芍药甘草汤HPLC指纹图谱的建立和7种成分含量测定

目的:建立芍药甘草汤的HPLC指纹图谱,并同时测定其中7种成分的含量。方法:采用Diamonsil(2)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;变波长检测;柱温为35℃;流速为1.0 mL/min;进样量为10μL。结果:建立了芍药甘草汤HPLC指纹图谱,标定了24个共有峰,指认了没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草酸7种成分。上述7种成分在相应的浓度范围内与峰面积线性关系良好,r0.9990,平均加样回收率分别为96.41%、102.71%、99.52%、101.19%、96.77%、102.36%、95.05%。结论:建立的芍药甘草汤HPLC指纹图谱和7种成分含量测定的方法简便、准确,可为芍药甘草汤的质量评价提供依据。     

经典名方温经汤标准汤剂HPLC指纹图谱建立及9种成分含量测定

目的建立经典名方温经汤标准汤剂HPLC指纹图谱,同时对其中9种成分进行含量测定,为其质量控制提供参考。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm~3 4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,采用多波长切换法,检测波长分别为220、280、320、380 nm,柱温25℃,对15批温经汤标准汤剂进样分析,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)并结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)与偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对结果进行评价,同时进行含量测定。结果建立了温经汤标准汤剂HPLC指纹图谱,15批样品相似度在0.902～0.992,共标定出18个共有峰,指认出其中9个色谱峰(即2号峰没食子酸、5号峰芍药苷、7号峰甘草苷、8号峰阿魏酸、9号峰芹糖异甘草苷、11号峰异甘草苷、14号峰桂皮醛、15号峰甘草酸铵、16号峰丹皮酚),CA、PCA及PLS-DA将15批样品分为2类。定量分析条件方法学考察结果良好,9个成分加样回收率在94.91%～108.16%;15批样品中没食子酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、芹糖异甘草苷、异甘草苷、桂皮醛、甘草酸铵及丹皮酚的质量分数分别为10.7～31.3、95.8～228.4、18.6～62.4、3.3～8.3、4.8～18.7、2.8～10.6、13.7～108.2、83.9～292.3、31.1～125.5 mg/g。结论建立的HPLC指纹图谱结合多成分同时含量测定的分析方法简便稳定,重复性好,可为经典名方温经汤物质基准的质量评价提供依据。     

基于HPLC指纹图谱和多成分定量分析的炒甘草饮片质量评价研究

建立HPLC双波长条件下炒甘草饮片的指纹图谱及多成分含量测定方法。采用Thermo Acclaim^TM 120 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长237,360 nm;柱温30℃。15批炒甘草饮片指纹图谱相似度均大于0.849,共标定了17个共有峰,指认了甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸6个成分,其中甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸5种成分的质量分数分别为0.519%~3.058%,0.227%~0.389%,0.070%~0.439%,0.038%~0.173%,1.381%~4.252%。聚类分析将15批饮片分为3类,主成分分析筛选出4个主成分,累计方差贡献率为86.630%,说明主成分可包含原有数据的绝大部分信息,PLS-DA法标记出饮片中的6个差异性成分。建立的指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠,可为炒甘草饮片的质量控制及临床应用提供参考。     

