某医院2012-2013年242株肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶及整合子耐药基因检测

目的了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷伯菌对16种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松和头孢他啶耐药率较高,分别为76.86%、65.70%、63.64%、62.40%和59.92%;亚胺培南、丁胺卡那、厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,分别为17.77%、18.88%、18.88%和23.55%。PCR结果显示,ESBLs基因阳性155株,占64.05%,主要为TEM型和SHV型,两者均存在的菌株有114株,占产ESBLs基因菌株的73.55%(114/155)。其次为KPC基因86株,占35.54%;此外AmpC基因43株,占17.77%,全部为DHA型。整合子基因128株,占52.89%,以整合子1(intI-1)为主,共检出120株,占49.59%。结论我院肺炎克雷伯菌耐药情况严重,主要的耐药基因型为TEM型、SHV型、KPC和intI-1。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性和基因分型研究

目的调查重庆地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法采用纸片扩散法测定10种抗菌药物对产ESBLs肺炎克雷伯菌的敏感性,应用PCR方法检测产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因。结果35株产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感,对头孢吡肟耐药率为22.9%;但对其他抗菌药物耐药率均>50%,其中对头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率分别为82.9%、68.5%和65.7%;基因型分析显示有26株携带CTX-M基因,24株携带TEM基因,15株携带SHV基因。结论产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,重庆地区以CTX-M型ESBLs多见。     

临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及耐药基因和I类整合子的检测

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及相关耐药基因之间的关系.方法 采用K-B琼脂扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用PCR技术检测相关耐药基因和I类整合子并用DNA序列分析确认其所产生基因型.结果 检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%.所有检测菌株对亚胺培南全部敏感;56株ESBLs阳性的菌株有44株扩增到TEM基因(78.6%),SHV型阳性的有2株(3.6%),CTX-M型阳性的有48株(85.7%),OXA型阳性的有1株(1.79%),intI1阳性菌株有35株(62.5%),占未检出PER和VEB型.结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs细菌最有效的药物;TEM型和CTX-M型ESBLs为我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要基因型,携带I类整合子基因是导致细菌产ESBLs的重要原因.     

老年产ESBLs肺炎克雷伯菌感染耐药现状及基因型分析

目的了解产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染情况及耐药基因型特点。方法对2002年1月～2003年12月651份老年患者的各类标本中的肺炎克雷伯菌进行分离鉴定,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并分别使用对TEM型、SHV型和CTXM型基因特异的引物,聚合酶链反应(PCR)扩增产酶菌的ESBLs基因。结果共分离出123株肺炎克雷伯菌,其中产ESBLs的占25.2%。ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌。31株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,TEM型基因占48.4%,CTXM型基因占35.5%,SHV型基因占29%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染率较高,耐药性较强,其基因型分布呈多样性,合理使用抗生素,加强对特定基因的监控,是控制其医院感染流行的重要措施。     

抗生素性腹泻肠道杆菌产超广谱β-内酰胺酶基因型的调查

目的:研究抗菌药物使用后,引起腹泻患者肠道杆菌产超广谱β-内酰胺酶(EsBLs)细菌的耐药基因型并进行序列分析.方法:收集临床住院应用抗茵药物后出现腹泻患者的大便或肛拭子进行培养,分离产ESBLs的肺炎克雷伯菌50株、大肠埃希菌21株和变形杆菌18株,通过改良Hodge实验、EDTA双纸片增效试验、分别测定KPC、金属酶:聚合酶链反应(PCR)检测其耐药基因、分析PCR产物序列并在GenBank中比对分析,总结产ESBLs细菌同源性的和变异情况.结果:89株产ESBL的菌株中,有64株携带CTX型耐药基因,68株携带TEM型耐药基因,21株携带SHV型耐药基因.肺炎克雷伯茵中CTX型占到84%(42/50),TEM型占到76%(38/50),SHV型占到15%(7/50);变形杆菌中没有SHV型,而TEM型占到100%(18/18),CTX型占到40%(7/18);大肠埃希菌中CTX占到100%(21/21),SHV型和TEM型均为83%(17/21);同时检出3株产KPc和22株产金属酶的细菌.结论:本院抗生素腹泻患者肠道杆菌产ESBLs耐药基因主要以CTX和TEM为主,同时携带两个或两个以上耐药基因的细菌占49%(44/89).     

