两株人肝癌细胞QSG-7701和HepG2放射敏感性的体外研究

在研究肿瘤的辐射效应之初就有人发现 [1], 各种肿瘤细胞对辐射的敏感性有明显差异 , 因而在接受放射治疗时效果也不一样 . 体外培养细胞株的存活分数 (surviving fractionm,SF)在受到 2 Gy照射后 (简称 SF2)可以在 0.01～ 0.90之间变动 , 即使是同一肿瘤的不同细胞株 , SF2也可以相差数十倍 [1]. 放射诱发细胞凋亡现象是近年放射生物学研究的一个热点 . 有人在研究鼠的肿瘤时发现 [2], 细胞放射反应与照射后凋亡水平具有相关性 .     

肝癌细胞受照后代生长特性及放射敏感性变化

探讨肝癌细胞照射后存活后代生长特性及放射敏感性的变化。方法　人肝癌细胞株HepG2和其照射后存活后代体外培养 ,测定其群体倍增时间、放射敏感性和 p5 3的表达水平。结果　HepG2的群体倍增时间为 (96 .0± 6 .8)h ,克隆形成率为 (13.0± 1.5 ) % ,SF2 为 0 .41± 0 .0 5。HepG2照射后存活后代群体倍增时间为 (12 4.8± 12 .2 )h(t =3.5 72 ,P <0 .0 5 ) ,克隆形成率为 (5 .0± 0 .6 ) % (t=8.5 37,P <0 .0 1) ,SF2 为 0 .6 5± 0 .0 8(t=3 .811,P <0 .0 5 ) ,p5 3表达水平无差别 (t =0 .778,P >0 .0 5 )。结论　肝癌细胞照射后存活后代生长延缓 ,放射敏感性降低 ,但与 p5 3的表达无关。     

人肝细胞癌放射敏感性与凋亡敏感性体外研究

肿瘤细胞的放射敏感性存在很大差异 ,同一肿瘤的不同细胞株 ,ＳＦ2 可相差数十倍。在鼠肿瘤研究中发现 ,细胞放射反应与照射后凋亡水平具有相关性。那么人肝细胞癌的辐射敏感性怎样 ,是否与细胞受照射后的凋亡敏感性有关 ,本研究以 3种人肝癌细胞株为模型用体外方法探讨这个问题。1　材料和方法1.1　细胞系及照射条件 :人肝癌细胞系ＢＥＬ 740 2、ＱＳＧ 770 1、ＨｅｐＧ2 均为南方医院消化研究所提供。 3株细胞均在37℃、5 %ＣＯ2 条件下 ,培养于含 10 %胎牛血清的ＲＰＭＩ 16 40培养液中。细胞处于指数生长期时进行照射 (换液后 2 4ｈ)。…     

人乳腺癌细胞系雌激素受体状态 细胞增殖动力学与放射敏感性

用葡聚糖包裹碳饱和分析法,测定两系人乳腺癌细胞BCap-37和McF 7的雌激素受体(ER)状态,通过流式细胞仪测定其DNA含量,了解细胞增殖动力学特点,并分别用克隆形成分析法按单击多靶和线性二次方程(L-Q)模型,分析放射敏感性差异。结论是:ER阴性的乳腺癌细胞DNA含量增高,细胞组织学分化程度较差,它的放射敏感性比ER阳性乳腺癌细胞略高,该差别的主要原因是Dq(或a成份)的不同。     

人子宫内膜癌体外放射敏感性的实验研究

检测3株人子宫内膜癌细胞系HECCL-1、HHUA和LA细胞对放射线的敏感性,为临床治疗提供参考.方法:在0.5、1.0、1.5、2.0、3.0和6.0 Gy荆量水平,用6MV X线单次照射体外培养的3株人子宫内膜癌细胞株,用MTT比色分析法检测两种不同浓度下3株人子宫内膜癌细胞系细胞d<,2>～d<,6>的存活丰,绘制其生存曲线.结果:6 MV X线照射后,3株人子宫内膜癌细胞系细胞亚致死性损伤剂量和细胞浓度无相关性,生存曲线在0～1.5 Gy形成肩区,亚致死性损伤剂量迭1.5 Gy后,生存曲线转入直线部分,随着剂量的增加发生指数性杀灭.结论:3株人子宫内膜癌细胞系具有较强的放射敏感性,属于放射敏感性肿瘤细胞.     

