肺炎衣原体套式聚合酶链式反应检测研究

目的 探讨肺炎衣原体（Ｃｐｎ）的套式聚合酶链式反应（ｎＰＣＲ）检测技术。方法 根据Ｃａｍｐｂｅｌｌ克隆的ＣｐｎＤＮＡ序列设计套式引物，并建立ｎＰＣＲ反应体系。结果 Ｃｐｎ经ｎＰＣＲ扩增出现３７８ｂｐ的阳性条带，而沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体以及其他用作特异性试验的微生物均不能扩增。３例阳性标本经ＤＮＡ测序与Ｃｐｎ（ＣＷＬ－２９株）序列完全一致。Ｃｐｎ ｎＰＣＲ之灵敏度比传统ＰＣＲ高１００倍。各种呼吸系     

PCR 与 DIFA 检测沙眼衣原体的比较研究

用所建立的沙眼衣原体质粒引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测１１６例泌尿生殖道沙眼衣原体，并与直接免疫荧光法（ＤＩＦＡ）进行比较。结果ＰＣＲ阳性３８例，ＤＩＦＡ阳性的３２例中有３１例ＰＣＲ阳性。ＰＣＲ敏感性为９６．９％，特异性为９１．７％。ＰＣＲ阳性者于治疗结束１～２周后复诊２１例，其中４例ＰＣＲ仍然阳性。结果显示，ＰＣＲ可快速、敏感、特异地检测泌尿生殖道沙眼衣原体ＤＮＡ，然而对治疗后短期内复诊患者，似乎不宜仅以ＰＣＲ阳性结果作为重复治疗的依据。     

PCR与DIFA检测沙眼衣原体的比较研究

用所建立的沙眼衣原体质粒引物聚合酶链反应技术检测１１６例泌尿生殖道沙眼衣原体，并与直接免疫荧光法进行比较。结果ＰＣＲ阳性３８例，ＤＩＦＡ阳性的３２例中有３１例ＰＣＲ阳性。ＣＰＲ敏感性为９６．９％，特异性为９．１７％。ＰＣＲ阳性者于治疗结束１－２财后复诊２１例，其中４例ＰＣＲ仍然阳性。     

胎膜早破与沙眼衣原体感染的关系探讨

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１５４例晚期孕妇宫分泌物的沙眼衣原体－核糖核酸（ＣＴ－ＤＮＡ）进行了测定，结果表明，胎膜早破（ＰＲＯＭ）孕妇宫颈分泌物ＣＴ－ＤＮＡ阳性率（４３．７５％）明显高于胎膜未破孕妇（８．６２％），Ｐ〈０．００１，提示，ＰＲＯＭ与沙眼衣原体（ＣＴ）感染有关，孕期防治ＣＴ感染，对预防ＰＲＯＭ有重要意义。     

聚合酶链反应检测新生儿衣原体感染

目的用聚合酶链反应检测新生儿衣原体感染状况。方法参照文献报道的沙眼衣原体及肺炎衣原体基因序列,分别设计一对引物,采用ＰＣＲ法检测住院新生儿衣原体感染。结果因呼吸道感染住院的１２３名新生儿的咽拭子标本,沙眼衣原体及肺炎衣原体感染率分别为１３．８％和４．９％。结论ＰＣＲ检测沙眼衣原体及肺炎衣原体感染具有特异、敏感、快速的特点,可为临床诊断提供科学依据。     

聚合酶链反应检测泌尿生殖道沙眼衣原体

聚合酶链反应检测泌尿生殖道沙眼衣原体莒县皮肤病防治站（２７６５００）关继富临沂市人民医院王家银，关向宏，战雪梅，李雪梅沙眼衣原体（ｃｔ）所致的泌尿生殖道感染为非淋球菌性性传播疾病。我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１０８例泌尿生殖道炎症患者的标本进...     

套式聚合酶链反应检测结核杆菌DNA

套式聚合酶链反应检测结核杆菌ＤＮＡ王晓东孟昭智陶静郑传文刘德鸿聚合酶链反应（ＰＣＲ）以其特异、敏感、快速的特点从众多结核杆菌检查方法中脱颖而出。套式ＰＣＲ经套式引物进行前后两次扩增，进一步提高了结核杆菌检测的特异性与敏感性。材料和方法：ＤＮＡ模板提取...     

