青蒿鲨烯合酶基因打靶研究

目的通过代谢途径工程调整代谢流向,试图增大转基因青蒿Artemisia annua植株中的青蒿素产量。方法利用青蒿鲨烯合酶(SS)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因和胞嘧啶脱氨酶(CodA)基因构建基因打靶载体,并通过冻融法将载体导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens。以叶盘法转化青蒿,采用"分段选择法"筛选转基因再生植株。结果对表达GFP基因后发出绿色荧光的转基因植株,采用PCR及PCR产物杂交法,在1棵转基因植株中检测到外源GFP基因,而未检测到内源SS基因。初步证据显示,在转基因青蒿植株中,突变型SS基因已取代野生型SS基因。结论青蒿鲨烯合酶基因打靶已取得初步成功。     

转基因何首乌毛状根生物转化青蒿酸的研究

目的利用转基因何首乌Polygonum multiflorum毛状根对青蒿酸进行生物转化研究,分离鉴定其转化产物。方法何首乌毛状根预培养7 d,投入青蒿酸,培养2 d,终止反应,利用TLC和GC-MS对转化产物进行检测,利用硅胶柱、ODS反相柱和Sephadex LH-20柱色谱对转化产物进行分离纯化,并根据理化数据和波谱技术鉴定转化产物的化学结构。结果青蒿酸在何首乌毛状根中发生了转化反应,经GC-MS检测可生成多种青蒿素类化合物。分离鉴定了2个转化产物:异青蒿内酯(1)和3β-羟基青蒿酸(2),利用GC-MS鉴定了另外2个转化产物:去氧青蒿素B(3)和青蒿内酯(4)。结论本实验首次利用转基因植物器官对青蒿酸进行生物转化研究,得到3个青蒿素类化合物和1个羟基化产物。该研究一方面填补了转基因植物器官对青蒿素类化合物生物转化的空白,另一方面也丰富了转基因何首乌毛状根的化合物转化类型。     

青蒿有效部位及其成分的解热作用研究

目的:观察青蒿提取物有效部位及其主要成分对大鼠的解热作用。方法:采用鲜酵母致大鼠体温升高的模型,观察青蒿有效部位及其成分对大鼠体温的影响。结果:青蒿中的有效部位(BJQH-A)及主要成分(青蒿乙素、青蒿酸、东茛菪内酯)对鲜酵母致大鼠体温升高具有明显的解热作用。结论:青蒿中含有多个具有解热作用的成分,它们的作用强度、起效时间和作用维持时间各有差别,青蒿的解热作用可能是其活性成分群整合作用的结果。     

青蒿鳖甲汤治验举隅

青蒿鳖甲汤出自《温病条辨·下焦篇》方由青蒿、鳖甲、生地、知母、丹皮组成,是治疗温病后期阴虚发热的代表方剂,从报道中看,一般多运用本方治疗以低热为主的病证,笔者以本方为主加减不仅用治多种疾病导致的低热,对高热或自觉发热者,凡切合阴虚病机者用此方均取得了显著的疗效。现介绍如下:1不明原因高热丁某某,男,64岁。20年来每年春季即无明原因的出现高热,均住院系统检查,除白细胞偏高(1万~1.5万)余无阳性发现,每静滴抗生素持续2月以上,方才恢复正常。2003年3月2月又现高热(最高达40.2℃)在某省级医院住院20余天,行系统检查,无阳性发现,…     

青蒿提取物抗内毒素实验研究

目的：探讨青蒿提取物抗内毒素作用。方法：测定大鼠肝线粒体ＬＰＯ、溶酶体ＡＣＰ、血浆内毒素和ＴＮＦα、肝微粒体Ｐ_４５０浓度、肝线粒体ＳＯＤ活性,观察小鼠死亡率和组织形态。结果：青蒿提取物、青蒿素可降低ＬＰＯ,ＡＣＰ,内毒素,ＴＮＦα,Ｐ_４５０浓度,升高ＳＯＤ活性,降低内毒素休克小鼠的死亡率,延长小鼠的平均生存时间,对肝、肺组织形态也有一定的保护作用。结论：青蒿提取物具有抗内毒素作用。     

