喉乳头瘤中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

喉乳头瘤中人乳头瘤病毒ＤＮＡ的ＰＣＲ检测董菁，庄坚，余秀葵（汕头大学医学院微生物学教研室，广东汕头５１５０３１）关键词乳头瘤，人乳头瘤病毒，聚合酶链反应喉乳头瘤（Ｌａｒｙｎｇｅａｌｐａｐｉｌｌｏｍａ，ＬＰ）为耳鼻喉科常见病之一，该病虽可自发缓解，但易...     

不同引物介导的聚合酶链反应对人乳头瘤病毒的快速检测与分型

目的 比较通用引物、型特异性引物在检测人乳头瘤病毒（HPV）DNA中的应用。方法 104例尖锐湿疣组织中提取DNA后分别用HPV6b、11、16、18型特异性引物及通用引物MY09／11、GP5^＋／6^＋经聚合酶链反应（PCR）进行扩增。部分标本采用限制性内切酶Pst I来确定HPV11型。结果 GP5^＋／6^＋的检出率高于MY09／11，但差异无显著性（χ^2=3．78，P〉0．05）。GP5^＋／6^＋检出微量HPV DNA的敏感度高于MY09／11。型特异性引物检测HPV感染优于通用引物MY09／11结合酶切分型。结论 型特异性引物检出HPV11单一型感染显著多于HPV6b型，且发现HPV6b、11型同时感染有逐年增高之趋势。GP5^＋／6^＋引物结合型特异性引物可为临床上检测尖锐湿疣HPV型别提供方便易行的选择。     

荧光定量聚合酶链反应检测人类乳头瘤病毒在尖锐湿疣中的应用

目的：对尖锐湿疣(CA)患者进行人类乳头瘤病毒(HPV)DNA定量测定及HPV分型。方法：用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对146例CA患者疣体组织进行HPV6，11型和HPV 16．18型的分型检测及HPV DNA定量测定。结果：146例CA患者标本中检出HPV 6．11和HPV 16．18型感染阳性143例(97．95％)。其中单独HPV 6．11型阳性104例，占71．24％；单独HPV 16.18型阳性16例，占10．96％；HPV 6．11和HPV 16．18型同时阳性23例，占15．75％；HPV 6.11和HPV 16.18型同时阴性3例，占2．05％。定量测定结果显示：HPV 6.11型患者病毒载量最高1．0×10^8拷贝／mL，最低2．8×10^3拷贝／mL，HPV 16.18型患者病毒载量最高1.0×10^8拷贝／mL，最低2．57×10^4拷贝／mL。结论：CA患者应用FQ-PCR检测HPV阳性率高，并可快速区分高危型及低危型HPV感染，对尖锐湿疣复发及癌变作出可能性预测。     

石蜡包埋尖锐疣组织中人类乳头瘤病毒（HPV）的PCR技术检测

以ＰＣＲ技术检测石蜡包埋尖锐湿疣组织标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ。实验结果：３０例具有典型病理特征标本和１４例病理特征不典型的标本均发现ＨＰＶ－ＤＮＡ６型中或／和１１型；２例诊断为假性湿疣的标本有１例检出ＨＰＶ６型ＤＮＡ；３例生殖道鳞癌有２例检出１６例ＨＰＶ－ＤＮＡ；２例正常组织未检出ＨＰＶ－ＤＮＡ。这一结果表明用石蜡包埋标本在进行ＰＣＲ研究中有特别用途，ＰＣＲ可对尖锐湿疣的诊断提供直接，快速和准确的依据     

聚合酶链反应反向点杂交法鉴定人乳头瘤病毒型别

为了探讨人乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)的分型方法 ,我们将聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术和Ｓａｉｋｉ等[1] 提出的反向点杂交 (ＲＤＢ)技术结合起来 ,对ＨＰＶ进行型别鉴定 ,现报告如下。一、材料及方法1.标本来源 :30份宫颈癌组织标本 ,选自贵阳医学院附属医院病理科 ,为 1995年 1月～ 1997年 12月部分存档活检及手术切除的蜡块标本。2 .菌种及试剂 :内含ＨＰＶ全基因组的 4种ＰＵＣ19质粒 :ＨＰＶ6Ｂ、11、16和 18及特异性寡核苷酸探针 (ＳＳＯ) ,通用引物序列为 :ＧＰ5 5′ ＴＴＴＧＴＴＡＣＴＧＧＴＡＧＡＴＡＣ 3′ ,ＧＰ6 5′ ＧＡＡＡＡＡＴＡ…     

