高效液相色谱法测定人血浆中巴洛沙星浓度

目的建立测定人血浆中巴洛沙星的高效液相色谱方法。方法血浆样品用三氟醋酸沉淀蛋白,采用Hy-persil C18柱,流动相为乙腈-水(1 000 mL水加0.5 mL磷酸和0.5 mL三乙胺)=25∶75,紫外检测波长291 nm。结果巴洛沙星在47~6 000 ng.mL-1血浆药物浓度与峰面积线性关系良好,回收率为94.81%~114.59%,日内、日间RSD分别为2.68%~9.43%和8.68%~11.72%。结论本法样品处理简单,无干扰,灵敏度高,重现性好,可用于巴洛沙星的人体药物动力学或生物利用度研究。     

单剂量巴洛沙星片在健康人体的药代动力学

目的 研究巴洛沙星片(喹诺酮类抗生素)在健康志愿者体内的药代动力学.方法 采用随机开放的三周期交叉试验设计,健康志愿者12例随机分成3组,分别单剂量交叉口服巴洛沙星100、200、400 mg,以反相高效液相色谱法测定给药后不同时间点巴洛沙星的血浆浓度,血药浓度经DAS软件处理.结果 巴洛沙星的主要药代动力学参数Cmax分别为(0.93±0.30)、(1.97±0.60)、(3.54±0.83)mg·L-1,t1/2分别为(8.78±2.65)、(8.11±1.42)、(7.68±1.31)h,AUC0～t分别为(9.9±1.4)、(20.38±3.20)、(40.02±5.54)mg·h·L-1,AUC0-∞分别为(10.41±1.44)、(21.19±3.16)、(44.07±7.29)mg·h·L-1.结论 单剂量口服巴洛沙星片,其消除半衰期t1/2与给药剂量无关;而Cmax、AUC0-t、AUC0～∞与剂量呈明显相关性,且随给药剂量的增大而增加.表明巴洛沙星在体内为线性动力学特征.     

HPLC-ESI-MS法测定人血浆盐酸氨溴索浓度

目的建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中氨溴索浓度的方法.方法血浆样品经NaOH碱化,乙醚提取浓缩后,以乙腈-水(8515)为流动相,流速0.2mL·min-1,采用电喷雾离子源(ESI),以多离子反应监测方式(MRM)进行正离子检测,氨溴索和内标地西泮的定量分析离子对分别为m/z 378.9→263.9和m/z 285.1→193.1.结果血浆样品中氨溴索线性范围0.26～200μg·L-1(r=0.9998),最低定量限为0.26ng·mL-1.低、中、高(0.78,12.5,100μg·L-1)3种浓度的日内RSD分别为9.1%,8.3%和2.7%;日间RSD分别为10.0%,7.2%和12.4%;准确度为109%,114%和106%.结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于人血浆中氨溴索的含量测定.     

高效液相荧光色谱法测定人血浆中细辛脑的浓度

目的建立测定人血浆中细辛脑浓度的高效液相荧光色谱法.方法血浆样品经10%高氯酸沉淀后,以甲醇-0.5%醋酸液(7822)为流动相,流速为1 ml·min-1,色谱柱为BaiAn-C18(150mm×4.6 mm,5 μm),柱温为35℃,荧光检测波长激发波长(λex)265 nm,发射波长(hem)395 nm.结果血浆内源性杂质不干扰待测物测定,细辛脑的线性范围为1～300 μg·L-1,定量下限为1μg·L-1,日内、日间RSD均小于5%.样品3次冻融及在沉淀后,4℃下12 h内稳定性良好.结论该法灵敏、快速、准确,操作简便,线性范围宽,可用于细辛脑的临床药动学研究.     