PCR结合索氏转移杂交在结核病诊断中的应用

利用Ｈｅｒｍａｎｓ引物扩增插入序列ＩＳ９８６所得之２４５ｂｐ片断是一结核分支杆菌复合体特异性片断，采用随机引物法将地戈辛标记该片断。将纯化结核分支杆菌ＤＮＡ经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，索氏转移后与该探针杂交，检测灵敏度可达１ｆｇＤＮＡ。通过对７９例痰标本、１４例结核性胸腔积液及２６例结核性关节腔积液的ＰＣＲ和ＤＮＡ索氏杂交试验比较，认为采用２４５ｂｐ探针，将ＤＮＡ索氏转移杂交与ＰＣＲ体外扩增相结合，不仅提高了结核病基因诊断的敏感性，同时也提高了诊断的特异性。     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义中国医科大学附属第一医院消化内科（沈阳，１１０００１）刘金兰，沙文阁聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种新兴的体外ＤＮＡ扩增技术，自１９８５年美国Ｃｅｔｕｓ公司Ｍｕｌｔｉｓ等［１］首次报道以来，ＰＣＲ技术已广泛应用于...     

聚合酶链反应检测日本血吸虫5D基因的实验研究

目的：寻找一种有效的日本血吸虫病诊断及疗效考核方法。方法：以血吸虫的成虫、虫卵、尾蚴ＤＮＡ为模板，利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对日本血吸虫编码免疫原性毛蚴抗原的５Ｄ基因进行扩增，检测其敏感性与特异性。结果：用ＰＣＲ检测日本血吸虫的成虫、虫卵、尾蚴ＤＮＡ，均出现明显特异性条带。通过引物１、引物２单扩增，即能检测到单个虫卵、单个尾蚴或针尖大小的成虫组织。采用Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ和非同位素探针能将敏感性进一步提高。常见的肠道细菌及人基因组ＤＮＡ无交叉阳性出现。结论：ＰＣＲ方法检测日本血吸虫基因的敏感性与特异性均满意。     

聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价

聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价张言斌谭耀驹谭守勇李一耕应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测各种临床标本中的结核分支杆菌具有快速、敏感、特异之优点。通过对２０８例新入院涂片检查阴性而ＰＣＲ技术检测结核分支杆菌特异性ＤＮＡ片段（ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ）...     

应用分子生物学技术检测布氏菌抗原的研究：I聚合酶链反…

我们把聚合酶链反应技术应用于布氏菌的检测，探索了该ＰＣＲ体系扩增的最佳反应条件。它对６种布氏菌纯化ＤＮＡ均可扩增，同时还测定了ＰＣＲ的敏感性和特异性。证实该方法最低可检测２００个菌细胞。与布氏菌血清学交叉反应较多的耶氏菌等ＰＣＲ结果阴性，说明这对引物具有很高的特异性。     

DNA扩增抑制试验在聚合酶链反应检测结核分支杆菌中的作用

ＤＮＡ扩增抑制试验在聚合酶链反应检测结核分支杆菌中的作用张显忠郭爱军曹洪林杨明峰我们建立了ＤＮＡ扩增抑制试验，检测系统中抑制因素所造成聚合酶链反应（ＰＣＲ）试验的假阴性，以使ＰＣＲ技术更加完善。材料与方法：标本来源：病例系本院住院肺结核病患者，根据临...     

聚合酶链反应检测致病性钩端螺旋体DNA的研究

以黄疸出血型ＲＧＡ菌株对所有致病性钩端螺旋体特异的ＤＮＡ克隆片段序列为基础合成聚合酶链反应引物Ｇ１Ｇ２。用该对引物扩增各群型致病性钩端螺旋体微量ＤＮＡ，均获阳性结果，对非致病性钩端螺旋体和其他细菌不扩增。纯化的钩端螺旋体ＤＮＡ５ｐｇ经聚合酶链反应后，琼脂糖凝胶电泳可以目测。用地高辛配基标记的特异性探针可检测到５ｆｇ即相当于１条钩端螺旋体ＤＮＡ量的扩增产物。将该对引物扩增早期钩体病患者血清标本，阳性率为８２％，显著高于ＭＡＴ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性率。由此表明，ＰＣＲ技术是灵敏、特异、快速的钩端螺旋体病早期诊断方法，还可用于流行病学调查。     

