. The cobas HPV Test demonstrates comparable analytical performance to the HC2 test, but with a lower rate of cross-reactivity with lrHPV genotypes, and has the advantage of simultaneously providing HPV16/HPV18 identification.     

血红蛋白和宫颈黏液对人乳头状瘤病毒分型的影响

目的探讨血红蛋白和宫颈黏液对导流杂交基因芯片（HybriMax）技术检测人乳头状瘤病毒（HPV）分型结果的影响。方法应用碱裂解法分别提取不同类型的宫颈脱落细胞样本的HPvDNA,经扩增后采用HYbriMax技术对HPVDNA进行分型检测。结果（1）非溶血样本经不同浓度（0．75～24．0g／L）血红蛋白处理后,HPV分型结果不受影响,符合率为100％。（2）无宫颈黏液标本和宫颈黏液标本HPVDNA的阳性率分别为25．11％和20．92％,差异有统计学意义（χ2=5．364,P〈0．05）。（3）宫颈黏液标本和无宫颈黏液标本的复查率分别为6．91％和2．49％,差异有统计学意义（χ2=24．049,P〈0．01）。结论溶血的宫颈脱落细胞标本,可采用碱裂解法提取HPVDNA进行HybriMax技术分型检测。标本中的宫颈黏液可影响本法对HPVDNA分型的检测。