急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因检测的临床意义

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)检测PML/RARα融合基因在急性早幼粒细胞白血病(APL)诊断中的应用价值。方法应用常规细胞遗传学分析28例APL患者的染色体核型,同时用FISH法检测PML/RARα融合基因。结果 28例初诊的APL患者254例常规核型分析检出t(15;17)(q22;q12);2例患者核型正常;另1例未检出t(15;17),核型分析结果为涉及15和17号染色体的复杂异常;FISH检测所有病例均存在PML/RARα融合基因。结论 FISH法行PML/RARα融合基因检测特异性和敏感性好,是诊断APL的可靠方法。     

急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因检测及临床意义

急性早幼粒细胞性白血病(APL)是一组累及 17号染色体上的维甲酸受体α基因,其中t(15;17)(q22;q21)易位后形成的早幼粒细胞性白血病(PML)/维甲酸受体α(RARα)融合基因在APL中的重视率最高,占90%以上[1].本研究以34例形态学诊断为APL患者和2例疑似APL患者为对象,采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者PML/RARα融合基因,并追踪观察部分患者PML/RARα融合基因的动态变化,探讨其在诊断、疗效评估及预测预后中的意义.     

急性早幼粒细胞白血病PML—RARα融合基因检测的临床意义探讨

目的探讨PML-RARα融合基因检测在临床检查急性早幼粒细胞白血病（APL）治疗前后的意义。研究PML—RAR饯融合基因含量与急性早幼粒细胞白血病（APL）病变进程的关系。方法运用RT-PCR技术检测急性早幼粒细胞白血病患者治疗前后骨髓内PML-RARα融合基因含量。结果所有51例初诊为APL的患者均做PML—RARα融合基因检测,其中阳性4l例,阳性率为80．4％。初诊为APL的51例患者治疗18个月后（进行随访）,其中死亡3例,阳性3例,阳性率为5．9％。结论PML-RARα融合基因的检测对APL诊断具有重要价值。定期检测PML—RAR仅基因可尽早发现分子学复发以及时治疗,并避免血液学复发。     

急性早幼粒细胞白血病PML/RARα异型的临床意义

为评价急性早幼粒细胞白血病(APL)PML／RARα异型与临床治疗及预后的相关性，对7l例诱导治疗的APL患者定期进行血像、骨髓像检查，用巢式RT—PCR检测PML／RARα不同转录本。结果表明：短型(s)和V型白细胞总数比长型(L型)显著升高，所以较易早期发生严重的出血合并症。S型和V型PML／RARα患者的复发率高于L型患者。结论：APL患者PML／RARα异型可作为独立的预后因素。     

巢式RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的意义

目的 探讨巢式RT-PCR技术在检测急性早幼粒细胞白血病(APL)患者PML/RARα融合基因的价值。 方法 采用巢式RT-PCR检测218例初诊为APL患者的PML/RARα融合基因的表达水平及在部分患者的动态变化;随机选择39例APL完全缓解(CR)的患者,分别用流式细胞术(FCM)和巢式RT-PCR监测外周血或骨髓中的微小残留病(MRD)白血病细胞。 结果 在确诊的167例APL患者中PML/RARα融合基因阳性率为90.4%(151/167);39例APL-CR患者中PML/RARα融合基因阳性率76.9%(30/39);FCM和巢式RT-PCR监测APL-CR患者MRD有很好的一致性(P＞0.05)。 结论 巢式RT-PCR对APL的诊断有高灵敏度和高特异性;对APL的疗效及预后判断有重要临床意义。     

改进的RT-PCR检测PML/RARα融合基因快速诊断急性早幼粒细胞白血病

在急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞中迅速、准确检出PMI/RARα融合基因对于及时应用全反式维甲酸(ATRA)或亚砷酸(As2O3)提高诱导缓解率、减轻出血导致的早期死亡至关重要，但目前临床上采用的嵌套式RT—PCR方法繁琐且费时，亟待改进以满足临床APL快速、准确诊断的需要。本研究采用TRIZOL快速提取高质量的细胞总RNA，随机引物反转录，热启动单轮PCR，适当控制MgCl2及引物浓度和Taq酶用量，4条引物，3个体系，相同循环参数，对40例初诊APL患骨髓标本同时扩增PML/RARα融合基因及内对照RARα。结果显示，40例APL患标本均扩增出特异条带，非APL标本无特异扩增产物；阳性扩增片段清晰易辩、断裂点类型易于确定，检测可在6小时内完成。结论：此改进的RT-PCR检测PML/RARα融合基因快速、特异、简便，完全满足临床对初诊APL诊断的需要。     

