哈族食管鳞癌中PLCE1基因启动子甲基化水平的实验研究

目的探讨PLCE1基因启动子甲基化与食管鳞癌发生发展的关系。方法分别用免疫组化(IHC)和甲基化特异PCR(MSP)方法检测51例新疆哈萨克族食管鳞癌及相应癌旁正常组织中PLCE1蛋白表达水平及其启动子甲基化水平,分析其与病理资料相关性;分别用Western blot及MSP检测食管鳞癌细胞在5-aza-dC作用前后PLCE1蛋白表达及启动子甲基化变化情况。结果新疆哈萨克族食管鳞癌组织中PLCE1蛋白表达高于癌旁正常组织,而其基因甲基化水平则较低(P 0.001),且蛋白高表达的癌组织中其甲基化水平低于蛋白低表达的癌组织(P=0.028),PLCE1甲基化水平与其蛋白表达水平具有明显的相关性(χ~2=4.791,P=0.028),并与患者的淋巴结及远处转移(χ~2=7.242,P=0.027)和TNM分期(χ~2=7.883,P=0.019)明显相关;在食管鳞癌细胞系中PLCE1甲基化程度同样与蛋白表达水平成反比,5-aza-dC处理可抑制TE-1和Kyse150的PLCE1甲基化,提高其蛋白表达。结论食管鳞癌组织中PLCE1甲基化低与其蛋白表达高、淋巴结和远处转移及TNM分期相关,5-aza-dC处理可抑制PLCE1甲基化程度,增高其蛋白表达。     

食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白的表达与病理学特征的关系

目的:探究食管鳞癌组织中L型氨基酸转运载体-1(Large neutral amino acid transporter-1,LAT-1)、巨噬细胞刺激蛋白受体(Recepteur d''origine nanta,RON)蛋白的表达与病理学特征的关系.方法:回顾性分析2020年7月至2022年7月本院收治的食管鳞癌患者113例为研究对象.采用免疫组织化学法(Envision法)对其食管鳞癌组织和癌旁组织中的LAT-1、RON蛋白表达水平进行检测.对比不同食管鳞癌组织与癌旁组织间LAT-1、RON蛋白表达水平;对比不同临床特征食管鳞癌组织间LAT-1、RON蛋白表达情况;分析食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白表达相关性.结果:LAT-1在癌旁组织中无阳性表达,但在食管鳞癌组织中有阳性表达.食管鳞癌组织LAT-1、RON蛋白阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05).食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白表达在不同分化程度、临床TNM分期及淋巴结转移中表达均有差异(P<0.05).Spearman轶相关分析结果显示在食管鳞癌组织中,LAT-1与RON蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论:LAT-1、RON蛋白与食管鳞癌临床病理特征显著相关,并能作为一种新的预后判断指标和治疗靶点,为临床病情诊断及预后评估提供参考.     

食管鳞癌中hTERT表达、DNA含量与细胞增殖周期的关系

目的探讨食管鳞癌中hTERT表达与细胞DNA含量、细胞增殖周期的关系。方法采用免疫组化检测hTERT表达,流式细胞术检测hTERT和DNA含量及增殖指数。结果(1)癌组hTERT阳性率和荧光指数(FI)显著高于癌旁组(P<0.01);(2)癌组DNA指数(DI)和异倍体率均高于癌旁组(P<0.05),癌组增殖指数(PI)显著高于癌旁组(P<0.01)。结论hTERT过量表达、DNA含量增加和增殖指数升高与食管鳞癌的发生、发展密切相关。     

食管鳞癌中ERK及其活化形式蛋白的表达及意义

目的研究食管鳞癌及食管黏膜组织中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其活化形式蛋白(P-ERK)的表达情况,并与食管癌临床病理特征进行相关性分析,探讨ERK及其活化形式蛋白在食管鳞癌发生发展中的作用。方法采用Western blotting法检测食管癌组织与黏膜组织中ERK及P-ERK蛋白的表达情况,并分别从食管鳞癌患者年龄、性别、病理分化程度、临床分期及淋巴结有无转移等方面进行相关性研究。同时,采用免疫组化SP法从食管鳞癌病理分化程度、临床分期及淋巴结有无转移方面进一步检测ERK及P-ERK与食管鳞癌的相关性。结果由Western blotting法结果可以看出,ERK及P-ERK在食管癌组织中表达明显增强,而在食管黏膜组织中则呈低表达,差异均有统计学意义(P<0.01)。ERK在患者的年龄、性别和分化程度各组间的表达差异无显著性(P>0.05),而在临床分期、淋巴结转移各组间差异有显著性(P<0.05),且T3-4期患者ERK及P-ERK蛋白的表达强度明显高于T1-2期患者;食管鳞癌淋巴结发生转移患者ERK及P-ERK蛋白的表达强度明...     