鲜青蒿治疗小儿高烧有奇效

青蒿是一种常用中药。据 1995年版《中国药典》记载 ,青蒿为菊科植物黄花蒿 Artemisia annua L .的干燥地上部分。并记载秋季花盛开时采割 ,除去老茎 ,阴干后使用。但文中并未见有青蒿鲜用记载。笔者曾用鲜青蒿治疗小儿高烧 ,屡见奇效。现报道如下。1　临床资料　李文杰 (12岁 )自去年 7月以后 ,患上呼吸道感染、急性咽喉炎、扁桃体炎 ,几乎每月发病一次 ,每次高烧达 40℃左右。曾用多种中西药治疗 ,效果不明显。后改用鲜青蒿治疗 ,服药 2次 ,即获奇效。2　治疗方法　采集鲜青蒿地上部分 ,除去茎枝 ,专取鲜叶 ,每次 15 g,用沸水浸泡 2 0 mi…     

青蒿解热成分研究概况

青蒿解热成分研究概况李沧海广西中医学院９４级药理研究生５３０００１南宁市明秀东路２１号赵一林启云广西中医学院关键词青蒿；解热；有效成分；综述青蒿，又名草蒿、方溃、蒿、细叶蒿，为菊科一年生草本植物黄花蒿（ＡｒｔｅｍｉｓｉａａｎｎｕａＬ．）的干燥地上部...     

青蒿道地药材研究综述

青蒿入药有2 000多年的历史,根据现代研究结果推断,1 700多年前的《肘后备急方》中所记治疗疟疾的青蒿应该来源于黄花蒿。基于本草资料从治疗暑热、截疟等方面,青蒿的道地产区应在历史上的荆州(今湖北)及其周边地区;从抗疟成分青蒿素含量高低的角度,青蒿道地产区应在重庆、广西及周边省份。研究表明:黄花蒿在秋季花盛开时采收,抗疟用青蒿素含量较高;黄花蒿放置半年后青蒿素可降解30%左右,一般需放置阴凉干燥处贮藏。野生黄花蒿具有丰富的遗传多样性,在试验田选育出的黄花蒿其青蒿素质量分数最高可达2%。     

青蒿多糖的免疫活性研究

青蒿为菊科植物黄花蒿Artemisia annuaL．的干燥地上部分。是一味常用中药，具有清热解暑，除蒸，截疟的功能。我们在研究中发现青蒿多糖对小鼠移植性肿瘤EAC、Heps、S180有明显抑制作用。免疫调节是多糖重要的生物活性，多糖作为一种免疫调节剂，能够通过多种途径提高机体的免疫机能，发挥抗肿瘤作用。采用M3W法及ELISA法对青蒿多糖进行免疫活性研究，以探讨其抗肿瘤作用机理。     

青蒿原种生产技术规程

1范围 本标准规定了青蒿原种生产的术语和定义，种子生产程序和方法。     

人RANTES基因在转基因青蒿植株中表达的测定

目的 为了增强青蒿的特异药理活性，探讨人β-趋化因子RANTES基因在青蒿细胞中表达的可能性。方法 将克隆的RANTES基因经Ti质粒衍生的双元表达载体pRPKII导入根癌农杆菌LBA4404菌株，通过叶盘共培养法已获得一批表现卡那霉素抗性的转基因青蒿植株。结果 PCR和Southern印迹杂交分析表明，RANTES基因已导入并整合到青蒿基因组中；RT-PCR、Northern印迹、Western印迹杂交结果证实，RANTES基因已在转基因青蒿植株中成功表达。结论 首次报道了RANTES基因在转基因青蒿植株中的表达，为基因工程改造青蒿打下了良好的基础。     

播种期对黄花蒿产量的影响

目的为黄花蒿播种期的确定提供科学依据。方法测定不同播种期的叶片及种子产量,并进行方差分析。结果播种期对叶片产量的影响不显著,但对种子产量的影响极显著。结论以收获叶片为目的时适宜播种期为2月中旬至4月中旬,以收获种子为目的时最佳播种期为2月中旬以前。     

野生黄花蒿种源抚育技术

目的为黄花蒿新品种选育和杂交育种提供依据。方法通过对野生黄花蒿在间苗、补苗、除草、施肥、培土、防治病虫害和除杂去劣等技术环节的研究,提高野生黄花蒿的种子产量。结果平均每hm产黄花蒿种子31.95kg以上。结论本试验可解决黄花蒿品种人工栽培的用种需求。     