临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及耐药基因和Ⅰ类整合子的检测

目的了解产超广谱B．内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及相关耐药基因之间的关系。方法采用K—B琼脂扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用PCR技术检测相关耐药基因和Ⅰ类整合子并用DNA序列分析确认其所产生基因型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44．4％。所有检测菌株对亚胺培南全部敏感;56株ESBLs阳性的菌株有44株扩增到TEM基因（78．6％）,SHV型阳性的有2株（3．6％）,CTX-M型阳性的有48株（85．7％）,OXA型阳性的有1株（1．79％）,intl1阳性菌株有35株（62．5％）,占未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs细菌最有效的药物;TEM型和CTX-M型ESBLs为我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要基因型,携带Ⅰ类整合子基因是导致细菌产ESBLs的重要原因。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析

目的　了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM及SHV型ESBLs亚型 ,并分析其耐药性。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)扩增分离四川大学华西医院住院患者的产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌株的TEM型及SHV型ESBLs基因并测序 ,用琼脂稀释法测定头孢他啶和头孢噻肟等 8种抗菌药物的最小抑菌浓度 (MIC)值。结果　所有产ESBLs株均耐头孢噻肟 ,11株耐氨曲南 ,2株分别耐头孢他啶和头孢吡肟 ,对环丙沙星、阿米卡星及头孢西丁耐药的分别为 11株、5株和 3株。 12株ESBLs菌中 10株产SHV 2 ,2株产TEM 19。结论　本研究中的产ESBLs株以耐头孢噻肟和氨曲南为主 ,其中绝大多数为多重耐药株 ,产SHV 2和TEM 19是其对头孢噻肟及氨曲南等氧亚胺基 β 内酰胺酶类抗生素耐药的原因之一     

老年呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药监测及产ESBLs基因型分析

目的分析老年患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型分布。方法对496份呼吸道感染的老年患者痰液标本进行培养,分离出的肺炎克雷伯菌用K-B法进行药敏分析,筛选产ESBLs菌株,并用PCR方法鉴定基因亚型。结果分离培养出肺炎克雷伯菌45株,占所有病原菌的11.9%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦及复方新诺明耐药率高,达60%以上,而对亚胺培南、呋喃妥因及阿米卡星等的敏感性都很高。有31.1%的肺炎克雷伯菌株被鉴定出产ESBLs,且ESBLs基因型多以CTX-M-14、TEM和SHV为主,且92.9%的菌株存在2种及以上的基因型。结论该地区老年患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药状况控制较好,但产ESBLs菌株携带多种耐药基因现象严重,需引起临床的高度重视。     

超广谱β-内酰胺酶SHV-12编码基因的克隆及序列分析

目的 分析浙江省临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯E95株的耐药基因序列,并确定其所产ESBLs型。方法 采用聚合酶链反应（PCR）获得ESBLs编码基因片段,克隆入pGEM-Teasy载体,双脱氧链终止法测定核苷酸序列并确定亚型。结果 PCR扩增E95株ESBLs基因型为SHV型,其基因片段含812个核苷酸,与瑞士报道的SHV-12型ESBLs编码基因的序列完全相同。结论 E95株肺炎克雷伯菌所产ESBLs为SHV-12亚型,从而证明在我国有SHV-12型ESBLs的存在。     

