晚期非小细胞肺癌中切除修复交叉互补基因1的表达及临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌组织中切除修复交叉互补基因1（ERCC1）表达水平与顺铂化疗耐药及预后的相关性。方法：应用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法检测104例非小细胞肺癌组织中ERCC1的表达并分析其与顺铂化疗耐药及1年生存率的关系。结果：非小细胞肺癌癌组织ERCC1表达水平与非小细胞肺癌患者性别及组织学类型无关,而与非小细胞肺癌患者以顺铂为基础联合化疗的耐药性有关。非小细胞肺癌化疗无效组ERCC1的阳性表达率为69.2%,明显高于化疗有效组12.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）;ERCC1高表达者有较短的中位总生存期（11.0个月）和无进展生存（8.0个月）,而ERCC1低表达患者有较长的中位总生存期（16.0个月）和无进展生存（13.0个月）。患者性别、年龄和组织类型与中位总生存期及无进展生存无相关性。结论：ERCC1在非小细胞肺癌组织中的表达水平与顺铂化疗耐药有关,ERCC1的高表达往往提示预后不佳。     

非小细胞肺癌RRM1、ERCC1的表达及对含铂化疗方案预后的影响

目的探析非小细胞肺癌RRM1(核苷酸还原酶1)、ERCC1(核苷酸切除修复交叉互补基因1)的表达及对含铂化疗方案预后的影响。方法择取2016年5月～2018年5月我院收治的110例非小细胞肺癌患者,取原发病灶与转移淋巴结标本,通过免疫组化技术对其RRM1、ERCC1的表达进行检测,并对所选患者进行随访,了解RRM1、ERCC1的表达及对含铂化疗方案预后的影响。结果原发病灶RRM1、ERCC1的阳性表达比转移淋巴结高,差异有统计学意义(P0.05);经过含铂化疗方案治疗的患者,RRM1、ERCC1的阴性表达患者中位总生存期比阳性表达者长,且中位疾病进展期也比阳性表达者长,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RRM1、ERCC1的表达与非小细胞肺癌进展之间存在密切联系,同时非小细胞肺癌RRM1、ERCC1的阴性表达对含铂化疗方案更加敏感。     

用Walker 256大鼠乳腺癌细胞建立大鼠胫骨癌痛模型

  目的  探讨用Walker 256大鼠乳腺癌细胞建立大鼠胫骨癌痛模型的可行性。  方法  将36只SD雌性大鼠, 随机分为肿瘤组(n=8)、假手术1(n=10)、假手术2(n=10)和正常对照组(n=8)。将含1 × 105 Walker 256大鼠乳腺癌细胞悬液注入大鼠胫骨上段制备骨癌痛模型, 观察疼痛行为学[包括机械缩足反射阈值(mechanical paw withdrawal threshold, MWT)和热缩足反应潜伏期(paw withdrawal thermal latency, PWTL)]、骨放射学和组织学变化。  结果  疼痛行为学、影像学、组织学观察结果证实, Walker 256大鼠乳腺癌细胞能成功制备大鼠胫骨癌痛模型。肿瘤组造模后第7天开始MWT显著降低, 为(37.59±2.02)g, 与假手术组1、2和正常对照组比较, P < 0.01;第11天PWTL显著降低, 为(6.87±1.00)s, 与假手术组1、2和正常对照组比较, P < 0.01。  结论  用Walker 256大鼠乳腺癌细胞能够成功建立大鼠胫骨癌痛模型。     

RCC1、RCA1在152例晚期NSCLC中的表达及其临床意义

目的 探讨ERCC1和BRCA1在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,分析ERCC1和BRCA1与铂类化疗近期疗效之间的关系.方法 采用免疫组化法对152例晚期NSCLC中ERCC1和BRCA1的表达进行检测分析.结果 ERCC1和BRCA1的表达与各临床特征之间均无关(P>0.05),ERCC1基因蛋白表达阴性者,应用含铂方案化疗,其近期疗效明显高于表达阳性的NSCLC患者(P<0.05),BRCA1的表达与含铂化疗近期疗效无关(P>0.05).结论 结果提示ERCC1可预测NSCLC对含铂联合化疗方案的敏感性.     

