头部亚低温对大鼠缺血脑组织的保护作用

目的：探讨头部亚低温对缺血脑组织的保护作用。方法：大鼠全脑缺血后头部置于15－20℃的低温环境中24h,分别与常温组及空白对照组比较体温、脑组织含水量、海马区神经细胞数量和形态学变化。结果：低温组体温下降幅度较大,神经细胞计数与常温组比较差异有显著性,脑组织含水量明显低于常温组和对照组。结论：头部亚低温能明显降低全身温度,减轻脑水肿,保护缺血的脑组织。     

亚低温对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的　研究亚低温对小鼠局灶性脑缺血急性期的保护作用。方法　 2 4只小鼠随机分为亚低温组和常温对照组 ,采用线栓法制作可逆性小鼠大脑中动脉缺血 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)模型 ,缺血 30min 再灌注 2 4h ,亚低温组在MCAO后 1h开始给予 34.5℃ - 35℃亚低温处理 2h。分析两组小鼠脑组织含水量以及神经功能缺陷评分的变化。结果　亚低温组脑组织含水量在亚低温后 3h、2 4h的较常温对照组显著降低 (P <0 .0 5 ) ;亚低温组在亚低温后 3h、6h、12h、2 4h神经功能缺陷评分较对照组显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;脑组织含水量与相应的神经功能缺陷评分具显著相关性 (P <0 .0 5 )。结论　亚低温对小鼠急性期局灶性脑缺血具有降低脑水肿、减轻神经功能缺陷的作用     

不同亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的探讨不同亚低温干预对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用.方法Wistar 7 d龄新生大鼠,随机分为缺氧缺血后29 ℃干预组、31 ℃干预组、34 ℃干预组、常温(37 ℃)恢复组、正常对照组(假结扎组).各组取20只动物于缺氧缺血后78 h处死,测定脑组织含水量及微管相关蛋白-2免疫组化染色;10只于生后42 d用迷宫实验检测其学习和记忆能力.结果与常温恢复组相比亚低温干预各组大鼠脑组织含水量及脑损伤程度显著降低,且随着温度的降低,脑组织含水量及脑损伤程度逐渐降低(P<0.05).亚低温干预各组大鼠学习和记忆能力显著高于常温恢复组(P<0.05),且随着温度的降低逐渐提高(P<0.05).结论亚低温干预可减轻新生大鼠HIBD,且随着温度的降低,效果越好,29 ℃亚低温干预短期效果优于31 ℃、34 ℃低温干预.     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达及细胞凋亡的影响

[目的]观察亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨亚低温对脑神经细胞保护作用的机制。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶脑缺血再灌注模型,于缺血2 h再灌注,再灌注后3、6、12、24、72 h和7 d处死。其中亚低温组大鼠于缺血后30 min实施病灶侧脑亚低温并持续4 h。采用HE染色观察神经细胞形态学改变,免疫组化法检测脑组织HSP70表达,TUNEL法检测凋亡细胞。[结果]正常组及假手术组均未见明显病理改变;常温缺血组梗死灶明显,大量神经元坏死消失;亚低温缺血组未见明显梗死灶,但可见神经元固缩。正常组及假手术组未见或偶见HSP70阳性细胞;常温缺血组HSP70阳性细胞较多;与常温缺血组相比亚低温缺血组在相应时间点均明显减少(P<0.05)。常温缺血组TUNEL阳性细胞数随再灌注时间的延长而逐渐增多,至72 h达高峰;与常温缺血组相比,亚低温缺血组各时间点均明显减少(P<0.05)。[结论]亚低温对大鼠缺血再灌注损伤脑有保护作用,通过降低HSP70的表达和减少细胞凋亡可能是其保护机制之一。     