老年呼吸科患者感染产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药分析

目的了解老年呼吸科患者感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用法国生物梅里埃公司的VPI微生物自动鉴定系统,对我院2012年至2013年,老年呼吸科患者的各类临床标本进行细菌鉴定,药敏试验采用琼脂扩散法检测14种抗生素敏感性,并药敏结果进行分析。结果 506株肺炎克雷伯菌标本分布以痰液为主,其中产ESBLs肺炎克雷伯菌258株,检出率为49.01%,检出506株肺炎克雷伯菌与其他细菌形成混合感染有164株(占32.14%),铜绿假单胞菌合并肺炎克雷伯杆菌52例,占31.7%,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药率明显高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌。结论老年呼吸科患者产ESBLs肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物的耐药率较高,所以监测产ESBLs的发生率及其耐药趋势能够预防和控制耐药菌的产生和传播。     

改良Hodge试验用于筛查产KPC肺炎克雷伯菌的临床评价

目的初步评价改良Hodge试验在产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌检测中的临床价值。方法用改良Hodge试验对170株超广谱β-内酰胺酶阳性肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶进行初步筛查,PCR扩增其基因并测序。结果在170株肺炎克雷伯菌中,10株对碳青霉烯类抗生素的敏感性降低,8株改良Hodge试验筛查阳性,经PCR证实8株均携带碳青霉烯酶-2型基因。结论改良Hodge试验能准确的筛查出临床分离株中存在的产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,可以为临床治疗提供可靠的参考。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶耐药基因的临床研究

目的探讨肺炎克雷伯菌感染的药敏及β-内酰胺酶耐药基因的分布情况。方法对近2年分离的268株肺炎克雷伯菌培养阳性标本结果进行回顾性分析,并随机选择其中20株肺炎克雷伯菌进行p内酰胺酶基因（TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-9群、OXA-1群、OXA-2群、0xA-10群、PER、GES、VEB、CARB、DHA、ACT-1）检测并分析。结果产超广谱β-内酰胺酶菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高,对β-内酰胺类、喹诺酮类和青霉素类抗生素几乎全部耐药,但对亚胺培南的敏感性为100．0％;且肺炎克雷伯菌β-内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关。结论近年来该菌感染率高,且产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对多种抗生素的耐药性呈上升趋势,应高度重视,及时加强对该菌的药敏及耐药谱检测,具有十分重要的临床意义。     

114株耐碳氢酶烯肺炎克雷伯杆菌耐药表型及基因分析

目的:分析114株耐碳氢酶烯肺炎克雷伯杆菌（CRKP）的耐药表型与基因型,为控制耐碳氢酶烯肺炎克雷伯杆菌传播及临床治疗提供依据。方法： 选取住院患者痰样本分离的114株CRKP,采用VITECK2全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定并验证其对碳青霉烯的药敏性。采用改良碳青霉烯灭活法（mCIM法）检测CRKP的耐药表型;采用PCR法检测碳氢酶烯酶blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA 4耐药基因。结果： 114株CRKP经mCIM法检测阳性率为95.61%,耐药表型均为KPC型。耐药菌对青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类药物的耐药率均在95%~100%;对氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类和氯霉素类药物的耐药率分别为70%~75%、82%~87%、90%~95%和80%~84%（均P<0.05）。经PCR检测,blaKPC基因阳性检出率为100%。脉冲凝胶电泳（PFGE）分子分型共分为13个谱型,优势型别为KPN01.005型（35株）,各菌株间相似性系数达92.0％以上。结论：宁乡市人民医院CRKP的耐药十分严重,与其携带blaKPC耐药基因密切相关。应加强细菌耐药性监测和医院感染的监控。     

