白藜芦醇对青光眼视网膜氧化损伤的保护作用

目的　探讨白藜芦醇对青光眼视网膜氧化损伤的保护作用。方法　３０只健康雄性成年家兔随机分为对照组、模型组和白藜芦醇治疗组,每组１０只。模型组和白藜芦醇治疗组用２５ｇ?Ｌ－１羟丙基甲基纤维素溶液０．２ｍＬ注入家兔前房内,制作青光眼模型。白藜芦醇治疗组按每日３００ｍｇ?ｋｇ－１体质量给予白藜芦醇灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。给药２８ｄ后测定视网膜抗氧化酶超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＰＸ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ,ＣＡＴ）的活性,抗氧化物质还原型谷胱甘肽（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ,ＧＳＨ）和还原型抗坏血酸（ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ,ＡｓＡ）含量及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）和丙二醛（ｍｅｔｈａｎｅｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）的含量。结果　模型组视网膜抗氧化酶ＳＯＤ、ＧＰＸ、ＣＡＴ活性及抗氧化物质ＧＳＨ、ＡｓＡ含量分别为（４２．０±３．３）Ｕ?ｍｇ－１、（１８．３±１．７）Ｕ?ｍｇ－１、（１．９±０．２）Ｕ?ｍｇ－１、（３３．３±２．７）ｍｇ?ｍｇ－１和（９７．０±７．６）ｍｇ?ｍｇ－１,均低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）;ＮＯ和ＭＤＡ含量分别为（３７．０±２．９）μｍｏｌ?ｍｇ－１和（１８．０±１．７）μｍｏｌ?ｍｇ－１,均高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）。白藜芦醇治疗组视网膜上述抗氧化酶活性、ＧＳＨ和ＡｓＡ含量分别为（４９．２±２．９）Ｕ?ｍｇ－１、（２４．１±３．２）Ｕ?ｍｇ－１、（２．８±０．２）Ｕ?ｍｇ－１、（４３．０±３．５）ｍｇ?ｍｇ－１和（１０８．４±８．１）ｍｇ?ｍｇ－１,均高于模型组,但低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）;ＮＯ和ＭＤＡ含量分别为（３０．１±２．４）μｍｏｌ?ｍｇ－１和（１２．４±１．０）μｍｏｌ?ｍｇ－１,低于模型组,但高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）。结论　白藜芦醇能够增加视网膜抗氧化酶活性和抗氧化物质ＧＳＨ和ＡｓＡ含量,从而可以减青光眼视网膜的氧化应激损伤。     

吡诺克辛钠液对H202诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨吡诺克辛钠液对Ｈ２Ｏ２ 诱导的人晶状体上皮ＳＲＡ０１／__________０４细胞凋亡的抑制作用。方法　将体外培养的ＳＲＡ０１／０４细胞分为３组:先加药组:先加吡诺克辛钠液３００μＬ培养２３．５ｈ后再加０．５μｍｏｌ?Ｌ－１Ｈ２Ｏ２培养３０ｍｉｎ;后加药组:先加０．５μｍｏｌ?Ｌ－１Ｈ２Ｏ２,３０ｍｉｎ后再加吡诺克辛钠液３００μＬ培养２３．５ｈ;对照组:不加药培养２４ｈ。对３组细胞标本进行一氧化氮合酶活性及羟自由基水平检测,以免疫组织化学法检测Ｂｃｌ-２、Ｂａｘ及Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达和ＴＵＮＥＬ法检测凋亡率。结果　后加药组的一氧化氮合酶活性（１６５．１７±１．２０）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１及羟自由基检测值（０．２０５±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１均高于先加药组的（１６１３９±１．８３）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１和（０．１７４±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１,更高于对照组的（１４６．９８±６．１９）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１和（０．１４４±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１,经统计学分析各组一氧化氮合酶活性和各组羟自由基检测水平差异有统计学意义（Ｆ＝３２．１０,Ｐ＜０．０１;Ｆ＝２１１２０,Ｐ＜０．０１）;Ｂａｘ及Ｃａｓｐａｓｅ-３表达的灰度值后加药组为１８８．５０±５．２７和１９８．０４±２．４４,先加药组为１５４．０２±７．７４和?８２１?眼科新进展　２０１４年９月　第３４卷　第９期ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．３４Ｎｏ．９Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２０１４ ｈｔｔｐ:／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ１８６．５８±２．４０,对照组为１４２．３６±３．３３和１５７．４８±１．２１,３组差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。凋亡率后加药组为５０％、先加药组为２５％、对照组为５％,各组凋亡率通过χ２检验差异有统计学意义（χ２＝１０３．９８,Ｐ＜０．０１）;而Ｂｃｌ-２表达的灰度值对照组为１５０．０５±９．６０,先加药组为１３８．２３±４７８、后加药组为１２６．６７±０．５９,经统计学分析各组扫描灰度值差异有统计学意义（Ｆ＝１４．２２,Ｐ＜０．０１）。结论　吡诺克辛钠液可通过减低氧化应激反应抑制Ｈ２Ｏ２诱导的细胞凋亡效应,且先加药组抑制效应大于后加药组,提示应用氧化应激抑制药对白内障可能具有一定预防效应。     