经典名方桃红四物汤化学指纹图谱及9种成分含量测定研究

目的建立15批桃红四物汤汤剂化学指纹图谱及多指标成分含量测定方法,为桃红四物汤经典名方的质量控制及评价提供参考。方法采用Thermo Hypersil Gold C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0m L/min,柱温30℃,检测波长225nm;建立HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)进行相似度分析,结合聚类分析评价15批样品的化学信息差异。进一步通过HPLC多成分波长切换法,测定样品中9种指标成分的含量,采用SIMCA 14.1软件进行偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以寻找样品间的质量差异成分。结果建立了15个批次桃红四物汤汤剂HPLC指纹图谱,相似度均0.96,并确认35个共有锋,指认出没食子酸、绿原酸、苦杏仁苷、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、苯甲酰芍药苷、藁本内酯10个色谱峰(分别对应2、8、9、13～16、25、31、32号色谱峰)。含量测定显示,没食子酸、5-羟甲基糠醛、绿原酸、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、洋川芎内酯Ⅰ 9种成分线性关系良好(r≥0.999 6),含量测定结果分别为187.5～344.4、6.2～154.8、413.2～459.2、507.5～923.5、873.8～1 202.0、2 122.3～2 782.9、59.2～121.3、6.4～26.9、38.9～79.6μg/g,其中以芍药苷、羟基红花黄色素A、芍药内酯苷等成分含量较高;更进一步将15批不同产地的样品分为3类。通过PLS-DA分析含量测定结果,发现芍药苷、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A和5-羟甲基糠醛是影响不同批次桃红四物汤汤剂质量贡献较大的4种成分。结论 HPLC指纹图谱结合多指标成分含量测定方法适用于桃红四物汤复方制剂的质量控制与评价。     

康媛颗粒HPLC指纹图谱的建立及主要成分含量测定

目的建立康媛颗粒HPLC指纹图谱,同时检测芍药苷、阿魏酸、甘草苷、橙皮苷4个成分的含量。方法采用YMC-Pack-ODS-A C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸水-乙腈,梯度洗脱,流速0.6 mL/min,柱温30℃。结果 10批康媛颗粒的指纹图谱相似度较高,确定9个共有色谱峰。芍药苷、阿魏酸、甘草苷、陈皮苷含量分别在1.102～11.02μg(r=1)、0.201～2.01μg(r=0.999 5)、0.270～2.70μg(r=0.9998)、0.102～1.02μg(r=1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,仪器精密度良好,供试品溶液在24h内基本稳定。结论本研究建立的康媛颗粒指纹图谱及4个成分含量测定方法简便、稳定、准确可靠,可用于康媛颗粒的质量控制。     

多基源甘草药材HPLC指纹图谱及指标性成分研究

目的:建立甘草药材HPLC指纹图谱,并同时测定甘草苷、异甘草苷、甘草酸3种指标性成分的含量,综合评价其质量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法和相似度评价软件,对12批不同基源的甘草药材进行指纹图谱研究,并对甘草中甘草苷、异甘草苷和甘草酸3种指标性成分中的含量进行测定与分析。结果:建立了多基源甘草药材HPLC指纹图谱,标定了18个共有峰,指认了其中3个色谱峰;不同基源甘草药材中甘草苷、异甘草苷和甘草酸3种成分的含量高低不一。结论:建立了甘草药材HPLC指纹图谱,并结合相似度评价和3种指标性成分定量分析法,较全面地反映该药材的质量,为临床合理用药和药材质量控制提供一定的参考。     

基于化学计量学结合多成分测定评价小儿金翘颗粒的质量

目的：建立HPLC法同时测定小儿金翘颗粒中6个成分含量,并结合化学计量学法对其质量进行评价。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.8 mL/min;柱温为40℃;检测波长为260 nm;进样量为4μL。采用统计学软件进行差异分析。结果：6个成分在一定浓度范围内与峰面积的线性关系良好,经统计学分析,12批样品可分为3类,批次间存在一定的差异性。绿原酸、4-二咖啡酰奎宁酸、连翘酯苷A的含量较甘草苷、连翘苷、甘草酸铵的含量高。结论：该研究可为小儿金翘颗粒的质量评价提供参考。     

高效液相色谱法测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量

目的测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定含量,色谱柱:Krom asil 100-5C18柱(4.6 mm×250 mm)。流动相:甲醇-水(38∶62),检测波长:230 nm,流速:0.7 m l/m in,柱温:30℃。结果该条件下芍药苷与其它组分分离良好,芍药苷在0~50μg/m l呈良好的线性关系,r=0.999 2,平均回收率为97.90%,RSD=1.186%。3批供试品含芍药苷分别为0.024 2%,0.027 4%,0.021 7%,平均为0.024 4%。结论HPLC法可用于参芪健胃颗粒的质量控制。     