不同脑温及银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨不同脑温状态下银杏叶提取物（GBE）对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法：将大鼠随机分为常温假手术组、常温脑缺血对照组、亚低温脑缺血组、轻度高温银杏叶组、常温银杏叶组、亚低温银杏叶组,测定各组大鼠缺血脑组织SOD、GSH-Px、MDA含量,采用光镜观察各组大鼠缺血脑组织病理改变特点。结果：亚低温银杏叶组、亚低温脑缺血组、常温银杏叶组、常温脑缺血对照组、轻度高温银杏叶组大鼠缺血脑组织病理损伤呈依次加重趋势,与SOD、GSH-Px、MDA水平失衡有关。结论：①GBE对脑缺血的保护作用受不同脑温影响,37～37.5℃常温状态下GBE的神经保护作用有限,与脑温较高时GBE对氧自由基的清除能力有一定限度有关,而32～32.5℃亚低温状态下GBE对脑缺血的保护作用增强,与亚低温状态下GBE对氧自由基的清除能力增强有关。②亚低温和GBE联合干预,增强清除氧自由基的能力及增强对脑缺血的保护,可能不是单一因素的作用,而是亚低温作用为主,两种干预因素共同协同作用的结果。     

亚低温治疗家兔脑外伤后c-fos蛋白变化的实验研究

目的 :研究脑外伤后c fos基因表达及全身亚低温治疗脑外伤后c fos基因表达的变化。方法 :将成年雄性家兔利用颅脑外伤自由落体打击器造成一侧脑外伤动物模型 ,伤后动物被分为常温组及亚低温组 ,常温组家兔体温维持在 3 7 0～ 3 7.5℃ ,亚低温组在外伤后 10min立即行亚低温治疗 15 0min(温度控制在 3 1 5～ 3 2 .5℃ ) ,6h后处死各组家兔 ,采用免疫组化方法及计算机图像分析检测伤灶及周围脑组织c fos蛋白的表达。结果 :全身亚低温治疗 15 0min后 ,损伤灶及周围神经细胞c fos蛋白表达较常温组显著减少。结论 :兔脑外伤后全身亚低温治疗能够抑制c fos基因的表达 ,全身亚低温脑保护作用的机制 ,可能与抑制c fos基因表达有关     

不同脑温状态银杏叶提取物对大鼠缺血脑组织氧自由基的影响

目的 探讨不同脑温状态下银杏叶提取物(GBE)对大鼠缺血脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的影响.方法 建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,诱导目标脑温,测定各组缺血脑组织SOD、GSH-Px和MDA含量.结果 ①与常温假手术组比较,常温脑缺血对照组及常温银杏叶组SOD和GSH-Px水平显著降低(均P<0.001),MDA水平显著增高(均P<0.001).②与常温脑缺血对照组比较,常温银杏叶组及亚低温脑缺血组SOD和GSH-Px水平显著增高(均P<0.001),MDA水平显著降低(均P<0.001).③与常温银杏叶组比较,轻度高温银杏叶组SOD和GSH-Px水平显著降低(均P<0.001),MDA水平显著增高(P<0.001);亚低温脑缺血组及亚低温银杏叶组SOD和GSH-Px水平显著增高(均P<0.001),MDA水平显著降低(P<0.001).④与亚低温脑缺血组比较,亚低温银杏叶组SOD、GSH-Px及MDA水平差异均无显著性(均P>0.05).结论 ①脑缺血/再灌注过程中,GBE修复缺血脑组织抗氧化酶/氧自由基失衡的作用受不同脑温的影响.常温状态下,GBE有修复抗氧化酶/氧自由基失衡的作用,从而对脑缺血有保护作用;轻度高温状态下,GBE无此作用;亚低温状态下,GBE的作用增强,从而增强对脑缺血的保护作用.②亚低温和GBE联合干预,修复抗氧化酶/氧自由基失衡,增强对脑缺血的保护作用,可能不是单一因素作用的结果.而是亚低温作用为主,两种干预因素共同作用的结果.     

