酶学项目自建检测系统检测结果的可比性研究

目的通过对自建检测系统校准方法的研究,用患者样本比对实验分析,为自建检测系统酶学项目的溯源性与可比性提供实验依据。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件,以日立7180生化分析仪、罗氏原装试剂和罗氏多项生化校准品(C.f.a.s)组成的检测系统为目标系统,分别用厂家自带校准品、C.f.a.s、日本酶参考物质和IFCC一级参考测量方法赋值血清4种校准方案对FX、KH和FH 3种自建系统进行校准,用40份患者新鲜血清对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)和乳酸脱氢酶(LDH)进行比对实验,分别计算目标系统(X)与自建系统(Y)之间的相关系数(r)、回归方程、医学决定水平处的相对偏倚、4种不同校准方案对自建系统校准后同一项目结果的变异系数(CV)的均值,并与原装配套检测系统(罗氏和贝克曼)常规实验室定值样本CV均值进行比对。结果5项酶的3种自建系统的偏倚均有趋势性变化,酶参考物质与参考方法赋值血清校准后的结果优于厂家自带校准品和C.f.a.s校准方案。酶参考物质与参考方法赋值的血清校准后同一项目结果的CV均值达到甚至优于原装配套检测系统定值室间样本的CV均值,厂家自带校准方案和C.f.a.s校准方案的ALT、AST、ALP项目检测结果可比性较差。结论用酶参考物质和参考方法赋值血清校准5项酶的3个自建检测系统,其患者样本的检测结果具有可比性和正确性。     

血清酶测定标准化的实验研究

目的　通过酶校 (标 )准品在临床实验室中的应用 ,探讨血清酶测定标准化的新途径。方法　向参加实验室 (15 0家 )发放酶校准品 1支和血清样本 3支 ,各实验室用现行方法分别测定校准品和血清样本 ,记录检验结果 ;用校准品定标后再测定血清样本 1次 ,记录检验结果 ;计算校准品测定结果总体均值与标示值间的偏倚和校准前后血清样本测定结果精密度的变化。结果　丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、淀粉酶 (AMY)和乳酸脱氢酶 (LD)的测定结果均值与标准品标示值的相对偏倚≤± 6 % ,分别为 3 8% ,- 1 8% ,2 3%和 - 5 2 % ;碱性磷酸酶 (ALP)、γ 谷氨酰基转移酶 (GGT)和肌酶激酶 (CK)的实验室检测结果与标准品标示值间的相对偏倚小于 2 0 % ;分别为13 7% ,- 13 9%和 - 19 2 %。在应用校准品后 ,多数项目测定结果的变异系数 (CV % )得到不同程度的改善 ,ALT由 10 %～ 4 4 %下降至 8%～ 4 2 % ,LD由 16 %～ 39%下降至 8%～ 11%。结论　我国临床实验室对血清ALT、AST、AMY和LD的测定结果有较好的向国际标准溯源性 ;使用酶校准品可改善不同分析系统间测定结果的一致性。     

肌酸激酶和乳酸脱氢酶测定结果正确性比对分析

目的：不同医院间检验结果的互认,避免重复检验,是降低就医成本的一项重要举措。实验采用 CK和 LDH 有证标准物质作为校准,对各个参加实验室校准前后结果的正确性进行比对分析,从而为医院间结果互认奠定技术基础。方法在上海市闵行区内选取7家一级医院,发放1支酶标准品,2个血清样品,各实验室采用现行的方法测定标准品和血清样品,记录检验结果;再采用另一水平酶标准品校准仪器后,同样测定上述酶标准品和血清样本,记录检验结果,计算校准前后酶标准品均值与标示值之间的偏倚和校准前后血清样品测定结果精密度的变化。结果酶标准品校准前准确性（CK 偏倚0．5％,LDH 偏倚-6．2％）和变异系数（CK 变异系数5．2％,LDH变异系数6．1％）;校准后准确性（CK 偏倚0．1％,LDH 偏倚-1．0％）和变异系数（CK 变异系数2．2％,LDH 变异系数3．5％）;血清样品的变异系数 CK 下降到2％,LDH 下降到3％。结论无论封闭还是开放系统,选择正确的方法和质量好的试剂,并采用 CK 和 LDH 用有证标准物质为检测项目的校准,可以缩小各实验室室间结果变异系数,提高结果正确性。     