普拉洛芬滴眼液不同用药时间对干眼症疗效的影响

目的　探讨普拉洛芬滴眼液不同用药时间对干眼症疗效的影响。方法　选取我院眼科门诊诊断为双眼干眼症的患者１１７例,按照随机数字表法将患者分成普拉洛芬１４ｄ组（３９例）、普拉洛芬３０ｄ组（４０例）和对照组（３８例）。普拉洛芬１４ｄ组给予１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液（１４ｄ）联合１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）;普拉洛芬３０ｄ组给予１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液（３０ｄ）联合１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）,对照组仅给予１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）。给药方法均为局部滴双眼,每次１滴,每天４次。分别于治疗前后检测３组患者的泪液分泌试验Ｉ（ＳｃｈｉｒｍｅｒＩｔｅｓｔ,ＳＩｔ）、泪膜破裂时间（ｔｅａｒｂｒｅａｋ-ｕｐｔｉｍｅ,ＢＵＴ）和角膜荧光素染色（ｃｏｒｎｅａｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｓｔａｉｎｉｎｇ,ＦＬ）评分。结果　治疗前３组患者人口基线特征比较差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。治疗后普拉洛芬１４ｄ组ＳＩｔ（７．１１±１．３６）ｍｍ和ＢＵＴ（８．４２±０．７９）ｓ均高于对照组ＳＩｔ（５．１９±０．８５）ｍｍ和ＢＵＴ（５．９２±１．２４）ｓ;ＦＬ评分（０．７３±０．７２）显著低于对照组（１．８８±０．７１）,差异均有统计学意义（ｔＳＩｔ＝８．０００,Ｐ＜０．００１;ｔＢＵＴ ＝１０．８７０,Ｐ＜０．００１;ｔＦＬ＝－７．６６７,Ｐ＜０．００１）;治疗后普拉洛芬３０ｄ组ＳＩｔ（７．３８±１．０１）ｍｍ和ＢＵＴ（８．１２±１．００）ｓ均高于对照组,ＦＬ评分（０．８８±０．６８）显著低于对照组,差异均有统计学意义（ｔＳＩｔ＝９．１２５,Ｐ＜０．００１;ｔＢＵＴ＝９．５６５,Ｐ＜０．００１;ｔＦＬ ＝－６．６６７,Ｐ＜０．００１）;但治疗后普拉洛芬１４ｄ组与普拉洛芬３０ｄ组的ＳＩｔ、ＢＵＴ和ＦＬ评分差异均无统计学意义（ｔＳＩｔ＝－１．１２５,０．４＞Ｐ＞０．２;ｔＢＵＴ＝１．３０４,０．２＞Ｐ＞０．１;ｔＦＬ＝－１．０００,０．４＞Ｐ＞０．２）。结论　短期应用１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液治疗干眼症即可达到较好的疗效,它是辅助治疗干眼症的有效药物。     

