捕获ELISA法测定抗EV71-IgM抗体用于EV71感染早期诊断

目的探讨捕获ELISA法测定抗肠道病毒71型(EV71)IgM抗体在EV71感染所致手足口病(HFMD)早期诊断中的价值。方法以实时荧光RT-PCR检测89例临床初诊为HFMD患儿的粪便、疱疹液、咽拭子或肛拭子的肠道病毒RNA。用40例排除HFMD的5岁以下儿童血清为抗EV71-IgM抗体阴性对照,以捕获ELISA法检测患儿不同发病期血清中抗EV71-IgM抗体。结果经实时荧光RT-PCR检测,89例HFMD患儿粪便、疱疹液、咽拭子或肛拭子中EV71感染28例,柯萨奇病毒A16(CA16)感染43例,非EV71和CA16的肠道病毒感染14例,非肠道病毒感染4例。EV71感染者发病1～3 d、4～6 d及>6 d的血清抗EV71-IgM抗体阳性率分别为81.3%、100%和100%;CA16感染者分别为10.0%、26.4%和65.7%;非EV71和CA16的肠道病毒感染者及非肠道病毒感染者在发病1～3 d和4～6 d无1例阳性;阴性对照组无1例阳性。抗EV71-IgM抗体在EV71感染的早期(急性期)的诊断敏感性和特异性分别为81.3%和92.9%。结论 EV71感染者与CA16感染者血清抗EV71-IgM抗体在发病4 d后存在较明显的交叉反应。抗EV71-IgM抗体可用作EV71感染早期诊断的血清学标志物。     

2013-2016年柳州市手足口病病原监测结果分析

目的 掌握柳州市2013-2016年手足口病病原学流行特征及病原谱变化情况,为制定柳州市手足口病预防控制措施提供科学依据.方法 收集柳州市2013-2016年医院和县级疾病预防控制中心送检的手足口病病例咽拭子、肛拭子及疱疹液标本,应用实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR) 技术对标本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16 型(CoxA16)及非EV71和CoxA16的其他肠道病毒(EV)进行核酸检测.结果 2013-2016年共收集临床诊断手足口病病例标本3 503份,实验室确诊EV阳性标本2 720份;2013-2016年柳州市每年手足口病主要病原体均有变化,除EV71和CoxA16外,还存在着较高比例的EV;手足口病发病有明显季节性,主要集中在每年3-9月;5岁以下儿童为主要发病的人群,其中1～3岁儿童发病最多,男性发病例数高于女性;EV71为引起重症及死亡手足口病的主要病原体,死亡病例未见CoxA16.结论 EV是引起柳州市2013-2016年手足口病流行的主要病原体,但每年病原谱在不断变化,EV71是引起重症及死亡手足口病的主要病原体.     

2010年西安地区手足口病病原血清型分析及隐性感染状况调查

目的 分析西安地区2010年引起手足口病(HFMD)的肠道病毒血清型和调查HFMD高发的6月、7月健康儿童携带肠道病毒核酸情况,为HFMD防治提供依据.方法 2010年4至9月,在西安市所属13个区县,每月采集临床诊断HFMD患儿的肛拭子标本,同时,在西安市儿童医院采集临床诊断为重症、危重症HFMD病例标本,以及采集高发的6月和7月健康儿童肛拭子标本进行病原学分析,研究西安地区2010年HFMD病原构成和健康儿童病原携带情况.结果 2010年西安地区共报告HFMD 23439例,病原EV71占24.81%、CA16占55.04%、非EV71和非CA16的其它肠道病毒占20.16%;EV71 7、8月所占比例增高;EV71占重症病例病原的75.71%;农村、城市健康儿童肠道病毒核酸阳性率分别为9.68%和3.51%.结论 2010年西安地区HFMD病例数较2009年增加,病原以CA16为主,重症病例主要由EV71引起,农村健康儿童携带肠道病毒与城市儿童差异无统计学意义.     