食管鳞状细胞癌中HGF表达与肿瘤血管形成的关系

目的研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤血管形成之间的关系。方法应用免疫组化PV两步法检测64例食管鳞癌组织及20例癌旁正常组织中HGF及CD34的表达情况,并计数微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 HGF在食管鳞癌中的表达(76.6%)高于癌旁正常组织(15.0%,P<0.05),且与肿瘤直径、分化程度及淋巴结转移有关;食管鳞癌组织的MVD值(38.87±17.55)/mm2明显高于癌旁正常组织的MVD值(15.10±3.76)/mm2(P<0.05),肿瘤直径>5 cm,有淋巴结转移及侵袭较深的肿瘤MVD值高(P<0.05);食管鳞癌中HGF阳性组MVD值为(42.25±16.50)/mm2,高于HGF阴性组MVD值(27.89±16.83)/mm2(P=0.005),且MVD值与HGF的表达之间具有相关性。结论 HGF的高表达与食管鳞癌的恶性生物学行为及肿瘤血管生成关系密切,HGF可作为食管鳞癌生物治疗的潜在靶点。     

PTEN和mTOR在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的观察食管鳞癌组织中PTEN与m TOR的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化染色检测148例食管鳞癌组织、癌旁组织及其正常食管组织中PTEN和m TOR表达,分析其与常见临床病理特征的关系。结果PTEN在癌组织中阳性表达率为43.9%,癌旁组织为67.6%,而正常组织为93.2%,食管癌组织中PTEN表达率均低于癌旁组织及正常食管黏膜组织,差异有统计学意义（P〈0.05）;m TOR在癌组织中阳性表达率为85.8%,癌旁组织为35.1%,而正常组织为3.4%,食管癌组织中m TOR表达明显高于癌旁组织及正常食管组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。PTEN的表达与m TOR的表达强度呈负相关（P〈0.05）。m TOR表达与性别、年龄、肿瘤长度差异无统计学意义（P〉0.05）,而与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度以及有无淋巴结转移上差异无统计学意义（P〈0.05）。结论 m TOR信号通路的激活与PTEN的抑制,可能在食管鳞癌的发生发展中起重要的作用,PTEN低表达与m TOR高表达与肿瘤恶性程度有关,两者联合检测可能有助于预后的判断。     

高危型HPV感染与食管鳞癌组织中HLA-G表达的相关性研究

目的研究人乳头瘤状病毒（HPV）在新乡地区食管鳞癌、癌旁组织中的感染情况和人类白细胞抗原系统G（HLA-G）表达的关系。方法采用基因芯片技术检测114例食管鳞癌组织及癌旁食管正常组织中HPV亚型感染情况,免疫组化SP法检测HLA-G的表达。结果 114例食管鳞癌组织及癌旁食管正常组织中HPV感染阳性率分别为63.2%和6.0%,HLA-G的检出率分别为51.8%、0%,差异均有统计学意义（P〈0.05）;食管鳞癌存在HPV16、18和52三种亚型感染,其中HPV16感染率最高,HPV52感染率最低。结论新乡地区食管鳞癌组织以HPV16、18和52亚型感染为主;HPV感染和HLA-G蛋白表达与食管鳞癌分化程度正相关;HPV感染食管鳞癌组织与HLA-G蛋白表达存在一定的相关性,可能提示与食管鳞癌发生有较密切关系。     