128例脊柱结核耐药患者的临床分析

目的 分析脊柱结核病灶中结核分枝杆菌菌型,耐药性及耐药原因和处理原则。 方法 搜集首都医科大学附属北京胸科医院2005年1月至2012年1月确诊为脊柱结核的住院患者1057例。通过穿刺或外科手术获得骨病灶中的脓液及干酪样物,进行结核分枝杆菌培养和药敏试验。 结果 在1057例患者中,分枝杆菌培养阳性128例,阳性率12.1%;128例患者中耐一线药物异烟肼、利福平及链霉素最多,分别为22例、16例、27例,占17.2%,12.5%及21.1%;利福平、利福喷丁及链霉素的高浓度耐药情况严重,分别为16例、12例、25例,占耐该药菌株中的100.0%(16/16),75.0%（12/16）,92.6%(25/27);其中耐多药结核（MDR-TB）21例,占阳性患者的16.4％(21/128),均为复治患者,培养阳性患者均按照药敏试验结果给予规范的抗结核治疗或个性化治疗,同时择期给予手术治疗,均痊愈。 结论 脊柱结核病灶中结核分枝杆菌耐药仍以常规药物（异烟肼、利福平、链霉素、利福喷丁）为主,耐多药脊柱结核多为复治患者,即以获得性耐药为主。因此早期获得患者耐药及药敏,并给予合理的抗结核治疗并结合合理的手术方法是治愈结核病的关键,对防止耐多药发生有重要意义。     

耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及其基因型和耐药性

目的了解耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及其基因型分布和耐药性状况。方法收集2004年9月-2005年3月分离自南京军区福州总院、福建省立医院、解放军476医院、福州?第二医院住院患者155株耐头孢西丁无重复革兰阴性杆菌,采用酶提取物三维试验检测AmpC酶;API药敏试验板和K-B法测定高产AmpC酶菌株对抗菌药物的敏感性;质粒转化试验定位耐药基因;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定,确定其基因亚型。结果在155株菌中有36株高产AmpC酶,高产AmpC酶发生率23.2%,分布在13种菌种中,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌和阴沟肠杆菌的发生率,分别为29.3%、13.9%、6/10、2/6。在36株高产AmpC酶菌株中检测出DHA-1型2株(肺炎克雷伯菌)、CMY-2型4株(大肠埃希菌),新发现基因CMY-22型1株(大肠埃希菌,GenBank登录号:DQ256079),5株携带CMY基因的大肠埃希菌分别同时带有TEM-1型广谱酶,TEM-144(新发现基因,GenBank登录号:DQ256080)、CTX-M-27、和CTX-M-14超广谱β-内酰胺酶。高产AmpC酶菌株耐药性严重,且呈多重耐药,但对亚胺培南和美罗培南的敏感率>87%。结论耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率较高,菌种分布较宽,耐药性强,治疗相关菌造成的感染应以亚胺培南和美罗培南为首选药物。福州地区临床分离株发现产DHA-1型AmpC酶肺炎克雷伯菌、产CMY-2型和CMY-22型AmpC酶大肠埃希菌。CMY-2型和CTX-M-27型为中国大陆首次报告,CMY-22型和TEM-144型为国内外首次发现。     

呼吸内科耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌不同耐药基因型的临床特征分析

目的分析解放军总医院呼吸内科耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)不同耐药基因型(OXA-48及KPC)的临床特征,旨在找到其内在差异,为临床预防及治疗提供依据。方法收集解放军总医院呼吸内科2013年7月至2015年7月分离出CRKP菌株的患者共44例,剔除同一患者分离的重复菌株,并根据产生碳青霉烯酶的不同分成KPC组及OXA-48组,比较2组患者的临床特点及耐药特性等指标。结果携带KPC酶14例,占31.8%;携带OXA-48酶27例,占61.4%;携带IMP酶2例,占4.5%;未携带碳青霉烯酶1例,占2.3%;其余型耐药基因未检出。单因素分析结果显示,OXA-48组与KPC组患者感染前住院时间,是否入住ICU≥7 d,感染前基础疾病及留置中心静脉置管、胸腔引流管、胃管、尿管,透析或连续性肾脏替代治疗,气管插管或气管切开,机械通气及内窥镜手术,分离出CRKP之前使用的药物情况及90 d全因死亡率等指标差异无统计学意义。OXA-48组和KPC组对美罗培南的耐药率分别为55.6%、92.9%,差异有统计学意义(P=0.038);OXA-48组和KPC组对亚胺培南的耐药率分别为66.7%100.0%,差异有统计学意义(P=0.041)。结论CRKP感染的患者病情严重且复杂,对多种抗生素耐药,死亡率较高,不同基因型CRKP临床特征无明显差异。CRKP不同基因型对于不同碳青霉烯类药物的耐药存在异质性,临床制定抗感染方案应结合耐药基因情况个体化治疗。     