异氟醚单凭吸入麻醉法用于糖尿病大鼠玻璃体注射的实验研究

目的　探究异氟醚单凭吸入麻醉法用于糖尿病大鼠玻璃体注射的可行性。方法２０只同龄ＳＤ雄性糖尿病大鼠随机平均分为Ａ、Ｂ组,Ａ组腹腔注射水合氯醛（４ｍｇ? ｋｇ－１）麻醉,Ｂ组采用体积分数１．５％异氟醚吸入法麻醉。麻醉起效后,于显微镜下行大鼠玻璃体注射间充质干细胞。比较２组动物的麻醉起效时间、肛温、呼吸频率、麻醉时间、死亡率、玻璃体注射操作成功率。结果　麻醉后,Ａ、Ｂ两组动物麻醉起效时间分别为（３．７５±０．６３）ｍｉｎ、（４．７８±０．４７）ｍｉｎ,肛温分别为（３４．７０±０．４３）℃、（３５．１８±０．２２）℃,呼吸频率分别为（５８．５６±４．６４）次?ｍｉｎ－１、（５６．８０±２．６１）次?ｍｉｎ－１,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。Ａ、Ｂ组麻醉时间分别为（２７．３３±３．８７）ｍｉｎ、（４．８４±０．７５）ｍｉｎ,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。除Ａ组１只麻醉死亡、Ｂ组有１例晶状体扎伤外,其他大鼠均成功进行了玻璃体注射,２组的死亡率和操作成功率差异均无统计学意义（均为Ｐ＞００５）。结论　异氟醚吸入法操作简便,成功率高,可作为糖尿病大鼠短时间操作（如玻璃体注射等）的首选麻醉。     

二氢睾酮对小鼠角膜上皮细胞Mucins表达的影响

目的　探讨不同浓度二氢睾酮（ＤＨＴ）对角膜上皮黏蛋白Ｍｕｃｉｎｓ表达的影响。方法　体外原代培养ＢＡＬＢ／ｃ小鼠角膜上皮细胞,分为空白对照组以及ＤＨＴ干预组,ＤＨＴ干预组给予不同浓度（０．０５ｇ?Ｌ－１、０．１０ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１、１．００ｇ?Ｌ－１）ＤＨＴ干预２４ｈ;采用ＲＴ-ＰＣＲ方法与免疫荧光组织化学方法分别检测Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ以及蛋白水平的表达。结果　Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ检测结果显示:空白对照组,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．１０ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１ｍＲＮＡ相对表达量分别为１．００±０．００、０．１５±０．０１、１．４０±０．０９、０．０７±０．１１、０．０６±０．０２;Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ相对表达量分别为１．００±０．００、０．３０±０．２８、１．３６±０．０５、０．４３±０．０１、０．４５±０．０１,０．１０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ表达水平较空白对照组明显增加,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;０．０５ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下降,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。免疫荧光化学检测结果示,以上各组Ｍｕｃ１ＯＤ值分别为１．８６±０．０１、１．８２±０．０１、２．０３±０．０４、１．８８±０．０１、１．８１±０．０２,０．１０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１表达较空白对照组明显增加,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下调,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;Ｍｕｃ４ＯＤ值分别为１．８６±０．００、１．７７±０．０１、１．８４±０．０２、１．９２±０．００、１．６９±０．０５,０．１０ｇ?Ｌ－１与０．２０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ４表达较空白对照组明显增加,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下调,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。０．５０ｇ?Ｌ－１与１．００ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ可影响细胞体外生长。结论　一定浓度ＤＨＴ（如０．１０ｇ?Ｌ－１）可上调小鼠角膜上皮细胞Ｍｕｃ１与Ｍｕｃ４的表达水平;而高浓度（０．５０ｇ?Ｌ－１与１．００ｇ?Ｌ－１）ＤＨＴ对角膜上皮细胞存在毒性作用。     

鱼油对健康家兔眼压的影响及其机理初探

将２０只家兔随机等份分成Ａ组（喂清鱼油）和Ｂ组（喂浓鱼油），对用药前后的眼压、眼压描记及房水ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ值进行同组对比和两组间的比较。结果：（１）Ａ、Ｂ两组用药１４天后眼压分别下降０．７６±０．１７和０．９２±０．２０ｋＰａ。（２）Ａ、Ｂ两组用药１３天后Ｃ值分别升高０．０９±０．０２和０．０８±０．０４，Ｂ组Ｆ值下降１．０４±０．０９。（３）Ａ、Ｂ两组用药１４天后房水ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ分别升高１．３６±２．２１、１．９５±３．３４和５．９２±３．９６、３．１２±２．４３ｐｍｏｌ／ｍｌ。因此认为鱼油通过影响兔房水生成和排出降眼压并与其房水ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量改变有关。     

