β-榄香烯抗肿瘤免疫效应的研究进展

肿瘤免疫治疗能够激发或调动机体的免疫系统,增强肿瘤细胞免疫原性,从而达到控制和杀伤肿瘤细胞的目的。目前,肿瘤免疫治疗已经成为抗肿瘤研究的重要课题之一。中医药抗肿瘤免疫机制是多方面的,β-榄香烯是抗肿瘤代表中药莪术的有效提取物,本文综述了近年来β-榄香烯抗肿瘤免疫效应的临床及实验研究的进展情况。     

全自动活细胞分析筛选榄香烯对人胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响

目的 应用机器视觉-全自动活细胞观测分析系统(continuous live cell imaging and analysis platform,eell-IQ)与流式细胞仪观察榄香烯对体外人胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响.方法:不同浓度的榄香烯作用于人胃癌SGC-7901细胞,应用机器视觉-全自动活细胞观测分析...     

β-榄香烯抗肿瘤机制研究进展

恶性肿瘤已经成为危害人民群众健康及生命的常见疾病,祖国中医药学为寻找新的抗肿瘤药物提供了丰富的宝库,本文深入探讨了我国二类非细胞毒性药物β-榄香烯的各种抗肿瘤机制,提示该药有较为广泛的临床应用前景。     

电磁辐射对大鼠心肌细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 对比性研究3种波段电磁辐射对大鼠心肌细胞Bcl-2和Bax的表达变化,探讨其损伤心肌细胞凋亡的可能机制。方法 180只Wistar大鼠电脑随机分为对照组(C)、S波段微波辐照组(S)、X波段微波辐照组(X)、电磁脉冲辐照组(E),分别于辐照后6h、1d、3d、7d、14 d、28 d活杀,切取大鼠心脏标本行组织学、免疫组织化学检测Bcl-2和Bax的表达,应用图像分析技术,定量研究3种波段辐照后大鼠心脏组织Bcl-2和Bax的表达变化规律。结果 3种波段辐照后6h~7d大鼠心脏组织损伤呈加重趋势,心肌纤维排列紊乱,糖原颗粒减少,核染色质浓缩,蒲肯野纤维溶解,间质水肿,心肌间有浆液渗出;与对照组相比,心肌细胞凋亡增加,Bax和Bcl-2表达均增加(P<0.05),但Bax促凋亡表达强于Bcl-2的表达强度。14~28d后心脏呈修复恢复期,14~28d后各组Bcl-2和Bax蛋白表达比6h~7d有所减弱,Bcl-2表达强于Bax表达强度,但仍较对照组表达强。6~12个月心脏组织与对照组基本相似。结论 电磁辐射对心脏损伤过程中,心肌细胞凋亡起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关,且高功率微波作用较电磁脉冲明显,而X的作用又较S明显。     

黄芪提取物对Aβ_(25-35)诱导的海马神经细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨黄芪提取物(EA)对Aβ_(25-35)所致海马神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法分离孕18 d的胎鼠的海马神经细胞进行体外培养,实验分为3组:对照组、模型组和黄芪组。对照组:只加入无B27神经生长因子的神经基础培养基(NB)原液培养24 h;模型组:加入无B27神经生长因子的NB原液,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养24 h;黄芪组:加入无B27神经生长因子的NB原液,先加入终浓度为黄芪提取物20 mg/L培养4 h,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养20 h。在倒置显微镜下观察各组海马神经细胞形态学变化;采用乳酸脱氢酶(LDH)法和3-(4,5-甲基噻唑-2)-2,5-苯基的氮唑溴盐(MTT)法检测细胞活性;Western blot检测各组海马神经细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果模型组的海马神经细胞活性明显下降,细胞出现凋亡的典型的形态学特征,Bcl-2蛋白的表达水平下降而Bax蛋白的表达水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。黄芪组海马神经细胞活性提高、凋亡的细胞数减少,Bcl-2蛋白的表达水平升高而Bax蛋白的表达水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪提取物对Aβ_(25-35)所诱导的海马神经元损伤具有一定的保护作用,可能与其降低海马神经细胞Bcl-2蛋白的表达水平升高Bax蛋白的表达水平有关。     

Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达

目的 通过研究Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达,以探讨铝对体外培养大鼠神经元细胞的神经毒性作用.方法 用不同浓度氯化铝体外培养大鼠神经元细胞染毒,用原位缺口末端标记（TUNEL）法和扫描电镜观察检测细胞凋亡,免疫组化法测定Bcl-2和Bax蛋白含量,RT-PCR法测定Bcl-2和Bax基因表达量.结果 （1）TUNEL法检测DNA碎片随染铝剂量的加大而增加,扫描电镜观察到了凋亡细胞典型的出芽现象和细胞裂解及凋亡小体的释放.（2）免疫组化和RT-PCR法检测Bcl-2蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而减少（P＜0.01,r=-0.695;P＜0.05,r=-0.647）,反之,Bax蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而增加（P＜0.01,r=0.676;P＜0.01,r=0.794）.Bcl-2/Bax与铝的作用剂量有关（P＜0.01,r=-0.655;P＜0.01,r=-0.777）.结论 低剂量铝暴露能够诱导神经元凋亡,Bcl-2和Bax蛋白及基因表达在铝致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的调控作用.     

铝致大鼠海马神经细胞凋亡及对Bcl-2和Bax表达的影响

[目的]探讨铝对大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响。[方法]健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组(对照组)、Al3+2.5mg/kg组、Al3+5mg/kg组、Al3+10mg/kg组。AlCl3溶液腹腔注射染毒,60d后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法测Bcl-2、Bax的表达,并用图像分析系统进行结果分析。[结果]随着染铝剂量的增高,大鼠海马神经细胞凋亡指数升高,存在剂量-效应关系(P<0.05)。各染铝组Bcl-2表达下降,Bax表达显著升高,Bcl-2/Bax逐渐下降,存在剂量-效应关系(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与Bcl-2呈负相关(r=一0.924,P<0.01),与Bax呈正相关(r=0.804,P<0.01),与Bcl-2/Bax表达比值呈负相关(r=-0.872,P<0.01)。[结论]铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制可能与Bcl-2表达下调,Bax表达上调以及Bcl-2/Bax表达比值下降有关。     

亚砷酸钠对人正常肝细胞凋亡及Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。     

大豆异黄酮对大鼠卵巢Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的 通过动物实验研究,观察B-cell lymphoma 2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2-associated X protein(Bax蛋白)在大鼠卵巢组织中的表达情况。方法 选用2月龄Wistar雌性大鼠50只,按体重随机分成5组:空白对照组(基础饲料),大豆异黄酮低、中、高剂量组[含量分别为100、200、300 mg/(kg.bw)]、雌激素组(EC)(己烯雌酚0.5 mg/kg),实验周期为7周;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠卵巢组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白水平。结果 空白对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组、雌激素组Bcl-2蛋白浓度分别为(1.41±0.19)、(1.43±0.20)、(2.07±0.58)、(2.42±0.32)、(2.95±0.78)pg/mL,组间差异均无统计学意义;Bax蛋白浓度分别为(33.64±5.83)、(30.02±9.44)、(17.33±4.21)、(9.67±1.95)、(10.69±4.95)pg/mL,其中大豆异黄酮高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大豆异黄酮可抑制大鼠Bax蛋白表达,对Bcl-2蛋白表达无影响。     

丙烯腈对小鼠生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨丙烯腈(AN)暴露对小鼠睾丸生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响。方法将250只成年健康SPF级昆明种雄性小鼠,按体重随机分为阴性对照组、3个AN染毒组和阳性对照组,阴性对照组用生理盐水,各染毒组分别以1.25、2.50、5.00mg/kg AN腹腔注射(注射剂量为0.01ml/g BW),每天1次,连续5天,阳性对照组注射环磷酰胺40mg/kg一次。分别于首日染毒后的第7、14、21、28和35天采用颈椎脱臼法处死小鼠,采用免疫组织化学法(SABC)检测生精细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 5个观察时间点AN 2.50mg/kg组和21天AN 1.25mg/kg组Bcl-2平均光密度值均显著低于阴性对照组(P<0.05);除21天AN 1.25mg/kg组外,所有观察时间点AN各染毒组Bax平均光密度值均显著高于阴性对照组(P<0.05)。Bcl-2在中剂量组和阳性对照组各观察时间点降低幅度均较大;Bax在各剂量组的不同时间点均以14天时升高幅度最大。结论 AN可诱导生精细胞Bcl-2蛋白表达减弱,以AN 2.50mg/kg组最为显著;同时可诱导生精细胞Bax蛋白表达增强,以14天时变化幅度较明显。     

