胰岛细胞移植前预处理的研究进展

在移植前预先对移植胰岛细胞进行技术处理，可以降低免疫原性，增强胰岛细胞功能，从而使胰岛细胞移植真正成为有效控制血糖代谢、减少和改善糖尿病并发症、进而达到根治糖尿病的治疗手段。     

成人胰岛细胞的分离

目的　探讨成人胰岛细胞的分离及胰腺冷缺血时间与胰岛细胞活率的关系。方法　采取胰、肾联合切取 ,经腹主动脉插管 ,用自制的灌注器以高渗枸橼酸盐嘌呤溶液 (HC A液 ) 15 0 0～2 0 0 0ml进行原位灌洗。将肾与胰腺、十二肠、脾分离 ,采用胶原酶P消化胰腺 ,分离并纯化胰岛细胞 ,以双硫腙及丫腚橙染色 ,测定所得到的胰岛细胞的纯度及活率。结果　胰腺的冷缺血时间为 2 .5～ 8h ,温缺血时间为 0～ 3min。胰岛收获量为 (2 .38± 0 .6 7)× 10 3 IEQ/g ,纯化后胰岛细胞的活率为 19%～ 83% ,冷保存指数 (或输注指数 )为 9.8～ 6 6 .4。胰岛细胞的活率与胰腺的冷缺血时间呈负相关 ,冷保存指数和胰岛细胞活率呈负相关。结论　以高渗枸橼酸盐嘌呤溶液灌洗、胶原酶P消化胰腺所得到的胰岛细胞活率高 ,但胰腺的冷缺血时间不宜超过 5h。     

紫外线对大鼠胰岛树突状细胞的影响

目的探讨紫外线对大鼠胰岛树突状细胞(Dendriticcell,DC)结构和功能的影响.方法分离大鼠胰岛经紫外线照射后利用免疫组织化学(ABC)方法显示胰岛Ia+DC,透射电镜观察其超微结构,同时将处理的胰岛移植于糖尿病小鼠模型.结果分离胰岛经紫外线照射后内分泌细胞变化不明显,Ia+DC的突起缩短,着色变浅,电镜观察胞质中形成抗原肽-MHCⅡ复合物的小泡状结构及吞饮小泡减少,异种移植实验胰岛移植存活期10.54±2.06天,紫外线照射组存活期17.58±1.88天,差异有显著性(P＜0.05).结论适量的紫外线照射对胰岛内分泌细胞无明显损伤,DC结构受损,功能受到抑制.异种移植实验表明紫外线照射后胰岛移植物存活期延长.     

紫外线对大鼠胰岛树突状细胞的影响

目的　探讨紫外线对大鼠胰岛树突状细胞 (Dendriticcell,DC)结构和功能的影响。　方法　分离大鼠胰岛经紫外线照射后利用免疫组织化学 (ABC)方法显示胰岛Ia DC ,透射电镜观察其超微结构 ,同时将处理的胰岛移植于糖尿病小鼠模型。　结果　分离胰岛经紫外线照射后内分泌细胞变化不明显 ,Ia DC的突起缩短 ,着色变浅 ,电镜观察胞质中形成抗原肽 MHCⅡ复合物的小泡状结构及吞饮小泡减少 ,异种移植实验胰岛移植存活期 10 .5 4± 2 .0 6天 ,紫外线照射组存活期 17.5 8±1.88天 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。　结论　适量的紫外线照射对胰岛内分泌细胞无明显损伤 ,DC结构受损 ,功能受到抑制。异种移植实验表明紫外线照射后胰岛移植物存活期延长。     

胰岛细胞移植前预处理的研究进展

在移植前预先对移植胰岛细胞进行技术处理,可以降低免疫原性,增强胰岛细胞功能,从而使胰岛细胞移植真正成为有效控制血糖代谢、减少和改善糖尿病并发症、进而达到根治糖尿病的治疗手段。     

胰岛细胞移植的研究进展

胰岛细胞移植治疗糖尿病存在两个障碍，组织来源不足和免疫排斥反应。分子生物学、组织工程学、免疫学、临床药理学等相关学科的发展为上述问题的解决提供了可能。本文就胰岛细胞移植研究的最新进展情况作一综述。     

胰岛细胞移植的研究进展

糖尿病是一种严重危害人类身体健康和生活质量的全球性常见病,针对1型和部分2型糖尿病患者,胰岛移植将是比较彻底的治疗方法.本研究对包括胰岛细胞移植的分类,胰岛移植物的制备、保存及鉴定,移植部位的选择,免疫排斥机制,基因技术的应用及临床病例治疗技术等方面详细阐述了胰岛细胞移植目前的研究现状.随着分子生物学技术和相关学科迅速发展,细胞混合培养,转基因技术,β细胞株的建立,异源性胰岛细胞移植等一系列方法兴起,胰岛移植必将给彻底治愈1型糖尿病带来新的前景.     