聚合酶链反应检测13例尖锐湿疣初愈病人体表人乳头瘤病毒

聚合酶链反应检测１３例尖锐湿疣初愈病人体表人乳头瘤病毒深圳市龙岗区第二人民医院（５１８１１６）曾惠锋深圳市宝安区西乡人民医院陈锦隆为证实造成尖锐湿疣广为流行可能是来自无症状及体征的携人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）者，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１３例局部痊...     

双温聚合酶链反应检测EB病毒

应用双温循环ＰＣＲ（聚合酶链反应）方法检测鼻咽癌石蜡包埋组织，活检或冰冻组织，患者鼻咽拭子或血液中的ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ）ＤＮＡ。模板ＤＮＡ制备方法简便，无需酚提取步骤，双温ＰＣＲ快速（约需１．５小时）、灵敏、目前已用于临床检验。     

人类乳头状瘤病毒与肺癌的病因关系研究

目的：研究人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）与肺鳞癌发生的病因关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测石蜡包埋肺鳞癌组织标本５０份，肿瘤组织旁鳞状化生上皮标本３０份，正常支气管粘膜３０份中的ＨＰＶＤＮＡ。结果：上述三种标本中，ＨＰＶＤＮＡ的检出率分别为２６％、３７％和１０％，其中以ＨＰＶ１６型所占比例最高。结论：结果表明ＨＰＶ感染与肺鳞癌的发生有一定的联系，鳞状上皮化生似可视为癌前病变，ＰＣＲ技术较体外杂交技术和ＤＮＡ探针有更高的敏感性     

聚合酶链反应检测宫颈癌的前瞻性研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对宫颈癌、宫颈糜烂、正常宫颈组织各５０例进行了人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）的检查。结果提示从宫颈正常组织到癌，ＨＰＶ＿１６、ＨＰＶ＿１８的检出率逐渐升高，尤其ＨＰＶ＿１６呈明显梯度关系，宫颈癌检出率显著高于正常组织及炎症组织（Ｐ＜０．０１）。说明宫颈组织自身ＨＰＶ＿１６的感染率与宫颈癌的发生密切相关，与ＨＰＶ＿１８有一定的联系。通过癌旁组织，宫颈糜烂组织及正常宫颈刮片检测出不同的ＨＰＶ＿１６阳性率的分析，说明ＨＰＶ感染是癌发前的重要因素，指出凡检出ＨＰＶ＿１６阳性者应视为“高危人群”给予长期密切监护治疗。     

女性尖锐湿疣患者疣体表面脱落细胞人类乳头瘤病毒核酸检测

目的:探讨荧光PCR技术检测疣体表面脱落细胞人类乳头瘤病毒核酸(HPVDNA)在女性生殖道尖锐湿疣(CA)诊断中的价值。方法:78例患者经临床和病理检查确诊为CA,采集疣体表面脱落细胞和疣体活组织标本,应用荧光PCR技术检测HPV6/11DNA。结果:(1)78例CA患者治疗前二种标本HPV6/11DNA阳性检出率分别为92.3%(72/78)和96.2%(75/78),二者差异无显著性(χ2=1.33,P>0.05)。(2)去除疣体治疗4周后,61例复诊者中32例疣体复发,表面脱落细胞HPV6/11DNA阳性30例(93.8%);29例未见新疣体出现,原病灶处表面脱落细胞HPV6/11DNA阳性4例(13.8%)。结论:应用荧光PCR技术检测HPVDNA可敏感诊断CA,且可以疣体表面脱落细胞替代疣体组织作为标本,并可监测去除疣体治疗后病毒残留。     