新生血管性青光眼患者房水中信号素3A表达水平的研究

目的　检测新生血管性青光眼（ｎｏｎｖａｓｃｕｌａｒｇｌａｕｃｏｍａ,ＮＶＧ）患者房水中信号素３Ａ（Ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ３Ａ,Ｓｅｍａ３Ａ）的水平,探讨Ｓｅｍａ３Ａ在ＮＶＧ发生发展中的作用。方法　选取在我院眼科２０１４年１月至２０１５年２月诊断为ＮＶＧ行抗青光眼手术患者４２例（４３眼）作为ＮＶＧ组,并根据病因分为糖尿病组１１眼、静脉阻塞组１１眼、青光眼组８眼及原因不明组１３眼;选取同期收治行单纯白内障手术患者１６例（１６眼）作为对照组。分别于术前抽取房水样本,利用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定房水中Ｓｅｍａ３Ａ含量,对比分析ＮＶＧ组和对照组在Ｓｅｍａ３Ａ浓度上的统计学差异。分析检测ＮＶＧ组房水中Ｓｅｍａ３Ａ水平与眼压水平的相关性。结果　ＮＶＧ组患者的眼压为（３２．６３±１１．１６）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,较对照组（１５．５６±１．９３）ｍｍＨｇ明显升高（ｔ＝２３．９６,Ｐ＜０．０００１）。ＮＶＧ组患者房水中Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（２．１３±１．９４）ｎｇ?ｍＬ－１,明显高于对照组（０．６６±０．５８）ｎｇ?ｍＬ－１,差异有显著统计学意义（ｔ＝２．９８５,Ｐ＜０．０００１）。但ＮＶＧ组房水中Ｓｅｍａ３Ａ与眼压水平无明显相关性（ｒ＝－０．２１６４,Ｐ＝０．１１８５）。根据引起ＮＶＧ的原发病进行分组比较,糖尿病组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（２．１４±１．４４）ｎｇ? ｍＬ－１、静脉阻塞组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（１．６７±０．９８）ｎｇ?ｍＬ－１及青光眼组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（１．８７±１．８０）ｎｇ?ｍＬ－１,与对照组房水中Ｓｅｍａ３Ａ浓度相比均明显升高,差异均有统计学意义（Ｐ＝０．００１、０．００２、０．０２１）。结论　Ｓｅｍａ３Ａ在ＮＶＧ患者房水中明显升高,推测其表达增加可能参与了ＮＶＧ患者虹膜新生血管形成及眼部损伤性改变。     

紫外光A/核黄素角膜交联后兔角膜基质内基质金属蛋白酶-1含量的变化

目的　检测紫外光Ａ／核黄素角膜交联（ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔＡ／ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎｃｏｒｎｅａｌｃｒｏｓｓ-ｌｉｎｋ-ｉｎｇ,ＵＶＡＲＣＸＬ）后兔角膜基质内基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＭＰ）-１的短期含量变化。方法　１５只新西兰白兔,随机分为３组,每组５只,Ａ组为空白对照组,Ｂ组为角膜交联后３ｄ,Ｃ组为角膜交联后７ｄ。Ｂ、Ｃ两组行ＵＶＡＲＣＸＬ。各组取角膜后去除角膜上皮和内皮细胞,应用ＥＬＩＳＡ法检测角膜基质内ＭＭＰ-１的含量。结果　Ａ组角膜基质内ＭＭＰ-１／总蛋白含量为（０．１４０±０．０３６）×１０－６,Ｂ组为（０．２４２±０．０５９）×１０－６,Ｃ组为（０．３７２±０．０６１）×１０－６,３组之间差异有统计学意义（Ｆ＝２４．０５１,Ｐ＝０．０００）。ＵＶＡＲＣＸＬ后３ｄ,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量显著升高,与Ａ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）,术后７ｄ其含量进一步升高,与Ｂ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论　ＵＶＡＲＣＸＬ后７ｄ内,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量持续增加,推测ＭＭＰ-１可能对ＵＶＡＲＣＸＬ后的角膜基质重塑起一定作用。     

