PHA-767491对结直肠癌Colo320细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨PHA-767491对结直肠癌细胞系Colo320细胞增殖和凋亡的影响。方法:配置不同浓度的PHA-767491作用于Colo320细胞，利用CCK-8法检测细胞的增殖能力；流式细胞术Annexin V/PI双染色法检测细胞的凋亡情况。结果:CCK-8结果显示PHA-767491能显著抑制Colo320细胞的增殖能力。流式细胞术检测结果显示PHA-767491能诱导Colo320细胞的凋亡。结论:PHA-767491能够抑制Colo320细胞的增殖并且诱导凋亡。     

PHA-767491对结直肠癌Colo320细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨PHA-767491对结直肠癌细胞系Colo320侵袭和转移的作用.方法:配置不同浓度的PHA-767491作用于Colo320细胞.利用CCK-8法检测细胞的增殖能力确定IC50.Westem blot法检测PHA-767491对Colo320细胞Cdc-7表达的影响.利用划痕实验检测细胞的迁移能力.Transwell小室法检测细胞的侵袭能力.结果:CCK-8法结果显示PHA-767491能显著抑制Colo320细胞的增殖能力,24小时IC50为4.51 μmol./L.Western blot结果显示PHA-767491能显著抑制Colo320细胞Cdc-7的表达.划痕实验结果显示PHA-767491能显著抑制Colo320细胞的迁移能力.Transwell结果显示PHA-767491能抑制Colo320细胞的侵袭能力.结论:PHA-767491能够抑制Colo320细胞的迁移和侵袭.     

α干扰素联合阿糖胞苷对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其机制

目的:研究α干扰素联合阿糖胞苷对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法:以浓度2 000 U/ml的α干扰素与不同浓度的阿糖胞苷作用于体外培养的K562细胞，观察细胞生长状态的变化，检测细胞生长抑制率及细胞凋亡率的变化，并对细胞端粒酶活性及P53蛋白的表达水平进行检测。结果:α干扰素与阿糖胞苷联合应用可显著抑制K562细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。并降低K562细胞端粒酶活性，升高P53蛋白的表达水平，其作用呈现出明显的量效与时效关系。结论:α干扰素与阿糖胞苷联合应用对白血病K562细胞具有明显的生长抑制及诱导凋亡作用，降低细胞端粒酶活性及升高P53蛋白的表达水平是其重要作用机制之一。     

过表达DACT1对白血病K562细胞生物学行为的影响及机制

目的:研究过表达DACT1对白血病K562细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法:用Attractene Transfection试剂在K562细胞中转染DACT1质粒,使其在细胞中过表达,应用CCK-8法、流式细胞术检测过表达DACT1对K562细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。Western blot法检测过表达DACT1后凋亡相关蛋白的变化。结果:过表达DACT1能够抑制K562细胞集落形成,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞发生G0/G1期阻滞。同时可使促凋亡蛋白Bax、caspase-3及caspase-9表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:过表达DACT1可以抑制白血病K562细胞增殖并诱导其凋亡,干扰其增殖周期,可能具有潜在的抑癌作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白有关。     

罗格列酮对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体y(PPART)激动剂罗格列酮(msiglitazone,RGZ)对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法 以不M浓度的RGZ(20～80umol/L)作用于体外培养的K562细胞0,24、48、72 h,应用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率,用膜联蛋白v.碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,并对细胞凋亡前后1'53蛋白的表达水平及Caspse.3活性进行榆测.结果 40~moVL以上的RGZ可显著抑制细胞生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量效与时效关系,在细胞凋亡的同时,P53蛋白的表达水平及Caspse-3活性均明显升高.结论 40umol/L以上的RGZ能显著抑制K562细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,升高半胱天冬蛋白酶(Caspse)-3活性,上涮促凋亡蛋白P53的表达水平是RGZ诱导K562细胞发生凋亡的重要作用机制之一.     

Hsp90抑制剂新生霉素诱导K562细胞凋亡的机制

目的研究Hsp90抑制剂新生霉素（novobiocin,NB）诱导K562细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白（client protein）AKT和ERK功能的影响。方法细胞用NB处理后,采用AO／EB双染后检测细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT和p-ERK的蛋白水平。结果NB能显著抑制K562细胞增殖,IC50是0．4353mM;NB能促进细胞色素C释放入胞浆,激活caspase-3／9的活性,触发K562细胞凋亡;NB能抑制AKT和ERK的功能,使细胞内p-AKT和p-ERK的蛋白含量减少。结论NB可通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡,还可干扰Hsp90伴侣功能阻断增殖信号通路,抑制K562细胞生长。     