β-榄香烯长循环脂质体的制备工艺

目的:探讨 β-榄香烯长循环脂质体的制备工艺.方法:将包封率作为评价指标,分析 β-榄香烯长循环脂质体的制备工艺.结果:薄膜分散法的包封率为81.0%,逆向蒸发法包封率为66.5%,乙醇注入法包封率为92.3%,乙醚注入法包封率为55.8%,乙醇注入法包封率最高.结论:乙醇注入法制备 β-榄香烯长循环脂质体的效果最佳,具有较为明显的应用价值.     

芹菜对小鼠生精细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达影响

目的 探讨芹菜对小鼠生精细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法 成年健康SPF级昆明种雄性小鼠72只,按体重随机分为4组:对照组、低、中、高剂量芹菜汁组,各组又随机分成3个时间组即:7、14、28d组,每组6只;以0.3mL不同浓度芹菜汁灌胃,对照组以0.3mL生理盐水灌胃.实验结束处死小鼠,取一侧睾丸,免疫组织化学法( SABC)检测小鼠睾丸生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 灌胃7d时,对照、低、中、高剂量芹菜汁组Bax蛋白表达平均光密度值分别为0.38、0.35、0.35和0.34,与对照组比较,各剂量芹菜汁组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);灌胃28 d时,对照组Bcl-2蛋白表达平均光密度值为0.34,中、高剂量芹菜汁组分别为0.37和0.38,明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 本实验条件下未观察到芹菜对生精细胞的促凋亡作用,而Bcl-2抑制生精细胞凋亡的作用增强.     

刚地弓形虫培养上清抑制胃癌细胞株SGC-7901增殖

目的 观察弓形虫培养上清对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响. 方法 取对数期生长的SGC-7901细胞接种于细胞培养板中,实验组加入相同体积不同数量（1×106、1×107、1×108/ml）弓形虫速殖子培养上清,对照组加入等体积的RPMI-1640培养液,通过显微镜观察培养24 h后细胞形态;计数细胞,绘制生长曲线;MTT法测定培养24、48、72 h后细胞增殖情况;Western blotting检测弓形虫培养上清作用24 h凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达. 结果 经弓形虫速殖子培养上清作用24 h后,胞质中颗粒明显增多,细胞密度有所降低;细胞生长受到抑制,且呈浓度依赖性;经1×106、1×107、1×108/ml弓形虫培养上清作用24、48、72 h均能显著抑制SGC-7901细胞的增殖;作用24 h后,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增强. 结论 弓形虫培养上清能抑制胃癌细胞株SGC-7901的增殖.     

祛风除湿中药独活对痴呆大鼠脑内凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的 探讨祛风除湿中药独活对β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)脑内注射所致大鼠痴呆模型的保护作用.方法 24只雄性Wistar大鼠行颅内Aβ海马CA1区内注射术后,随机分为4组,独活组、吲哚美辛组、假手术组和模型组,每组6只,分别给予中药独活、吲哚美辛及生理盐水灌胃.进行水迷宫实验检测逃避潜伏期,在实验4周末处死大鼠,检测凋亡蛋白Bcl-2/Bax在大鼠脑中表达的情况.结果 除假手术组外,其他3组逃避潜伏期均有不同程度延长(P＜0.05);与模型组比较,其他3组Bcl-2/Bax大鼠脑中的表达有所不同,独活组可提高Bcl-2/Bax的比值(P＜0.05).结论 独活可以改善痴呆模型大鼠的学习记忆能力,并能上调Bcl-2表达,抑制Bax表达,提高Bcl-2/Bax的比值,对痴呆大鼠神经细胞的凋亡有抑制作用.     

