校准和溯源在提高临床生化检验质量中的应用

目的探讨校准和溯源在提高临床生化检验质量中的作用。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2文件，以Beckman Coulter Synchron Lx20检测系统为目标系统，以患者血清对不同自建检测系统进行几项常规生化检测，并与目标系统进行比对，计算自建检测系统Y和目标检测系统X之间的相对偏差，以美国临床医学检验部门修正法规（CLIA’88）允许误差的1／2为标准，判断检验结果的可比性。结果自建检测系统B，C的所有项目与目标系统均具可比性，自建检测系统D，E中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）与目标检测系统不具可比性。结论自建检测系统与目标检测系统的常规生化结果依项目不同存在不同的偏差。在提高检测结果的准确性中，应重视校准品、质控，品在不同检测系统间的基体效应。校准和溯源是实现自建检测系统可比性和提高临床生化检验质量的有效途径。     

不同厂家校准品校准同一检测系统检验结果的实验研究

目的 观察不同厂家的校准品能否直接校准非配套的检测系统.方法 参考美国临床实验室标准化委员会的EP9-A2文件,以罗氏检测系统为目标检测系统(系统1),用罗氏C-fas、朗道校准品Level2和Level3分别与国内某一厂家生产的生化分析仪器、试剂和检测程序组成待评检测系统(系统2～4),然后用上述四个检测系统分别检测40份新鲜患者血清中的总胆红素(TBil)等10个项目,每个标本测定两次,结果取均值.计算待评检测系统(Y)与目标检测系统(X)之间的相对偏倚,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA'88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性.结果 系统2与系统1的TBil,DBil,ALP和CK具有可比性,其他项目不具有可比性.系统3与系统1的TBil和GGT具有可比性,其他项目不具可比性.系统4与系统1的Glu具有可比性,其他项目不具可比性.结论 不同厂家生产的校准品不能直接用于校准非配套检测系统,每一检测系统都必须具有自己的配套校准品.     

定值质控血清及血清酶校准品在室内质控中的溯源性研究

目的探讨定值质控血清及血清酶校准品在室内质量控制中的溯源性，建立与国家相关机构关联、实用且准确的方法。方法在0LYMPUSAU-400全自动生化分析仪上用酶校准品以单点定标方式定标和用定值质控血清以两定标方式定标，与理论校准参数KS值3种方法分别测定室内质控血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸激酶（cK）、乳酸脱氢酶（LD）、7一谷氨酰转移酶（y-GT）等6种酶的活性，同一批号的室内质控血清分装后在3种参考系统内测定，比较其X±S和相对偏倚（D％）。结果定值质控血清校准的碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LD）与酶校准品差异有统计学意义（P％0．05），丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、7-谷氨酰转移酶（y-GT）差异无统计学意义（P〉0．05）；理论KS值的6种酶与酶校准品差异有统计学意义（P％0．05）。结论定值质控血清校准与血清酶校准品校准结果相近，用两者进行室内质控血清酶的测定方法具有较好的溯源性，在无血清酶校准品时，可以用定值质控血清代替以校准理论KS值。     

产品校准品不确定度水平对互换性评价结果的影响

目的观察产品校准品不确定度水平对互换性评价结果的影响。方法以总胆红素为例,评价A厂家产品校准品的互换性。建立测量血清总胆红素的参考测量程序和厂家测量系统;同时测量3.9~717.4μmol/L 26份单人份血清和A厂家产品校准品;按目前我国市场上总胆红素产品校准品的不确定度水平(0.57%~10.0%),采用国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)互换性评价更新方案评价校准品不确定度水平对其互换性的影响。结果建立的总胆红素参考测量程序测量GBW09184和GBW09185的结果分别为(108.1±1.8)μmol/L和(44.8±0.8)μmol/L;测量浓度为84.3μmol/L的质控品10次,测量变异为0.55%。26份单人份血清,参考测量程序和厂家测量系统的测量结果分别为5.0~679.7μmol/L和3.9~717.4μmol/L,A厂家产品校准品的测量结果分别为80.9和77.6μmol/L。按总胆红素产品校准品的相对不确定度分别为1.0%、5.0%计算,A厂家产品校准品在2个相同测量程序间的互换性评价结果存在差异。结论产品校准品的不确定度水平影响互换性评价结果。     