天门冬氨酸氨基转移酶“改良参考方法”的建立及其用于测定结果的可比性研究

目的应用不含磷酸吡哆醛的参考方法评价不同实验室间天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定结果的可比性。方法参照国际检验医学溯源联合会（JCTLM）推荐的参考方法及日本临床化学会相关文件,建立不含磷酸吡哆醛的AST参考方法。根据美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件对该方法的精密度、正确度、线性范围等性能进行评价。应用该参考方法对新鲜血清进行赋值作为校准品校准广州地区10家实验室的常规检测系统,比较校准前、后新鲜血清、能力验证样本以及市售制备物质测定结果间的偏倚,进行检验结果的可比性评价。结果改良参考方法的批内不精密度〈1%,总不精密度〈2%;检测日本临床化学会酶参考品结果均在其不确定度允许范围内,参加参考实验室网络赋值计划测定结果与均值比较在等效限内。改良AST参考方法分析测量范围上限为413.6 U/L。校准前新鲜血清测定结果与参考方法测定结果之间偏倚〉20%的所有11个测定结果中,有10个测定结果来源于用理论K值计算酶活性的检测系统;校准前新鲜血清组最大偏倚为-25.0%,平均偏倚为9.3%;使用改良参考方法定值的酶校准品校准后,最大偏倚降为12.3%,平均偏倚降为2.1%。而能力验证样本和市售制备物中AST测定结果的平均偏倚在校准前后则变化不大,市售制备物组平均偏倚反而略有升高。结论应用参考方法定值的新鲜血清作为校准品进行校准是实现不同检测系统检验结果一致性和可比性的有效途径,非新鲜血清样本存在不同程度的基质效应。     

血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价结果的影响

目的观察血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价结果的影响。方法按血清总胆红素厂家校准品3种示值来源(a.厂家校准品证书示值,b.Doumas参考方法赋值,c.有证标准物质传值)分别给某厂家校准品定值,并校准该厂家常规测量系统,分别命名为A、B、C常规测量系统。采用Doumas参考方法和A、B、C常规测量系统同时测量该校准品和26份不同浓度单人份血清样本;按国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)工作组互换性更新方案评价该校准品的互换性。结果a方式下校准品不具备互换性,b和c方式下校准品互换性评价结果基本一致且均具备互换性。结论血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价存在一定的影响,具备溯源性的厂家校准品可获得相对一致的互换性评价结果。     

临床检验正确度控制品-评估偏倚

精密度控制监测分析随机误差; 准确度控制评估总误差,包括随机误差和系统误差; 而正确度(偏倚)评估的是系统误差。正确度控制品应具有计量学溯源性,最好通过使用参考物质或参考方法来确定靶值,如果没有溯源至参考测量系统,来自不同实验室的同一患者检测结果的可比性可能是不理想的。正确度控制品还应具有互换性,即控制品与患者标本一样,在不同测量程序上的结果具有一致性,可以显示相同的数值关系。同时正确度控制品定值更适合设置在医学决定水平(MDLs)或其他有临床意义的浓度上,由参考物质的提供者制备并以与校准品相同的方式进行生产。     

血清γ-谷氨酰基转移酶参考方法在国产试剂量值溯源中的应用

目的 应用血清γ-谷氨酰基转移酶(GGT)参考方法评价国产GGT试剂的溯源性.方法 按照国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)有关GGT活性测定的要求建立参考方法;根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)系列文件对建立的参考方法的主要性能进行评价;应用建立的参考方法评价国内不同厂家的GGT试剂在罗氏Cobas 6000和日立7170A全自动生化分析仪上测定结果的溯源性,并用经参考方法定值的新鲜人血清作为校准品实现不同检测系统检验结果的一致性和可比性.结果 GGT参考方法的批内不精密度和总不精密度均<1%,与国际参考实验室外部质量评价计划样品靶值的相对偏倚在等效限内;校准前常规检测系统与参考方法GGT检测结果在医学决定水平处的最大偏倚分别达到-47.53%、-34.11%、-30.07%,平均偏倚分别为14.53%、12.88%、12.48%;使用新鲜血清作为校准品校准后,最大偏倚分别降至-17.63%、-5.88%、-4.08%,平均偏倚降至7.50%、2.70%、1.87%.结论 GGT参考方法性能符合要求.应用参考方法赋值的新鲜人血清作为校准品进行校准是实现国内不同厂家酶学试剂检验结果一致性和可比性的有效途径.     