PI3K/Akt抑制剂渥曼青霉素对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究PI3K/Akt抑制剂渥曼青霉素对白血病细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法: 以不同浓度的渥曼青霉素作用于人类髓细胞白血病细胞K562,采用MTT法检测细胞增殖活性,单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤形成的“彗星”样拖尾现象,Annexin VFITC/PI双标法检测细胞凋亡,Western blotting、RTPCR检测渥曼青霉素作用K562细胞后总Akt和磷酸化Akt以及NFκB基因及蛋白表达水平的变化。结果: 渥曼青霉素以时间剂量依赖性方式抑制K562细胞的增殖,其24 h的IC50是25 nmol/L。渥曼青霉素诱导K562细胞发生凋亡,其作用呈明显剂量依赖性增强。渥曼青霉素作用后K562细胞DNA链断裂,呈现“彗星”拖尾现象,其尾长与拖尾率显著高于对照组(P<0.01)。渥曼青霉素能同时在蛋白和基因水平,以剂量依赖性方式抑制磷酸化Akt以及NFκB表达,但对总Akt蛋白没有明显影响。结论: 渥曼青霉素以时间和剂量依赖方式明显抑制K562细胞的增殖及诱导其凋亡,其机制可能与其下调磷酸化PI3K/Akt信号通路以及NFκB蛋白表达有关。     

小分子化合物S1抑制K562细胞增殖及其机理研究

目的:探讨小分子化合物S1对K562细胞的抑制作用及机理,为S1治疗慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）提供理论与实验基础。方法:MTT法检测不同浓度S1对K562细胞增殖的抑制作用;应用Chou-Talalay计算联合指数,观察单独应用S1与S1联合阿糖胞苷对K562细胞增殖抑制的协同作用;Western-blotting方法检测不同浓度S1作用后K562细胞系中Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,S1可以抑制K562细胞的增殖（P<0.05）;S1与阿糖胞苷联合应用对K562细胞的生长抑制具有协同作用,联合指数CI<1;S1可下调K562细胞系中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论:小分子化合物可通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达抑制K652细胞的增殖,并与阿糖胞苷具有协同作用。     

脂质体转染survivin反义寡核苷酸对K562细胞增殖及凋亡的作用

目的:观察脂质体转染survivin反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞K562的增殖及凋亡的影响。方法:人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染K562细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;用MTT法观察转染前后对细胞增生的影响;用细胞凋亡检测法(POD)观察细胞凋亡;RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果:(1)survivin ASODN抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性;(2)survivin ASODN可诱导K562细胞的凋亡,凋亡指数呈浓度依赖性;(3)survivinASODN处理组K562细胞survivin mRNA的表达水平显著下降。结论:脂质体转染survivin ASODN能够明显抑制K562细胞增殖,且能诱导细胞凋亡。survivin可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。     

PTEN/PI3K/Akt信号通路对K562细胞凋亡调控的研究

 目的 探讨PTEN/PI3K/Akt信号传导通路对人慢性粒细胞白血病细胞系K562的增殖、凋亡调控的研究及可能的分子作用机制。 方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）及空载体（Ad-GFP）腺病毒,转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562。通过MTT检测细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞增殖指数,同时用细胞光镜、电镜形态等方法检测细胞凋亡,荧光定量PCR（FQ-PCR）检测PTEN及凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-_xL、Bax mRNA水平变化,Western blot检测PTEN及Akt、p-Akt蛋白水平变化。 结果 与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP 转染K562细胞后,细胞增殖受抑,增殖指数降低,凋亡率增加,p-Akt表达降低,抗凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-_xL mRNA表达降低,促凋亡基因Bax mRNA表达增加。 结论 过表达PTEN可能通过抑制PI3K/Akt通路抑制K562细胞系增殖,促进细胞凋亡。     

辛伐他汀引起的Ras-ERK途径改变对K562细胞增殖和凋亡的调节

目的 探讨辛伐他汀作用K562细胞后的Ras-细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路分子水平的变化,以说明辛伐他汀通过引起Ras-ERK信号通路分子水平的变化参与K562细胞细胞增殖和细胞凋亡的调节.方法 体外用辛伐他汀处理慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,用流式细胞术检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化,用逆转录聚合酶链反应检测Ras-ERK信号通路分子在转录水平的变化.结果 辛伐他汀能抑制K562细胞的增殖,使K562细胞停滞在G_0-G_1期,明显诱导K562细胞凋亡,Ras-ERK信号通路的大多数分子在转录水平出现差异表达.结论 辛伐他汀可能通过作用于参与细胞增殖和凋亡的Ras-ERK信号通路抑制K562细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

K562细胞硫氧还蛋白还原酶活力测定及其抑制剂体外抗白血病的初步研究

 目的　探讨慢性粒细胞白血病（CML）细胞株K562中硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的活力及其新型抑制剂乙烷硒啉（BBSKE）体外抗白血病作用。方法　应用胰岛素还原法检测K562细胞株及健康人骨髓单个核细胞中TrxR的活力。运用CCK-8法测定BBSKE对K562细胞的增殖抑制率。应用激光共聚焦显微镜、琼脂糖凝胶电泳以及Annexin Ⅴ-FITC／PI双标记流式细胞术观察BBSKE的抗白血病作用。结果　K562细胞中TrxR的活性明显高于健康人骨髓单个核细胞,10 μmol／L BBSKE与K562细胞作用24 h,激光共聚焦显微镜可见典型的细胞凋亡表现,琼脂糖凝胶电泳后可见典型的DNA“梯”条带出现,流式细胞术检测凋亡率为（10.28±2.74）%;10 μmol／L BBSKE对CML患者原代细胞有诱导凋亡的作用,凋亡率为（5.70±0.48）%。结论　慢性粒细胞白血病细胞株K562中TrxR活力高于健康人骨髓单个核细胞,BBSKE有抑制TrxR活力、抑制K562细胞增殖和诱导凋亡的作用,是治疗CML潜在的有效药物。     