人血浆中伏立康唑的LC-MS-MS法测定方法学研究

目的:建立测定人血浆中伏立康唑浓度的液相色谱-串联质谱联用法。方法:待测血浆0.5 mL经乙醚-二氯甲烷萃取,以甲醇-10 mmo.lL-1醋酸铵水溶液(80∶20)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,液相色谱-串联质谱联用法多反应离子检测,正离子模式,用于定量分析的离子分别是伏立康唑m/z351.0→127.0[M H ]和地西泮m/z285.8→193.3[M H ]。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品分析时间小于5 min,线性范围为20.0~4 000 ng.mL-1,定量下限为20.0 ng.mL-1,批内、批间精密度均小于10%,提取回收率大于85%。结论:该法操作快速、简单、准确、灵敏度高,适用于临床药动学研究。     

高效液相色谱法测定非小细胞肺癌患者血浆中紫杉醇浓度

目的建立测定非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中紫杉醇的高效液相色谱方法,用于考察紫杉醇联合顺铂治疗NSCLC的疗效,不良反应与血药浓度之间的关系.方法血浆样品经碳酸氢钠碱化后用乙醚提取处理.色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为50 mmol·L-1醋酸铵水溶液-乙腈(55∶45),流速为1.0mL·min-1,检测波长为230nm.结果紫杉醇线性范围为10～640μg·L-1,方法回收率在100.6%～112.6%之间,日内和日间的精密度均小于8.6%.结论该方法样品处理过程简便,重复性好,符合生物样品的测定要求,可适用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中霉酚酸的浓度

目的建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中霉酚酸的浓度.方法血浆样品经处理后,采用Waters Atlantis C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,3 μm),流动相为乙腈-0.01%甲酸溶液(70∶30),以电喷雾电离源(ESI)负离子检测,吲哚美辛为内标.结果霉酚酸血浆质量浓度的线性范围为0.010～50.4 mg·L-1(r=0.9998),最低检测质量浓度为2 μg·L-1(S/N=5),提取回收率为78.2%～88.9%(n=5),方法回收率为100.3%～101.9%(n=5),日内和日间RSD均小于5%.结论本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于霉酚酸临床药动学研究.     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中戊乙奎醚及应用

目的建立高效液相色谱-质谱法测定人血浆中戊乙奎醚浓度.方法血浆样品经碱化后,用石油醚乙醚(7030)萃取;流动相为CH3OH-5 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(9010,10%甲酸调pH 5.8),流速为0.2 mL·min-1,采用ESI离子源,以MRM方式进行检测,检测离子为m/z 316.2/128.3(戊乙奎醚),455.4/303.4(内标).结果戊乙奎醚线性范围为0.078～10.000 ng·mL-1,最低定量限为0.078 ng·mL-1.方法回收率为91.3%～99.4%,预处理回收率为79.9%～92.1%,日内RSD为10.57%～6.38%,日问RSD为7.38%～9.44%.结论本法快速、准确、灵敏,重现性好,可用于盐酸戊乙奎醚药动学和其他相关研究.     

建立人血浆中拉呋替丁的液相色谱质谱联用测定方法

目的 建立人血浆中拉呋替丁(制胃酸药)的LC-MS测定方法.方法 采用单剂量单周期给药试验设计,12名健康受试者服用拉呋替丁片10 mg后,测定了不同时间内的血药浓度.在血浆0.5 mL中加入内标盐酸雷诺嗪10 μL碱化,以乙醚5 mL提取,进行LC-MS法检测.流动相由0.02%甲酸与0.5 mmol·L-1醋酸铵的水溶液和甲醇组成,流量为0.2 mL·min-1;色谱柱为Shim-Pack ODS(5 μm,150 mm×2.0 mm),质谱采用选择性离子检测方法.结果 拉呋替丁的线性范围为1.0～400.0 μg·L-1,最低检测浓度为1.0 μg·L-1,批间和批内的变异系数均＜10%.结论 该法简便、准确、灵敏度高.     

测定人血浆中巴洛沙星浓度的反相高效液相色谱荧光法

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人血浆中巴洛沙星浓度。方法采用Diamonsil ODS C_(18)分析柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温为室温,流动相为乙腈-0.05 mol·L~(-1)KH_2PO_4缓冲液(25:75,V/V)(三乙胺和H_3PO_4调pH为3.40),流速:1.0 mL·min~(-1);血浆样品用二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λ_(cx)=295 nm,λ_(cm)500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50～4 000μg·L~(-1)内线性良好,最低检测限为10μg·L~(-1),巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.35和4.03 min,日内和日间RSD均<10.0%,提取回收率和方法回收率分别在92%～99%和95%～105%。结论本法具有快速、简便、灵敏、准确等优点,适用于人血浆中巴洛沙星浓度测定及药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中利奈唑胺浓度及临床监测