原发性青光眼合并2型糖尿病患者房水及血液中MMP-2及TIMP-2的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶２（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＭＭＰ-２）及金属蛋白酶２组织抑制因子（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＴＩＭＰ-２）与原发性青光眼合并２型糖尿病的关系。方法　研究对象分Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组、Ｅ组、Ｆ组６组,每组３０眼。Ａ组为原发性开角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙｏｐｅｎａｎｇｌｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＯＡＧ）组,Ｂ组为原发性闭角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙａｎｇｌｅｃｌｏ-ｓｕｒｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＡＣＧ）组,Ｃ组为ＰＯＡＧ合并２型糖尿病组,Ｄ组为ＰＡＣＧ合并２型糖尿病组,Ｅ组为糖尿病性白内障组,Ｆ组为年龄相关性白内障组。采用酶联免疫吸附试验检测各组房水及血清中ＴＩＭＰ-２及ＭＭＰ-２的含量,并计算ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值。结果　在６组研究对象的房水中,ＭＭＰ-２浓度在Ａ组为（２４．９２±６．６２）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（３６．８０±１５．０７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（２８.４４±５．７８）μｇ?Ｌ－１,均较Ｆ组的（２２．８７±３.５４）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）;同时房水中ＴＩＭＰ-２浓度在Ａ组为（４３.９２±１９．５７）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（７６．１３±２７．６７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（６１．９２±６．５１）μｇ?Ｌ－１,也均较Ｆ组的（２２.４８±３．５６）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组房水中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值较Ｅ组和Ｆ组显著提高,约为其２倍,但Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组间ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无显著性差异。在６组研究对象的血清中,Ａ组ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度最高,分别为（３９６．７５±４９．３０）μｇ?Ｌ－１和（３３７．６７±６２．７８）μｇ?Ｌ－１,其余各组间ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度无显著性差异。６组研究对象血清中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无明显差异。结论　原发性青光眼患者中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值均存在失衡,说明ＭＭＰ-２的活性变化及ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值与ＰＯＡＧ和ＰＡＣＧ的发病密切相关,但２型糖尿病对原发性青光眼的病程进展无明显影响。     

通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜IKKβ/IKBα/NF-κB通路的作用

目的　观察通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜ＩＫＫβ／ＩＫＢα／ＮＦ-κＢ通路的影响。方法　４０只ＫＫ／Ｕｐｊ-Ａｙ小鼠随机分为模型组、通心络低（１ｇ?ｋｇ－１）、中（２ｇ?ｋｇ－１）、高（４ｇ?ｋｇ－１）剂量组,每组各１０只,１０只Ｃ５７ＢＬ／６小鼠为对照组。通心络组按相应剂量灌胃给药,对照组和模型组给予等体积的蒸馏水,每天１次,连续１２周。测定体质量、空腹血糖值（ｆａｓｔｉｎｇｂｌｏｏｄｇｌｕ-ｃｏｓｅ,ＦＢＧ）,伊文思蓝法（ｅｖａｎｓｂｌｕｅｍｅｔｈｏｄ,ＥＢ）测定血-视网膜屏障的通透性,ＨＥ染色法观察视网膜形态学变化,Ｒｅａｌ-ｔｉｍｅＰＣＲ（ｑＰＣＲ）和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法测定ＩＫＫβ、ＩＫＢα、ＮＦ-κＢｍＲＮＡ和蛋白的表达及Ｐ-ＩＫＢα和核ＮＦ-κＢ蛋白的表达。结果　通心络高剂量组较中、低剂量组细胞结构更致密,排列更有序。通心络低、中、高剂量组ＥＢ含量分别（２０．８２±３．８８）ｎｇ?ｍＬ－１、（１６．４３±２６０）ｎｇ?ｍＬ－１、（１６．１４±２．４２）ｎｇ?ｍＬ－１,较模型组（２５．５３±３．５７）ｎｇ?ｍＬ－１明显下降（均为Ｐ＜０．０５）。通心络中、高剂量组ＩＫＫβｍＲＮＡ和蛋白表达量较模型组显著下降（均为Ｐ＜０．０１）;通心络组ＩＫＢαｍＲＮＡ,通心络中、高剂量组ＩＫＢα蛋白以及Ｐ-ＩＫＢα蛋白的表达均较模型组显著下降（均为Ｐ＜０．０１）,通心络低、中、高剂量组核ＮＦ-κＢ蛋白表达量为０．５２±０．０５、０４３±００５、０３４±０．０４,显著低于模型组（０．６１±０．０７）（均为Ｐ＜０．０５）。结论　通心络胶囊可明显改善ＫＫ／Ｕｐｊ-Ａｙ小鼠视网膜病变,其机制与抑制ＩＫＫβ／ＩＫＢα／ＮＦ-κＢ通路相关。     