应用多重聚合酶链反应法检测并鉴别结核分支杆菌与非结 …

目的 提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测分支杆菌ＤＮＡ的特异性和敏感性、以检测和鉴别结核分支杆菌与非结核分支杆菌ＤＮＡ。方法 应用三对具有特异性的寡核苷酸引物，进行多重ＰＣＲ扩增。这三对引物分别对应于分支杆菌６５０００表面抗原、结核分支杆菌插入序列ＩＳ６１１０及人类β－珠蛋白基因的部分序列，其扩增产物分别为３８３ｂｐ、１２３ｂｐ和２６８ｂｐ。结果 此多重ＰＣＲ电泳检测的灵敏度为０．６ｐｇ。经多重ＰＣＲ     

OmpA-VS2为靶基因的非标记实时荧光PCR检测沙眼衣原体感染

目的建立一种以OmpA-VS2为靶基因的非标记实时荧光聚合酶链反应(PCR)方法,以检测沙眼衣原体。方法设计15种型别沙眼衣原体通用引物,对OmpA-VS2进行套式PCR扩增和实时荧光PCR检测,并对其敏感性、特异性进行评价,并用临床标本进行验证。结果15种型别沙眼衣原体均扩增出168bp的目的片段;敏感性为每个反应1个拷贝。特异性分析可见,与10种泌尿生殖道病原体和共生菌均没有交叉反应。临床标本验证的结果显示,该方法与以质粒为靶基因的核酸扩增检测的Amplicor CT/NG方法的检测结果一致。结论该方法具有敏感性高、特异性强、扩增后无需PCR后处理等特点,可望用于临床与防治项目中沙眼衣原体的检测。     

聚合酶链反应早期诊断结核性胸膜炎的临床价值

聚合酶链反应早期诊断结核性胸膜炎的临床价值肖志坚，崔秀琴，肖志敏，张菊萍，杨素敏为提高对结核性胸膜炎（结胸）的早期确诊率，对４８例结胸患者进行了胸水、血清中ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ（用聚合酶链反应技术检测结核菌特异性ＤＮＡ片段）和结核抗体检测，胸水涂片结...     

多聚酶链反应快速检测衣原体

应用沙眼衣原体内源性质粒引物和鹦鹉热衣原体１６ｓｒＲＮＡ基因引物，对沙眼衣原体眼部感染和尿道感染进行快速检测，４９份临床诊断为沙眼的标本经ＰＣＲ检测，阳性３１份，阴性１８份；２８份临床诊断为非淋菌性尿道炎的标本，经ＰＣＲ检测，阳性１１份；阴性１７份。以上结果分别与国际公认的免疫荧光试剂盒和酶联免疫试剂盒对同一标本的检测结果进行了比较，表明多聚酶链反应技术远较ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ灵敏，是快速检测沙眼衣     

人型结核分支杆菌检测方法的改进

人型结核分支杆菌检测方法的改进汤虹，高洁生聚合酶链反应（ＰＣＲ）是近年发展起来的一种特异ＤＮＡ片段的体外扩增方法，由于具有高度的敏感性与特异性，以及高效、简便、快速等特点，已被作为一项新技术而推广。由于某些干扰因素的存在，影响了对ＰＣＲ扩增后结果的观...     

丝虫性乳糜尿患者沙眼衣原体及解脲支原体感染的研究

近年来的研究表明，生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）感染是性传播疾病的主要病原体，亦是泌尿生殖道和口腔及盆腔炎的主要病因。丝虫性乳糜尿是班氏丝虫病的晚期临床表现之一，常合并细菌感染［１，２］。丝虫性乳糜尿患者是否存在沙眼衣原体和解脲支原体感染国内尚未见文献报道。我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，检测乳糜尿患者尿液ＣＴＤＮＡ和ＵＵＤＮＡ，现报道如下。材料与方法１　研究对象　选择１９９７年１０月～１９９８年５月门诊就诊的丝虫性乳糜尿患者５０例，其中男３０例，女２０例；年龄３５～５０岁，平…