ERCC1表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性

目的:研究Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织内核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross complementation group1,ERCC1)基因mRNA表达水平与含铂类方案化疗疗效的相关性。方法:符合入选条件的患者56例,均为Ⅲb、Ⅳ期患者。所有的患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC。化疗前利用RNA提取技术及RealtimeRT-PCR技术对其组织学标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析。患者分别给予4～6个周期的含铂类方案化疗(吉西他滨/顺铂、紫杉醇/顺铂方案),对患者化疗后的总生存期(overall survival,OS)、肿瘤进展时间(time to progression,TTP)及化疗后反应率(response rate,RR)进行评估。结果:56例患者活检标本的ERCC1 mRNA相对于内控管家基因GAPDH mRNA表达的平均表达水平为6.1×103。以ERCC1 mRNA表达水平≥6.1×103的22例患者作为高表达组,以ERCC1 mRNA表达水平<6.1×103的34例患者作为低表达组。高表达组患者化疗后RR、OS及TTP...     

ARHI基因与HuR蛋白在胰腺癌PANC-1细胞中的表达

  目的  观察ARHI基因转染胰腺癌PANC-1细胞后对HuR蛋白的影响。  方法  采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒pLNCX2-ARHI-EGFP和空载体pLNCX2-EGFP转染胰腺癌PANC-1细胞,细胞分为3组:实验组(pLNCX2-ARHI-EGFP)、空载体转染组(pLNCX2-EGFP)和PANC-1细胞空白对照组,用G418筛选稳定转染的细胞株;采用PCR和Western blot方法检测ARHI基因表达,采用Western blot方法检测HuR蛋白表达。  结果  稳定转染ARHI基因组可检测到ARHI基因mRNA和蛋白的表达。根据图像灰度计算蛋白条带相对表达量,稳定转染ARHI基因组HuR蛋白表达(0.2226± 0.0644)较空载体对照转染组(0.4063 ± 0.0925,P=0.029)和PANC-1细胞空白对照组(0.4178 ± 0.1319,P=0.022)显著降低。  结论  ARHI基因可以导致胰腺癌细胞株中HuR蛋白表达降低。     

局部注射胆固醇包裹let-7a miRNA模拟物下调人3种Ras表达抑制裸鼠皮下肝癌移植瘤的生长和转移

  目的  研究胆固醇包裹let-7a模拟物(mimics)是否能通过下调人3种Ras抑制肝癌发展, 寻找肝癌的潜在治疗策略  目的  采用MTT增殖分析、PI单染和Annexin V/FITC双染方法检测let-7a mimics在体外对肝癌细胞的作用。使用裸鼠皮下移植瘤模型和通过肿瘤局部注射方法观察let-7a mimics对体内肝癌的作用。采用实时定量PCR和Western blot方法检测let-7a及其靶点Ras的表达  结果  与阴性对照组相比, let-7a mimics转染的肝癌细胞let-7a水平升高, 细胞增殖缓慢(P均 < 0.05);let-7a mimics阻滞更多肝癌细胞停留在G0-G1期且促进肝癌细胞凋亡(P均 < 0.05)。经let-7a mimics治疗的裸鼠体内肿瘤体积较阴性对照组减小, 是阴性对照组的54.97%(P=0.039);局部浸润和肝脏转移较阴性对照组明显减轻。肝癌细胞和移植瘤组织内let-7a上调的同时, 人K-Ras、H-Rras和N-Ras mRNA和蛋白的表达降低(P均 < 0.05)  结论  let-7a mimics下调人3种Ras mRNA和蛋白的表达, 影响细胞周期, 进而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。瘤周多点注射胆固醇包裹的let-7a mimics能抑制移植瘤的生长、浸润和转移。提示let-7阻断Ras可成为肝癌治疗的研究策略。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血穿孔素的表达及其临床意义