总蛋白改良参考方法的建立及其用于临床检测结果的溯源性研究

目的建立测量总蛋白(TP)参考方法,评价不同实验室TP测定结果的溯源性。方法参照美国疾病控制与预防中心推荐的参考方法及相关文件,建立37℃温浴10min的总蛋白参考方法。根据美国临床实验室标准化协会系列文件对方法的精密度、正确度、线性范围等性能进行评价。应用该参考方法对新鲜血清进行赋值作为校准品校准广州21家实验室,比较校准前、后赋值血清校准品、血清样本测定结果间的偏移,进行检验结果的可比性评价。结果改良参考方法的精密度评价样本浓度为55.48、88.68g/L的CV分别为0.56%、1.23%,标准参考物质909C与靶值的偏移为1.76%,分析测量范围上限128.69g/L。与参考方法测量结果比较,赋值血清校准品校准前平均偏移为6.38%,校准后降为1.86%,样本血清1、2校准前偏移分别为6.04%和8.71%,校准后降为-1.61%、-0.13%。结论改良的双缩脲法测量TP方法性能好,应用参考方法对新鲜血清进行赋值能够实现不同检测系统结果的溯源性。     

不同校准品复溶方式影响碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶检测结果

目的:评价校准品复溶方式不同对碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)检测结果的影响。方法:用各厂家,即贝克曼、罗氏、德赛和和光的推荐方式复溶校准品后作为标准校准品,测定不同方式复溶的校准品;挑选与标准校准品相比,检测结果偏倚较大的2种校准品作为待评校准品。用标准校准品校准方法后作为比对方法,待评校准品校准方法后作为待评方法,分别对临床血清进行检测,参考CLSI EP9-A3评价偏倚。结果:德赛、罗氏和和光的校准品ALP和LDH值在4℃和25℃下3 h内不随时间变化。对于贝克曼,有2种方式复溶的校准品与标准校准品相比,偏倚分别为-4%和5%。2种待评方法偏倚中位数分别为-3.92%、5.06%。结论:不同复溶方式对部分厂家校准品ALP的值有较大影响,实验室用户应严格按照正确的标准操作规程进行操作。     

参考方法在丙氨酸氨基转移酶测定标准化中的应用

目的 调查不同检测系统使用经参考方法赋值的冰冻人血清样本作为校准品进行校准后,不同来源样本丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定结果的可比性与准确性的改变程度.方法 5份经4家候选参考实验室应用不含磷酸吡哆醛的ALT参考方法定值的冰冻人混合血清样本用于评价广州地区10个不同检测系统ALT催化活性结果的可比性与准确性.其中一个样本用作校准品校准各系统.比较校准前后各系统间新鲜血清样本与商品制备物测定结果的变异与偏倚.结果 校准后,各检测系统间新鲜血清测定结果的变异由11.90%～8.60%下降到6.78%～2.30%,偏倚则从-12.52%～-8.44%下降到-3.36%～-0.08%.校准后,常规系统测定新鲜血清结果与参考方法的回归曲线的斜率和截距比校准前更接近1和0;而商品制备物测定结果校准后的斜率和截距则无明显改善.结论 采用定值冰冻人血清样本作为校准品可以改善不同检测系统测定结果的准确性和可比性,但由于基质效应的存在不能改善商品制备物测定结果的可比性.     

不同品牌校准品对血清碱性磷酸酶检测结果可比性的影响

目的 探讨不同品牌校准品和基质对碱性磷酸酶（ALP）检测结果可比性的影响,为进一步开展血清ALP检测标准化和检测结果互认提供参考。方法 选用临床实验室常用的2种校准品（AU校准品、C.f.a.s.校准品）和ALP国家二级标准物质（简称标准物质）分别于AU5800全自动生化分析仪（简称AU5800）和cobas c501全自动生化分析仪（简称c501）上对ALP项目进行校准。检测收集的25例新鲜临床血清样本和上海市临床检验中心常规化学室间质量评价5个浓度水平样本,各测定2次。以标准物质校准后的检测值为参比系统,计算2种校准品与标准物质校准后的检测值的相对偏移和相关性。以c501检测值为参比系统,计算采用同一校准品校准后,2台仪器检测值的相对偏移和相关性。结果 以标准物质校准后的检测值为参比系统,两两系统的偏移绝对值均<10%,c501呈负偏移,AU5800呈正偏移,室间质量评价样本与临床样本的偏移均无明显差异。以c501检测值为参比系统,使用标准物质校准后,系统间临床血清样本测定值差异缩小;使用非系统配套校准品校准后,系统间差异增大。室间质量评价样本与临床血清样本呈现了相反的结果。...     