丙型肝炎病毒F蛋白上调肝癌细胞HepG2中Bcl-2和Bax表达

目的 研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因1b型F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2、Bax表达的影响.方法 应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C、pEGFP-C3(阴性对照)瞬时转染HepG2细胞,48h后抽细胞总蛋白质,蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax表达的变化.结果 转染F基因的HepG2中Bcl-2表达水平略高于未转染的细胞,但Bax表达水平显著高于未转染的细胞.结论 HCV F蛋白具有调节原癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax的特性,可能与肝癌的形成有关.     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2的影响

目的：探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法：经过敞箱实验选取得分相近的2-3个月龄SD大鼠80只,按随机数字表法分为四组,每组20只,结合孤养并给予慢性轻度不可预见刺激,复制抑郁模型,于造模成功第2天开始,分别给予氟西汀组和β-细辛醚组1.2 mg/（kg·d）氟西汀和25 mg/（kg·d）β-细辛醚灌胃,模型组与正常组给予等体积生理盐水。于第21天对大鼠处死取脑,免疫组织化学法检测Bax、Bcl-2蛋白相对含量。结果：模型组大鼠海马组织神经元数目减少,散在排列,细胞核发生固缩变形,CA1区,CA3区变化显著。与模型组比较,β-细辛醚组、氟西汀组Bax蛋白表达均显著降低（P〈0.01）。结论：β-细辛醚可以降低大鼠海马组织Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达。     

上皮性卵巢癌中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达与化疗耐药关系的探讨

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达与顺铂化疗耐药的相关性。方法:应用免疫组织化学S-P法检测56例上皮性卵巢癌患者病变组织中的Bcl-2蛋白及Bax蛋白的表达并分析其与顺铂化疗耐药的关系。结果:①Bcl-2蛋白在术前未经化疗组的阳性表达率为70.00%,高于术前化疗组的阳性表达率(P<0.05);Bax蛋白在术前未经化疗组和术前化疗组的阳性表达率分别为20.00%和68.75%,有升高趋势(P<0.05);②化疗耐药组Bcl-2蛋白的表达率为78.13%,高于敏感组的表达率(P<0.05),而化疗耐药组Bax蛋白的表达率为21.87%,低于敏感组的表达率(P<0.05)。结论:化疗使Bcl-2蛋白表达下降,而使Bax蛋白表达升高;Bcl-2蛋白的高表达提示化疗耐药,而Bax蛋白的高表达提示化疗敏感。     

鼻咽癌组织Bcl-2和Bax蛋白表达及其临床意义

研究Bcl-2和Bax基因蛋白表达以及Bax／Bcl-2比例与鼻咽癌放射敏感性及其预后之间的关系。采用免疫组化S—P法，检测75例鼻咽癌组织标本和12例正常鼻咽黏膜组织中Bcl-2和Bax的蛋白表达情况。结果显示，Bax／Bcl-2比例可作为指导鼻咽癌的临床治疗和估计其预后的指标。     

靶向MICA基因对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用

目的探讨通过小干扰RNA(siRNA)抑制MICA基因表达对胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用。方法将靶向MICA的siRNA(MICA siRNA)通过脂质体转染法瞬时转染胃癌SGC-7901细胞48 h;Western blot检测siRNA转染前后SCG-7901细胞内MICA蛋白表达的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MICA siRNA转染对细胞增殖的影响,TUNEL检测siRNA转染对细胞凋亡的影响。结果 MICA siRNA转染干扰SCG-7901细胞内MICA表达,并诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖。细胞转染后,MICA蛋白表达降低70%~85%,明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);转染组细胞存活率明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);转染组细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论靶向MICA抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并促进细胞凋亡,MICA可用于胃癌基因治疗的靶点。     

丙型肝炎病毒F蛋白上调肝癌细胞HepG2中Bcl-2和Bax表达

目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因1b型F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2、Bax表达的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C、pEGFP-C3(阴性对照)瞬时转染HepG2细胞,48h后抽细胞总蛋白质,蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax表达的变化。结果转染F基因的HepG2中Bcl-2表达水平略高于未转染的细胞,但Bax表达水平显著高于未转染的细胞。结论 HCV F蛋白具有调节原癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax的特性,可能与肝癌的形成有关。