一测多评法测定槐花颗粒中7种有效成分含量

目的：建立槐花颗粒中7种有效成分绿原酸、芦丁、甘草苷、木犀草苷、蒙花苷、木犀草素、槲皮素一测多评的方法,并验证该方法在槐花颗粒质量标准评价的可行性及准确性。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）测定槐花颗粒中7种成分的含量,色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相：乙腈（A）-0.5%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱;流速：1.0 ml/min;柱温：25℃;进样量：10μl;检测波长：334 nm;以芦丁为内标物,测定与绿原酸、甘草苷、木犀草苷、蒙花苷、木犀草素、槲皮素的相对校正因子,计算槐花颗粒中7种成分含量,并比较一测多评法的计算值与外标法实测值的相似度。结果：在线性范围内,芦丁与绿原酸、甘草苷、木犀草苷、蒙花苷、木犀草素、槲皮素的相对校正因子分别是1.014 7、14.370 4、1.912 0、2.181 1、1.966 7、1.285 3。以外标法和一测多评法分别测定6个批次样品中各成分含量,外标法中芦丁含量为32.710 mg/g、绿原酸含量为0.790 mg/g（一测多评法为0.780 mg/g）、甘草苷...     

HPLC指纹图谱结合化学计量学对甘草品质评价研究

目的:建立甘草HPLC指纹图谱,并结合化学计量学法对甘草质量进行整体评价。方法:采用依利特Supersil ODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为237 nm;进样量为10μL;柱温为40℃,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行相似度评价,采用SPSS 19.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果:建立了甘草HPLC指纹图谱,共确定27个共有峰,并指认了2、3、16号色谱峰分别为芹糖甘草苷、甘草苷、甘草酸;14批样品的相似度均大于0.900。聚类分析将14批甘草分成3类;主成分分析与偏最小二乘判别分析结果显示芹糖甘草苷、甘草苷、甘草酸等12个成分对甘草分类影响较大。结论:HPLC指纹图谱结合化学计量学法能够整体、全面、真实地反映甘草质量的差异,对甘草质量控制及整体性评价具有一定的指导意义。     

桃红四物汤配方颗粒与水煎方剂指标性成分差异研究

目的:通过测定桃红四物汤配方颗粒与水煎方剂中指标性成分的含量,研究两种剂型的化学成分差异。方法:采用HPLC法,使用Agilent Ecplipse C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液(v/v)为流动相,流速1.0mL/min,进样量10μL,柱温25℃,检测波长214nm;测定10批配方颗粒及其所用药材制备的汤剂中芍药苷、苦杏仁苷及阿魏酸的含量并计算转移率。结果:10批配方颗粒及其所用药材制备的汤剂中芍药苷、苦杏仁苷及阿魏酸的平均含量分别为0.0882、0.1107、0.0795mg/g,转移率分别为69.27%、69.29%、81.91%。结论:配方颗粒制备工艺能够较好地转移各指标性成分;本研究所用测定方法准确、快速,能够全面、科学地评价桃红四物汤配方颗粒的质量。     

UPLC⁃MS/MS法同时测定抗萎平异合剂中7种成分

目的建立UPLC?MS/MS法同时测定抗萎平异合剂(黄芪、党参、木蝴蝶等)中咖啡酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、木蝴蝶苷B、党参炔苷、黄芪甲苷、甘草酸的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Waters CORTECS C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm);流动相乙腈?水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温40℃;正离子多反应监测(MRM)模式。以木蝴蝶苷B为指标成分,通过UPLC?DAD法测定其含量。结果7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率97.53%~104.30%,RSD 3.3%~4.3%。3批样品中木蝴蝶苷B含量为1.783~1.811 mg/mL。结论该方法简便准确,可用于抗萎平异合剂的质量控制。     