甘露糖对6个人非小细胞肺癌细胞系放射敏感性影响

目的 探讨甘露糖对6个人非小细胞肺癌细胞系放射敏感性的影响及其可能机制。方法 采用Western blot检测磷酸甘露糖异构酶在6个肺癌细胞系中的表达。利用MTT法观察甘露糖对肺癌细胞系的增殖抑制作用;分别给予对照组、甘露糖组0、2、4、6、8、10Gy照射,采用平板克隆形成实验检测甘露糖对6个肺癌细胞放射敏感性的影响;流式细胞术检测对照组、甘露糖组、照射组及联合组细胞的凋亡情况。结果 6个肺癌细胞系中磷酸甘露糖异构酶表达量各不相同,其中A549细胞表达量最高,H460细胞表达量最低。11.1mmol/L甘露糖对A549、H460细胞系抑制作用相同,随着甘露糖浓度增加,对H460细胞系抑制作用更显著。采用11.1mmol/L的甘露糖可明显增加H460细胞系放射敏感性及细胞凋亡率,而对A549细胞系放射敏感性和凋亡率影响不大。结论 在磷酸甘露糖异构酶高表达的6个肺癌细胞系中,甘露糖可增强部分肿瘤细胞的放射敏感性。     

SALL4对白血病HL-60细胞放射敏感性影响研究

目的 探讨下调SALL4对白血病细胞放射敏感性影响,为提高白血病患者放射敏感性提供新思路。方法 人急性髓系白血病细胞株HL-60感染shRNA SALL4和shRNA control慢病毒记为Lv-shSALL4组和Lv-shNC组,用RT-PCR和蛋白印迹法检测细胞中SALL4水平,同时取感染后的细胞给予8Gy剂量照射处理记为Lv-shSALL4＋放射组、Lv-shNC＋放射组,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白水平。取Lv-shSALL4组和Lv-shNC组细胞,给予0、2、4、6、8Gy照射,细胞克隆形成实验测定放射增敏比。结果 Lv-shSALL4组细胞中SALL4水平低于Lv-shNC组(P<0.05)。细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白水平升高,与Lv-shNC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Lv-shSALL4＋放射组细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白水平升高(P<0.05)。Lv-shSALL4组细胞放射增敏比为1.323。结论 下调SALL4增加白血病细胞放射敏感性,抑制白血病细胞增殖并诱导凋亡。     

宫颈癌细胞受照后代生长特性及放射敏感性变化

目的探讨宫颈癌细胞照射后存活后代生长特性及放射敏感性变化.方法小鼠宫颈癌U14和其照射后存活后代体外培养,测定其群体倍增时间、放射敏感性和p53的表达水平.结果U14群体倍增时间(92.0±4.8)h,克隆形成率为(36.0±0.8)%,SF2为0.45±0.06.U14照射后存活后代群体倍增时间为(126.4±8.6)h(t=4.763,P＜0.05),克隆形成率为(15.0±1.5)%(t=9.647,P＜0.01),SF2为 0.84±0.04(t=4.625,P＜0.05),p53表达水平无差别(t=0.846,P＞0.05).结论宫颈癌细胞照射后存活后代生长延缓,放射敏感性降低,但与p53的表达无关.     

miR-449a对胰腺癌细胞放射敏感性影响

目的 研究miR-449a对胰腺癌SW1990细胞放射敏感性的影响方法 qRT-PCR检测放疗前后胰腺癌SW1990细胞系中miR-449a的表达变化,利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将miR-449a mimics及miR-NC转染到SW1990细胞中,流式细胞术、克隆形成实验检测放射处理后细胞放射敏感性变化。使用TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证明miR-449a与Cyclin D1的靶向作用,免疫组织化学法观察Cyclin D1在胰腺癌组织和胰腺癌旁5 cm的正常胰腺组织的分布,基因敲除Cyclin D1验证其对胰腺癌细胞放射敏感性的影响。结果 经放射处理后,miR-449a在胰腺癌细胞中的表达量明显降低;过表达miR-449a增加了放射后胰腺癌细胞的凋亡率,并使胰腺癌细胞克隆形成率也明显降低;TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证实了Cyclin D1是miR-449a的靶标;Cyclin D1蛋白在胰腺癌患者组织中的阳性染色率(70%,35/50)明显高于正常胰腺组织(20%,2/10),Cyclin D1增加了胰腺癌细胞的放射敏感性。结论 miR-449a通过靶向干扰Cyclin D1的表达,促进胰腺癌细胞的放射敏感性。     