rhEGF基因治疗角膜碱烧伤的实验研究

目的探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）基因缓释型滴眼液对免角膜碱烧伤的基因治疗。方法新西兰白兔75只，分为A（rhEGF-pcDNA3．1-脂质体基因滴眼液）、B（rhEGF衍生物滴眼液）、c（pcDNA3.1空质粒-脂质体对照组）三组分别点眼治疗免角膜碱烧伤。每天观察模型眼眼表、荧光素染色并照相。分别测定hEGFmRNA、hEGF和EGFR在角膜组织中的表达。结果A组眼表结膜充血、分泌物、角膜水肿和角膜混浊程度均比B组和C组轻。角膜荧光素染色显示A组角膜上皮的溃疡面积较B组和C组范围小，21d转为阴性。A组基因在行滴眼24h后在全层角膜细胞内可见hEGFmRNA和蛋白质表达，第3d达高峰，细胞阳性率高达95％，随后逐渐降低，21d仍有弱表达。结论rhEGF-PcDNA3．1-脂质体基因滴眼液能够降低角膜的炎症反应，促进角膜上皮细胞的增生，加速角膜碱烧伤的损伤修复过程。     

Amniotic membrane, tear film, corneal, and aqueous levels of ofloxacin in rabbit eyes after amniotic membrane transplantation

PURPOSE: We evaluated ocular penetration and drug levels in tears after topical ofloxacin instillation in rabbit eyes with amniotic membrane transplantation (AMT). METHODS: Forty-eight New Zealand White rabbits were used. In the first set of experiments, 24 rabbits (24 eyes) were divided into four groups according to the epithelial removal or AMT. Topical ofloxacin was instilled four times every 15 minutes. One hour after the last eyedrop, the concentration of ofloxacin in the amniotic membrane, cornea, and aqueous humor was evaluated. In the second set of experiments, 24 rabbits were divided into six groups according to AMT (transplantation of lyophilized or fresh amniotic membrane) or duration of application. Ofloxacin ointment or two drops of ofloxacin were applied to the right eye, and then tear samples were collected after 0.5, 1, 2, 4, and 6 hours for the analysis of ofloxacin concentration. RESULTS: Mean ofloxacin concentrations in the cornea and aqueous humor were statistically higher in deepithelialized cornea regardless of AMT (p < 0.05). The mean tear levels of ofloxacin in the AMT groups were statistically higher than those in non-AMT groups (p < 0.05). There was no statistical significance in the tear level of ofloxacin between lyophilized amniotic membrane groups and fresh amniotic membrane groups nor between 1-hour amniotic membrane-attached groups and 6-hour amniotic membrane-attached groups. CONCLUSION: Amniotic membrane transplantation seems to interfere with the ocular penetration of topical ofloxacin in normal rabbit corneas but enhances ofloxacin penetration in corneas with epithelial defects. The ofloxacin level in tears was higher in eyes with AMT up to 1 hour after topical ofloxacin use. Therefore, it seems that amniotic membrane has some potential to act as an effective drug delivery system.     

更昔洛韦原位胶化滴眼液兔眼部药物动力学及生物利用度研究

目的比较0．2％更昔洛韦滴眼液及其原位胶化滴眼液给兔眼滴用后,更昔洛韦在兔眼泪液、房水以及角膜组织中的经时过程及其药物动力学行为。方法采用健康无眼疾白色家兔,按完全随机化方法分为试验组与对照组。试验组每眼结膜囊内单次给更昔洛韦原位胶化滴眼液50山,对照组动物每眼结膜囊单次给更昔洛韦一般滴眼液50μl。两种制剂滴眼后,在不同时间点分别取泪液、房水以及角膜组织,样品经处理后,采用高效液相色谱法（HPLC）测定不同时间的兔眼泪液、房水及角膜组织中更昔洛韦浓度,药物动力学参数采用非线性最小二乘法进行计算机拟合求得。结果在用药后120min内,试验组各时间点房水中和角膜组织中的药物浓度均明显高于对照组。泪液中在5—10min时试验组药物浓度明显高于对照组。试验组的泪液、房水和角膜药物浓度一时间曲线下面积分别是对照组的2．2、5．5和3．4倍,试验组和对照组药物在房水中的t1／2分别为59和43min,在角膜中分别为223和87min。试验组和对照组房水中药物达峰浓度分别为4．79和0．96μg／ml,达峰时间分别为60和45min。结论更昔洛韦原位胶化滴眼液同一般滴眼液相比,明显延长药物在眼部的滞留时间,增加角膜组织和房水中的药物浓度。显著提高更昔洛韦的眼部生物利用度。     