基于多成分含量测定结合化学计量学评价不同产地鸭跖草药材质量

该研究建立了同时测定鸭跖草中异荭草苷、荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷4种成分含量的HPLC定量分析方法,对不同产地共62批鸭跖草进行含量差异分析及质量评价。采用Dikma Platisil ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(14∶86),检测波长348 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃;应用化学计量学的方法对62批鸭跖草药材产地差异及其药材质量进行研究。结果显示4种成分的测定在质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r>0.999 9),平均加样回收率为96.17%～103.0%,精密度、稳定性、重复性RSD均小于2.0%。整体上4种成分含量由高到低依次为异荭草苷>异牡荆苷>荭草苷>牡荆苷,取产地明确的47批鸭跖草样品进行分析,化学计量学将其分为6类,不同产地鸭跖草质量差异大,综合而言西部、中部、南部产地的鸭跖草质量较优。该研究所建立的HPLC多成分含量测定方法专属性强,简便高效,为综合评价不同产地的鸭跖草药材质量提供参考;经化学计量学分析发现不同产地鸭跖草质量差异大,认为可将异荭草苷...     

HPLC法分析12产地甘草中4种主要黄酮类化合物的含量

目的:分析不同产地甘草中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素的含量,为不同产地甘草的质量评价提供参考。方法:从全国7省区12产地采集甘草种子,栽培于北京中医药大学药草园,1年后每产地随机挑取15株甘草作为实验材料,利用ITS序列鉴定其基原,采用HPLC法测定其甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素的含量,分析各成分含量的差异性及相关性。结果:ITS鉴定结果表明甘草样品均为乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)。HPLC分析结果显示:甘草苷的标准曲线为Y=0.000 5X+1×10~(-5)(R~2=0.999 9),在0.113 7μg~0.854 1μg范围内线性良好;异甘草苷的标准曲线为Y=0.000 3X-3×10~(-5)(R~2=0.999 9),在0.025 3μg~0.204 8μg范围内线性良好;甘草素的标准曲线为Y=0.000 3X+1×10~(-4)(R~2=0.999 8),在0.009 3μg~0.092 7μg范围内线性良好;异甘草素的标准曲线为Y=0.000 2X-7×10~(-5)(R~2=0.999 9),在0.004 6μg~0.030 7μg范围内线性良好。不同产地甘草中4种黄酮类成分含量差异显著,其中山西应县甘草样品的甘草苷、异甘草苷、甘草素及异甘草素的含量均为最高,而黑龙江肇州县、新疆尼勒克县、额敏县、阿拉尔县甘草样品的甘草苷、异甘草苷、甘草素及异甘草素的含量普遍较低。且所有样品中4种黄酮类化合物的含量之间均存在显著相关关系。结论:不同产地甘草质量差异性显著,本实验结果可以为不同产地甘草的质量评价提供参考。     

HPLC法同时测定消肿止痛颗粒中5种成分

目的建立HPLC法同时测定消肿止痛颗粒(当归、地黄、青皮等)中5种成分的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Waters Symmetry ShieLd-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长230、280、330 nm。结果芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、甘草苷、橙皮苷在各自范围内线性关系良好(r0.999 0),平均加样回收率97.63%～100.61%,RSD 1.72%～2.89%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于消肿止痛颗粒的质量控制。     

HPLC法测定芩杏清热止咳颗粒中8种成分

目的建立HPLC法测定芩杏清热止咳颗粒(黄芩、栀子、桑叶等)中8种成分的含有量。方法黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的分析采用Diamonsil Plus C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相0.2%磷酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长274 nm。栀子苷、甘草苷、异甘草苷、甘草酸的分析采用Diamonsil Plus C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相0.05%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长237、360 nm。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r0.999 5),平均加样回收率97.35%～98.73%,RSD 0.61%～1.9%。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于芩杏清热止咳颗粒的质量控制。     