改良共有引物PCR法检测宫颈癌组织中的人乳头瘤病毒

本文采用人乳头瘤病毒高保守序列区共有引物两步温控ＰＣＲ法检测ＨＰＶ，并应用限制性内切酶进行酶切，确定型别，该法省时特异，简便易行，便于基层推广应用，对宫颈癌的普查筛检和回顾性研究将十分有益。     

不同保存时间和反复冻融对人乳头瘤病毒DNA检测结果的影响

目的：研究不同保存时间和反复冻融对宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒（HPV）DNA检测结果的影响。方法收集HPV载量在103 IU/mL、105 IU/mL、107 IU/mL 3个不同水平的标本各5个,混匀后分装,分别在室温下保存1～4周和-20℃保存并反复冻融1、5、10次后,通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测宫颈脱落细胞中HPV-DNA载量,与起始 HPV-DNA载量进行比较分析。结果标本在室温保存4周,高、中、低3个载量水平 HPV-DNA都无明显变化,差异无统计学意义（P＞0．05）。-20℃保存并反复冻融10次,高、中、低3个载量水平HPV-DNA也都无明显变化,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论适宜的细胞保存液能保持宫颈脱落细胞中HPV-DNA的稳定性,能满足临床检测、复查和标本保存的需要。     

妇女高危型人乳头瘤病毒核酸定量检测结果分析

目的探讨阳江地区妇女高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染情况和年龄分布。方法选取2012年5月至2013年4月在该院妇科就诊的1744例妇女宫颈棉拭子标本,采用实时荧光定量PCR技术检测高危型HPVDNA。将筛查人群分成10个年龄组,分别计算各年龄组高危型HPV阳性率。结果1744例妇女中,共检测出高危型HPV阳性者200例,总阳性率为11．5％（200／1744）,高危型HPV阳性者在大于40~45岁和大于35-40岁2个年龄组的分布率较高,分别是25．O％（50／200）和22．5％（45／200）。结论对妇女进行HPV检查,可为宫颈癌的早期诊断、预防及治疗效果提供实验室诊断依据。     

应用实时荧光聚合酶链反应技术与第二代杂交捕获法检测高危亚型人乳头瘤病毒

目的比较实时荧光聚合酶链反应（PCR）与第2代杂交捕获法（HC-Ⅱ）2种人乳头瘤病毒（HPV）检测方法。方法采用实时PCR与HC-Ⅱ分别检测223例宫颈脱落细胞标本中的高危亚型HPV,对结果不一致的标本进行测序分析。结果实时PCR和HC-Ⅱ2种方法检测高危亚型HPV的一致性较好,总符合率为77％,总一致性指数（Kappa指数）为0．538。其中,高度鳞状上皮细胞内病变（HSIL）组二者的符合率为82％,Kappa指数为0．410,一致性比其他组好。结论实时PCR与HC-Ⅱ检测结果一致性较好,尤其对于HSIL患者,可作为临床上HPV高危亚型检测的有效手段。     

双温聚合酶链反应检测EB病毒

应用双温循环ＰＣＲ（聚合酶链反应）方法检测鼻咽癌石蜡包埋组织、活检或冰冻组织、患者鼻咽拭子或血液中的ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒｖｉｒｕｓ）ＤＮＡ。模板ＤＮＡ制备方法简便，无需酚提取步骤；双温ＰＣＲ快速（约需１．５小时）、灵敏。目前已用于临床检验。     

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中HPV分型检测的意义

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中ＨＰＶ分型检测的意义吕火祥钱奕红刘建栋（浙江省人民医院，杭州３１００１４）人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型常引起人类生殖器感染，其中ＨＰＶ１６、１８型具有潜在的致癌性。国内外对ＨＰＶ的检测在尖锐湿疣组织中的型别...     

食管癌癌旁组织与人类乳头状瘤病毒（HPV）感染的关系

本文对287例食管鳞癌之癌旁组织和31例正常食管组织使用组织学评分标准进行了是否受HPV感染的分析,并对癌旁组织的形态学变化与HPV感染的可能关系进行了初步探讨。