丹参酮ⅡA抑制髓系白血病细胞株增殖及诱导凋亡的研究

目的 探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）对髓系白血病细胞株NB4、K562、THP-1增殖抑制作用及促凋亡作用.方法 将不同浓度TanⅡA与NB4、K562、THP-1细胞共培养24、48、72 h,以柔红霉素为阳性对照,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TanⅡA对白血病细胞株的增殖抑制作用,AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,紫外分光光度法检测Caspase-3蛋白表达.结果 TanⅡA作用24、48、72 h对NB4细胞的IC50值分别为24.11、9.60、7.28 μmol/L,对K562细胞IC50值分别为31.75、11.88、6.81 μmol/L,对THP-1细胞IC50值分别为111.10、32.82、11.82 μmol/L.流式细胞术检测结果显示：与空白对照组相比,TanⅡA与各白血病细胞株作用48 h后,细胞凋亡明显增加,G1期细胞数增加,Caspase-3蛋白表达显著升高（P＜0.05）.结论 TanⅡA对白血病细胞具有增殖抑制与促凋亡作用,其作用强度从高到低依次为NB4、K562、THP-1细胞.其抗癌作用机制可能与阻滞细胞于G1期,上调Caspase-3表达有关.     

PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂对白血病细胞株增殖及其PHLPP表达的影响

目的:观察PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂wortmannin或rapamycin对白血病细胞株增殖及其PHLPP(PH domainleucine-rich repeat protein phosphatase)蛋白表达的影响。方法:以不同浓度的wortmannin或rapamycin分别作用于人类髓细胞白血病细胞系K562、HL-60,采用WST-1法检测细胞的增殖活性,AnnexinⅤ-FITC双染流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblotting法检测细胞中p-Akt、Akt、PHLPP蛋白的表达。结果:Wortmannin以时间以及剂量依赖方式抑制K562、HL-60细胞的增殖(P<0.05),48 h的IC50值分别为(187.6±48.4)、(185.5±48.1)nmol/L。100 nmol/L wortmannin作用于K562细胞、50nmol/L wortmannin作用于HL-60细胞12和24 h后,细胞凋亡率均较对照细胞显著升高[(12.4±0.7)%、(17.6±2.3)%vs(5.0±0.6)%,P<0.05;(11.0±0.2)%、(17.9±1.6)%vs(6.8±0.4)%,P<0.05]。Wortmannin分别作用于K562、HL-60细胞12、24、36 h后,p-Akt、PHLPP的蛋白表达水平明显降低;rapamycin同样可使K562、HL-60细胞中PHLPP蛋白的表达水平降低。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂抑制白血病细胞株增殖的同时降低其PHLPP蛋白的表达。     

3,7-二硝基二苯并溴五环盐诱导K562肿瘤细胞凋亡作用研究

目的：研究３,７－二硝基二苯半溴五环盐对人慢性粒细胞红白血病细胞株Ｋ５６２增殖的影响及其凋亡机理。方法：采用台盼攻拒染法,ＭＴＴ比色法及克隆形成率等方法,并用化学、荧光及电子显微镜观察照相,流式细胞术等方法分析ＤＮＡ断裂的数值。结果：ｃＢｒ对Ｋ５６２具有杀伤作用,可明显抑制Ｋ５６２细胞增殖,呈现时间和剂量效应：克隆形成率测得ＩＣ５０为０．４９７ｍｍｏｌ／Ｌ,流式细胞术测定凋亡率为７０．３４％;荧光显微镜和电镜观察到明显凋亡特征。结论：ｃＢｒ抑制肿瘤增殖是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡与其抑制Evi-1表达有关

背景与目的： 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡的分子机制。 材料与方法： 分别以1、2、4、8 μmol/L的As2O3诱导K562细胞凋亡,每隔24 h采用光镜和电镜观察细胞形态变化,MTT观察细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Evi-1mRNA表达率,ELISA检测细胞内JNK蛋白。 结果： As2O3对K562细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量-时间关系;1、2、4、8 μmol/L的As2O3可使K562细胞发生凋亡,在本实验时间段内随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐升高,诱导细胞凋亡的最佳浓度为4 μmol/L;在此过程中K562细胞的Evi-1基因表达下调,JNK蛋白表达增多,两者跟As2O3浓度存在剂量-时间关系。 结论： As2O3通过抑制K562细胞Evi-1表达,从而激活JNK信号传导途径,促进细胞凋亡,这可能是As2O3促进K562细胞凋亡的机制之一。