Induction of genes into the rabbit eye by iontophoresis

PURPOSE: After inducing 6-carboxyfluorescein (6-FAM)-labeled phosphorothioate oligonucleotides (S-ODNs) noninvasively into albino rabbit eyes by iontophoresis, we assessed the transfer of S-ODNs into the ocular tissues, their stability, and the possible presence of injury to the ocular tissues. METHODS: The iontophoresis group consisted of 12 eyes of 6 rabbits and the control group consisted of 4 eyes of 2 rabbits given eye drops containing S-ODNs. Aqueous humor and vitreous humor were collected after iontophoresis, subjected to electrophoresis with a fluorescent DNA sequencer and analyzed by the Gene Scan program. Frozen sections at 10 microns were prepared for observations under a fluorescent microscope. A plasmid 4.7 kbp in size that expresses green fluorescent protein (GFP) was induced into 18 eyes of 9 rabbits by the same procedure. RESULTS: In the iontophoresis group, S-ODNs were detected in the anterior chamber 5 minutes after electrophoresis and in the vitreous 10 minutes after. These S-ODNs maintained the same length as at the initial synthesis. S-ODNs could also be detected in the posterior retina 20 minutes after electrophoresis. No evidence of degeneration or inflammation due to the above procedure was found in the ocular tissues. Fluorescence showing GFP gene expressions were found in the cornea, the anterior chamber angle, and the ciliary subepithelial tissues. CONCLUSIONS: These findings show that iontophoresis is an effective method to induce gene into rabbit eyes.     

几种抗炎滴眼液对兔角膜上皮损伤和愈合影响的实验研究

目的 探讨双氯芬酸钠、妥布霉素地塞米松、普拉洛芬、溴芬酸钠滴眼液频繁点眼对兔角膜上皮的副作用,并观察其常规使用对兔角膜上皮创伤愈合的影响。设计 实验性研究。研究对象80只新西兰大白兔。方法 将兔分为2组,每组40只,一组为频点组（点滴眼液每小时1次）;另一组行直径6 mm的角膜上皮刮除模型并予点滴眼液每日4次。每组兔再随机分为5组,每组8只,分别给予生理盐水、双氯芬酸钠、妥布霉素地塞米松、普拉洛芬、溴芬酸钠滴眼液。选择右眼为观察眼。在角膜上皮损伤前、损伤后12、24、48、72、96小时及第5、6、7天进行观察,并在观察结束后摘除眼球行组织病理学检查。主要指标 眼表刺激症状、角膜上皮损伤、愈合情况和角膜上皮厚度。结果 与生理盐水组比较,四种滴眼液频繁点滴兔眼均未出现明显刺激症状且未见上皮缺损形成,但荧光素染色均可见角膜上皮点染,以第3天明显,且双氯芬酸钠组角膜上皮损伤的积分（9分）明显高于对照组（0分）和溴芬酸钠组（1分）（P<0.05）;病理学检查显示点药5天后,妥布霉素地塞米松组角膜上皮细胞层数（3.67±0.52层）少于对照组（4.17±0.41层）（P<0.05）,其余各用药组与对照组的角膜上皮细胞层数未见明显差异。创伤后兔角膜上皮的平均修复时间在双氯芬酸钠组和妥布霉素地塞米松组分别为（75.0±27.0）小时和（75.0±8.5）小时,而生理盐水、普拉诺芬和溴酚酸钠组分别为（66.0±11.1）小时、（69.0±15.4）小时和 （66.0±11.1）小时,各组比较差异无统计学意义（P>0.05）,但角膜上皮愈合后妥布霉素地塞米松组（2.00±0.00层）和双氯芬酸钠组（2.50±0.55层）上皮细胞的层数少于对照组（5.00±0.00层）（P<0.05）。结论  频繁滴用抗炎滴眼液可导致兔角膜上皮细胞潜在的损伤;双氯芬酸钠和妥布霉素地塞米松滴眼液抑制兔角膜上皮创伤的愈合作用略强于普拉洛芬和溴芬酸钠。     