2011年贵阳地区手足口病病原学检测结果分析

目的:了解贵阳地区2011年4-10月手足口病流行期间婴幼儿手足口病病原学分布情况及流行特征.方法:对2011年4-10月在我院住院期间临床诊断为手足口病病例采集肛拭子标本1 379份,运用荧光定量PCR法进行肠道通用型、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)核酸检测.结果:肠道病毒通用型核酸、EV71和CoxA16核酸检出率分别为46.99％、5.80％、2.18％.手足口病发病以幼儿为主,在5岁以下儿童是疾病高发年龄段,4～6月为发病高峰期,肠道病毒阳性检出率男性高于女性;其他肠道病毒和EV71为主要病原,重症病例和非重症病例感染的主要病原体型别有差异.其他肠道病毒和CA16为轻症病例的主要病原,EV71则为重症病例的主要病原.结论:贵阳地区儿童手足口病的主要病原体是未知的其他肠道病毒和EV71,EV71更易引起重症病例的发生.     

内江地区手足口病肠道病毒核酸检测及流行特征分析

目的分析内江地区2014年1月至2015年12月手足口病的病原学特征,为手足口病的预防控制提供病原学依据。方法选取2014年1月至2015年12月临床疑似手足口病685例作为研究对象。采集疑似手足口病患儿发病1周内的疱疹液、咽拭子或肛拭子标本,用实时荧光RT-PCR进行肠道病毒通用型(EV)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)核酸扩增,并分析患儿性别、年龄以及近2年流行时间的分布。结果 685例疑似手足口病中,肠道病毒阳性599例,检出率87.45%(599/685),其中EV71型、CoxA16型、肠道病毒其他型分别占肠道病毒感染阳性的16.53%(99/599)、12.35%(74/599)和71.12%(426/599)。EV71与CoxA16型手足口病的患儿以0~4岁儿童为主,性别差异无统计学意义(P0.05);4-7月与10-11月为该地2个发病高峰。结论对内江地区类似手足口病症状的儿童进行病原学检测,及早发现并治疗,有利于疫情控制及应对突发事件,是降低手足口病死亡率的关键。     

2012～2013年杭州市萧山区手足口病病原谱及临床特征分析

目的：了解杭州市萧山区手足口病（H FM D ）病原谱及临床特征。方法采用荧光定量反转录聚合酶链反应,对2012年5月至2013年7月就诊的208例H FM D疑似患儿咽拭子标本（45份）和粪便标本（208份）进行病原体检测,结合患儿临床资料分析检测结果。结果208例患儿中,肠道病毒（EV ）检出率为83．17％,其中EV71、柯萨奇病毒A16（CoxA16）和其他EV亚型所占比例分别为55．49％、13．29％和31．21％;男、女性患儿EV检出率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。5岁及其以下患儿以EV71感染为主,5岁以上患儿以其他EV亚型感染为主。HFMD患儿临床症状主要为发热伴疱疹,各种类型临床症状患儿均以EV71感染为主。粪便标本EV检出率高于咽拭子标本（P＜0．05）。结论 EV71和其他EV亚型是该地区 HFMD患儿常见病原体,CoxA16感染流行趋势有所下降。加强EV、EV71和CoxA16检测有助于 HFMD的预防和控制。     

手足口病肠道病毒EV71和CoxA16感染的检测分析

手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒引起的常见传染病,以婴幼儿发病为主。大多数患者症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征。引起手足口病的病原体主要为肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16),其中EV71不仅引起HFMD,而     