人肝癌细胞株HepG2和BEL-7402对放射敏感性的体外实验研究

目的　采用体外实验方法探讨人肝癌细胞株HepG 2和BEL -740 2对放射的敏感性。方法　对人肝癌细胞株HepG2和BEL -740 2进行体外培养 ,应用集落形成法和MTT法测定 6MVX线不同剂量照射后细胞的存活率 ,计算 2株细胞放射敏感性参数 (D0 )。结果　HepG 2的D0 值为 1.5 ,SF2 为 (0 .45± 0 .0 5 ) ;BEL -740 2的D0 值为 1.6,SF2 为 (0 .63± 0 .0 5 )。MTT法与集落形成法相关性较好 (γ =0 .946,P <0 .0 5 )。结论　HepG2具有较高的放射敏感性 ,BEL -740 2的放射敏感性较低 ;MTT法可替代集落形成法作细胞放射敏感性的快速测定。     

吉非替尼对肺癌细胞株HCC827和H358放射敏感性的影响及其机制研究

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的一个重要因素,其过表达或是下游通路的激活与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路可能会增强放疗敏感性。本研究旨在探讨小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼能否增加肺癌细胞株HCC827和H358的放疗敏感性及其可能的机制。方法选取HCC827和H358这两个非小细胞肺癌细胞株,分为单纯X线组和X线+吉非替尼两组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经1μmol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射。克隆形成实验比较两株细胞中不同分组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中的磷酸化H2AX(γ-H2AX)及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,H358细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.355和0.433;HCC827细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.223和0.242,差别不明显。激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后各时间段实验组H358细胞核中g-H2AX斑点相比对照组要多,且持续时间更长。而对照组和实验组的HCC827细胞g-H2AX斑点在各时间段并无明显差异;激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后对照组H358的EGFR蛋白在1h内入核,而经吉非替尼处理后EGFR蛋白几乎不入核;实验组及对照组HCC827细胞的EGFR表达位置均在细胞质中,胞核中很少或者没有,可以认为并无入核现象;Western blot结果显示,H358细胞在经4Gy放射处理后有入核现象,而预先经吉非替尼处理后,EGFR蛋白几乎不在核内表达而仍位于细胞浆内。对于HCC827细胞,实验组及对照组的EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中很少或没有,且两组并无明显差异。结论吉非替尼可增加肺癌细胞株H358的放射敏感性,这可能与其阻止放疗后EGFR入核、影响放疗后双链断裂(double strand break,DSB)修复有关;而对HCC827细胞无影响,可能与其放疗后EGFR不入核相关。     

三种缝线材料对人肺腺癌细胞A549增殖和细胞周期的影响

背景与目的细胞与生物医用材料之间的相互作用是影响其临床应用的重要因素之一,本研究旨在探讨三种缝线材料对人肺腺癌细胞A549增殖和细胞周期的影响。     

化疗药物对宫颈癌细胞系作用的实验研究

目的：本实验通过研究顺氯胺铂(cDDP)、平阳霉素(PYM)、氟尿嘧啶(5-Fu)在体外对宫颈癌Hela及Siha细胞系的作用，探索有效的宫颈癌新辅助化疗方案，以指导宫颈癌的临床化疗。方法：应用三磷酸腺苷生物发光法(adenosine triphosphate cell viability assay，ATP—CVA)检测以上3种化疗药物单用及联合用药对HeLa及Siha细胞的药物敏感性，药物浓度以血浆峰浓度(plasm peak concentration；PPC)计算。结果：从0．2～2倍PPC浓度时，各药物随着浓度的增加抑制率逐渐增加。1倍PPC时，5-FU、cDDP、cDDP PYM和cDDP 5-Fu对Hela细胞的抑制率均高度敏感、PYM随着药物剂量增加对HeLa细胞的抑制率无明显增加，且均不敏感。1倍PPC时，PYM、5-Fu、cDDP、cDDP PYM和cDDP 5-Fu对Siha细胞的抑制率均高度敏感。结论：1倍PPC时，cDDP、5-Fu、cDDP PYM、cDDP 5-Fu能有效抑制HeLa和Siha细胞的生长，PYM能有效的抑制Siha细胞的生长，而对Hela细胞无明显的抑制效应。临床宫颈癌的化疗可以以此作为参考依据。     

蛇毒制剂抗肿瘤体外实验研究

作者应用蛇毒提纯成份（蛇毒Ａ、Ｂ、Ｃ）及蛇毒混合品，对４株人类肿瘤细胞进行体外抗癌实验并进行比较。结果表明，蛇毒－Ａ对细胞增殖的抑制率高于蛇毒混合品（Ｐ＜０．０５）。蛇毒－Ａ１０００μｇ／ｍｌ对ＳＧＣ－７９０１细胞的抑制率为６２．７％，高于蛇毒－Ｂ、Ｃ及蛇毒混合品。用蛇毒－Ａ处理后，４株细胞均有形态学的改变，以ＳＧＣ及ＳＭＭＣ细胞最为明显。     