湖南雪峰山地区野生黄花蒿挥发油化学成分的研究

用气相色谱质谱联用法对湖南雪峰山地区野生黄花蒿挥发油进行化学成分分析。采用水蒸气蒸馏法从黄花蒿中提取挥发油,用气相色谱质谱法对其化学成分进行鉴定,归一法测定其百分含量。共鉴定出45个成分,占挥发油总成分的90%。从鉴定出的化学成分可知,湖南雪峰山地区野生黄花蒿品种优良,有开发的潜力和价值。     

荧光探针法研究青蒿多糖及黄酮对DNA的保护作用

 目的 对比研究湖南、北京、重庆等不同产地14种青蒿中多糖和黄酮类化合物对DNA的保护作用。方法 利用溴化乙锭（EB）作为荧光探针,检测14种青蒿中多糖和黄酮类化合物存在下DNA与EB混合液的荧光积分强度。药物分子与DNA相互作用程度可用作用常数D来表示,根据D的大小研究多糖和黄酮含量对DNA保护作用的影响。结果 经测定,水提液中多糖对DNA的作用强弱顺序为：湖南怀化>北京>山西榆社>湖南种子（忻州种植）>山西忻州室内培育蒿>重庆（忻州种植）>河北阜平>山西定襄南庄>重庆>山西忻州卢野>山西盂县>山西阳曲灰蒿;醇提液中黄酮对DNA的作用强弱顺序为：山西忻州卢野>湖南（忻州种植）>山西忻州室内培育蒿>重庆(忻州种植)>山西忻州野生>山西阳曲灰蒿>山西定襄南庄>重庆>河北阜平>北京>山西榆社>山西忻州铁杆蒿>山西盂县>湖南怀化。青蒿多糖、黄酮与DNA的相互作用呈现一定的量效关系。结论 研究表明：14种青蒿提取液均能与探针DNA/EB作用,但作用程度不同;D值越大,药物与DNA作用越强,反之越弱。
     

青蒿叶药材质量标准研究

 目的 制定青蒿叶药材的质量标准,为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法 采用了显微鉴别法、薄层色谱法、HPLC、水分测定法、灰分测定法及浸出物测定法。结果 根据10个不同产地青蒿叶测定结果,确定青蒿素含量不低于0.1%,东莨菪内酯含量不低于0.1%,含水分不高于11%,总灰分不高于11%,酸不溶性灰分不高于2%,95%乙醇冷浸出物不低于7%。结论 建立了青蒿叶的质量标准。
     

青蒿丛生芽诱导影响因素的研究

目的 对影响青蒿丛生芽诱导因素进行基础性研究。方法 把常规的植物组织培养技术应用于调控青嵩中次生代谢产物青蒿素的生物合成代谢。结果 青蒿的基因型，激素和基本培养基对丛生芽的发生有显著影响，而光强在1000～6000 1x和温度在20℃～30℃对丛生芽的发生影响不大；在5种基因型的青蒿中，025丛生芽的诱导率最高；诱导丛生芽的激素组合是6-BA 2．0mg／L和NAA 0．15mg／L；另外，离子在青蒿丛生芽的诱导和青蒿素的生物合过程中起着非常重要的作用。结论 组织培养条件下，青蒿丛生芽的诱导及青蒿素的生物合成可以通过理化因子有效地进行调控。     

青蒿挥发油化学成分的GC／MS研究

目的：用气相色谱－质谱法对青蒿挥发油进行化学成分的分析。方法：采用水蒸气蒸馏法从青蒿中提取挥发油。试用不同类型的毛细管柱进行分析,找出最佳分析条件,用归一化法测定其百分含量,并用气相色谱－质谱法对化学成分进行鉴定。结果：共鉴定了49个成分,占挥发油总成分的89％以上。结论：本方法稳定可靠,重现性好,适用于中药挥发油的化学成分分析。     

用超临界CO2萃取技术提取青蒿素的研究

用超临界ＣＯ２萃取技术对植物黄花蒿进行进取研究,考察了萃取压力,温度及时间对青蒿素收率的影响。萃取产物经简单的分析后得到纯度≥９５％青蒿素产品,经ＴＬＣ、ＩＲ、ＭＳ＾ＨＮＭＲ和＾１３ＣＮＭＲ分析确认。