骨肉瘤血管生成与肿瘤治疗的实验研究

目的：研究人骨肉瘤OS－732细胞系促进血管生成作用及血管内皮生长因子（VEGF）抗体对其血管生成的抑制作用。方法：应用鸡胚绒毛尿囊膜模型。通过解剖显微镜、光镜及免疫组化方法观察人骨肉瘤OS－732细胞系血管生成活性，并探讨VEGF抗体的血管生成抑制作用。结果：OS－732细胞系具有较强的促血管生成能力，鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤组织中VEGF、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）均呈阳性表达，且VEGF呈持续高表达。给予VEGF抗体后VEGF抗体组血管数目、瘤细胞数低于PBS对照组。结论：VEGF、bFGF、TGF-β1可能共同参与骨肉瘤OS－732细胞系诱导的血管生成，其中VEGF可能起着主要作用。VEGF抗体能抑制本细胞系的血管生成，提示VEGF抗体对骨肉瘤治疗具有良好的应用前景。     

骨肉瘤中HIF-1α、VEGF、P53表达与血管生成和预后的关系

目的检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及VEGF、p53、CD34在骨肉瘤的表达，探讨其与缺氧情况下骨肉瘤血管生成和预后的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测46例有完整随访资料的骨肉瘤病例中HIF-1α、VEGF、p53、CD34的表达。用Spearman分析各指标间的相关性．并结合临床资料进行生存曲线分析。结果46例骨肉瘤标本中有14例(30．4％)表达HIF-1α；HIF-1α表达组VEGF、p53表达强度及术后转移率均高于HIF-1α不表达组；HIF-1α表达组患者术后1年生存率及总生存率均显著低于HIF-1α不表达组。HIF-1α表达与VEGF、p53表达之间存在显著相关性；HIF-1α表达与微血管密度(MVD)之间无相关性。结论骨肉瘤组织中存在HIF-1α的过表达，HIF-1部分地参与了骨肉瘤的演进，HIF-1通过调节VEGF的表达在骨肉瘤血管生成中发挥着重要作用；HIF-1和p53缺失或突变可能协同参与了缺氧对骨肉瘤肿瘤细胞的调节，HIF-1α表达与骨肉瘤的不良预后密切相关，是评估骨肉瘤患者预后的重要指标。     

血管内皮生长因子对肿瘤血管生成的影响

血管生成对于实体肿瘤的生长和转移十分重要。肿瘤可通过血管生成从机体获得大量营养,并通过生成的血管转移到身体其他部分继续生长繁殖。在肿瘤血管生成中各种细胞因子起着极为重要的作用,其中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)又叫血管通透因子(Vascular permeability factor,VPF)特异地作用于内皮细胞,升高细胞内Ca~(2 )浓度,促进内皮细胞迁移增殖,增加血管通透性,诱导细胞外基质形成。     

脂质介质在肿瘤血管生成中的作用

血管生成通过给予营养和氧气供应以及为远处转移提供通道,在恶性肿瘤的生长和扩散中发挥关键作用。血管生成涉及诸多生长因子及信号分子,其中一些脂质介质通过调节血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、白细胞介素-8(interleukin-8, IL-8)、缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor, HIF)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)以及高密度脂蛋白(high density lipoprptein, HDL)调节炎症及肿瘤的作用机制也已明确,由此针对这些脂质介质进行药物干预有望作为一种全新的靶向肿瘤治疗方法。该文总结了肿瘤血管生成过程中主要的促血管生成介质和抗血管生成介质,旨在为肿瘤的靶向治疗提供新思路。     