食管鳞癌组织中TIG1基因甲基化及其mRNA表达的研究

 目的：探讨他扎罗汀诱导基因1（tazarotene-induced gene-1, TIG1）基因甲基化及表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测43例食管鳞癌组织、20例癌旁组织和15例正常组织中TIG1基因甲基化状态;实时荧光定量PCR法法检测TIG1 mRNA的表达。结果：食管鳞癌组织TIG1基因启动子甲基化率为25.6%（11/43）,癌旁组织5.0%（1/20）,正常组织中未检测到其甲基化,差异有统计学意义（P<0.05）;其甲基化水平与患者性别、年龄、肿瘤生长部位和分化程度无关（P>0.05）,但与患者TNM分期（P<0.01）及淋巴结转移（P<0.05）有关。鳞癌组织TIG1 mRNA显著低于癌旁组织（P<0.05）及正常组织（P<0.01）,甲基化组织TIGI mRNA表达显著低于非甲基化组织（P<0.01）。结论：甲基化可能是食管鳞癌中TIG1基因失活的重要机制,与患者病理分期及淋巴结转移有关。     

长链非编码RNA WIF1-1在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)WIF1-1的表达水平,并评估其对患者预后的价值.方法:使用实时荧光定量PCR检测50例食管鳞状细胞癌组织样本及其对应同源的癌旁组织样本中lncRNA WIF1-1的表达水平,分析临床病理特征及其与患者预后的相关性.结果:食管鳞状细胞癌组织中lncRNA WIF1-1的表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001).进一步分析发现:lncRNA WIF1-1的表达水平与食管鳞状细胞癌的淋巴结转移、TNM分期和临床分期之间呈负相关.对预后资料分析发现:lncRNA WIF1-1表达水平较低的食管鳞癌患者的总生存时间(overall survival,OS)以及无进展生存期(progression-free survival,PFS)均较短.单因素及多因素分析结果显示:lncRNA WIF1-1可作为食管鳞状细胞癌患者OS和PFS的独立危险因素.结论:lncRNA WIF1-1可能在食管鳞状细胞癌中发挥抑癌基因的作用,其表达量与患者预后具有相关性,有可能成为食管鳞状细胞癌的治疗靶点.     

食管癌中p73蛋白的表达及与临床病理特征的关系

目的:检测p73蛋白在食管癌组织中的表达情况,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化检测p73蛋白在53例食管磷癌及癌旁组织中的表达情况。结果:p73蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为84.9%(45/53),而在癌旁食管粘膜组织中的阳性表达率为32.7%(17/53),两者比较有显著性差异(P<0.01)。p73蛋白的表达与食管磷癌分化程度密切相关(P<0.05),其在低分化癌组织中的阳性表达率(94.7%)显著高于在高分化癌组织中的阳性表达率(61.5%)。p73蛋白的表达与食管磷癌的TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均无明显相关性(P>0.05)。结论:p73蛋白在食管磷癌组织中呈高表达,表明可能参与食管癌的发生。     

Smac、Caspase-9在食管癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨caspase-9、Smac蛋白在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。 方法　采用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌病例的癌组织、正常组织及癌旁组织进行caspase-9和Smac蛋白半定量免疫组化分析,用TUNEL法检测石蜡切片中肿瘤细胞凋亡情况。 结果　（1）Smac 、caspase-9在食管正常组织、鳞癌组织、癌旁组织的阳性表达率分别为92.50%,63.75%,77.50%和85.00%,58.75%,72.5%,差异均有统计学意义。（2）Smac表达阳性的51例中,Caspase-9蛋白阳性表达47例,占92.16%（47/51）,两者表达有极强的关联性。(3)在Smac蛋白表达阳性组平均癌细胞凋亡率(19.186±1.331),明显高于Smac蛋白表达阴性组(10.316±1.661);与Caspase-9蛋白表达阳性组比较无差异。47例　Smac 与Caspase-9蛋白共表达阳性组平均细胞凋亡率（26.819±1.273）明显高于Smac 与Caspase-9蛋白共表达阴性组（6.154±1.631）。 结论　Smac、caspase-9在食管癌中的表达呈明显的正相关,二者共同参与了食管鳞癌的发生、发展,在食管癌细胞的凋亡中发挥正反馈调节作用。     

NOB1mRNA在人食管鳞癌组织的表达及其临床意义

目的 探讨NOB1 mRNA(nin one binding protein)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法 运用RT-PCR方法检测19例ESCC患者癌组织及对应的癌旁组织中NOB1 mRNA的表达情况,分...     