乳酸脱氢酶(LDH) 37℃参考方法的建立及其临床应用

目的通过建立37℃乳酸脱氢酶（LDH）参考方法．对酶校准品定值,探讨血清LDH测定结果的准确度与一致性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立LDH酶催化活性参考方法,用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品．验证参考方法的准确性,并对其精密度进行方法学评价。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法以及理论K值常规方法和参考方法LDH结果,计算前三种常规方法与参考方法的相对偏倚及相关系数。结果用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品结果500．1U／L,在其给定的502±7U／L范围内。初步建立的37℃LDH参考方法CV〈1％。用制备的酶校准品校准的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法比较,相关均良好,分别为0.9867,0.9872和0．9878,而与配套常规方法和理论K值常规方法相比较,酶校准品校准的非配套常规方法与参考方法的相对偏倚明显阵低,在10％以下。结论LDH的参考方法基本建立,采用参考方法定值酶校准品,可以提高临床血清LDH测定结果的准确度和一致性。     

乳酸脱氢酶（LDH）37℃参考方法的建立及其临床应用

目的通过建立37℃乳酸脱氢酶（LDH）参考方法．对酶校准品定值,探讨血清LDH测定结果的准确度与一致性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立LDH酶催化活性参考方法,用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品．验证参考方法的准确性,并对其精密度进行方法学评价。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法以及理论K值常规方法和参考方法LDH结果,计算前三种常规方法与参考方法的相对偏倚及相关系数。结果用参考方法测定ERM-AD453 LDH参考品结果500．1U／L,在其给定的502±7U／L范围内。初步建立的37℃LDH参考方法CV〈1％。用制备的酶校准品校准的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法比较,相关均良好,分别为0.9867,0.9872和0．9878,而与配套常规方法和理论K值常规方法相比较,酶校准品校准的非配套常规方法与参考方法的相对偏倚明显阵低,在10％以下。结论LDH的参考方法基本建立,采用参考方法定值酶校准品,可以提高临床血清LDH测定结果的准确度和一致性。     

血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价结果的影响

目的观察血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价结果的影响。方法按血清总胆红素厂家校准品3种示值来源(a.厂家校准品证书示值,b.Doumas参考方法赋值,c.有证标准物质传值)分别给某厂家校准品定值,并校准该厂家常规测量系统,分别命名为A、B、C常规测量系统。采用Doumas参考方法和A、B、C常规测量系统同时测量该校准品和26份不同浓度单人份血清样本;按国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)工作组互换性更新方案评价该校准品的互换性。结果a方式下校准品不具备互换性,b和c方式下校准品互换性评价结果基本一致且均具备互换性。结论血清总胆红素厂家校准品不同示值来源对互换性评价存在一定的影响,具备溯源性的厂家校准品可获得相对一致的互换性评价结果。     

以控制品为校准品的尝试

目的以稳定的液体控制品为碳酸氢盐测定的应用校准品,观察对病人标本测定的可靠性。方法固定的检测系统,校准品校准确认为准,对拟采用的控制品作长期测定,确定其稳定性。原检测系统的仪器、试剂、操作程序不变的条件下,试用该控制品为校准品替代原校准品,以长期测定的均值为校准值校准检测系统,在测定病人标本时,又和以原校准品校准的检测系统作对比。结果在1个月内,2种校准方法的病人标本碳酸氢盐测定结果具极好的可比性,回归式Y=0.994X-0.137,相关系数r=0.966。结论始终以病人测定结果为准,做好校准确认,可以将重定值稳定的控制品为校准品。     

同一生化分析仪不同检测模块间的误差分析及溯源性的探讨

目的测定Hitachi7600-020全自动生化分析仪各模块间的误差,探讨用校准品校正仪器以减小误差的可行性,确保2个模块测定结果解释的一致性以及结果的可溯源性。方法用不同检测模块组成相应的系统测定质控血清6项生化指标的批内精密度并比较其差异,再分别用原装检测系统对新鲜混合血清进行定值后校准自建的不同模块间的检测系统,经校准验证有效后对日常校准品进行定值,再用新的校准值校准不同模块检测系统,经校准验证后,与原装试剂检测系统进行检测结果的比对分析,以评估偏倚是否在可接受的范围之内、误差是否明显减小以及结果是否可比。结果 Hitachi7600-020的P1、P2模块间精密度均较好,变异系数为0.51%～4.28%,但6个测定项目中,4个项目测定结果的差异有统计学意义(P<0.01),经多次校准和重新定值后,误差明显减小,两模块具有较好的一致性。结论 Hitachi7600-020的2个模块测定不同项目时,部分项目可产生明显的系统误差或比例误差,采用校准和校准验证后,可增加其量值的溯源性和可比性,达到结果的一致性。     