整合素与肿瘤血管生成及抗血管生成作用

肿瘤血管生成不仅与肿瘤的生长和转移密切相关 ,而且在肿瘤病理分级、治疗和预后判断上具有重要的评估价值。研究表明 ,细胞粘附分子介导的细胞粘附行为异常在肿瘤的浸润和转移中有重要作用。近年 ,随着免疫和分子生物学的发展 ,肿瘤血管生成及抗血管生成逐渐成为肿瘤研究的重点和热点之一 ,细胞粘附分子与血管生成的关系也日益受到关注〔1〕。现就其中整合素家族在肿瘤血管生成及抗血管生成中的作用作一简要综述。1　整合素分子的基本结构整合素家族 (ｉｎｔｅｇｒｉｎｆａｍｉｌｙ)为细胞粘附分子家族的重要成员之一 ,是一组广泛分布于细…     

血管生成抑制蛋白vasohibin的研究进展

血管新生参与机体重要的生理和病理过程。Vasohibin是新近发现的调节血管生成的内皮源性负反馈调节因子,对抑制血管生成起重要作用。Vasohibin因参与肿瘤﹑视网膜疾病及类风湿性关节炎等血管新生异常疾病的发生发展而备受关注,相关研究可望为探索这些疾病的发生机制以及寻找新的治疗措施奠定基础。     

人S100A6对人骨肉瘤细胞系β-catenin的作用

目的 研究人S100A6对人骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中β-catenin的作用。方法 分别用携带人S100A6及其siRNA基因的重组腺病毒AdS100A6和AdSiS100A6感染MG63和U2OS,分别使细胞中S100A6表达上调和下调;RT-PCR、蛋白印迹和免疫细胞化学法分别检测细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达。结果 上调骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中S100A6后, β-catenin mRNA和蛋白表达均增加（P＜0.05）,蛋白的增加以胞核更明显。下调S100A6则使细胞中β-catenin mRNA及蛋白表达减少（P＜0.05）,蛋白的减少也以胞核更甚。结论 增加Wnt信号途径活性可能是S100A6参与肿瘤发生发展的机制之一。     

甲状旁腺激素1型受体对骨肉瘤细胞炎症因子和血管生成的影响及其机制研究

目的:探讨甲状旁腺激素1型受体（PTHR1）对骨肉瘤细胞炎症因子和血管生成的影响及其机制。方法:培养骨肉瘤MG63细胞,分为PTHR1阴性对照组（si-NC组）和PTHR1小干扰RNA组（si-PTHR1组）,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测si-NC组和si-PTHR1组细胞中PTHR1、血管紧张素...     

视网膜母细胞瘤基因对人骨肉瘤细胞株OS732的影响

目的 观察外源性N端截短的视网膜母细胞瘤（Rb)基因对骨肉瘤细胞株OS732的生长和细胞间缝隙连接信息通讯能力的影响。方法 构建N端截短的长度为1.65kb Rb基因的真核表达质粒,并用DOTAP将其导入骨肉瘤细胞株OS732。应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）和Northern blot检测Rb基因的表达;用细胞计数,流式细胞仪分析和软琼脂克隆形成试验观察OS732细胞的生成状况;用半定量RT－PCR法和罗氏黄荧光传输法检测细胞间缝隙连接信息通讯的能力。结果 转染N端截短的Rb基因后,OS732细胞内可检测到内源性和外源性Rb基因的mRNA表达。OS732细胞的形态发生改变,其生长速度减慢,软琼脂形成集落能力降低,细胞周期阻滞于G0－G1期;缝隙连接蛋白基因Gonnexin43的表达和细胞信息通讯能力增强。结论 N端截短的Rb基因可抑制骨肉瘤细胞株OS732的恶性生长表型以及增强细胞间信息通讯能力。     