Expression of long non-coding RNA ZEB1-AS1 in esophageal squamous cell carcinoma and its correlation with tumor progression and patient survival

Background: LncRNA ZEB1-AS1 has been identified as a tumor oncogene in hepatocellular carcinoma. However, the clinical significance in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is still unknown. The aim of this study was to explore ZEB1-AS1 expression levels and evaluated its clinical significance in ESCC patients. Methods: LNCRNA ZEB1-AS1 expression was determined by quantitative real-time PCR (QRT-PCR) in 87 pairs of ESCC specimens and adjacent non-tumor tissues. Then, the association of ZEB1-AS1 expression with clinicopathological factors or survival of ESCC patients were determined. Results: LNCRNA ZEB1-AS1 was found up-regulated in ESCC tissues compared to adjacent non-tumor tissues. Increased lncRNA ZEB1-AS1 expression was significantly associated with tumor grade, depth of invasion, and lymph node metastasis. Kaplan-Meier analysis revealed that ESCC patients with high ZEB1-AS1 expression had a poorer overall survival and disease-free survival. Furthermore, multivariate analysis suggested that ZEB1-AS1 expression was identified as an independent prognostic factor in patients with ESCC. Conclusion: These results indicated that lncRNA ZEB1-AS1 was associated with tumor progression and could be an independent prognostic factor for ESCC patients.     

受体相互作用蛋白1RIP1在食管鳞癌的表达及意义

目的明确受体相互作用蛋白1 RIP1在人食管鳞癌组织中的表达及与临床病理因素、病人预后的关系。方法使用免疫组化SP法检测76例人食管鳞癌组织和相对应的癌旁正常食管黏膜中RIP1的表达状况,并分析与临床病理因素如病人的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、临床分期、分级、有无淋巴结转移的关系,并进行了随访。结果76例食管鳞癌中RIP1阳性的病例有53例,占69.7%,癌旁组织RIP1阳性的只有19例,占25%,差异有统计学意义,RIP1的阳性表达与病人的性别、年龄、肿瘤大小无关,与浸润深度、临床分期、分级、有无淋巴结转移成正相关,随访结果表明:食管鳞癌中RIP1阳性率越高,病人生存期越短,预后越差,RIP1蛋白的表达是个预后不良的独立因素。结论 RIP1在食管鳞癌中表达增高,可能参与食管鳞癌的发生。     

Overexpression of CD9 correlates with tumor stage and lymph node metastasis in esophageal squamous cell carcinoma

Objective: Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is one of the leading causes of cancer deaths worldwide. CD9 has been reported to play a critical role in cell motility, growth and metastasis of multiple cancers. The present study investigated the clinicopathological features of CD9, and its biological characteristics in ESCC. Methods: Fifteen normal esophageal tissue specimens, fifty-three ESCC adjacent tissues and one hundred and four ESCC tissues were included in this study. Using immunohistochemistry (IHC), the expression levels of CD9 were evaluated among different samples. And its clinicopathological parameters and its prognostic factors were analyzed. Western blotting was used to measure CD9 expression and colony formation was performed to determine the effect of CD9 on cell growth in ESCC TE-1 cells. Results: Compared with normal esophageal tissues and tumor adjacent tissues, CD9 expression level is significantly higher in ESCC tissues. CD9 expression correlated with tumor stage (P = 0.022) and lymph node metastasis (P = 0.019) in ESCC patients. Furthermore, the small interfering RNA-mediated silencing of CD9 expression in TE-1 cells resulted in increased proliferation as evidenced by increased colony number and colony size. Conclusion: CD9 expression is upregulated in ESCC tissues and its expression is correlated with tumor stage and lymph node metastasis in ESCC patients. CD9 suppresses the proliferation of TE-1 cells. CD9 may present a potential in tumor progression in ESCC.     