不同标本及组合对荧光探针法诊断儿童手足口病的价值评估

目的评估不同临床标本及组合在实验室采用荧光探针法诊断儿童手足口病的价值。方法收集680例临床诊断为手足口病的咽拭子和肛拭子标本,其中有溃疡表征的标本223例,有疱疹液的标本522例,有脑膜炎症状的血清和脑脊液标本76例,采用荧光探针法检测肠道病毒肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)及通用型。结果单一标本肠道病毒通用型咽拭子阳性检出率(70.29%)最高,其余依次为肛拭子(65.15%),疱疹拭子(63.03%),溃疡拭子(43.95%),脑脊液(2.63%),血清(1.32%);对于有全套标本的患儿咽拭子确诊率达74.15%,咽拭子与疱疹拭子组合确诊率达91.7%,咽拭子与肛拭子组合确诊断率为89.26%,全套标本组合将诊断率提升至95.61%;单独一个的疱疹拭子与溃疡拭子诊断率分别为63.03%和43.95%,当疱疹拭子与溃疡拭子为2个诊断率分别为66.67%和47.09%,当疱疹拭子与溃疡拭子为3个诊断率分别为67.24%和47.98%,大于等于4个时诊断率将不再提升。结论对手足口病标本进行实验室检测时,首选咽拭子标本,将咽拭子与其他标本组合将明显提升诊断率;血清和脑脊液标本对临床诊断是否感染手足口病不是必须的选择;对于暴发手足口病采集全套咽拭子、肛拭子、疱疹拭子、溃疡拭子标本十分必要;采集疱疹拭子与溃疡拭子标本时同时采集2~3个拭子是较为可靠的做法。     

TLR9启动子区基因多态性与柯萨奇病毒 A16感染手足口病患儿的相关性研究

<正>手足口病(hand,footand mouth disease,HFMD)是一类肠道病毒(enterovirus,EVs)感染引起的传染性疾病,儿童是该病的易感人群,引发手足口病的肠道病毒有多种(型),其中以肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(Cox A16)最为常见。随着近几年EV71型灭活疫苗的接种,EV71感染的儿童手足口病占比减少。虽然CoxA16病毒感染后大部分患儿临床症状较轻,但是发病率较高,引起越来越多的关注^[1-2]。CoxA16感染的患儿临床表现轻重不一,轻症者仅为发热、皮疹、口腔黏膜散在疱疹等,重症者可出现中枢神经系统损害、心肺功能衰竭等^[3-4],CoxA16病毒感染的发病机制至今没有完全阐明,可能与其感染导致的异常免疫反应有关^[5-6]。     

某地区2010年手足口病患者肠道病毒RNA实时荧光逆转录PCR检测结果分析

目的用实时荧光定量RT-PCR技术检测惠州市2010年手足口病患者肠道病毒RNA,了解手足口病病例肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据。方法采集2010年1～12月本院送检的1712例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子和脑脊液等标本5849份,应用荧光RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)。结果男性及女性EV、EV71和CA16感染率分别为68.15%、43.61%、5.56%和61.23%、37.03%、5.70%;共检出1123份EV阳性标本,705份EV71阳性标本,96份CA16阳性标本,阳性率分别为60.28%、33.35%和5.13%;4～6月和7～9月是手足口病发病高峰期,感染肠道病毒EV、EV71型、CA16型人数分别占所有肠道病毒EV、EV71、CA16型感染者的36.33%、49.50%、42.70%和42.56%、38.72%、40.63%;0～4岁的儿童是手足口病的高发人群,占所有患者的85.46%。结论惠州市2010年手足口病的病原以肠道病毒71型为主,夏秋季节是手足口病发病高峰期,0～4岁儿童是感染肠道病毒的高危人群。     

咸阳市2012年手足口病病原学监测结果分析

目的：分析咸阳市手足口病病原体构成特征的变迁,为手足口病防控提供科学依据。方法对2012年咸阳市手足口病病例资料及咽拭子标本检测结果进行分析。结果共送检手足口病病例咽拭子标本549份,检出肠道病毒（EV ）阳性标本126份,阳性检出率为22．95％,其中 EV71阳性77份（占61．11％）、柯萨奇病毒 A组（CoxA）16型（CoxA16）阳性10份（占7．94％）、CoxA10阳性9份（占7．14％）、其他未分型 EV 阳性30份（占23．81％）,未检出CoxA6阳性标本。不同病情病例EV71阳性检出率比较差异有统计学意义（P＜0．05）。发病高峰期及非高峰期送检标本阳性检出率比较差异有统计学意义（P＜0．05）。不同试剂阳性检出率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论咸阳市2012年手足口病病原体以EV71型为主,首次检出CoxA10。重症病例EV71阳性检出率高于普通病例。在手足口病发病高峰期采样,可以提高EV阳性检出率。     