那他霉素滴眼液治疗角膜外伤后真菌性角膜炎

目的观察5％那他霉素滴眼液治疗角膜外伤后真菌性角膜炎的临床疗效。方法经角膜刮片确诊的真菌性角膜炎的37例（37眼）进行病灶刮除并碘酊烧灼联合国产5％那他霉素滴眼液滴眼,观察疗效。结果37例中30例痊愈,7例好转。结论病灶刮除并碘酊烧灼联合国产5％那他霉素滴眼液治疗轻中度外伤性真菌性角膜炎有效。     

醋酸强的松龙滴眼后在兔眼内的分布

目的观察醋酸强的松龙短期和长期滴眼后在兔眼多种组织中的分布。方法用1g.L-1醋酸强的松龙滴眼液分1d内数次或连续29d长期滴兔眼,分别于滴眼后15min、30min、60min、120min和29d取材,高效液相色谱法测定角膜、房水、晶状体、玻璃体和血液中的激素含量。结果1g.L-1醋酸强的松龙滴眼液滴眼后兔眼不同组织和血液中的激素分布随时间而变化,无论短期或长期连续滴眼在角膜和房水中均获得较高的激素含量,血液和玻璃体中亦有少量进入。短期滴眼后,仅在晶状体赤道和前皮质有少量激素进入,长期局部滴眼时在晶状体各部位均有蓄积。结论1g.L-1醋酸强的松龙局部滴眼后易进入角膜和房水。此结果有助于了解眼部激素治疗和并发症发生的关系。     

The immunosuppressive effects of 0.025% cyclosporin eye drops in alpha cyclodextrin on rabbit corneal allografts]

We reported the ocular penetration of cyclosporin (CYA) and the immunosuppressive effect of rabbit corneal allograft using 0.025% CYA eye drops in alpha-cyclodextrin (alpha-CD). Local application using 0.025% CYA in alpha-CD showed the concentration of 4,133 ng/gr in the cornea, but no detectable levels in aqueous humor and serum. All eyes (10/10) in the CYA eye drop group remained clear for 100 days after corneal allografting. CYA eye drops halted and suppressed the corneal allograft's immune reaction when the treatment was begun early in the initial phase of rejection. These results indicate that 0.025% CYA eye drops in alpha-CD penetrate the cornea 5 to 10 times more than CYA eye drops in lipophilic vehicles. Furthermore, they are extremely effective in suppressing the immune reaction of corneal grafts.     

FK506及其纳米粒的房水药代动力学的实验研究

目的探讨FK506及其纳米粒的房水药代动力学特征。方法42只新西兰白兔分为:(1)FK506纳米胶体液滴眼组(18只兔)和注射组(16只兔):双眼结膜囊滴入或结膜下注射10μgFK506的纳米胶体溶液;(2)不含纳米微粒的FK506滴眼组(8只兔):再分为2个亚组,即双眼结膜囊分别滴入20μg和40μg FK506的滴眼液。不同时间点采集房水,酶联免疫法测定房水中FK506含量,计算药代动力学参数。结果含10μg FK506的纳米胶体溶液结膜下注射和滴眼后房水有效药物浓度可分别维持96 h和16 h;结膜下注射后2 h房水浓度为(1.15±0.25)ng/m、l6~96 h房水浓度为(9.62±2.19)~(2.60±0.21)ng/m l,滴眼16 h内房水浓度为(15.50±3.39)~(2.59±0.83)ng/m l;药代动力学参数分别为:达峰时间(Tm ax)(64.00±13.86)h和(1.25±0.50)h,达峰浓度(Cm ax)(10.16±1.37)ng/m l和(15.52±2.37)ng/m l,曲线下面积(AUC0→t)(612.48±54.39)ng.m l-1.h-1和(152.44±16.74)ng.m l-1.h-1,吸收速率常数(Ka)0.040±0.004和3.790±0.730,平均滞留时间(MRT)(58.53±5.42)h和(8.20±1.28)h。房水中FK506质量浓度呈一室模型。不含纳米微粒的FK506(20μg和40μg)液滴眼后房水有效药物浓度维持均≤4 h;其中含20μgFK506液的Tm ax为1 h,Cm ax为(18.93±6.95)ng/m l;含40μg FK506液的Tm ax为2 h;Cm ax为(28.33±1.31)ng/m。l结论采用FK506纳米粒胶体溶液行结膜下注射和滴眼时均可延长FK506药物在房水中的滞留时间,而且结膜下注射能使房水中维持的有效药物浓度相对较低和时间更长