生化校准品在室间质控分析前的应用

目的分析生化校准品在室间质控检测前应用的重要性。方法使用全自动生化分析仪同时测定校准品、室内质控、室间质控的值,得到第1组数据,通过分析对校准品测定值出现变异指数得分(VIS)大于50的项目进行重新定标校准,然后再重复一次之前的测定,得到第2组数据,两组数据进行比较分析。结果校准前胆红素、总蛋白、尿酸和葡萄糖4个项目的校准品测定值VIS都超过50,室内质控精密度较高,而室间质控有3项VIS值超过50。校准后,校准品和室间质控的VIS值都降到了50以下。结论根据浙江省临检中心的反馈数据显示,经过校准后项目的测定值与靶值较接近,准确度较高。     

用临床生化分析仪的室间质评回报靶值结果评价干式生化分析仪回归校准后的准确度

目的：用日立7170生化分析仪的室间质评回报靶值结果来评价Vitros350干式生化分析仪回归校准后的10个项目的准确度。方法用相同质控品分别在两台仪器上测试后上报卫生部临床检验中心,将 Vitros350卫生部室间质评回报结果代入回归校准方程后所得的数据与日立7170室间质评回报靶值结果进行偏差分析,以美国临床实验室修正法案（CLIA’88）规定的总误差范围为标准,在参考区间内,偏差＜1／2CLIA’88允许总误差,作为可比性的判断标准,即符合要求,在参考区间外,偏差＜CLIA’88允许总误差,作为可行性的判断标准,也符合要求,仪器也无需校准。如不符合要求的项目,则必须以日立7170为标准仪器,重新做 Vitros350的回归校准工作。结果7个项目的偏差均＜1／2CLIA’88允许总误差的要求,偏差（％）范围分别为 LDH 0．16～－9.89,CK 2.92～6.25,ALT －4.64～－8.07,TBIL 0.08～2.67,TP－0.37～4.41,ALB 2.74～4.77,URIC 1.04～3.0,不需要重新校准。而 GLU和CREA只有1份在参考区间外的标本的偏差＞1／2 CLIA’88允许总误差,而＜CLIA’88允许总误差的要求,其余标本的偏差范围均＜1／2 CLIA’88允许总误差,偏差（％）范围分别为 GLU －0.99～5.41,CREA－2.0～9.6,按规定,也无需校准,而BUN所求的偏差（％）范围为－23.7～－29.6,＞CLIA’88允许总误差,则必须重新做回归校准工作,以保证仪器的准确度。结论用临床生化分析仪的卫生部室间质评回报靶值结果来评价 Vitros350回归校准后的准确度是可行的,是经济的、适用的。     

血清乳酸脱氢酶及其同工酶检测在卵巢癌诊治中的初步应用

目的:探讨血清乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶检测在卵巢癌诊治中的意义。方法:检测72例卵巢癌、22例子宫恶性肿瘤、33例卵巢良性肿瘤患者术前和30名健康成年女性(对照组)血清LDH及其同工酶水平,治疗后测定卵巢癌患者血清LDH的变化。结果:卵巢癌患者术前血清LDH含量为(405.9±331.5)u/L,明显高于子宫恶性肿瘤(198.2±60.1)U/L、卵巢良性肿瘤(205.0±70.5)U/L和对照组(168.6±69.3)U/L(P<0.001),晚期患者高于早期患者(P<0.05),各病理类型之间无明显差异。卵巢癌治疗有效患者血清LDH下降明显,与治疗无效或稳定患者相比差异亦有显著性(P<0.01)。血清LDH同工酶检测显示卵巢癌患者LDH1、LDH2明显低于对照组(P<0.05),LDH5水平高于对照组(P<0.001)。结论:测定卵巢癌患者血清LDH及其同工酶水平对卵巢癌的诊断、鉴别诊断以及随访具有一定的临床意义。     

An Automated Colorimetric Method for the Estimation of Lactate Dehydrogenase Activity in Serum

An automated method for estimating lactate dehydrogenase (LDH) in serum is presented. Fe³⁺ is reduced to Fe²⁺ by NADH formed when lactate is oxidized to pyruvate. Fe²⁺ complexed with 2,2-bipyridyl is measured colorimetrically. Solutions of Fe²⁺ salt are used as standards. Nicotinamide is used to stabilize NAD+ in solution and is shown to enhance enzyme activity. The method is less expensive than most automated methods published and reagents are stable for at least 4 weeks. Results correlate well with a kinetic spectro-photometric method.     