HPLC法同时测定白芍配方颗粒中5种成分

目的建立HPLC法同时测定白芍配方颗粒(白芍)中5种成分的含有量。方法该药物水提液的分析采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱;检测波长230 nm;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃。结果芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷亚硫酸酯、没食子酸、苯甲酸分别在0.020~0.639 mg/m L(r=0.999 8)、0.005~0.172 mg/m L(r=0.999 9)、0.020~0.652 mg/m L(r=1.000 0)、0.003~0.097 mg/m L(r=0.999 8)、0.002~0.058 mg/m L(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.1%、98.3%、98.6%、98.1%、99.5%,RSD分别为1.86%、1.37%、1.69%、1.46%、2.26%。27批样品中各成分含有量均有明显差异。结论白芍配方颗粒中白芍质量不稳定,应对其加以关注。     

两种方法测定复方苦参注射液中聚山梨酯80的含量

目的：建立HPLC同时测定栝楼桂枝汤中没食子酸、原儿茶酸、芍药内酯苷、芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草苷、甘草素、甘草酸含量的方法,并探讨君药天花粉对复方9种成分的含量影响。方法：用Diamonsil C₁₈柱,流动相0.1%甲酸-乙腈梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长254 nm;测定桂枝汤、栝楼桂枝汤中没食子酸、原儿茶酸、芍药内酯苷、芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草苷、甘草素、甘草酸的含量,比较了配伍天花粉的栝楼桂枝汤与桂枝汤9种成分的含量变化。结果：建立了HPLC同时测定没食子酸、原儿茶酸、芍药内酯苷、芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草苷、甘草素、甘草酸的含量的方法,与桂枝汤相比,栝楼桂枝汤中芍药苷含量增加、没食子酸、原儿茶酸、芍药内酯苷、甘草苷、甘草素、肉桂酸、甘草酸含量减少,桂皮醛含量变化不大。结论：本方法专属性、重复性好,可用于栝楼桂枝汤中9种成分的含量测定;配伍天花粉对各成分含量有影响,其影响非常复杂。     

当归建中汤物质基准特征图谱和多指标成分测定研究

目的 建立15批当归建中汤特征图谱及多指标成分含量测定方法,为当归建中汤经典名方的质量控制评价提供参考。方法 色谱柱为Waters Symmetry C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈(B)-0.1%磷酸溶液(A)为流动相,梯度洗脱;流速:1 mL·min^-1;检测波长为230 nm;柱温35 ℃;进样量为5 μL,建立15批当归建中汤物质基准特征图谱,并使用HPLC测定5种指标成分含量。结果 对15批当归建中汤物质基准进行研究,其特征图谱相似度处于0.886~0.996之间,标定了15个共有峰,指认出芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、肉桂酸、甘草酸6个色谱峰。经方法学考察,5种成分在一定浓度范围内呈良好的线性关系;精密度、稳定性、重复性均符合要求;阿魏酸、肉桂酸、甘草苷、甘草酸、芍药苷的平均加样回收率分别为99.74%、100.28%、100.56%、98.44%、102.25%。以含量测定均值上下浮动30%规定出各指标成分的含量范围,均未出现离散数据(平均值的70%～130%以外)。结论 建立的经典名方当归建中汤特征图谱及5个成分的含量测定方法简便、稳定、准确可靠,可用于当归建中汤物质基准的质量控制。     

胃灵散质量标准研究

目的建立胃灵散的质量标准。方法采用TLC法对胃灵散中的延胡索、甘草进行了定性鉴别。并用HPLC法对制剂中的白芍所含芍药苷进行了含量测定。ODS分析色谱柱(4mm×250mm,7μm),流动相甲醇-冰醋酸-水(30∶1∶69),流速1.0ml/min,检测波长230nm。结果胃灵散中的延胡索乙素、甘草酸铵与其它成分分离良好。高效液相色谱法(HPLC)测定芍药苷、可达基线分离,芍药苷对照品在0.35～1.75μg