全身亚低温对脑缺血再灌流损伤神经细胞凋亡及Caspase-3的影响

目的 探讨亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及Caspase-3基因表达的影响。方法 应用原位末端标记(TUNEL)和原位杂交技术分别观察亚低温组、常温组脑缺血再灌流不同时间点神经细胞凋亡的变化及Caspase-3 mRNA的表达。结果 (1)常温组脑缺血再灌流后凋亡神经细胞主要分布于缺血周围区，随着再灌流时间的延长凋亡细胞数逐渐增加，至24小时达高峰，2天后开始下降，14天时仍高于假手术组；(2)亚低温组脑缺血再灌流后，凋亡神经细胞也主要位于缺血周围区，数量相对较少，其变化规律与常温组相似，同一时间点相比较，亚低温组均显著低于常温组；(3)常温组脑缺血再灌流2小时后，神经细胞Caspase-3 mRNA开始表达，并随着再灌流时间的延长而增强，24小时达高峰，2天后逐渐下降，至14天略高于假手术组；(4)亚低温组脑缺血再灌流后，神经细胞Caspase-3 mRNA的表达也主要位于缺血周围区，其变化规律与常温组相似，同一时间点相比较，亚低温组均显著低于常温组。结论 脑缺血再灌流后。缺血周围区神经细胞的凋亡是一个动态的渐进过程，Caspase-3基因在介导脑缺血损伤神经元凋亡过程中起关键作用。亚低温对短暂性脑缺血后的神经元凋亡有明显的抑制作用，亚低温可能通过Caspase-3 mRNA途径抵抗脑缺血损伤。     

亚低温对大鼠外伤性脑损伤保护作用的实验研究

目的研究亚低温对大鼠外伤性脑损伤急性期的保护作用。方法27只大鼠随机分为假手术组、亚低温组和常温对照组。采用改进的Feeney自由落体法制作重型外伤性颅脑损伤模型,体表降温法在伤后30 min内达到亚低温目标,检测三组大鼠脑组织的病理变化、含水量以及神经功能缺陷评分。结果亚低温组大鼠脑组织在治疗后24 h的含水量较对照常温组显著降低（P〈0.05）;病理组织学检查见亚低温组大鼠脑损伤较常温组改善;亚低温组大鼠在6 h的神经功能缺陷评分显著低于常温组（P〈0.05）。结论亚低温具有减轻大鼠外伤性颅脑损伤急性期脑水肿及神经功能缺陷的作用。     

亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑保护的实验研究

目的研究亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及对大脑海马CA1区脑红蛋白(NGB)表达的影响。方法用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将132只SD大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,缺血组分别于缺血3h再灌注3、6、12、24、48、72h和1周处死,假手术组于24h时间点处死,亚低温缺血组于缺血后10min实施全身亚低温并持续3h。处死大鼠前进行神经功能缺损评分,在再灌注6、24、72h进行脑梗死体积的测定,免疫组织化学染色观察NGB的表达。结果 (1)与常温缺血组比较,亚低温缺血组神经功能缺损评分低(P<0.05),脑梗死体积小(P<0.05)。(2)常温缺血组大脑海马CA1区NGB表达在再灌注3h开始增加,24h达高峰,而后逐渐下降,1周时接近假手术组水平;亚低温缺血组NGB表达与之相似。除再灌注1周外,两组大脑海马CA1区NGB表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);除再灌注1周外,亚低温缺血组NGB表达均高于常温缺血组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温对局灶性缺血脑组织具有保护作用,促进海马CA1区NGB的表达可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

生后6~12h开始亚低温治疗对新生儿缺氧缺血性脑病预后的影响

目的：探讨生后6~12 h 开始选择性头部亚低温治疗对新生儿缺氧缺血性脑病预后的影响。方法将中度缺氧缺血性脑病新生儿40例随机分为对照组与观察组：对照组（常温组）18例,观察组（生后6~12 h 实施亚低温）22例。所有患儿给予相同的支持对症治疗。观察组患儿给予选择性头部亚低温治疗,维持肛温（34.0±0.5）℃,持续72 h,患儿在3、6月龄时用中国标准化的贝来量表（ CDCC）测智力发育指数（ MDI）和运动发育指数（PDI）。结果两组患儿的 MDl 分别为73.2±11.2和80.7±10.3。PDl 分别为77.2±9.3和84.5±10.2。观察组 MDl、PDl 均高于对照组,差异有统计学意义（P 〈0.05）。结论中度缺氧缺血性脑病新生儿生后6~12 h 开始选择性头部亚低温治疗仍可有不同程度的神经保护作用。     

亚低温对脑梗死后AQP4表达及血脑屏障通透性的影响

目的 观察脑梗死后亚低温干预对大鼠水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达及血脑屏障(blood brain-barrier,BBB)通透性的影响,探讨亚低温对缺血性脑水肿的作用机制.方法 线栓法制造大鼠局灶性脑缺血模型,同时给予亚低温治疗.用免疫组织化学方法检测AQP4和IgG的表达.用干湿重法检测脑水含量.结果 再灌注损伤后脑内AQP4蛋白水平迅速降低,至再灌注后12h达最低水平,至再灌注7d时接近正常水平.亚低温组AQP4、IgG表达及脑水含量均明显低于常温组.结论 ①脑梗死后,AQP4表达水平迅速下降,可能是机体的一种保护性反应;②亚低温能有效抑制脑梗死后AQP4的表达和血脑屏障通透性的增加.     