  目的  研究原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)患者外周血穿孔素(perforin, 又称pore-forming protein, PFP)的表达, 探讨PFP在PBC发病机制中的作用及其临床意义。  方法  应用荧光定量PCR检测86例PBC、56例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis type B, CHB)和69名健康对照者的外周血单个核细胞(peripheral bloodmono nuclear cells, PBMCs)中PFP mRNA基因表达的差异; 采用流式细胞术分别检测CD3-CD56+自然杀伤细胞(natu-ral killer cells, NK)、CD3+CD8+细胞毒性T细胞(cytotoxic Tlymphocytes, CTL)和CD3+CD56+自然杀伤性T细胞(natural killer Tlymphocytes, NKT)的PFP蛋白表达量。  结果  PBC组PBMCs中PFP mRNA基因表达较健康对照者升高(P < 0.05);PBC、CHB患者和健康对照者NK、CTL和NKT占PBMCs的比例无明显差别(P>0.05), PBC患者NK、CTL和NKT中表达PFP蛋白的细胞较健康对照者明显升高(P < 0.01)。PFPmRNA基因表达量及NK、CTL和NKT表达PFP蛋白的细胞比例与PBC患者Mayo危险评分呈显著负相关(P < 0.01), PBC患者总胆红素水平与NK、CTL表达PFP蛋白的细胞比例呈负相关(P < 0.05)。  结论  PBC患者PFP的异常表达, 提示PFP可能参与PBC的发病。PBC患者NK、CTL和NKT表达PFP蛋白的细胞比例可做为PBC患者生存预后的有效指标。     

放线菌素D单日冲击疗法治疗低危妊娠滋养细胞肿瘤

  目的  探讨放线菌素D(Actinomycin D，Act-D)单日冲击疗法用于低危妊娠滋养细胞肿瘤(low-risk gestational trophoblastic neoplasia, LRGTN)患者的疗效及安全性。  方法  回顾性分析2012年1月至2015年10月北京协和医院95例接受Act-D单日冲击化疗方案治疗的LRGTN患者临床资料，对不同临床特征的疗效进行统计学分析，随诊血清人绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin, β-hCG)水平评价治疗效果，并根据美国国家癌症研究所-不良事件通用术语标准评估化疗毒副反应的严重程度。  结果  95例患者中，79例经Act-D单日冲击疗法治疗后达到血清学完全缓解，完全缓解率83.2%(79/95)，总疗程平均(4.4±1.3)程(1~8程)，不同临床特征之间完全缓解率差异无统计学意义(P＞0.05)；16例患者因无效或耐药更改联合化疗方案后均达到血清学完全缓解。所有患者严重毒副反应发生率仅1.1%(1/95)。患者病情完全缓解后平均随诊(11.6±9.0)个月，3例复发，复发率3.8%。  结论  Act-D单日冲击化疗方案用于治疗LRGTN安全有效，且具备简便、耐受性好等优点，可作为LRGTN一线化疗方案。     

整合素受体显像99mTc-3PRGD2 SPECT/CT用于非小细胞肺癌诊断及淋巴结分期的价值

  目的  通过与¹⁸F-FDG PET/CT比较, 前瞻性评估整合素α_vβ₃受体显像^99mTc-3PRGD2 SPECT/CT对非小细胞肺癌诊断及淋巴结分期的价值。  方法  前瞻性纳入2011年2月至2012年12月北京协和医院知情同意参与研究的65例肺占位病变患者。其中男41例, 女24例, 平均年龄(60±11)岁。患者在1周内分别行^99mTc-3PRGD2 SPECT/CT和¹⁸F-FDG PET/CT检查。完成病理诊断后, 随访至死亡或随访至少2年。用受试者工作特征曲线、Z检验、卡方检验比较两种方法对肺内病灶及纵隔淋巴结的诊断效能。  结果  53例患者共65个病灶经病理证实为非小细胞肺癌, 12例患者共14个病灶诊断为良性病变。基于美国癌症联合委员会/国际抗癌联盟纵隔分区, 248个区域有肿瘤转移淋巴结, 56个区域有良性淋巴结。在诊断纵隔淋巴结转移方面, ^99mTc-3PRGD2 SPECT/CT特异性显著高于¹⁸F-FDG PET/CT(94.6%比75.0%, P=0.008), 而两者的敏感性差异无统计学意义(88.3%比90.7%, P=0.557)。两种方法对肺内病变的诊断效能差异无统计学意义(Z=0.82, P=0.410)。  结论  整合素受体显像^99mTc-3PRGD2 SPECT/CT在诊断淋巴结转移方面具有较高的特异性, 可能弥补¹⁸F-FDG PET/CT的不足, 在肺癌手术决策方面具有更大价值。     