Commutability and traceability: their repercussions on analytical bias and inaccuracy

The commutability of calibrators and accuracy control materials affects the traceable link between patient sample results and standards. We sought to identify the repercussions of commutability on various aspects of laboratory practice (calibration, control of bias and accuracy assessment) and to discover the solutions that can reduce the problems produced by non-commutability with presently available resources. Ten serum constituents, ten comparison procedures and 37 analytical procedures were studied. The information concerning accuracy and bias provided from materials found to be commutable in previous works was challenged with native serum results for each routine and reference method compared, using Passing–Bablok regression and decision limits derived from biological variation. We found that: (1) Use of commutable control materials did not assure reliable information on the bias (systematic component of analytical error) of analytical procedures, and (2) Results from native serum and commutable controls were very highly concordant, indicating that these materials provide a good indication of the inaccuracy (total analytical error) of results. We suggest that the performance of individual laboratories would be better evaluated by occasional use of native sera with values assigned by reference methods in EQAS schemes. Moreover, our findings support the idea that manufacturers should assign values to calibrators using reference methods and native sera to reduce matrix effects and promote traceability.     

A reference method laboratory network for cholesterol: a model for standardization and improvement of clinical laboratory measurements

BACKGROUND: Accurate and precise measurement of blood cholesterol plays a central role in the National Cholesterol Education Program's strategy to reduce the morbidity and mortality attributable to coronary heart disease. Matrix effects hamper the ability of manufacturers to adequately calibrate and validate traceability to the National Reference System for Cholesterol (NRS/CHOL). CDC created the Cholesterol Reference Method Laboratory Network (CRMLN) to improve cholesterol measurement by assisting manufacturers of in vitro diagnostic products with validation of the traceability of their assays to the NRS/CHOL. METHODS: CRMLN laboratories established the CDC cholesterol reference method (modification of the Abell-Levy-Brodie-Kendall chemical method) and are standardized using CDC frozen serum reference materials. CRMLN laboratories use common quality-control materials and participate in monthly external performance evaluations conducted by CDC. The CRMLN performance criteria require member laboratories to agree with CDC within +/-1.0% and maintain a CV < or =2.0%. RESULTS: From 1995 to 200 the CRMLN laboratories met the accuracy criterion 97% of the time and the precision criterion 99% of the time. During this time period, the CRMLN maintained an average bias to CDC of 0.01% and an average collective CV of 0.33%. CONCLUSIONS: CDC established the CRMLN as the first international reference method laboratory network. The CRMLN assists manufacturers in the validation of the calibration of their diagnostic products so that clinical laboratories can measure blood cholesterol more reliably. The CRMLN can serve as a model for other clinical analytes where traceability to a hierarchy of methods is needed and matrix effects of the field methods with processed calibrators or reference materials are present.     

Specimen materials,target values and commutability for external quality assessment (proficiency testing) schemes

BACKGROUND: The objective of external quality assessment is to evaluate clinical acceptability of laboratory results. It is desirable to evaluate intermethod harmonization and traceability to a reference system. METHODS: Conventional matrix-modified processed materials are used in most programs, because they can be produced in large quantities, can have multiple abnormal analytes in the same vial and have excellent stability. The principal limitation of these materials is non-commutability which makes them unsuitable for traceability or harmonization evaluation. Peer group evaluation is used which allows an individual laboratory to confirm appropriate use of a measurement technology and a manufacturer to monitor uniformity in their calibration transfer process. Authentic clinical specimen pools provide commutability but are limited by the quantity available and number of analytes at pathologic levels in the same vial. Hybrid approaches have used authentic clinical specimen pools in conjunction with non-commutable processed materials to determine method-specific matrix-corrected target values which have enabled evaluation of traceability to reference methods. CONCLUSIONS: Conventional processed materials are limited by non-commutability. Pooled clinical specimens are limited by availability. When used together, external quality assessment can evaluate traceability to reference systems and harmonization between test procedures.     