亚低温联合胸腺喷丁对脑出血患者预后的影响

目的观察亚低温联合胸腺喷丁对脑出血患者预后的影响。方法急性脑出血患者60例,随机分为亚低温联合胸腺喷丁治疗组(观察组)和亚低温治疗组(对照组)各30例,对照组于发病后24 h内行亚低温治疗及常规治疗,观察组在对照组治疗方法的基础上同时给予胸腺喷丁静脉滴注,2组均于入院的第1、3、7天取外周静脉血采用流式细胞术检测CD3+、CD4+、CD8+细胞及CD4+/CD8+比值,并观察2组患者院内感染情况及预后。结果入院第1天2组患者CD3+、CD4+、CD8+细胞及CD4+/CD8+比较差异无统计学意义(P>0.05);入院第3天、第7天观察组CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),2组CD8+细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组仅CD4+细胞在入院第7天与第1天比较升高,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CD3+细胞第7天较第1天升高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组CD4+细胞在第1、3、7天比较差异均有统计学意义(P<0.05),CD4+/CD8+第3天、第7天高于第1天,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的颅内感染率、肺部感染率、泌尿系感染率及多部位感染率均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组和对照组在预后等级分布上差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温联合胸腺喷丁治疗脑出血可以改善T细胞亚群受损情况,降低院内感染发生率,对预后有明显影响。     

选择性头部降温对缺氧缺血性脑病新生儿血清NSE的影响

目的：探讨选择性头部亚低温治疗对缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE）新生儿血清神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）的影响。方法：将40例中重度HIE患儿随机分为选择性头部亚低温治疗组（亚低温组）和常规治疗对照组（治疗对照组）各20例。二组均采用常规治疗,亚低温组出生6h内采用选择性头部降温方法,维持鼻咽部温度（34.0±0.5）℃,肛温（35.5±0.5）℃,持续72h。并以20例正常足月新生儿做为正常对照组,采用放射免疫分析法,检测生后3天血清NSE水平。采用独立样本t检验进行统计学分析。结果：亚低温组和治疗对照组患儿NSE水平明显高于正常对照组;治疗后亚低温组NSE水平显著低于治疗对照组。结论：NSE水平是反映脑组织损伤的较好的生化指标,临床上早期用亚低温治疗中、重度HIE有较好的疗效。     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠认知和脑组织形态的改善

目的观察丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠认知和脑组织神经元形态异常的改善作用。方法持久性结扎大鼠两侧颈总动脉3个月,制备慢性脑缺血模型。实验分4组,每组8只:假手术组、模型组、丁基苯酞30和120 mg/kg组。造模后第46天开始给药,每天1次,连续45 d后,用水迷宫定位航行和空间探索实验检测大鼠的空间认知能力。同时,取皮层和海马,用HE染色法观察神经元形态。结果水迷宫定位航行实验中,随着训练天数的增加,模型组逃避潜伏期逐渐长于假手术组;与模型组比较,丁基苯酞两个组的潜伏期逐渐缩短。空间探索实验显示,模型组大鼠的目标象限活动时间明显少于假手术组(P<0.01),而与模型组比较,丁基苯酞2个剂量明显延长大鼠的目标象限活动时间(P<0.05)。同时,HE染色显示模型组大鼠脑组织神经元形态明显异常,而该药对神经元形态异常有明显的改善。结论丁基苯酞能够改善慢性脑缺血大鼠的认知缺陷,并改善脑组织神经元的形态异常。     