肺炎克雷伯菌的分布及传播途径连续调查

目的 连续观察开滦总医院2011— 2016年临床分离肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)的分布与耐药性变化情况,回顾医院感染防治的长期效果。方法 用VITEK2-compact全自动微生物鉴定仪(法国生物梅里埃公司)进行细菌鉴定与药敏实验,用改良Hodges试验筛选产碳青霉烯霉肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae carbapenemases,KPC)菌株。结果 6年中共分离出非重复KPN 2155株,产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta lactamase,ESBLs)菌有715株,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)有128株,并在2014年有小规模暴发流行。结论 KPN易在年老体衰与自身免疫力低下的患者体内引起感染,直接接触传播仍是当前最重要的院内感染传播方式,严格的院内感染防治措施可以有效减缓KPN感染的发展趋势。;     

Drug-resistant genes and serotypes of pneumococcal strains of community-acquired pneumonia among adults in Japan

BACKGROUND: A high frequency of drug-resistant pneumococci has been reported in Asian countries. Few data on the drug-resistance or serotype of pneumococcal strains responsible for community-acquired pneumonia (CAP), however, are available for the past two decades in Japan. METHODOLOGY: Susceptibility to antibiotics and the genotype of antibiotic-resistant genes and serotypes of Streptococcus pneumoniae isolates from 114 adult patients with CAP were examined in a nationwide study in Japan between 2001 and 2003. RESULTS: Most of the cases were non-bacteraemic pneumonia and the case fatality rate was 4.4%. The most frequent genotype of the pbp gene was pbp1a + 2x + 2b (gPRSP; 36.8%) followed by pbp 2x (28.1%) and of the macrolide-resistant gene, it was ermB (50.0%). The most common serotype was 19F (29.1%), followed by serotype 23F (13.2%), 6B (12.3%) and 3 (11.4%). The coverage of serotypes of isolates by a 23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine (PPV) would be 82.5% in these patients with CAP. Most of strains with serotypes 19F and 23F were gPRSP. A cluster of serotype 3 strains associated with the pbp 2x and ermB gene was also noted. CONCLUSION: A high frequency of altered pbp gene mutations or of macrolide-related genes and a high serotype coverage by the 23-valent PPV found in our study of pneumococcal pneumonia facilitates attempts to increase the coverage rate of the 23-valent PPV in adults older than 65 years in Japan.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpCβ内酰胺酶基因型的检测

目的了解产质粒介导的AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型。方法收集2002年1月至2004年5月间呼吸科临床标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共110株，用酶提取物三维试验检测AmpC酶；用等电聚焦电泳、耐药质粒电转化试验、聚合酶链反应（PCR）及测序确定AmpC酶基因型。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为9．30％（4／43），4．48％（3／67）。药敏试验结果显示产酶株对头孢西丁全部耐药，对第三代头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、阿米卡星及环丙沙星均有不同程度耐药，对头孢吡肟及亚胺培南较敏感。7株产AmpC酶菌株中有5株通过电转化试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌，经PCR扩增和测序证实为质粒介导DHA-1型AmpC酶。结论临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中已经出现产质粒介导AmpC酶菌株，其耐药性能够水平传播，给临床抗感染治疗带来重大威胁。