食品中单核细胞增生李斯特氏菌快速检测方法研究

[目的 ]　建立一种快速准确检验食品中单核细胞增生李斯特氏菌的方法。　 [方法 ]　以miniVIDAS仪结合API系统 ,将该法与传统方法进行比较。　 [结果 ]　该方法能检出 <10个 /mL模拟样品中的单核细胞增生李斯特氏菌 ,与食品中常见的细菌无交叉反应 ,能对非单核细胞增生李斯特氏菌作出正确鉴定。在 4天内能作完全鉴定结果。对 2 2 6份实样的检测 ,检出率为 11.5 %。　 [结论 ]　以miniVIDAS仪结合API系统建立的方法具有特异性好、灵敏度高、快速简便的特点 ,是一种较好的检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法     

78件熟肉制品单核细胞增生性李斯特氏菌污染情况调查

为了解北京市石景山区熟肉制品被单核细胞增生性李斯特氏菌 (以下简称单增李斯特氏菌 )的污染情况 ,1999年对采自市场和加工企业委托检验的 78件熟肉制品进行了单核增生性李斯特氏菌污染情况调查。1　材料与方法78件熟肉制品分为两大类 ,其中灌肠类 5 6件 ,酱卤类 2 2件。单增李斯特氏菌标准菌株 ,由中国商检技术研究所提供。依据ＧＢ4789.3 0 94《食品卫生微生物学检验》规定的检验程序和操作步骤对样品进行检验。2　结果与讨论2 1　 78件熟肉制品单增李斯特氏菌检出情况 :总检出率为7 69% ;总检出单增李斯特氏菌的样品均来自灌肠类 ,其…     

单核细胞增生李斯特氏菌在食品中的污染

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,以下简称单增李氏菌)是李斯特氏菌(Listeria)属中最重要的人类食源性病原菌.该菌广泛存在于自然界如土壤、人和动物的粪便中.因此,该菌很容易污染食品而引起人的食物中毒.目前人们对单增李氏菌污染食品的问题很关注.本文基于近年来一些文献作一简要综述.     

单核细胞增生李斯特菌生物学研究进展

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)隶属于李斯特菌属,根据《伯杰氏鉴定细菌学手册》第9版,将李斯特菌属分为7种:单核细胞增生李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌、威氏李斯特菌、利斯氏李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏李斯特菌。原隶属于李斯特菌属的反硝化李斯特菌已成为一个新属,称为琼斯菌属。对人和动物具有致病力的有LM和伊氏李斯特菌,其余均为非致病型。此外,郭仰霖等[1]研究发现一种产H2S型李斯特菌,对动物具有高度致死性,牲畜病死率高达98·48%,对人存在潜在性威胁。1生物学特性1.1形态与染色李斯特菌(以下简称…     

牛乳中单核细胞增生李斯特氏菌的检出与其卫生学意义

从鲜乳中分离出３株单核细胞增生李斯特氏菌，菌株生物学形态、生理生化特性、细菌学分类均符合李斯特氏菌定义，能强烈溶解动物红细胞，致试验小白鼠死亡。从巴氏消毒乳中未分离出此菌。     

熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌污染调查

单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes,LM）属人畜共患病的病原菌,其致病性强。近几年来许多国家报道从多种食品中分离到LM或因食品污染LM而引起食物中毒爆发事件。     

河南省食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况的调查

单核细胞增生李斯特氏菌是一种严重的人畜共患和食品病原菌，可导致人和动物患脑膜炎、败血症、流产等，死亡率高达３０％～７０％〔１〕。由该菌污染食品，引起食源性李斯特氏菌病（ＦｏｏｄｂｏｒｎｅＬｉｓｔｅｒｉｏｓｉｓ），在国际上已引起广泛关注〔２〕。ＷＨＯ和...     

福州市食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染调查

单核细胞增生李斯特氏菌(以下简称L.m)是一种严重的人畜普遍易感染的致病菌,可导致人和动物患脑膜炎、败血症、流产等,病死率高达30%～70%.该菌在自然界中广泛存在,土壤是主要的贮主,各种野生和家养动物以及健康人群被认为是该菌的携带者.Gray和killinger从37种不同动物和17种禽类中分离到本菌^[1].家庭环境和多种食品均可被污染.我国于1994年制定了食品中L.m检验方法(GB4789-94).     

单核细胞增生李斯特氏菌的研究近况

单核细胞增生李斯特氏菌 (Ｌｉｓｔｅｉｅｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ简称Ｌ .Ｍ) ,在自然界广泛分布 ,以家畜、家禽兽为主要宿主 ,是一种人畜共患和食品病原菌 ,近年来国外报道该菌所致的食物中毒越来越多 ,病死率可高达 30 %～ 70 % [1 ] ,国内也不断有散发病例 ,引起了国内医学界的普遍关注。本文就国内Ｌ .Ｍ的研究近况作一简要综述。1　病原学　目前国际上公认的李斯特氏菌属共有 7个菌种 ,除Ｌ .Ｍ外 ,还有绵羊李斯特氏菌 (Ｌ .ｉｖａｎｖｉｉ)、英诺克李斯特氏菌 (Ｌ .ｉｎｎｏｃｕａ)、威尔斯李斯特氏菌 (Ｌ .ｗｅｌｓｈｉｍｅｒｉ)…     