妊娠肝内胆汁淤积症患者血清心肌酶检测及其临床价值

【目的】研究妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）患者心肌酶水平及其临床价值。【方法】选取30例妊娠肝内胆汁淤积症患者及20例正常孕妇,比较血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）和γ谷氨酰转移酶（γ-GT）水平。【结果】ICP组总胆汁酸（TBA）、总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）,谷丙转氨酶,谷草转氨酶、乳酸脱氢酶和γ谷氨酰转移酶（-γGT）均高于正常对照组（P〈0.05）;ICP组间接胆红素（IB）和肌酸肌酶（CK）高于正常对照组,但差异无显著性（P〉0.05）。在ICP组患者乳酸脱氢酶和γ-GT与TBA存在正相关（r=3.54,P〈0.05）,与TB、DBI、B、谷丙转氨酶及谷草转氨酶间不存在相关（P〉0.05）;CK与TB、DBI、B、胆汁酸、谷丙转氨酶及谷草转氨酶间不存在相关（P〉0.05）。【结论】LDH和γ-GT增高可以提示诊断和预后,而CK没有诊断价值。     

建立实验室生化开放通道试剂评价的标准操作程序——以丙氨酸氨基转移酶试剂为例

目的以丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂为例,建立一套符合该实验室的生化开放通道试剂评价的标准操作程序。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A、EP6-A及EP9-A文件[1],对在开放通道的全自动生化分析仪上使用的4种丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂分别进行准确度、精密度、线性范围、干扰实验、溯源性以及与现有系统相关性的评价。结果4种试剂中,A厂家的ALT试剂准确度较高,精密度均小于5%,稳定性较高,线性较高,超过1,000U/L。但B厂家的试剂的线性较宽达约1,500U/L。4种试剂在干扰试验中无显著差异。4种试剂与现有系统相关性较好,相关系数均接近于1。结论1.4种试剂均可以满足临床实验室常规工作的要求。2.A厂家的ALT试剂性能相对更为优越。     

胸腔积液和乳酸脱氢酶对急性胰腺炎严重度评估的价值

目的 探讨胸腔积液和乳酸脱氢酶在急性胰腺炎严重度评估中的价值.方法 对2009年7月1日～2010年6月30日123例急性胰腺炎病例资料作回顾性分析.按照中国急性胰腺炎诊治指南（草案）分为轻症急性胰腺炎组（76例）和重症急性胰腺炎组（47例）,采用Logistic多因素回归及ROC曲线分析入院后24h内乳酸脱氢酶和C-反应蛋白、72h内胸腔积液与急性胰腺炎严重度的相关性.结果 胆道疾病是急性胰腺炎最常见的原因（55.28%）,胸腔积液、乳酸脱氢酶和C-反应蛋白在急性胰腺炎轻症组和重症组间差异均有显著性（P〈0.01）,三者ROC曲线下面积分别为0.748、0.875、0.873;经Z检验,胸腔积液与乳酸脱氢酶、C-反应蛋白两指标ROC曲线下面积的分别比较均有统计学意义（P=0.012,P=0.013）,乳酸脱氢酶、C-反应蛋白两指标ROC曲线下面积的比较无统计学意义（P=0.976）;胸腔积液和乳酸脱氢酶联合应用其平行试验的敏感度、特异度分别为0.973、0.548,其序列试验的灵敏度、特异度分别为0.623、0.939.结论 胸腔积液、乳酸脱氢酶对急性胰腺炎严重度评估具有一定的临床价值.     

妊高症孕妇乳酸及乳酸脱氢酶含量的变化

目的 探讨妊娠期高血压患者体内乳酸及乳酸脱氢酶含量的变化.方法 取被确诊为妊娠期高血压病的住院产妇60例作为研究组.取同期住院年龄和孕周有可比性的正常待产妇40例作为对照组,早晨空腹采血测定乳酸、乳酸脱氢酶及相关生化指标的含量.结果 重度妊高症其乳酸和乳酸脱氢酶的检测结果均明显高于对照组(P<0.05).重度妊高症组与轻度妊高症组相比较差异有统计学显著性意义(P<0.05),含量的多少与妊高症的严重程度呈相关性.结论 乳酸可作为妊高症生化监测指标,尤其是与乳酸脱氢酶的联合检测对临床治疗和预后有指导意义.