异体大鼠骨髓单个核细胞胰岛细胞移植治疗糖尿病

目的 观察异体骨髓单个核细胞和胰岛细胞通过肝脏和静脉途径移植后对糖尿病大鼠的治疗作用.方法 密度梯度离心法分离胰岛细胞,淋巴细胞分离液分离骨髓单个核细胞,28只糖尿病大鼠模型随机分为A、B、C、D组,A组在肝脏被膜下多点注射1000个胰岛细胞,B组在体外将1000个胰岛细胞和1×107个骨髓单个核细胞混合后在肝脏被膜下多点注射,C组通过尾静脉注射1000个胰岛细胞,D组在体外将1000个胰岛细胞和1×107个骨髓单个核细胞混合后通过尾静脉注射,移植后于不同时间点尾静脉测定随机血糖,比较不同细胞组合和移植途径之间对糖尿病的治疗作用.结果 A、B组血糖于术后3 d内开始下降,A组血糖可降至正常水平(7.98±2.28)mmol/L,血糖维持正常水平(3.71±0.95)d,B组降至(7.72±1. 75)mmol/L可维持(4.86±1.06)d,静脉移植组血糖于术后4 d内降至正常(7.35±1.40)mmol/L,可维持(7.85±1.46)d,D组静脉注射胰岛于4 d起效(7.00±0.83)mmol/L,血糖可降至正常水平可维持(14.10±1.21)d,各组间血糖随时间变化的趋势及维持正常水平的时间具有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓单个核细胞和胰岛混合细胞通过尾静脉移植对大鼠血糖维持正常时间最长,血糖控制水平最理想.     

兔胰岛细胞团颅内移植治疗糖尿病的研究

将新鲜制备的成年兔胰岛样细胞团经腰椎穿刺注入脊髓腔，采取小剂量多次颅内移植治疗糖尿病兔。术后不用免疫抑制剂，不用外源性胰岛素。结果１０只糖尿病兔在胰岛细胞团颅内移植后，３只显效，２只有效，无排斥反应及神经系统异常。     

微囊化新生猪胰岛细胞体外培养的研究

目的 探讨海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊（ＡＰＡ微胶囊）微囊化新生猪胰岛细胞作为异种移值供体来源的可能。方法 利用微囊技术包膜新生猪胰岛细胞本外培养，放免疫法检测培养液中胰岛素含量，比较微囊化及未微囊化新生猪胰岛素分泌能力和胰岛素刺激释放试验、组织学检查。结果 二者差异无显著意义，均具有良好的生物活性。结论 微囊包膜后胰岛细胞的生物活性和分泌功能良好，微囊包膜新生猪胰岛细胞可能是临床异种胰     

缺血预处理对大鼠移植小肠细胞外基质的保护作用

目的　研究缺血预处理 (IP )对大鼠移植小肠细胞外基质的早期保护作用。方法　SD大鼠随机分为假手术组 (S组 ,n =6) ,小肠移植组 (SBT组 ,n =12 ) ,缺血预处理加小肠移植组 (IPSBT ,n =12 )。建立大鼠异位节段小肠移植模型。各组移植肠冷保存 /再灌注 1h取材。检测层粘连蛋白(LN)的表达。电镜观察小肠上皮细胞基底膜结构的变化。结果　S组、SBT组和IPSBT组LN表达灰度值分别为 3 9.5 2± 2 .60 ,13 .5 3± 0 .44和 2 5 .40± 1.79,SBT组明显低于S组 (P <0 .0 5 ) ,而IPSBT组明显高于SBT组 (P <0 .0 5 )。电镜显示 ,S组小肠上皮基底膜呈线性均匀连续完整的结构 ;SBT组上皮基底膜断裂、甚至缺失 ;IPSBT组上皮基底膜破坏程度比SBT组为轻。结论　移植小肠细胞外基质是冷保存 /再灌注损伤靶点 ;IP对细胞外基质冷保存 /再灌注损伤有明显的保护作用。     

三种不同部位移植胰岛细胞治疗糖尿病

目的 对比通过肝脏、静脉、胰腺三种途径移植胰岛细胞对糖尿病大鼠的治疗作用.方法 24只糖尿病大鼠模型随机分为A、B、C组,A组在肝脏被膜下多点移植1000个胰岛细胞,B组通过尾静脉移植1000个胰岛细胞,C组在胰腺被膜下移植1000个胰岛细胞,于不同时间点测定大鼠随机血糖,对比大鼠血糖变化趋势及维持正常的时间.结果 A组大鼠血精于术后3 d内开始下降,血糖可降至正常水平(7.98±2.28)mmol/L,血糖维持正常水平(3.71±0.95)d,B组移植后24 h 血糖降至正常水平(7.35±1.40)mmol/L,可维持(7.85±1.46)d,C组移植后24 h血糖降至正常水平(7.06±2.11)mmol/L,可维持(24.90±2.60)d,不同部位移植对大鼠血糖水平变化的影响不同,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在胰腺被膜下移植胰岛细胞血糖维持正常时间最长,是一个较理想的移植部位.