韶关市1190例手足口病病原体检测结果分析

目的分析韶关地区手足口病病原体分布情况。方法收集2011年1月～12月的1190例手足口病患者的咽拭子,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CoxAl6）。结果在1190份标本中病毒核酸阳性率为11．51％（137／1190）,其中Ev71占60．58％（83／137）,CoxAl6占39．42％（54／137）;6月份高发,占29．08％（346／1190）;男女比例为1．64：1,且0～4岁的患儿占93．11％。结论韶关地区2011年手足口病病原体以Ev71为主,6月份高发,主要分布在0-4岁,男性多于女性,实时荧光PCR可用于手足口病病原体的检测,对手足口病的诊疗和防控具有重兽膏义。     

2010～2011年乐山市手足口病监测结果分析

目的了解乐山市手足口病流行特征,探讨科学的防控措施。方法每周监测哨点医院的疑似手足口病病例和辖区内送检的咽拭子标本,采用荧光定量PCR进行病毒型别鉴定。结果 2010～2011年全市共监测疑似手足口病标本436份,病例主要集中在1～5岁年龄组,占95.41%;男女性别比为1.36∶1,发病主要分布于散居儿童(44%)和托幼儿童(46%)。实验室检测表明,引起乐山市手足口病流行的病原体没有明显的型别优势,肠道疾病71型(EV71型)和柯萨奇A组16型(Cox A16型)几乎各占一半。结论加强疫情监测、健康教育宣传力度,以及养成良好的个人卫生习惯是手足口病防控的关键。     

粤东地区2011年手足口病病原学检测及临床分析

目的 了解粤东地区2011年婴幼儿手足口病的病原体分型情况及其与临床的关系.方法 采集2011年1月至12月汕头大学医学院第二附属医院儿科手足口病住院患儿的咽拭子标本,RT-PCR检测肠道病毒71型（EV71）,柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）,肠道病毒属,并对扩增产物测序鉴定.结果 301例患儿中有214例咽拭子中检测到肠道病毒,病毒阳性率为71.1%,其中EV71 60例,占28.0%,CoxA16 108例,占50.5%,除EV71、CoxA16外的其他型别肠道病毒为46例,占21.5%;91例患儿有明显神经系统损害,其中33例EV71检测阳性（33/60,55.0%）,35例CoxA16检测阳性（35/108,32.4%）,8例除EV71、CoxA16外其他型别肠道病毒检测阳性（8/46,17.4%）,15例肠道病毒检测阴性.除1例由EV71引起的的危重型手足口病死亡外其余300例均痊愈出院.结论 粤东地区2011年手足口病病原体主要为CoxA16、EV71,但CoxA16已经成为当年优势病原体,其他型肠道病毒也占有一定比率.而EV71最容易引起神经系统损害和导致重症及危重症,EV71、CoxA16及其他型肠道病毒均可引起神经系统损害.     

手足口病患儿机体免疫功能临床研究

目的：探讨手足口病（HFMD）患儿机体免疫功能的变化。方法将236例HFMD患儿分为3组,肠道病毒71型（EV71）感染组（EV71组）99例,柯萨奇病毒A组16型感染110例（CoxA16组）,有严重合并症的患儿27例纳入重症组。另将24例疝气患儿纳入对照组。检测并比较患儿外周血各类淋巴细胞亚群百分比的差异。结果HFMD患儿CD3^＋、CD3^＋CD4^＋亚群百分比较对照组下降,且重症患儿更为明显（P＜0．05）。CD3^＋ CD8^＋亚群百分比仅重症组低于对照组（P＜0．05）。重症组CD3^-CD16^＋ CD56^＋亚群百分比较EV71组、CoxA16组和对照组升高（P＜0．05）。HFMD患儿CD3^-CD19^＋、CD19^＋CD23^＋亚群百分比高于对照组,且EV71组升高更明显（P＜0．05）。HFMD患儿CD4^＋CD25^＋ T亚群百分比高于对照组（P＜0．05）。结论 HFMD患儿存在不同程度的免疫功能紊乱;CD3^＋、CD3^＋CD8^＋和CD3^-CD16^＋CD56^＋亚群百分比检测可用于监测HFMD患儿病情。     