ERCC1 gene polymorphism as a predictor for clinical outcome in advanced colorectal cancer patients treated with platinum-based chemotherapy

Excision repair cross-complementation group 1 (ERCC1) is a highly conserved protein and an essential member of the nucleotide excision repair pathway. DNA repair is an important mechanism for resistance to platinum-based chemotherapy. Previous studies have shown that ERCC1 gene expression is associated with clinical outcome to platinum chemotherapy in a variety of cancers. Recently, 2 common polymorphisms in the ERCC1 gene have been described. The first is a single nucleotide polymorphism at codon 188 of the ERCC1 gene that causes a C-->T change but codes for the same amino acid, asparagine. This polymorphism may be associated with differential ERCC1 gene expression. The second is also a signal nucleotide polymorphism in the 3'-untranslated region and may affect MRNA stability. We hypothesized that these 2 polymorphisms may be associated with clinical outcome to platinum-based chemotherapy. We assessed the relationship between these ERCC1 gene polymorphism and clinical outcome to platinum-based chemotherapy in 106 patients with advanced refractory colorectal cancer. We found a significant associated between the ERCC1 codon 118 polymorphism and clinical outcome. Patients with the C/C genotype had a median survival of 15.3 months (95% CI, 6.0-12.1) and 11.1 months (95% CI, 5.8-16.2) for those with C/T and T/T genotypes, respectively. The ERCC1 codon 118 polymorphism may be a useful predictor of clinical outcome in advanced colorectal cancer patients treated with platinum-based chemotherapy.     

晚期非小细胞肺癌患者外周血细胞核苷酸切除修复互补基因1表达水平与铂类化疗敏感性相关研究

目的 建立检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血核苷酸切除修复互补基因1(ERCC1 mRNA)表达水平的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并探讨该基因表达水平与铂类化疗敏感性的关系.方法 符合入选条件的晚期NSCLC患者60例,化疗前利用实时荧光定量RT-PCR技术对其外周血标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析.患者分别接受4～6个周期的含铂类第三代方案的化疗(具体方案为吉西他滨+顺铂或多西他赛+顺铂),并采用实体瘤疗效评价标准(RECIST标准)对患者化疗的有效率(response rate,RR)进行评估,疗效分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD).结果 60例患者外周血均检测到ERCC1mRNA的表达.化疗总有效率(PR/PR+SD+PD)30.0％(18/60),总疾病控制率(PR+SD/PR+SD+PD)86.7％(52/60).有效(PR)患者的ERCC1mRNA表达水平(中位值＝1.790)与无效(SD+PD)患者的ERCC1 mRNA表达水平(中位值=2.779)差异有统计学意义(Z=2.376,P＜0.05).疗效为PR,SD,PD患者的ERCC1 mRNA表达水平呈逐渐升高的趋势(中位值分别为1.790,2.883,3.545),差异有统计学意义(H=6.319,P＜0.05).ERCC1 mRNA表达水平低于中位值患者(“低”表达)的有效率(53.3％)与高于中位值患者(“高”表达)的有效率(6.6％)差异有统计学意义(P＜0.05).ERCC1 mRNA表达水平与年龄、性别、ECOG PS评分、临床分期、组织细胞病理学分型等因素之间无显著相关性(P＞0.05).结论 ①外周血细胞ERCC1 mRNA表达水平与铂类化疗敏感性具有显著负相关.②所建实时荧光定量RT-PCR方法能成功检测晚期非小细胞肺癌患者外周血细胞ERCC1 mRNA表达水平,有较高的敏感性与特异性,可应用于临床检测工作,指导临床化疗.     