急性早幼粒细胞白血病患儿PML／RARα融合基因罕见型2例

目前认为急性早幼粒细胞白血病（APL ）属于急性髓细胞白血病（AML ）的特殊类型［1］,由于 APL 细胞存在 t （15;17）（q22;q21）,该易位使第15号染色体长臂2区2带的早幼粒细胞白血病基因（PML）和第17号染色体长臂2区1带的维甲酸受体‐α（RARα）基因形成 PML ／RARα融合基因,该基因在产生过程中因断裂点不同及 mRNA 的剪切、拼接不同会产生不同的异构体并在 APL 发病中起到重要作用［2］。本院收治2例APL 患儿出现新的 PML ／RARα融合基因变异体,现报道如下。     

PML—RARα转基因小鼠发生急性早幼粒细胞白血病

为了从整体水平上研究ＰＭＬ－ＲＡＲα融合蛋白的致白血病作用,建立了仅在髓系细胞中表达ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的转基因小鼠。通过表型分析发现一个单系的３只ｈＣＧ－ＰＭＬ－ＲＡＲα转基因小鼠在１－５个月时发生急性早幼粒细胞白血病,从而说明ＭＰＬ－ＲＡＲα融合基因的表达在白血病的发生中起着极为重要的作用。     

维甲酸受体α与急性早幼粒细胞白血病PML－RARα融合受体特性研究

作者通过受体的放射配基结合分析方法，研究了ＨＬ－６０细胞中维甲酸受体α（ＲＡＲα）与急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）细胞中ＰＭＬ－ＲＡＲα融合受体的一些特性。结果显示：ＲＡＲα在细胞中以单体形式存在，而ＰＭＬ－ＲＡＲα则以复合体形式存在；ＰＭＬ－ＲＡＲα与全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）的亲和力比ＲＡＲα与ＡＴＲＡ的亲和力低。提示：ＲＡＲα与ＰＭＬ－ＲＡＲα这些特性的差异可能与ＡＰＬ发病及ＡＴＲＡ治疗作用有关。     

维甲酸受体α与急性早幼粒细胞白血病PML—RARα融合受体特性研究

作者通过受体的放射配基结合分析方法，研究了ＨＬ－６０细胞中维甲酸受体α（ＲＡＲα）与急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）细胞中ＰＭＬ－ＲＡＲα融合受体的一些特性。结果显示：ＲＮＡα在细胞中以单体形式存在，ＰＭＬ－ＲＡＲα则以复合体形式存在；ＰＭＬ－ＲＡＲα与全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）的亲和力比ＲＡＲα与ＡＴＲＡ的亲和力低。提示：ＲＡＲα与ＰＭＬ－ＲＡＲα这些特性的差异可能与ＡＰＬ发病及ＡＴＲＡ治疗作用有关     

骨髓涂片双色荧光原位杂交检测急性早幼粒细胞白血病的PML/RARα基因重排

为了探讨双色荧光原位杂交(D—FISH)技术在骨髓涂片(BMS)上检测PML／RARα基因重排对急性早幼粒细胞白血病(APL)的诊断价值，采用光谱绿(Spectrum Green)和光谱桔红(Spectrum Orange)分别标记PML和RARα两种基因探针对27例临床拟诊为APL的患者进行BMS-D—FISH检测，并与常规细胞遗传学(CCG)、逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测结果作比较。结果表明：18例初诊患者中，CCG检出t(15；17)者14例，他们的BMS-D-FISH和RT—PCR均证实有PML／RARα基因重排，从而肯定了对APL的诊断；而CCG未检见t(15；17)易位的4例中有1例显示阳性的BMS-D-FISH和RT—PCR结果，证实该例有隐匿易位存在，其余3例的两种检测均是阴性，因而他们被重新诊断为AML而不是APL；9例缓解患者中，CCG查出1例部分缓解患者有t(15；17)易位，其BMS-D—FISH和RT—PCR均为阳性，而8例完全缓解患者(6例伴正常核型，2例未作CCG检测)的BMS-D-FISH和RTPCR检测显示6例阴性，2例阳性，提示该2例患者有微小残留病(MRD)存在。结论：BMS—D—FISH是检测APLPML／RARα基因重排的敏感可靠方法，有助于APL确诊及其MRD检测，适合于CCG检测失败、伴有隐匿易位、RT—PCR检测缺乏材料以及需作回顾性研究者。     

急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα融合基因及免疫表型与全反式维甲酸治疗预后的关系

急性早幼粒细胞白血病 (APL)是一组累及 17号染色体维甲酸受体α基因 ,导致粒系造血细胞分化阻滞在早幼粒阶段的异质性肿瘤。其中t(15 ;17) (q2 2 ;q12 )易位后形成的PML/RARα融合基因在APL的重现率最高 ,占 90 %以上[1] ;其余为t(5 ;17)、t(11;17)等易位形式[2 ,3 ] 。自从全反式维甲酸 (ATRA)应用于临床以来 ,APL的早期病死率明显下降、缓解率明显提高[4] ,但是仍然有近 2 0 %的APL患者不能缓解。因此 ,本研究以 6 3例形态学诊断为APL患者为对象 ,探讨PML/RARα融合基因及免疫表型与ATRA治疗预后的关系。1　资料和方法1.1…     