Abstract：

Objective To study the curative effectiveness of pancreatic islets transplantation through the liver, tail vein and pancreas. Methods Twenty-four diabetic rats were randomly divided into groups 1,2, 3. The rats in group Ⅰ were transplanted with 1000 pancreatic islets beneath the liver capsule,those in group 2 with 1000 pancreatic islets through tail vein, and those in group 3 with 1000 pancreatic islets beneath the pancreas capsule. Plasma glucose levels at different time points were determined and compared. Results In group 1, plasma glucose levels were reduced at the 3rd day post-transplantation,reached the normal level (7.98 ±2. 28) mmol/L and maintain (3.71 ±0. 95) days. Group 2 start to activate after 24 h. Plasma glucose level reach to (7.35 ± 1.40) mmol/L and maintain (7.85 ± 1.46) days.Group 3 start to activate after 24 h. Plasma glucose level reach to ( 7.06 ± 2. 11 ) mmol/L and maintain (24. 90 ± 2. 60 ) days. There is statistical significance in plasma glucose level and maintain normal time after transplantation pancreatic islet in different sites ( P ＜ 0. 05 ). Conclusion Transplantation pancreatic islets beneath the pancreas capsule maintain plasma glucose for the longest time. The pancreas is a ideal transplantation site.     

胰岛细胞移植的现状与进展

胰岛细胞移植是目前糖尿病治疗中的一个研究热点,也是有望从根本上治疗糖尿病的一种方法。自2000年加拿大Edmonton报到了对7例1型糖尿病患者成功施行胰岛细胞移植术以来,国内外掀起了胰岛细胞移植的研究热潮,在动物实验和临床研究方面取得了一定的突破。本文就胰岛细胞移植的现状与进展进行简要的综述。     

胰岛细胞移植的研究进展(文献综述)

胰岛细胞移植治疗糖尿病存在两个障碍 ,组织来源不足和免疫排斥反应。分子生物学、组织工程学、免疫学、临床药理学等相关学科的发展为上述问题的解决提供了可能。本文就胰岛细胞移植研究的最新进展情况作一综述     

胰岛移植的临床应用概况

胰岛移植作为一种β细胞替代疗法,近年来取得了相当大的进展.因为其具有简单、安全、经济、易推广等优点,已在一些移植中心应用于临床,成为有效的Ⅰ型糖尿病治疗方法之一.在以基础研究为指导的临床应用中,相对于胰岛素替代疗法、胰腺移植,胰岛移植表现出更好的前景和独特优势,但其远期疗效不尽理想.     

胰岛移植的临床应用概况

胰岛移植作为一种β细胞替代疗法,近年来取得了相当大的进展。因为其具有简单、安全、经济、易推广等优点,已在一些移植中心应用于临床,成为有效的I型糖尿病治疗方法之一。在以基础研究为指导的临床应用中,相对于胰岛素替代疗法、胰腺移植,胰岛移植表现出更好的前景和独特优势,但其远期疗效不尽理想。     

微囊化胰岛与滋养细胞对鼠胰岛功能和活性的影响

目的 研究微囊化滋养细胞对胰岛功能和活性的影响.方法 对单独、分别和联合微囊组胰岛素含量及不同条件(5.6、16.7mmol/L葡萄糖、16.7mmol/L葡萄糖+10mmol/L茶碱)下胰岛素释放试验进行检测;监测3组(每组8例)小鼠平均空腹血糖(FIG),将胰岛的功能和活性进行对照.结果 体外,联合组胰岛素含量(288±25)、(292±29)、(203±21)mmol/L及在胰岛素释放试验中的反应性(306±25)、(335±26)、(378±32)mmol/L均好于另两组,差异有统计学意义(P<0.01);移植后,单独组(27.3 d)、分别组(30.5 d)维持FPG<6.0的时间明显少于联合组(66.8 d),联合组恢复高血糖状态的平均时间为91.7 d,差异有统计学意义(P<0.01).结论 滋养细胞与胰岛联合微囊化能够改善胰岛的存活状况,提高其生物活性,并维持其分泌功能.     

热缺血时间对大鼠胰岛结构和功能的影响

目的 探讨胰腺热缺血时间对胰岛形态和功能的影响。方法 以Lewis大鼠的胰腺为研究对象，分别在大鼠被处死后立即、25min后及30min后以胶原配灌注，然后分离、纯化胰岛，观察各组所得胰岛的形态、活性、胰岛当量数(IEQ)与功能。结果 各组均可获得形态完好的胰岛，胰岛细胞活率在85％以上；各组IEQ的差异元显著性；热缺血时间25min组与立即灌注组相比，纯化后的胰岛细胞在低糖与高糖刺激下，胰岛素分泌量的差异元显著性，而热缺血时间30min组与立即灌注组相比，胰岛素的分泌能力显著降低(P＜0．01)。结论 热缺血时间不超过25min时，分离、纯化后得到的胰岛在结构与功能方面的改变不显著，若热缺血时间延长到30min时，胰岛功能出现减退。