黄芪提取及提取液陶瓷膜超滤纯化工艺研究

目的 建立适合于工业化生产的黄芪Astragali Radix提取和超滤纯化工艺方法。方法 采用L₉(3⁴)正交设计及层次分析法,以加水量、提取时间和提取次数为提取考察因素,以操作压力、料液温度和膜面错流速度为超滤纯化考察因素,以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、黄芪多糖、醇溶性浸出物含量(保留率)以及出膏率(除杂率)为评价指标,优选最佳提取和最佳超滤工艺参数。结果 最佳提取条件为饮片加16倍量水(6.67、4.67、4.67倍),提取3次,总提取时间210 min(70 min/次);最佳超滤工艺为孔径50 nm的无机陶瓷膜,操作压力0.12 MPa,膜面错流速度5.3 m/s和料液温度25℃。通过提取液与超滤液的特征图谱建立与相似度分析可以得出,超滤液与提取液的化学成分一致性较好,且各批次超滤液中的化学成分稳定存在。结论 所建立的黄芪提取和超滤纯化工艺方法科学合理、简便可行、重复性好,有良好的工业化生产前景。     

LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中5种成分

目的建立LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素5种有效成分的含有量。方法黄芪注射液和黄芪口服液甲醇稀释液在Agilent ZORBAX SB C18(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱上分离,流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸,70∶30,V/V);体积流量为300μL/min。MS采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行正离子扫描。结果 5种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,在黄芪注射液和黄芪口服液中的平均回收率分别为96.8%~102.3%和95.9%~101.5%。结论本法测得结果准确、可靠、灵敏度高,可用于黄芪注射液和黄芪口服液的质量控制。     

黄芪不同部位黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定

目的对黄芪药材不同部位黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量进行测定并对比分析,为黄芪药材入药部位的合理性提供科学依据。方法采用HPLC-ELSD法测定黄芪不同部位黄芪甲苷的含量,HPLC-UV法测定黄芪不同部位毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。结果纤维根中黄芪甲苷含量最高(0.220 7%～0.321 9%),主根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量最高(0.021 9%～0.029 7%)。结论黄芪药材产地加工应除去根头及纤维根,保证黄芪药材质量的稳定性,纤维根中黄芪甲苷可加以提取应用。     

超滤法和水醇法制备黄芪注射液的实验研究

目的：通过实验研究优选黄芪注射液的制备工艺。方法：采用水醇法和超滤法制备黄芪注射液并对其进行杂质检查及含量测定的比较。结果：两种方法制备的产品均符合黄芪注射液的质量标准，但超滤法制备的黄芪注射液中黄芪甲苷的含量低于水醇法。结论：采用水醇法制备的黄芪注射液质量优于超滤法制备的产品。     

HPLC同时测定黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷

目的:建立同时测定黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷的方法.方法:采用HPLC仪,色谱柱Waters symmetry C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相乙腈-水(30:70),体积流量1 mL· min-1,柱温35℃,检测波长260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷),210 nm(黄芪甲苷).结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷,黄芪甲苷线性范围分别为0.391 ～9.78,0.974 ～24.3 μg,平均加样回收率分别为99.18％(RSD 2.43％),99.41％(RSD 2.59％).结论:该方法简单快捷,可用于黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷的同时测定,为含黄芪制剂质量标准的建立提供了参考.     

黄芪饮片及配方颗粒中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定

目的实验分析黄芪饮片及配方颗粒中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定。方法将黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量作为评价指标,经由Waters高效液相色谱仪测定黄芪饮片及配方颗粒中成份含量和不同环境下的稳定性。结果黄芪饮片中的黄芪甲苷含量低于黄芪配方颗粒,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量高于黄芪配方颗粒,但对比无明显差异(P>0.05);加速实验测定显示40℃、75%RH环境下,黄芪饮片及配方颗粒中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量无明显变化,对比无明显差异(P>0.05);高温、高湿、强光条件下配方颗粒中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量变化明显,同条件下黄芪饮片中黄芪甲苷含量变化更为明显。结论综合有效成份和制剂稳定性,黄芪配方颗粒可替代黄芪饮片,本次试验可为配方颗粒统一工艺标准和质量标准提供参考。     

黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的转化

目的：考察黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的变化。方法：采用薄层色谱法进行定性鉴别,高效液相色谱法进行含量测定。结果：黄芪经侧耳菌发酵后黄芪甲苷的含量降低了91%,并有新的物质产生;毛蕊异黄酮葡萄糖苷经过高温灭菌后,其含量显著降低,发酵后该成分消失。结论：黄芪在侧耳菌的作用下黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷均发生了生物转化,生成更利于人体吸收利用的物质。     

黄芪饮片与黄芪配方颗粒有效成分含量比较

目的:比较黄芪饮片及其配方颗粒中2种有效成分的含量。方法:采用HPLC法,迪马C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈∶水(32∶68)为流动相;蒸发光检测器检测黄芪甲苷含量,以乙腈为流动相A,以0.2%甲酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱紫外检测器检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,比较黄芪饮片及其配方颗粒中二者含量差异。结果:黄芪饮片中2种有效成分含量均高于《中国药典》标准,黄芪配方颗粒中黄芪甲苷含量接近药典标准、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量与所标示的浓缩倍数不符,远低于药材含量。结论:配方颗粒生产工艺及质控标准需要改进,需建立统一的配方颗粒工艺标准和质量标准。     

黄芪浸膏质量标准的研究

目的建立黄芪浸膏的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对黄芪浸膏中的黄芪甲苷进行定性鉴别,应用HPLC法对黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行定量测定。结果薄层色谱斑点清晰,分离度良好;黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷在测定范围内均表现出良好的线性(r0.999),方法的平均回收率在97.5%~100.5%之间。结论定量的方法在Pheomenex Luna C18(0.46 cm×25 cm,5μm),Agilent Eclipse XDB-C18(0.46 cm×25 cm,5μm),Waters XBridge Shieldrp18(0.46 cm×15 cm,5μm)和Welch Xtimate C18(0.46 cm×15 cm,5μm)4根色谱柱具有良好的精密度和重现性,结果准确可靠。     

4个主要黄芪产地黄芪质量比较

目的:比较4个主产地黄芪浸出物、总黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、总皂苷及黄芪甲苷的含量差异,为种植、资源开发及合理使用提供参考依据。方法:应用浸出物测定法测定浸出物的含量;应用紫外可见分光光度法测定总黄酮、总皂苷的含量;应用高效液相色谱法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷的含量。结果:黑龙江、甘肃、内蒙古和山西黄芪的冷浸法测定水溶性浸出物的含量分别为18.52%、21.13%、24.46%和19.33%;冷浸法测定醇溶性浸出物含量分别为8.11%、9.83%、11.44%和10.26%;总黄酮的含量分别为0.356%、0.574%、0.693%和0.492%;毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量分别为0.040%、0.111%、0.135%、0.021%;总皂苷的含量分别为0.171%、0.283%、0.342%、0.240%;黄芪甲苷的含量分别为0.042%、0.068%、0.079%、0.058%。结论:不同产地黄芪浸出物、总黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、总皂苷、黄芪甲苷含量不同,黄芪水溶性浸出物含量内蒙古甘肃山西黑龙江;醇溶性浸出物的含量内蒙古山西甘肃黑龙江;总黄酮含量内蒙古甘肃山西黑龙江;毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量内蒙古甘肃黑龙江山西;总皂苷的含量内蒙古甘肃山西黑龙江;黄芪甲苷含量内蒙古甘肃山西黑龙江。4个产地黄芪质量有较大差异,应建立多成分的评价指标,更科学地评价黄芪质量。     

响应曲面法优化参麦注射液超滤工艺研究

目的利用响应曲面法优化参麦注射液超滤工艺。方法在单因素实验的基础上,应用BoxBehnken设计方法建立数学模型,选择过膜压力、药液浓度和洗滤体积为自变量,以总固体和总皂苷的收率为因变量,进行响应曲面分析。结果参麦注射液最佳超滤工艺:过膜压力为0.15 Mpa,药液浓度为稀释至理论配制量的22%,洗滤体积为4倍。总固体及总皂苷平均收率分别为94.03%、89.16%,与预测值(94.39%、89.45%)的偏差0.4%、0.3%。结论优选的参麦注射液超滤工艺稳定可行,预测性好,可为工业化大生产提供科学的依据。     