2013-2014年北京市顺义区熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌致病因子检测分析

目的用PCR方法检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌致病因子,为顺义区熟肉食制品中单增李斯特菌污染危害风险评估提供依据。方法利用细菌培养法从熟肉制品监测样本中分离单增李斯特菌,PCR检测阳性菌株的16sRNA、侵袭蛋白P60、李氏溶血素、迟发型超敏反应蛋白等致病因子。结果 180件食品样本共分离出6株单增李斯特菌;通过PCR检测致病因子,6株细菌都检出16sRNA和迟发型超敏反应蛋白的目的基因,5株检出李氏溶血素和侵袭蛋白目的基因,各引物检测目的基因的敏感性略有差异。结论顺义区熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌污染较为严重,83.33%(5/6)菌株携带李氏溶血素、侵袭蛋白P60等致病因子。     

应用PCR方法检定单核细胞增多性李斯特菌

目的建立单核细胞增多性李斯特菌（单增李斯特菌）快速、敏感、特异的ＰＣＲ诊断方法。方法选取ｈｌｙＡ基因作为靶序列设计一对引物，用该引物对５４株标准李斯特菌和２１株无关菌进行ＰＣＲ扩增，得到进一步验证。采用ＰＣＲ和常规鉴定方法同时对从国内食品分离的３３株李斯特菌进行鉴定。结果可扩增含有保守ＨｉｎｄⅢ切点的７４３ｂｐ片段。表现出极好的单增李斯特菌种特异性。纯培养的检测极限为５５个菌。发现其中１８株用两种方法都鉴定为单增李斯特菌，两种方法的结果完全符合。当用于食物标本检测时，ＰＣＲ反应遭强烈抑制。经过２５小时的增菌培养，对培养物进行化学抽提、纯化的菌体经加热裂解后直接用作ＰＣＲ反应模板，可使抑制作用大大降低。每毫升牛奶人工接种４个菌可用该法特异检出。结论建立了ＰＣＲ方法，可初步用于单增李斯特菌的快速、特异、敏感诊断。     

辽宁省食品中单增李斯特菌监测分析

目的 了解辽宁省各地区市售食品中单核细胞增生李斯特致病菌的污染现状及分布特征,为单核细胞增生李斯特菌的防控工作提供依据。方法 辽宁省14个城市全部纳入检测范围,2010-2014年对六类食品进行采样,并对单核细胞增生李斯特菌进行分离和鉴定。结果 六类5822份食品样品中,检出单核细胞增生李斯特菌109株,阳性率为1.87%;其中生畜禽肉阳性检出率为8.88%,水产品为2.02%,熟肉制品为1.22%,速冻米面食品为0.65%,餐饮食品为0.93%,豆制品均为阴性;2010-2014年单增李斯特菌的阳性检出率依次为1.38% 、0.67% 、1.44% 、1.29% 、4.82%,年均检出率基本保持平稳;受单核细胞增生李斯特菌污染较为严重的食品为生畜禽肉(8.88%)、水产品(2.02%)、熟肉制品(1.22%)。结论 辽宁省各类食品均不同程度受到单核细胞增生李斯特菌污染,尤以生畜禽肉、熟肉制品、水产品污染严重。     

2016—2019年北京市海淀区副溶血性弧菌血清型、毒力基因及分子分型研究

目的　综合分析北京市海淀区副溶血性弧菌血清型分布、毒力基因携带情况和PFGE分型结果,并找出其相关性,从而掌握海淀区副溶血性弧菌的流行特征。方法　对2016—2019年北京市海淀区检出的63株副溶血性弧菌进行血清分型、毒力基因检测和PFGE分型试验。结果　海淀区副溶血性弧菌最优势流行株的血清型为O3:K6,毒力基因组合为tlh+tdh+,占比69.8%（44/63）;63株副溶血性弧菌经PFGE聚类分析得到37种带型,各带型之间相似度为84.8%～100.0%,其中,61株副溶血性弧菌聚集形成5个簇（带型相似度≥90%）;4年间共出现了8次一定时间内（发病日期间隔≤90 d）分离得到的菌株血清型、毒力基因和PFGE带型均一致的情况。结论　海淀区副溶血性弧菌的污染来源相对固定且单一。副溶血性弧菌血清分型和PFGE之间无特殊相关性;毒力基因相同的菌株,PFGE带型相似度更高。     