食管鳞状细胞癌中SFRP基因家族启动子区甲基化状态的检测

目的: 检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中Wnt通路拮抗基因家族分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)基因的甲基化状态,探讨其与食管鳞癌发生的关系。方法: 应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)及RT-PCR的方法检测78例食管鳞癌及相应癌旁非肿瘤组织中 SFRP1 、 SFRP2 、 SFRP4 和 SFRP5 基因的甲基化状态及mRNA表达情况,并分析其与Wnt通路中心因子β-catenin蛋白表达的关系。结果: 在食管鳞癌组织中, SFRP1 、 SFRP2 、 SFRP4 和 SFRP5 基因的甲基化率分别为65.4%(51/78)、69.2%(54/78)、62.8%(49/78)和52.6%(41/78),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01)。这4个基因的甲基化率与肿瘤患者的组织学分级及临床分期均无关,但它们共同发生甲基化的频率则与临床分期显著相关(P<0.05)。这4个基因mRNA的阳性表达率分别为42.3%(33/78)、46.2%(36/78)、50.0%(39/78)和39.7%(31/78),均明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.01)。在发生甲基化的食管癌组织中这4个基因的mRNA表达阳性率及β-catenin蛋白的异质表达率均明显低于未发生甲基化的癌组织,且差异显著(P<0.05)。结论: 食管鳞癌组织中 SFRP1 、 SFRP2 、 SFRP4 和 SFRP5 基因均呈高甲基化状态,并有可能通过Wnt/β-catenin信号转导通路参与了食管癌的发生。联合检测SFRP基因家族甲基化状态对于食管癌的预后判断有一定指导意义。     

FEZ1基因在食管癌变过程中的作用

目的探讨FEZ1基因在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其与患者预后的关系。方法采用Western blot和免疫组化法分析FEZ1基因在ESCC中的表达情况,应用SPSS 13.0软件分析其与临床病理资料及预后的关系。结果 FEZ1蛋白阳性表达在食管癌中的表达与浸润深度、肿瘤大小相关(P<0.05);而与肿瘤组织分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05)。正常食管组织中FEZ1的蛋白表达(4.3±0.39)明显高于食管癌组织中(1.6±0.25),且差异有显著性(P<0.05)。FEZ1的高表达提示患者的5年生存率高。结论 FEZ1基因在食管癌的发生、发展过程中起着重要的作用;FEZ1基因在食管癌中可能是候选的抑癌基因。     

食管鳞癌组织中miRNAs差异表达谱的筛选及研究

目的 筛选并鉴定在食管鳞癌（ESCC）及癌旁组织中miRNAs的差异表达,为进一步阐明其在ESCC发病机制中的作用奠定基础。方法 选取在邯郸市第一医院行食管癌切除术患者新鲜的鳞癌组织及癌旁正常组织,各3例,抽提总RNA,利用miRNAs芯片筛选其中差异表达的miRNAs,并对miR-106b-3p通过进一步RT-qPCR 技术进行验证。结果 miRNAs芯片从配对组织中共筛检出62个差异表达的miRNAs,其中41个miRNAs表达上调,21个miRNAs表达下调,鳞癌组织与癌旁正常组织中差异表达的miRNAs比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。miR-106b-3p在ESCC组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,与芯片结果一致。结论 食管鳞癌组织中miRNAs的差异表达为进一步研究miRNAs在ESCC发病中的作用奠定了基础;miR-106b-3p的高表达可能与ESCC的发生、发展有关。     

Significance of elevated ERK expression and its positive correlation with EGFR in Kazakh patients with esophageal squamous cell carcinoma

Extracellular signal-regulated kinases (ERKs) are activated by the MAPK pathway. ERKs are downstream effectors of the epidermal growth factor receptor (EGFR), which belongs to the receptor tyrosine kinases family. Studies on the activation of the EGFR-ERK pathway in Kazakh patients with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) have not been reported. Using immunohistochemical staining on tissue microarrays, we investigated the protein expression of EGFR and ERK in 90 ethnic Kazakh patients with ESCC and 48 adjacent normal esophageal tissues (NETs). EGFR and ERK1 expression was localized in the cytoplasm, whereas ERK2 expression was localized in the nucleus. Both were more highly expression in the ESCC tissues than in the NETs, and the difference was considered significant (P = 0.003, 0.002, and 0.005, respectively). ERK1 and EGFR expression was positively correlated with lymph nodes metastasis (P = 0.011 and 0.013, respectively). ERK1 staining was also significantly associated with tumor-node-metastases stage of ESCC (P = 0.044). ERK2 staining was significantly associated with Histological grade (P = 0.012). Furthermore, ERK1 and EGFR expression in the ESCC tissues were positively correlated (r = 0.413, P < 0.001); EGFR was more highly expressed in the ESCC tissues with high ERK1 expression than in the ESCC tissues with low ERK1 expression (4.95 ± 0.57 vs. 3.21 ± 0.35, P = 0.01). This study is thus far the first to demonstrate the correlation between EGFR overexpression and ERK overexpression in Kazakh patients with ESCC. This correlation suggests that the EGFR-ERK signaling pathway participates in ESCC progression and can thus be used as a prognostic marker.