剪切修复偶联因子1和存活蛋白对非小细胞肺癌化学疗法敏感性的预测及其相互关系

目的 剪切修复偶联因子1(ERCC1)是核苷酸外切修复家族中的重要成员,它在核酸损伤修复过程和凋亡过程中起着重要作用;存活蛋白(Survivin)属凋亡抑制蛋白家族,是迄今发现的最强的凋亡抑制因子之一.研究中初步探索晚期非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)中ERCC1和Sur...     

新辅助化疗对非小细胞肺癌组织ERCC1和BRCA1表达影响

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织核苷酸切除修复基因1（ERCC1）和乳癌易感基因1（BRCA1）的表达以及新辅助化疗对两者表达的影响。方法应用免疫组化PV二步法检测110例NSCLC组织（50例术前行新辅助化疗,60例行常规手术而术前未经化疗）ERCC1、BRCA1的表达。结果ERCC1主要在NSCLC组织细胞核表达,细胞浆有少量表达,总阳性表达率为59.09%。BRCA1在细胞核表达,总阳性表达率为74.55%。ERCC1、BRCA1表达强度与性别、年龄、组织学类型、肿瘤细胞分化程度、临床分期及有无淋巴结转移均无关（u=-1.557～-0.032,H=0.003～3.151,P〉0.05）。新辅助化疗组ERCC1、BRCA1总阳性表达率为68.00%、80.00%,单纯手术组为51.67%、70.00%,两组比较差异有显著性（u=-2.365、-3.011,P〈0.05）。ERCC1与BRCA1的表达强度呈显著正相关（r=0.264,P〈0.01）。结论新辅助化疗可以影响NSCLC组织中ERCC1、BRCA1的表达,从而影响肿瘤对顺铂化疗的敏感性,在肿瘤化疗中应予重视。     

Bevacizumab and non-small-cell lung cancer

Although platinum-based chemotherapy remains a mainstay of non-small-cell lung cancer treatment, its efficacy has probably reached a plateau. Increased understanding of cancer biology has allowed the identification of a number of possible molecular targets, including the EGF receptor and the angiogenesis pathway. ECOG-E4599 has randomised chemonaive patients to receive paclitaxel – carboplatin with and without bevacizumab, a humanised monoclonal antibody targeting the VEGF. The study is the first to show a survival advantage of adding a biological agent to chemotherapy in this setting: in particular, for the first time the survival of lung cancer patients has been extended beyond 1 year. The aim of this review is to describe the biological and clinical properties of bevacizumab and to discuss the evidence that has supported its approval for the first-line treatment of advanced non-squamous non-small-cell lung cancer.     

Bevacizumab and non-small-cell lung cancer: starving the enemy to survive

Although platinum-based chemotherapy remains a mainstay of non-small-cell lung cancer treatment, its efficacy has probably reached a plateau. Increased understanding of cancer biology has allowed the identification of a number of possible molecular targets, including the EGF receptor and the angiogenesis pathway. ECOG-E4599 has randomised chemonaive patients to receive paclitaxel--carboplatin with and without bevacizumab, a humanised monoclonal antibody targeting the VEGF. The study is the first to show a survival advantage of adding a biological agent to chemotherapy in this setting: in particular, for the first time the survival of lung cancer patients has been extended beyond 1 year. The aim of this review is to describe the biological and clinical properties of bevacizumab and to discuss the evidence that has supported its approval for the first-line treatment of advanced non-squamous non-small-cell lung cancer.     