放射线诱导hEgr-1-CD对鼻咽癌CNE放射增敏作用的研究

目的 研究放射线诱导hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株放射增敏作用。方法 将pcDNA3.1（＋）Egr-1-CD利用脂质体转染的方法 转染入鼻咽癌细胞株,给予不同剂量的X线照射观察基因表达与放射的剂量效应关系,观察不同的放射线及不同剂量的前药对鼻咽癌细胞的杀伤效应。结果 电离辐射可诱导增强自杀基因阳性鼻咽癌CNE细胞株中CD基因的表达,电离辐射与前药5-Fc的联合应用大大增强了对自杀基因阳性细胞的杀伤作用,其杀伤作用大于单独自杀基因前药系统和单独照射。结论 hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株有放射增敏作用,其与放射联合应用对CNE细胞有明显的协同杀伤作用。     

14株 (亚株 )人鼻咽癌细胞的放射生物特性

目的：了解14株（亚株）人鼻咽癌细胞的放射生物学特性。材料与方法：采用集落存活分析法分析中国建成的14株（亚株）人鼻咽癌细胞的特性;除了CNE1之外,所有的细胞均为低分化鳞癌细胞,实验求得的放射剂量存活曲线用线性二次模型进行拟合,用Fertil和Malais介绍的方法和原理计算存活曲线的初斜率（α）,平均抑制剂量（mean inactivation dose,MID)及2Gy处的存活分数（SF2）。结果：α：0.001-0.81,MID:1.11-2.46,SF2:0.17-0.66,14株（亚株）鼻咽癌细胞的放射敏感性变化较大,来源同一个母株（SUNE1）的8个亚株之间的放射敏感性存在着差别。结论：鼻咽癌细胞在个体内和个体间变化较大;因此,在临床制定鼻咽癌的治疗计划时,要考虑鼻咽癌的个体放射生物学特性。     

基质金属蛋白酶-24在卵巢浆液性囊腺癌细胞株中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶－24(MMP-24)基因在卵巢癌细胞株中的表达及临床意义。方法应用半定量RT-PCR和Western blot对卵巢浆液性囊腺癌细胞株OVCa-R₃、SKOV₃ 、HO-8910及人卵巢细胞株TC-1进行检测。结果3种卵巢癌细胞株中MMP-24基因和蛋白的表达均增强,与正常卵巢细胞相比,差异有统计学意义。结论MMP-24基因可能与卵巢癌的发生、发展有关。     

TGF-β1对人肝癌细胞系凋亡的调控作用研究

 目的　本研究旨在明确人肝癌细胞系中TGF β1的作用及其与凋亡的关系。 方法　本研究选用了 3种含有不同 p5 3基因状态的人肝癌细胞系 ,应用TUNEL技术对TGF β1诱导的肝癌细胞的凋亡进行了定量检测。结果　TGF β1仅能诱导HepG2细胞 (野生型p5 3)凋亡 ,这提示凋亡与 p5 3基因的表达具有明确的联系。结论　HepG2细胞系比Huh 7和Hep3B系细胞更易发生TGF β1诱导的凋亡 ,TGF β1通过p5 3依赖性途径诱导肝癌细胞系发生凋亡     

蝎毒抗癌多肽对H22细胞株体内、体外的抑瘤作用

目的 观察蝎毒抗癌多肽（APBMV）对小鼠肝癌（H22）实体瘤及瘤细胞的抑制作用。方法 应用MTT法检测APBMV对H22瘤细胞的毒性作用；通过小鼠H22实体瘤模型，观察APBMV对肿瘤生长的抑制作用及对小鼠外周血白细胞（WBC）数和脾脏指数（SI）的影响。结果 APBMV对H22细胞具有一定的毒性作用，但剂量效应关系不明显（P＞0．05）。APBMV能明显抑制小鼠H22肿瘤的生长，抑制率最高可达40．30％（P＜0．01），带瘤小鼠外周血WBC和SI无明显变化或略高于对照组，而阳性对照5－Fu组小鼠WBC和SI均明显下降（P＜0．01）。结论 APBMV是东亚钳蝎蝎毒中的1种低毒有效的抗肿瘤成分，能抑制小鼠肝癌的生长。