目的 建立快速测定人血浆利奈唑胺浓度的高效液相色谱法,并用于重症感染者的治疗药物浓度监测.方法 色谱柱为ZORBAX-SB-C18 (4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(22∶78),流速为1.1 mL·min-1,柱温为25 ℃,检测波长为254 nm,内标为氯霉素.用该方法 检测6例重症感染者静脉滴注600 mg利奈唑胺注射液后的血浆药物浓度,测得结果 与最低抑菌浓度(MIC)比较,为临床应用利奈唑胺提供指导.结果 利奈唑胺在0.25~20 mg·L-1内线性良好(r=0.999 2),最低定量限为250 μg·L-1.所测6例危重患者中,有2例患者出现利奈唑胺谷浓度小于最低抑菌浓度(2 mg·L-1)的情况.结论 该方法 准确可靠,操作简便,灵敏度高,可用于临床利奈唑胺血药浓度的检测,并能为制定个性化给药方案提供参考.     

RP-HPLC法测定法罗培南血药浓度和尿药浓度

目的：建立测定法罗培南血药浓度和尿药浓度的RP-HPLC法。方法：采用Diamond C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,血样与尿样测定流动相分别为0．02mol／L磷酸二氢钾缓冲液（pH=2．95）：乙腈=75：25和81：19,流速均为1．0mL／min,检测波长均为318nm。结果：血浆样品的线性范围为0．03125～2．5μg／mL（r=0．9999）、2．5～120μg／mL（r=0．9997）,最低检测浓度为31．25ng／mL,绝对回收率为68．9％～77．8％;尿液样品的线性范围为0．5～20μg／mL（r=0．9999）、20～1600μg／mL（r=0．9997）,最低检测浓度为0．5μg／mL,绝对回收率为96．5％～106．0％。日内及日间精密度均〈11．0％。结论：本方法简单、快速,灵敏度和准确度较高,能满足法罗培南钠注射液临床药动学研究的需要。     

反相高效液相色谱法测定巴洛沙星片的含量及有关物质

目的:建立巴洛沙星片含量及有关物质测定的反相高效液相色谱方法.方法:色谱柱为DiamonsilTM C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.05 mol/L柠檬酸(用三乙胺调pH 4.0)(22:78),检测波长294 nm.结果:在0.52～83.2 μg/ml范围内,溶液浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.6%,RSD为0.55%(n=9).结论:该方法简单、快速、准确,重现性及专属性好,可用于巴洛沙星片的质量控制.     

RP-HPLC荧光法测定人尿中巴洛沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人尿中巴洛沙星质量浓度。方法采用DiamonsilODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温:室温,流动相:乙腈-0.05 mol.L-1KH2PO4缓冲液(体积比为25∶75,三乙胺和H3PO4调pH为3.4),流速:1.0 mL.min-1。尿液样品用0.1 mol.L-1KH2PO4(KOH调pH为7.0)缓冲液稀释100倍,然后与二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λex=295 nm,λem=500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50~6 000μg.L-1内线性良好,最低检测限为10μg.L-1,巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.42、4.05 min,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率和方法回收率分别在93%~96%和98%~108%。结论本法适用于人尿液中巴洛沙星质量浓度测定及药物动力学研究。     

高效液相色谱法检测人血浆中替加环素的浓度

目的：建立一种有效、灵敏、准确的可用于检测人血浆中替加环素浓度的方法。方法：色谱柱：Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.1%甲酸（4：96）,进行梯度洗脱,流速：1 mL·min^-1,紫外检测波长：246 nm,内标：雷尼替丁,柱温：40℃,进样量：20 μL。结果：替加环素峰与杂质峰及其他药物峰分离良好,不受血浆内源性物质干扰。血浆标准曲线下替加环素峰面积与内标峰面积的比值与血浆中两者浓度比值在0.028~5.600 μg·mL^-1内呈线性关系,回归方程Y=0.994 316X+0.007 455 29,r²>0.999 98,最低定量限为0.028 μg·mL^-1。替加环素和内标保留时间分别为13 min和15 min。日内和日间RSD小于10%,加样回收率均在95%以上,符合检测要求。结论：此方法具有较高可行性,准确度高,适用于血浆中替加环素浓度检测。     