局灶低温治疗大鼠创伤性脑水肿及对乳酸的影响

目的：观察局灶低温治疗对大鼠脑创伤后脑水肿的作用和对乳酸含量的影响。方法：SD大鼠168只,随机分成6组,每组28只：A组,假手术对照组;B组,脑外伤模型对照组;C组,0℃水局灶低温治疗组;D组,10℃水局灶低温治疗组;E组,20℃水局灶低温治疗组;F组,25℃水局灶低温治疗组。除A组外各组动物均按Feeney方法制作重度脑创伤模型,B组伤后不予治疗,C,D,E,F 4组伤后30 min开始给予局灶低温治疗,20～30 min局灶脑温降至3l℃并维持3 h。所有动物分别于伤后l,3,5,7 d处死,取伤区脑组织测水含量及乳酸含量。结果：B组各时间点脑组织水含量和乳酸含量比A组升高(1,3,5,7 d组均P<0.05)。C,D,E,F组与B组相比,C组水含量和乳酸含量无统计学意义(P>0.05),其余3组均降低(P<0.05)。局灶低温各组间相比,C组水含量、乳酸含量最高(P<0.05)。结论：对大鼠脑外伤后脑水肿,0℃水局灶低温治疗无效果,10℃,20℃,25℃水局灶低温治疗有效,以20℃和25℃水局灶低温的效果更好。减少乳酸堆积、缓解酸中毒可能是其作用机制之一。     

抗癫痫药丙戊酸钠对大鼠正常脑组织的放射保护作用

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)对大鼠正常脑组织的放射保护作用。方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为VPA组、放疗组、联合组和对照组,每组12只。VPA组给予假照射和VPA注射(150 mg/kg,2次/d,共5 d);放疗组给予X线照射和生理盐水注射(150 mg/kg,2次/d,共5 d);联合组给予X线照射和VPA注射(150 mg/kg,2次/d,共5 d);对照组给予假照射和生理盐水注射(150 mg/kg,2次/d,共5 d)。放疗后24 h,采用免疫组化法检测脑组织Caspase-3的表达观察细胞凋亡。记录大鼠自VPA注射后2周内体质量变化。放疗后6个月,电镜观察脑组织神经元细胞核的改变。结果 免疫组化结果显示,放疗组与联合组相比可见明显Caspase-3表达。放疗组平均体质量明显低于其他各组,与联合组相比,体质量明显下降(P<0.05)。电镜结果显示,放疗组神经元核膜表面凹凸不平,不规整,甚至有损伤;联合组神经元核膜表面轻度不规整、没有损伤;对照组和VPA组神经元未见异常表现。结论 VPA对正常脑组织具有放射保护作用,其机制与抑制X线诱导的正常细胞凋亡有关。     

急性创伤性脑水肿NO变化及低温保护效应的研究

目的 探讨急性创伤性脑水肿后NO变化及低温脑保护作用。方法 建立急性脑创伤模型,分常温组和低温组,按不同时段取伤侧颈内静脉血清测NO及伤侧脑组织测脑水含量。结果脑损伤后30min脑组织水肿及颈内静脉血清NO开始增高,8h达高峰。低温组NO及脑水含量均较常温相应组低。结论脑损伤后脑水肿发展与血清NO增加具有同步效应,低温(31～32℃)对创伤性脑水肿则有保护作用。     

全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆的影响

目的:探讨缺血性脑损伤对大鼠空间分辨学习和记忆能力的影响。方法:17只Wistar雄性大鼠随机分成两组,缺血组采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法(4VO)建立大鼠全脑缺血模型,假手术组则只手术不缺血。缺血第8天开始利用Morris水迷宫测试来检测其空间分辨学习和记忆的能力。然后进行灌注固定,经石蜡切片和尼氏染色,最后在显微镜下观察海马CA1区神经元的存活情况,从而确定全脑缺血模型制作的成功与否。结果:缺血性脑损伤组大鼠CA1区约90%神经元死亡,未死亡的神经元散在分布,其形态与正常神经元形态稍异,而假手术组海马CA1区神经元排列整齐,并未发生死亡,说明模型制作成功;在Morris水迷宫测试前4天的训练中,缺血性脑损伤组大鼠平均找到平台时间明显多于假手术组大鼠所用时间,经统计分析两组间有显著性差异(P<0.05),而两组间的游泳速度未见显著性差异(P>0.05);第5天撤掉平台后,缺血性脑损伤组大鼠在原平台所在象限所走的路程占总路程的比例也明显比假手术组少(P<0.05)。说明与假手术组相比,缺血性脑损伤组大鼠的空间分辨学习与记忆能力明显降低。结论:缺血性脑损伤使大鼠的学习、记忆功能受到损害。