BRCA-1、ERCCmRNA表达水平与在大肠癌铂类化疗预后的相关性研究

目的探讨以铂类为基础化疗方案的大肠癌患者中乳腺癌敏感蛋白I型（BRCA-1）、核苷酸切除修复交叉互补基因（ERCC-1）表达与患者临床病理特征的关系及其预后意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶联反应（RT—qPCR）检测54例大肠癌患者组织标本中BRCA-1、ERccmRNA表达,比较其表达水平与患者临床病理特征和生存时间之间的关系。结果（1）BRcA_1mRNA低表达20例（37．04％）,高表达34例（62．97％）。BRCA-lmRNA表达水平与淋巴结转移及临床分期有关（P=0．037,P=0．034）;（2）BRcA_1mRNA低表达患者中位生存时间MST（47．84月）高于高表达患者（35．36月,P=0．137）;（3）BRCA-lmRNA表达在16例晚期大肠癌患者中总生存时间高表达患者（32．6月）长于低表达患者（9．5月,P=0．026）;至肿瘤进展时间高表达患者（10．3月）长于低表达患者（4．3月,P=0．026）;（4）ERCCmRNA低表达14例（25．93％）,高表达40例（74．07％）。ERCCmRNA表达水平与临床病理特征无关（P〉O．05）;（5）ERCCmRNA低表达患者中位生存时间MST（49．50月）高于低表达患者（30．33月,P=0．014）;（6）ERCcmRNA表达在16例晚期大肠癌患者中总生存时间低表达患者（41．1月）长于高表达患者（20．7月P=0．018）;至肿瘤进展时间高表达患者（9．5月）长于低表达患者（8．9月,P=0．966）;（7）ERCC与BRCA-1表达有相关性,（r=0．497P〈O．05）;（8）COX多因素分析显示ERCCmRNA表达水平可以作为大肠癌患者铂类化疗预后的独立预测指标。结论ERCClmRNA表达水平的高低与大肠癌患者铂类化疗生存时间存在显著相关性：可以作为生存期的预测指标;ERCC与BRCA-1的表达具有相关性,但BRCA-1目前尚不能作为大肠癌患者铂类化疗生存期的预测指标,需进-步观察。     

ERCC1表达与肝癌mFOLFOX6肝动脉灌注化疗效果及预后的关系

目的探讨原发性肝癌中DNA切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达与奥沙利铂联合亚叶酸钙/5-氟尿嘧啶(mFOLFOX6)肝动脉灌注化疗效果的关系及其对预后的影响。方法纳入30例原发性肝癌患者,取其石蜡包埋标本,以免疫组化法检测ERCC1蛋白的表达水平,探讨ERCC1的表达与含奥沙利铂化疗方案效果及预后的关系。结果30例原发性肝癌患者中,ERCC1阳性表达率高达63.33%(19/30)。结论尚未发现ERCC1表达与肝癌患者接受以奥沙利铂为基础动脉灌注化疗的效果及预后的相关性,未来仍需进行大规模前瞻性研究。     

非小细胞肺癌组织中ERCC1和RRM1表达与抗肿瘤治疗的疗效及预后关系

目的探讨核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1)和核苷酸切除修复交叉互补基因l(ERCC1)蛋白在ⅢB和Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,及其对重组人血管内皮抑制素(恩度)联合吉西他滨/奈达铂化疗疗效的预测。方法采用免疫组织化学方法检测51例ⅢB～Ⅳ期肺癌患者组织中ERCC1和RRMl的表达水平。经过4周期以上恩度联合吉西他滨/奈达铂方案化疗,分析比较不同ERCCl和RRMl表达水平与NSCLC治疗预后的关系。结果 NSCLC组织中ERCCl的阳性率为4 3.1%,RRMl的阳性率为62.7%。RRMl与ERCC1蛋白表达显著正相关。RRMl和ERCC1表达均为阴性组的有效率为72.2%;二者表达均为阳性组为19.0%;二者表达任一阳性组为58.3%,3组之间比较差异均有统计学意义;ERCC1和RRM1低表达的患者生存期明显长于高表达者。结论 ERCC1和RRM1的表达可作为NSCLC患者恩度联合吉西他滨/奈达铂方案化疗敏感性及其预后判断的指标之一。