基于超滤技术的消癌平注射液工艺改进

目的：采用超滤技术优化消癌平注射液的生产工艺。方法：采用HPLC、比色法、动态浊度法和光阻法分别检测消癌平注射液超滤前后绿原酸、总酚酸、细菌内毒素的含量变化及澄明度的合格率;比较原生产工艺和超滤膜联用技术对消癌平注射液中指标成分的影响、细菌内毒素的去除效果及澄明度的改善程度。结果：原生产工艺、30 kDa和5 kDa超滤膜联用、30 kDa和10 kDa超滤膜联用成品中绿原酸回收率分别为51.6%,52.6%,55.3%,总酚酸回收率分别为75.3%,58.2%,64.6%,细菌内毒素去除率分别为84.2%,98.4%,98.2%,成品澄明度合格率分别为80.0%,95.6%,93.3%。结论：与原工艺相比,采用截留相对分子质量30 kDa和5 kDa的超滤膜进行二级超滤时,指标性成分无明显损失,但可最大程度提高成品澄明度合格率,并能有效去除药液中细菌内毒素,保证注射剂的安全性及生产效率,适用于消癌平注射液的生产。     

防己黄芪颗粒的提取工艺研究

目的优选防己黄芪颗粒的制备工艺。方法以粉防己碱、防己诺林碱、黄芪甲苷提取率及固形物得率为指标成分,采用正交试验法对防己黄芪颗粒的提取工艺进行优选,并对小鼠和大鼠的抗炎作用进行药效学验证。结果优选工艺:防己、黄芪等药味先以10倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5h;再以12倍量水煎煮2次,每次1.5h。提取物对小鼠和大鼠均有抗炎作用。结论该工艺合理,有效成分提取效率较高。     

超滤工艺对生脉注射液中有效成分透过率的影响

目的：考察超滤工艺对生脉注射液中有效成分透过率的影响。方法：以人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,五味子醇甲透过率为指标,通过正交试验考察聚砜膜孔径、温度、压力对生脉注射液超滤工艺的影响。采用HPLC测定指标成分含量,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~30 min,0%~10%A;30~40 min,10%~23%A;40~50 min,23%A;50~85 min,23%~60%A;85~95 min,60%~100%A）,检测波长203 nm。结果：最佳超滤工艺为聚砜膜孔径50 000,温度45 ℃,压力11 psi;人参皂苷Rg₁,Rb₁,Re,五味子醇甲的透过率分别为80.26%,85.02%,50.69%,94.99%。结论：超滤工艺对生脉注射液中有效成分的透过率存在一定影响,为生脉注射液过滤工艺的优选提供实验依据。     

防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺优选

目的： 优选防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺条件。方法： 采用HPLC测定粉防己碱、防己诺林碱及黄芪甲苷含量。以干燥物含水量、粉防己碱和防己诺林碱的总含量、黄芪甲苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察干燥温度、履带速度、进料速度对防己黄芪颗粒真空带式干燥工艺的影响。结果： 最佳真空带式干燥工艺条件为3个干燥区的温度依次为80,85,80℃,履带速度20 cm·min^-1,进料速度12 L·h^-1;含水量4.58%,粉防己碱和防己诺林碱总提取量11.97 mg·g^-1,黄芪甲苷提取量0.54 mg·g^-1。结论： 优选的干燥工艺具有干燥速率高、产品质量好等优点,符合GMP要求,为防己黄芪颗粒的工业化生产提供实验依据。     

超滤工艺对风痛宁注射液中有效成分的影响

目的：采用正交试验方法,研究超滤工艺对风痛宁注射液有效成分的影响。方法：以温度、pH值、药液浓度和超滤膜截留分子量4因素进行正交设计,盐酸青藤碱为检测指标,测定超滤前后药液成分浓度,通过计算透过率来观察盐酸青藤碱超滤前后的含量变化。结果：温度、pH值、药液浓度和超滤膜截留分子量4个考察因素对盐酸青藤碱透过率无显著影响。结论：风痛宁注射液有效成分进行超滤的适用性较好。     