2013-2016年山东省食品中单核细胞增生李斯特菌的血清型、耐药性及分子分型分析

目的  了解分离于2013-2016年山东省食品中单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)的主要血清型、耐药谱和分子分型特点。 方法  采用微量肉汤稀释法测定LM抗生素敏感性, 使用玻片凝集法和PCR方法确定其血清型, 利用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)进行分子分型。 结果  191株LM对8种抗生素总体基本敏感, 四环素耐药率最高(15/191, 7.85%), 8种抗生素耐药性连续监测4年无差异(P=1.000);血清型1/2a占38.82%(66/170), 1/2b占18.82%(32/170), 1/2c占42.36%(72/170); SDSRZXDZ016、S2014L031和SDSRZX030带型共占33.78%, 呈明显聚集性, 为优势带型; 优势ST型为ST9、ST8和ST121, 占81.18%(69/85), 临床常见ST3, ST7和ST87占8.23%(7/85), 未发现新ST型。 结论  2013-2016年分离于山东省的食源性LM菌株对所测定的大多数抗生素敏感, 但已经发现耐四环素和红霉素菌株; 优势血清型为1/2c和1/2a, 未发现易引起李斯特菌病暴发的4b血清型; SDSRZXDZ016、S2014L031和SDSRZX030为山东省2013-2016年PFGE优势带型; 主要ST型为ST8、ST9和ST121, 临床常见的ST3、ST7和ST87型均从食品中分离到, 应予以重视。     

食品中产单核李斯特菌PCR检测灵敏度的研究

目的:研究PCR检测不同食品中产单核李斯特菌(Lm)的灵敏度。方法:从市场采集牛奶和火腿,向其中以及作为对照的生理盐水中添加不同量的Lm,直接检测或经过高温处理后检测Lm。结果:添加Lm的牛奶、火腿和生理盐水样品,未经高温、经100℃10 m in、经121℃15 m in处理后,PCR检测灵敏度分别为未经高温26.5、265、2.65×103cfu/m l;265、2.65×104、2.65×104cfu/m l;2.65×105、2.65×108、2.65×108cfu/m l。结论:不同食品中Lm PCR检测灵敏度不同,高温处理影响检测灵敏度。     

奶液模拟标本中单增李斯特菌real-time PCR检测方法的建立

目的建立了基于TaqMan探针的real-time PCR技术针对奶液模拟标本中单增李斯特菌的快速检测方法。方法用单增李斯特菌hlyO基因的部分片段作为靶基因,制作标准曲线,定量检测奶液中的单增李斯特菌。结果通过对不同李斯特菌及一些较为常见的致病菌的DNA进行扩增,只有单增李斯特菌能够产生扩增曲线,其余菌株均不产生扩增曲线。单增李斯特菌的检测灵敏度可以达到9copies/反应体系。结论该方法特异性好,灵敏度高,整个实验可在1.5h内完成,可用于食品中单增李斯特菌的快速检测和疫情暴发时的相关病原调查。     

北京市顺义区278件即食类散装熟肉制品的风险监测结果

目的 了解北京市顺义区市售散装熟肉制品的安全卫生现状,为预防和控制食源性疾病的发生,食品安全风险预警提供科学依据。方法 2013-2015年间,对辖区内农贸市场、超市中的市售散装熟肉制品进行连续监测,并按国家标准进行检验和评价。结果 2013-2015年间,共检测散装熟肉制品278件,总超标率为54.7%,检出致病菌28株,检出率为10.1%,检出率最高的食源性致病菌为单核细胞增生李斯特菌(8.3%)、其次为金黄色葡萄球菌(1.1%),沙门氏菌(0.7%),其中有32件样品存在亚硝酸盐超标现象,超标率为11.5%。结论 北京市顺义区市售散装熟肉制品被单增李斯特菌污染比较高,未按标准使用亚硝酸盐的现象依然存在,食品生产企业应严格自律,运输、销售等各部门间执行良好的操作规范,监管部门加强管理,避免食源性疾病的发生,保证居民饮食安全。     

2010-2013年达州市市售食品单增李斯特菌 污染监测结果分析

摘要:目的　了解达州市市售食品单增李斯特菌污染状况,为科学监管提供参考。方法　依照食品国家安全标准“单核细胞增生李斯特氏菌检验”GB 4789.30-2010方法对达州市81类市售食品进行检测。结果　共检测达州市8类市售食品571件,检出单增李斯特菌20株,其中,水产品中单增李斯特菌检出率最高,为20.0%;3类采样地点中,农贸市场销售的食品中单增李斯特菌检出率高,为5.1%;达州市周边县市单增李斯特菌检出率为8.3%,高于达州市主城区食品的检出率。结论　达州市市售食品存在单增李斯特菌污染,但污染严重程度低于我省部分市州,需要对高风险的食品类别和销售地点进行重点监管。     

进口三文鱼单核细胞增生李斯特菌污染检测

目的对2003~2006年由北京口岸挪威进口的三文鱼进行单核细胞增生李斯特菌污染情况监控,并对分离的单核细胞增生李斯特菌进行血清分型。方法采用美国食品药品管理局颁布的检测方法对单核细胞增生李斯特菌进行分离和血清分型。结果挪威三文鱼的单核细胞增生李斯特菌的检出率为1.2%~6.3%,在2003~2006年呈下降趋势;血清分型结果显示,分离自三文鱼的单核细胞增生李斯特菌的血清型主要是1/2a、1/2b和4b型,分别占分离菌株的85%,6%和6%。结论首次对分离自挪威三文鱼的单核细胞增生李斯特菌进行血清分型,所分离的菌株中97%是引起人类李斯特菌病的菌株。