CTGF在胃癌中的表达及其促进血管生成的机制

目的研究CTGF在人胃癌标本中表达情况及其促进血管生成的机制。方法应用Real Time PCR和免疫组织化学染色检测胃癌标本中CTGF mRNA,VEGF mRNA及其在组织中蛋白表达情况;应用pcDNA3.1质粒上调AGS细胞中CTGF的表达,并用Real Time PCR和Western blot检测VEGF mRNA水平和蛋白水平表达变化;AGS稳定株细胞接种于裸鼠,成瘤后肿瘤组织切片,免疫组化染色。结果与正常组织相比,胃癌组织中CTGF mRNA,VEGF mRNA表达水平均显著增加,免疫组化亦显示CT-GF、VEGF在胃癌的标本中显色比正常对照组织强。统计显示两者mRNA水平及免疫组化表达有相关性（P〈0.05）。转染pcD-NA3.1 CTGF质粒后,AGS细胞中CTGF蛋白的表达上调,Real Time PCR及Western blot检测显示过表达CTGF后,VEGF表达上调。与对照细胞相比,过表达CTGF的AGS的肿瘤形成和生成速度明显加快（P〈0.05）。免疫组化染色显示VEGF的染色明显强于对照组。结论在胃癌中CTGF,VEGF表达明显增加,CTGF可能通过上调VEGF表达促进肿瘤血管生成。     

血管内皮生长因子的研究进展

在某些生理过程，如胚胎发育、卵巢周期、伤口愈合和缺血组织的修复，可出现新生血管的形成；而在某些病理过程，血管生成也是必不可少的环节，如类风湿性关节炎、银屑病糖尿病性视网膜病以及实体瘤的生长和转移[1].以往认为，出生后的血管生成（angiogenesis）与胚胎发育过程中的血管发生（vasculogenesis）是两个互相区别的过程：前者是通过分化完全的血管内皮细胞从业已存在的血管中增殖、迁徙和重塑而成；后者是指由中心包含造血于细胞、周边分布成血管细胞（angioblast）的血岛发育而成[1]。但近来的研究发现：出生后的血管生成（包括…     

血管生长素与血管生成

血管生长素 (ANG)属于RNase超家族 ,是唯一具有核糖核酸酶活性的血管生成因子。它可通过促进基膜的降解 ,促进内皮细胞增殖、迁移、粘附等作用来促进血管生成。ANG在多种肿瘤中表达增高。在糖尿病、外周动脉阻塞性疾病中其表达水平亦有升高     

肝细胞肝癌肿瘤血管生成及其临床病理意义

目的　探讨肝细胞肝癌 (HCC)肿瘤血管生成与临床病理的意义 ,及其调控因素 p5 3与血管内皮生长因子 (VEGF)和微血管密度 (MVD)之间的内在联系。方法　经手术治疗的HCC 6 0例 ,分别进行HE染色和 p5 3、VEGF和CD34的免疫组化染色。根据CD34阳性结果计数测定MVD。记录HCC患者的手术及临床病理特征如AFP结果、包膜情况、肝内转移、病理分级汇管区癌栓等资料 ,并将 p5 3、VEGF和MVD结果分别与上述指标进行统计分析。 结果　MVD值在汇管区癌栓组 (2 2 0 76± 89 84 )和肝内转移组 (2 2 5 31± 87 17)高于无汇管区癌栓组 (16 8 79± 87 5 7)和无肝内转移组 (173 0 5± 89 4 0 ) ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。VEGF表达的阳性率在汇管区癌栓组 (71 4 3% )、肝内转移组 (75 % )和包膜完整组 (75 % )中均高于无汇管区癌栓组 (4 1 0 3% )、无肝内转移组 (4 3 18% )和无包膜 (4 0 % )或包膜不完整组 (35 2 9% ) ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。p5 3蛋白表达的阳性率在汇管区癌栓组 (5 7 14 % )、肝内转移组 (6 2 5 0 % )和中低分化组 (4 1 30 % )中均高于无汇管区癌栓组(2 0 5 1% )、无肝内转移组 (2 2 75 % )和高分化组 (7 14 % ) ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。当 p5 3蛋白表达阳性时 ,MVD值增高(2 2 1 90± 73     