黄芪注射液拮抗阿霉素心脏毒性作用的研究

目的：研究黄芪注射液对阿霉素心脏毒性的保护作用及其机制。方法：采用阿霉素体外损伤大鼠心肌线粒体和体内小鼠心脏毒性两种模型,应用生化方法测定黄芪注射液对其心脏毒性的保护作用。结果：阿霉素体外引起大鼠心肌线粒体丙二醛（MDA）水平升高,谷胱甘肽（GSH）含量降低及线粒体肿胀等,黄芪注射液对上述损伤有明显的保护作用。体内实验表明,黄芪注射液对阿霉素引起的小鼠心肌线粒体丙二醛（MDA）、血清肌酸磷酸激酶（CK）、门冬氨酸氨基转移菌（AST）活性水平增高及超氧化物歧化酶（SOD）活性降低等损伤均有较好的保护作用。结论：黄芪注射液能拮抗阿霉素引起的心脏毒性,为临床应用黄芪注射液作为抗肿瘤辅助药物提供了实验依据。     

超滤在痰热清注射液制备中的应用研究

目的 选择适用于痰热清注射液(黄芩、熊胆粉、山羊角、金银花、连翘)制备的超滤膜及超滤参数.方法 通过超滤前后细菌内毒素检测,脱色效果、指标性成分(黄芩苷、熊去氧胆酸、氨基酸、总固体)透过率和指纹图谱相似度评价,对超滤膜进行筛选;并以膜通量为指标,对超滤参数进行优选.结果 用灵敏度0.25 EU/mL的鲎试剂检查,饮用水通过10 kDa、8 kDa、5 kDa、3 kDa的膜后均符合注射用水内毒素标准要求,不同孔径超滤膜对药液色泽和黄芩苷、熊去氧胆酸、总固体透过率影响较大,对氨基酸透过率和指纹图谱相似度影响较小;泵转速250 r/min、操作压力193.06 kPa、药液温度40℃时膜通量最大.结论 选择5 kDa超滤膜能有效去除细菌内毒素,改善痰热清注射液颜色,对注射液整体化学成分影响不大,指标性成分含量及指纹图谱相似度符合痰热清注射液质量标准.     

正交试验优选黄芪桂枝五物汤的水提取工艺

目的:优选黄芪桂枝五物汤的提取工艺.方法:用高效液相色谱法分别测定黄芪甲苷、芍药苷.以黄芪甲苷、芍药苷和干浸膏的含量为考察指标,通过正交试验法优选最佳提取工艺.结果:优选得到的工艺为药材加10倍水量浸泡0.5h、煎煮3次、每次煎煮1.5h.结论:最佳提取工艺稳定可行,可作为黄芪桂枝五物汤的提取工艺.     

Hemolytic assay for Huangqi Injection

Objective Huangqi Injection is a preparation with an extract of Astragali Radix which has a long history of being used as a tonic to strengthen the body's immunity. Anaphylaxis and hemolysis are two main adverse drug reaction(ADR) of injections. Our study was aimed to establish an approach for the(ADR) prediagnosis of Huangqi Injection. Methods An in vitro model for anaphylactoid assay of Huangqi Injection based on the release rate of histamine and β-hexosaminidase of RBL-2H3 cells induced by injections and a colorimetric method based on the detection of hemoglobin resulted in the erythrocyte hemolysis for prediagnostic assaying the hemolytic ADR of injections were established. Results Both histamine and β-hexosaminidase are the anaphylactiod mediators, but β-hexosaminidase release induced by Huangqi Injection could not be determined by spectrophotometry due to the interference of the injection itself. In addition, normal hemolysis and abnormal hemolysis were discovered during the experiment. The fingerprints and tannins in different batches of injections showed obvious differences, indicating that the content of tannins was related to abnormal hemolysis and higher histamine-secreting from RBL-2H3 cells. Conclusion The results indicate that the hemolytic assaying method is not only suitable for prediagnostic assaying of hemolytic ADR of herbal medicine injection, but also partly reflects the anaphylaxis of herbal injections, and tannins may be the major factors causing abnormal hemolysis.