RP-HPLC测定拉米夫定的人体血药浓度及生物等效性研究

目的：建立人血浆中拉米夫定的HPLC测定法,研究拉米夫定片在健康中国志愿者体内的药动学特征及相对生物利用度。方法：20名健康男性志愿者采用随机分组、双交叉给药方案,分别单剂量口服0．3g的拉米夫定国产制剂与进口制剂,采用RP—HPLC法测定血药浓度,色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm ID,5μm）,流动相为甲醇：25mmol／L磷酸二氢钾（含体积分数为1％的三乙胺,pH3．3）（10：90）,流速1mL／min,检测波长UV280nm。应用DAS2．1软件处理数据,计算两组的药代动力学参数及相对生物利用度。结果：拉米夫定在25～7500μg／L内线性良好（r=0．9992）,血浆中低、中、高3种质量浓度（50、500、5000μg／L）的相对回收率在100．09％～103．36％之间,批内RSD≤2．2％,批间RSD≤7．8％。口服0．3g拉米夫定试验制剂（国产）及参比制剂（进口）后的主要药代动学参数如下：Cmax分别为（2835±734）和（2868±726）μg／L;tmax分别为（1．2±0．6）和（1．0±0．8）h;t1／2分别为（2．68±0．32）和（2．58±0．41）h;AUC1-14h分别为（10994±1839）和（10593±1654）μg·L^-1·h;AUC0-∞,分别为（11330±1908）和（10884±1734）μg·L^-1·h。试验制剂（T）的相对生物利用度为（104．80±15．56）％。结论：本法简便、灵敏、准确、稳定,可用于体内药物分析。国产拉米夫定片与进口片剂具有生物等效性。     

RP-HPLC法测定犬血浆中苦参碱含量

目的:建立RP-HPLC法测定犬血浆中苦参碱的含量。方法:采用色谱柱为Shim-packCLC-ODS柱(6mm×150mm,5μm);流动相为甲醇∶水∶乙二胺(70∶30∶0.02),流速1.2mL/min,检测波长220nm。以地西泮为内标,测定血浆中苦参碱的浓度。结果:苦参碱浓度在0.3125~40.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996),最低检测浓度为15ng/mL,回收率和精密度均符合要求。结论:本法操作简便,灵敏度高,回收率好。     

RP-HPLC法测定盐酸纳洛酮原料药含量及相关物质

目的:改进盐酸纳洛酮原料药的含量测定和杂质检查方法,为其质量控制提供快速、有效的分析手段。方法:色谱柱为Dikma公司ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为水(每580 mL含辛烷磺酸钠1.36 g、氯化钠1.0 g、磷酸1mL)∶甲醇∶乙腈(5.8∶4.2∶1.08);流速0.9 mL/min;柱温40℃;检测波长为229 nm。结果:盐酸纳洛酮在0.100 7~1.611 2μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),低、中、高3种浓度(15.0、20.0、25.0μg/mL)对照品溶液的日内RSD分别为0.84%、0.53%、0.67%(n=6),日间RSD分别为0.81%、0.67%、0.46%(n=6),最低检测浓度为50.0 ng/mL。相关杂质、中间体与盐酸纳洛酮分离良好。结论:该法专属性强,结果准确,重现性好,可用作盐酸纳洛酮含量测定和杂质控制的方法。     

反相高效液相色谱法测定美罗培南的血药浓度及其临床应用

目的建立快速测定人血浆中美罗培南的HPLC法,并用该法对临床使用美罗培南的患者进行血药浓度测定。方法采用蛋白沉淀法对血样进行预处理,以雷尼替丁为内标。色谱条件:Spursil ODS C18柱(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇-乙腈混合有机相(10:3)-0.05 mol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(15:85,缓冲盐pH=5.0);流速:0.8 mL·min-1;测定波长:298 nm。结果美罗培南的最低定量浓度为0.35μg·mL-1,线性范围为0.35¹81.17μg·mL-1,绝对回收率和相对回收率分别为95.4%和100.0%,日内、日间精密度均<10%。63名患者的血药峰浓度、谷浓度、t>MIC均具有较大差别。结论该方法快捷、经济、稳定、准确,适用于美罗培南临床血药浓度监测。临床患者美罗培南的谷峰浓度差异较大,对患者进行美罗培南峰谷浓度的测定对促进美罗培南在临床的合理应用具有重要意义。