缺氧加电离辐射调节人恶性胶质瘤VEGF、HIF1及血管生成素-1、血管生成素-2及血管生成素-4的差异表达

肿瘤细胞对电离辐射的反应依赖于氧，肿瘤的缺氧区需要更高的辐射量才能达到与氧供正常区相似的生物学效应。在缺氧情况下，肿瘤细胞发生遗传及适应性的改变可以提高其在不利的生理环境下的存活及增殖，其中的一个重要因子就是缺氧诱导因子1（HIFl），它是很多与适应相关的基因的转录因子，如血管生长因子、VEGF、糖转运子（Glut-1）。人肿瘤细胞产生2个生长因子家族专门作用于内皮细胞，包括VEGF家族及血管生成素家族（Ang-1、-2和-4）。     

血管内皮生长因子与血管生成

本文综述了血管内皮生长因子结构特点、体内分布、正常及病理条件下的表达水平变化及其生物学功能、并对血管通透性与血管生成之间的关系进行了评述.     

肿瘤血管生成和抗血管生成治疗的研究进展

肿瘤组织中的新生血管是保证肿瘤持续生长所必需的,也是肿瘤转移的重要途径之一.针对促进肿瘤血管生成和血管生成抑制物制定新策略,采用合适手段与方法,抑制肿瘤内血管新生,消除或减少肿瘤内原有血管,可达到治愈肿瘤的目的.     

抗血管生成因子Angiostatin与Endostatin作用下肿瘤血管生成的二维数值模拟

目的数值模拟抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin对肿瘤血管生成的影响。方法建立肿瘤内外血管生成的二维离散数学模型。模型耦合两种抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin的抑制效应,数值模拟在促血管生成因子诱导下肿瘤微血管网生成,讨论血管生成抑制因子的影响。结果抗血管生成因子Angiostatin对肿瘤内外血管网络生成的速度和成熟度有抑制作用。抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin耦合作用时,在肿瘤血管生成的早期有明显的抑制效应;在肿瘤血管生成的中后期,它们可以降低肿瘤血管化程度。结论本文模型能够较好的模拟抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin对内皮细胞迁移和增殖的抑制作用。     

沉默Gli2基因对人肝癌细胞系SMMC-7721体外血管生成的影响

目的探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对肝癌细胞SMMC-7721体外血管生成作用及机制。方法设干扰组、对照组和空白组;构建靶向Gli2的shRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒,转染到SMMC-7721细胞,RT-q PCR和Western blot检测沉默效率;用体外血管生成实验检测血管生成能力;用ELISA检测SMMC-7721细胞上清液中VEGF-A、MMP-2分泌水平;用RT-q PCR、Western blot检测细胞内VEGF-A、MMP-2的表达差异。结果 shRNA慢病毒转染率为90%左右,干扰组与对照组和空白组相比Gli2表达降低(P0.05);血管生成能力减弱(P0.05);上清液中VEGF-A含量下降(P0.05);细胞中VEGF-A、MMP-2表达明显降低(P0.05)。结论沉默Gli2的表达能够抑制肝癌细胞SMMC-7721血管生成,其机制可能与VEGF-A、MMP-2的下调有关。     

人星形细胞瘤中单核细胞在血管生成过程中的作用

目的探讨单核细胞在人星形细胞瘤血管生成(Angiogenesis)过程中的作用.方法应用硷性纤维母细胞生长因于(bFGF)的抗体,通过免疫组织化学手段,在组织学切片上探讨单核细胞和bFGF在人星形细胞瘤血管生成过程中的作用.结果1.bFGF在血管内皮细胞中的表达强度随血管密度增加而增加,并与血管密度之间存在回归直线,P＜0.01.2.28.3%的切片中单核细胞表达bFGF,表达bFGF的单核细胞可见于血管内,或沿血管壁呈规则排列,也可成堆靠近血管壁,并使血管呈出芽生长.结论肿瘤内新生的血管内皮细胞可产生bFGF;单核细胞不但产生bFGF,而且参与肿瘤内的血管生成,它可能是血管内皮细胞的前期细胞.