血清酶测定结果可溯源性研究

目的　通过对酶标准品的测定 ,探讨血清酶测定结果的可溯源性。方法　向参加研究的实验室 (50家 )各发放酶校准品 1支 ,各实验室用常规方法测定校准品 ,记录检验结果 ;计算校准品测定结果总体均值与标示值间的偏倚。结果　丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶 (CK)和乳酸脱氢酶 (LD)的测定结果均值与标准品标示值的相对偏差≤± 10 % ,分别为 6 3 % ,5 5% ,-5 9%和 -5 0 % ;碱性磷酸酶 (ALP)的实验室检测结果与标准品标示值间的相对偏倚为 -3 6 6% ,淀粉酶测定结果的实验室间CV为 2 9 2 %。结论　我国临床实验室对血清酶的测定结果有向国际标准溯源的基础     

血清尿酸紫外分光光度参考方法的建立及性能评价

目的以尿酸酶紫外光度法为基础,建立血清中尿酸测定的参考方法并评价其性能.方法 用新鲜患者血清样本、迈瑞常规复合校准品等对方法的精密度进行评估;用有证参考物质SRM909bⅠ和Ⅱ、IFCC参考实验室质评样本Rela A/B对方法的准确度进行初步评价,同时测定新鲜人血清并与同位素稀释质谱法进行方法学对比,验证方法准确度.结果 方法对新鲜患者血清、厂家复合校准品等不同类型样本批内不精密度CVintra小于1%,总不精密度CVt小于2%;有证参考物质SRM909bⅠ/Ⅱ测定结果均在参考值范围内,对UA参考实验室能力验证样本Rela A/B测定结果与中心值结果相对偏差小于0.5%;血清样本测定结果与同位素稀释液相质谱法可比,线性回归斜率1.005,相关系数0.999,医学决定水平处引入的相对误差小于3.25%.结论 血清尿酸紫外分光光度法已基本建立,精密度和准确度符合要求,测量结果和同位素稀释液相色谱/质谱法可比,可为常规系统尿酸溯源体系的建立和性能评估提供便捷有效的方法.     

Standardization of clinical enzyme analysis using frozen human serum pools with values assigned by the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine reference measurement procedures

Variation in clinical enzyme analysis, particularly across different measuring systems and laboratories, represents a critical but long-lasting problem in diagnosis. Calibrators with traceability and commutability are imminently needed to harmonize analysis in laboratory medicine. Fresh frozen human serum pools were assigned values for alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyltransferase (GGT), creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) by six laboratories with established International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine reference measurement procedures. These serum pools were then used across 76 laboratories as a calibrator in the analysis of five enzymes. Bias and imprecision in the measurement of the five enzymes tested were significantly reduced by using the value-assigned serum in analytical systems with open and single-point calibration. The median (interquartile range) of the relative biases of ALT, AST, GGT, CK and LDH were 2.0% (0.6–3.4%), 0.8% (?0.8–2.3%), 1.0% (?0.5–2.0%), 0.2% (?0.3–1.0%) and 0.2% (?0.9–1.1%), respectively. Before calibration, the interlaboratory coefficients of variation (CVs) in the analysis of patient serum samples were 8.0–8.2%, 7.3–8.5%, 8.1–8.7%, 5.1–5.9% and 5.8–6.4% for ALT, AST, GGT, CK and LDH, respectively; after calibration, the CVs decreased to 2.7–3.3%, 3.0–3.6%, 1.6–2.1%, 1.8–1.9% and 3.3–3.5%, respectively. The results suggest that the use of fresh frozen serum pools significantly improved the comparability of test results in analytical systems with open and single-point calibration.     

AST不同方法间血清与人红细胞提纯酶结果互换性

目的 研究门冬氨酸氨基转移酶（AST）不同测定方法间人血清标本与纯化人红细胞c-AST结果的互换性。方法 采用八种常用的AST测定方法（试剂盒）测定99份血清标本及提纯AST，以IFCC推荐的方法（不含磷酸吡哆醛）为基准，其它七种方法测定的血清AST值与之进行相关分析，并对血清AST及纯化人红细胞c-AST的反应性进行比较。结果 八种方法间血清AST测定值的相关性较好，相关系数（r)接近1．0，截距接近0。提纯的c-AST在以上各方法间均与人血清AST反应性相近，具互换性；且提纯的c-AST测定值受辅基磷酸吡哆醛的影响较小。结论 提纯的 c-AST在各方法间与血清AST反应相似，可以作为AST参考品的酶制剂应用于临床生化检验。