实时荧光聚合酶链反应检测患儿手足口病病原体

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测患儿手足口病病原体,为防治手足口病提供依据。方法收集手足口病疑似患儿189例(按年龄分为<3岁组113例、3～5岁组76例)及39例手足口病密切接触儿童的咽拭子、疱疹液,用FQ-PCR检测标本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CoxA16),并与酶联免疫吸附试验(ELISA)结果进行比对。结果 189例手足口病患儿疑似组FQ-PCR检测EV阳性141例,阳性率为74.6%,其中<3岁阳性91例、3～5岁阳性50例,3～5岁组EV检出率明显低于<3岁组(P<0.05);EV71阳性135例,CoxA16阳性65例;咽拭子标本阳性率为74.5%(120/161),疮疹液标本阳性率为82.1%(23/28);ELISA检测EV阳性76例(40.2%);39例手足口病密切接触者FQ-PCR检测EV阳性率为33.3%(13/39),ELISA检测阳性率为17.9%(7/39)。结论 FQ-PCR是一种特异性强、灵敏度高、检测较快速、效率高的方法,对检测手足口病病原体及进行相关流行病调研有重要价值。     

实时荧光PCR技术在手足口病检查中的应用

目的采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)法检测手足口病患儿病原体。方法收集433例疑似手足口病患儿的粪便标本进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型(EV-71)和柯萨奇病毒16型(CA-16)鉴别与分析。结果实时荧光PCR法检测433例患儿肛拭子标本使用通用型试剂盒检出366例阳性,其中66例为EV-71感染,151例为CA-16感染。结论 EV-71和CA-16肠道病毒是手足口病的主要病原体,该地区2011年以CA-16感染为主,实时荧光PCR技术对手足口病的病原诊断具有重要价值。     

RT—PCR和FQ—PCR法在亳州地区手足口病检测中的应用

目的比较RT—PCR和FQ—PCR法在手足口病（HFMD）病原学检测中的差异,并探讨亳州地区EV71和CoxA16的流行特征。方法采集毫州地区2011年193例疑似HFMD患者不同种类的标本共252份。对其中的124份咽拭子样品,同时采用RT—PCR和FQ—PCR法进行EV71和CoxA16检测,并比较两种方法检测结果的差异。运用FQ—PCR法对所有标本进行检测,比较不同类型标本间结果的差异,并分析不同感染类型的阳性率。用FQ—PCR法检测咽拭子标本188份,分析不同类型HFMD感染者的季度分布。结果用FQ—PCR及RT—PCR法检测124份疑似HFMD患者的咽拭子标本,EV71的阳性率分别为68．55％（85／124）和63．71％（79／124）,CoxA16的阳性率分别为46．77％（58／124）和41．94%（52／124）。两种方法检测结果间的差异均有统计学意义（χ^2分别为95．385、101．908,P均,40．01）。用FQ—PCR法共检测252份标本,其中咽拭子、粪便、疱疹液和脑脊液的阳性率分别为75．00％（106／188）、81．13％（43／53）、6／7和1／4,不同类型标本之间阳性率的差异无统计学意义（χ^2=6．888,P〉0．05）。EV71单独感染、CoxA16单独感染及联合感染率分别为42．06％、9．92％和23．81％,其差异有统计学意义（χ^2=63．369,P〈0．05）。EV71单独感染季度间差异无统计学意义（χ^2=6．561,P〉0．05）,而CoxA16单独感染及联合感染的季度间差异均有统计学意义（CoxA16单独感染：χ^2=8．061,P〈0．05;联合感染：χ^2=24．898,P〈0．01）。结论FQ—PCR比RT-PCR法更适用于HFMD病原学检测,并且不受标本种类限制。EV71单独感染率最高,常年流行;联合感染次之,以夏秋季为主;CoxA16单独感染较少见,以秋冬季较多。