荧光聚合酶链反应检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα的临床价值

实时定量逆转录聚合酶链反应是目前最精确地检测急性白血病微小残留病的方法,对急性早幼粒细胞PML／RARα融合基因表达量的测定及动态变化监测,取得PML／RARα融合基因的表达拷贝数,对临床治疗、预防复发、延长患者生存期,最终治愈白血病具有重要的指导意义。     

PLZF—RARα—急性早幼粒细胞白血病一个新的融合基因

对一例变异型易位ｔ（１１；１７）（ｑ２３；ｑ２１）的急性早幼粒细胞白血病患者进行分子生物学研究，发现一个新的含九个锌指结构的基因－早幼粒白血病锌指基因（ＰＬＺＦ）。该基因位于１１ｑ２３，在ｔ（１１；１７）中与维甲酸受体α基因发生了重排，形成位于ｄｅｒ（１１）和ｄｅｒ（１７）上的两个融合转录单位。ｔ（１１；１７）中ＲＡＲα基因的断裂点亦位于Ａ和Ｂ区之间，其Ｂ－Ｆ区域与ＰＬＺＦ的激活区以及第１，２两个     

全反式维甲酸治疗无PML/RARα融合基因的急性髓细胞白血病

全反式维甲酸 (ＡＴＲＡ)敏感性与急性早幼粒细胞白血病(ＡＰＬ)和ＰＭＬ ＲＡＲα融合基因高度相关。ＡＴＲＡ对无ＲＡＲα重排的ＡＰＬ及其他类型急性髓细胞白血病 (ＡＭＬ)疗效差[1] 。我们对无ＰＭＬ ＲＡＲα融合基因的ＡＰＬ患者采用ＡＴＲＡ治疗 ,具有一定的疗效 ,现将结果报告如下。病例和方法1　病例　 5例ＡＭＬ均为本院住院患者 ,其中 1例在外院进行ＡＴＲＡ治疗 ,余 4例在本院接受ＡＴＲＡ治疗 ;男 1例 ,女 4例 ,年龄 18～ 71岁。经骨髓及血涂片过氧化物酶 (ＰＯＸ)染色等细胞化学检查确诊 ,诊断和疗效标准参照文献 [2 ]。2　免…     

荧光聚合酶链反应检测急性早幼粒细胞白血病PML／RARα的临床价值

实时定量逆转录聚合酶链反应是目前最精确地检测急性白血病微小残留病的方法，对急性早幼粒细胞PML／RARα融合基因表达量的测定及动态变化监测，取得PML／RARα融合基因的表达拷贝数，对临床治疗、预防复发、延长患者生存期，最终治愈白血病具有重要的指导意义。     

实时定量PCR检测46例初诊急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARαmRNA的分子表达

本研究探讨实时定量PCR（Q-PCR）检测PML／RARα mRNA的方法学，并对46例初诊急性早幼粒细胞白血病（APL）患者骨髓标本进行检测。构建PML／RARα的bcr1型和ber3型转录本以及内参照abl基因转录本的阳性标准品质粒；利用ABI Prism 7500型Q-PCR仪对46例初诊APL患者和40例非APL患者骨髓标本进行检测，PML／RARα mRNA定量结果以校正比值（NQ）表示，NQ=PML／RARα mRNA拷贝数／ABLmRNA拷贝数；应用四色流式细胞术检测免疫表型。结果显示，Q-PCR结果的日间差和日内差平均变异系数（CV）分别为1．58％和0．88％。可重复敏感度为可以检测5 copies／100ng RNA。40例非APL患者PML／RARα mRNA均为阴性。46例初诊APL患者PML／RARα mRNA表达量NQ中位值为0．450（0．084—1．082）。比较32例bcr1型和14例bcr3型两组患者的特征表明，PML／RARα mRNANQ中位值分别为0.454（0.084—1、082）和0．386（0.151—0．848）（P〉0．05）。形态学诊断M3v的患者比例分别为9.40％和48.96％（P〈0.05）；初诊时WBC中位数分别为2．15（0．2—59．6）和9．35（0．91—122．8）（P〈0．05），而在性别、年龄、初诊时血红蛋白和血小板计数、骨髓中APL细胞比例、DIC指标等方面无差异。流式细胞仪术检测时，CD45／SSC射门情况下，APL细胞群分布可以分为两类：高侧向角（L-SSC，粗颗粒）和非高侧向角（NL-SSC，细颗粒）两类。bcr1型患者中85．70％表现为L—SSC，而bcr3型患者中64．29％表现为NL-SSC。结论：建立的Q—PCR方法稳定可靠，敏感度高；berl型和bcr3型APL患者的PML／RARetmRNA表达量无差异，bcr3型APL患者中形态学M3v比例和WBC数比bcr1型患者高；PML／RARα不同转录本类型和免疫表型以及细胞形态学之间有一定的相关性。