同种异体胰岛细胞移植在糖尿病小鼠中的实验研究

目的 通过建立糖尿病小鼠模型,观察同种小鼠胰岛细胞移植前后血糖、胰岛功能的变化,探索胰岛细胞分离、纯化、移植的方法及有效性.方法 采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)复制糖尿病小鼠模型,经胆囊注入V型胶原酶水浴消化胰腺并进行密度梯度离心以分离纯化胰岛细胞,并在消化液和Ficoll分离液中加入了大豆胰酶抑制剂(STI)和牛血清白蛋白组份V(BSA),用双硫腙(DTZ)法判定胰岛纯度,锥虫蓝排斥试验评估胰岛存活率;糖尿病小鼠行同种异体胰岛细胞移植后,检测受体血糖、胰岛素及C肽变化,以判定胰岛功能.结果 糖尿病小鼠模型胰腺形态有明显病理变化,同种小鼠胰岛纯化后细胞形态完好,使分离纯化后的胰岛产量由原来方法的(40.7±13.2)个提高到了(263.5±32.I)个(P<0.01),活性在95%以上,胰岛移植后,实验组48 h后血糖明显下降,C肽水平上升.结论 采用加用STI、BSA小鼠胰岛细胞分离纯化方法可增加胰岛细胞产量,同种小鼠胰岛细胞移植能明显降低糖尿病小鼠血糖水平,改善胰岛功能,从而达到治疗目的 .     

同种异体胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的护理

目的：总结同种异体胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的护理研究。方法按JDRF标准筛选3例1型糖尿病患者(T1DM),并实施同种异体胰岛细胞移植。在GMP实验室内以Liberase 酶消化胰腺器官、COBE 2991细胞分离机分离、连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞。培养12h后,检测其达到移植标准,再经皮穿刺肝脏门静脉主干,经门静脉将胰岛细胞匀速移植到肝脏内。术后应用各种护理方法,密切观察病情变化和各种并发症的变化。结果2例完全脱离胰岛素治疗,1例胰岛素用量较术前减少60%以上。术后血糖稳定,C肽、糖化血红蛋白在正常范围,肾功能得以改善,无移植并发症、以及低血糖发作,患者掌握了术后自我管理的方法,总结出了个体化的护理经验。结论患者护理效果满意,初步建立同种异体胰岛细胞移植治疗1型糖尿病一整套护理方法。     

新的胰岛细胞移植方案获得最佳效果

据加拿大的一个研究小组报告,7名长期患有1型糖尿病的病人在应用一种新方案进行胰岛细胞移植之后可以停用胰岛素。在平均12个多月的随访之后,所有7名病人的胰岛细胞继续发挥作用并使患者成为非胰岛素依赖者。在以前的实验研究中,胰岛细胞的移植很少达到如此长期的效果。此项研究的报告发表在近期出版的《新英格兰医学杂志》上。     

胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的临床观察

胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的临床观察张珍福建医科大学附属协和医院内分泌科（福州３５０００１）关键词Ⅰ型糖尿病；胰岛移植作者自１９８５年５月～１９９２年４月对２６例胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）即Ⅰ型糖尿病者进行同种异体胎胰胰岛移植的研究，并随访３～９年...     

日本通过胰岛细胞移植治疗Ⅰ型糖尿病

2004年4月和7月在日本京都大学附属医院两次接受胰岛细胞移植的一名女性Ⅰ型糖尿病患者被宣布完全康复。该名女性患者34岁，14岁时被诊断患有Ⅰ型糖尿病，20年来患者每日必须注射4次胰岛素。该医院2(K)4年4月从一名心脏停止跳动的男性胰脏中分离出35万个胰岛细胞，移植到该女性患者体内后患者开始分泌胰岛素。     

大鼠胰岛制备用于同种异体移植的初步研究

目的:建立一种实用可靠的大鼠胰岛制备方法,并研究胰岛在体内外的生物学活性。方法:采用胶原酶溶液经胆总管原位灌注胰腺,于37℃水浴静止消化30min,过滤法纯化胰岛,经体外形态及功能鉴定后,移植于链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾包膜下,术后动态观察血糖。结果:平均每只大鼠胰腺消化后可获得(1024±156)个胰岛,纯化后收获最(867±104)个胰岛,活率≥95％。该法制备的胰岛形态结构完好,体外胰岛素释放试验表明其功能良好。5例进行同种异体移植糖尿病大鼠在移植后24～72h血糖均降至正常,完全缓解率100％,胰岛有功能存活时间(6.60±2.07)天。实验组口服葡萄糖耐量试验曲线与正常组相似。结论:此种移植物制备技术简便、可靠,效果满意,经体外和体内实验证明获得的胰岛功能良好。但是需要进一步研究防治移植排斥反应的措施。     

胰岛移植方法治疗Ⅰ型糖尿病的临床研究

本文总结4例Ⅰ型糖尿病病人应用同种异体胰岛移植的经验。4例均经临床确诊为胰岛素依赖型糖尿病。其中男2例,女2例,病程3年至12年。4例术后经2～5个月观察,胰岛素每日用量均较术前减少,血糖、尿糖明显下降,病情显著改善。血清C肽值由术前平均0.058pmol/ml上升为术后的0.333pml/ml,表明移植的胰岛在体内存活并发挥作用。     

胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的临床研究

采用经培养的人胎胰胰岛组织移植治疗Ⅰ型糖尿病患者20例,经临床和实验室观察判断,疗效显著者3例(15％)、疗效较好者10例(50％)、疗效一般者7例(35％)。     

胰岛细胞移植的现况

全球糖尿病患者约 1 3 2亿 ,预计 2 0 10年可达 2 4亿 ,2 0 2 5年可能达到 2 99亿 ,增加的糖尿病病人约 2 / 3或 3 / 4在发展中国家。 3 0ａ后发达国家患病人数可能增加 3 0 % ,而发展中国家可能增加 2 0 0 %。在死亡原因中 ,糖尿病将是威胁人类健康与生命安全和发病率及死亡率最高的五大疾病之一[1] 。目前我国糖尿病患者约 2 0 0 0万～ 3 0 0 0万 ,每年新增近 10 0万糖尿病病人。预计中国糖尿病人数由 1995年的 16 0 /百万到2 0 2 5年 3 7 6/百万。随着糖尿病病人寿命延长 ,由于糖尿病性微血管病变所致的肾功能衰竭、失明及心血管、神经…     

胰岛细胞移植进展

近年来,随着在供体胰腺的获取与处理、胰岛的分离与纯化、新型免疫抑制剂的应用等领域不断取得突破,胰岛细胞移植已经公认为是一种治疗1型糖尿病安全有效的治疗方法。胰岛细胞移植治疗的理想目标在于获得比目前治疗方案更符合生理的代谢控制,便患者摆脱对胰岛素的依赖,并保持移植物长期有功能存活和改善患者的生活质量。然而,大量的临床试验表明目前的胰岛移植治疗糖尿病方案仍然存在较多难题,距离临床推广应用仍需时日。本文简要介绍了胰岛细胞移植的历史,并对胰岛分离技术、移植程序、免疫抑制剂的应用、异种胰岛细胞移植、干细胞移植、基因技术在胰岛细胞移植中的应用、羊膜上皮细胞移植、胰岛细胞移植所面临的挑战及将来发展方向等方面作了简要综述。     

10例糖尿病纯胰岛细胞移植临床观察

１０例糖尿病纯胰岛细胞移植临床观察第二医院内科林国云张志广闻淑君泌尿研究所畅继武张淑敏泌尿科姚庆祥胰岛移植是近１０多年来国内外治疗糖尿病的一项新技术，并且大量的研究工作［１～３］已证明胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病有肯定疗效，在这些工作基础上，本组利用纯胰岛...     

胰岛移植的现状与未来

Ⅰ 型糖尿病的治疗现状 1型糖尿病是针对β细胞的特异性自身免疫性疾病,需终身依赖外源性胰岛素治疗。自从Banting和Best在1921年发现胰岛素起,胰岛素注射已成为治疗1型糖尿病的惟一选择及部份2型或其他类型糖尿病患者的主要方法。根据1 993     

新鲜与短期培养胰岛细胞移植对移植胰岛存活的影响

目的 观察新鲜和短期培养后的小鼠胰岛细胞对移植后胰岛的再血管化及功能的影响.方法 C57小鼠作为胰腺供体,胆总管灌注胶原酶P溶液消化胰腺,Ficoll 400不连续梯度纯化获得胰岛细胞.接受不同胰岛细胞肾被膜下移植的受体糖尿病C57小鼠随机分成三组(n=10):A组接受新鲜胰岛细胞移植,B、C组分别接受培养1、3d的胰岛细胞移植.术后观察血糖变化并于移植后第14天取移植胰岛,分别进行HE染色和胰岛素、CD31免疫组织化学染色,并计算微血管密度.结果 胰岛细胞移植后3d内,三组小鼠的随机血糖浓度均＜11.0 mmol/L.A组小鼠在移植后第14天时的血糖浓度仍＜11.0 mmol/L,而B、C组小鼠血糖浓度在移植3d后呈现持续上升,此后各时间点的血糖浓度均显著高于A组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学胰岛素染色结果显示:A组小鼠肾被膜下成团的细胞被染成棕褐色,B、C组类似细胞团仅有少量着色.免疫组织化学CD31染色发现,A组小鼠肾被膜下移植细胞团内部有大量细胞胞质被染成棕黄色,而B组和C组仅有少量细胞着色;A组肾被膜下胰岛内微血管密度显著高于B、C组(P＜0.05).结论 小鼠新鲜胰岛细胞移植较短期培养后胰岛细胞移植更有利于移植胰岛的再血管化及存活.     

成人胰岛细胞移植临床研究

目的建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法,观察成人胰岛细胞移植的安全性与有效性。方法PFC与UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞。采用外科方法,将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内。术后监测血糖与胰岛素用量、C肽与糖化血红蛋白水平以及肝肾功能,并与术前比较。结果42个胰腺成功分离胰岛细胞,平均数量28.5万IEQ、纯度95.7%、活率93.2%、刺激指数2.43,病原学结果均阴性。11例1型糖尿病患者实施成人胰岛细胞移植20次,每次移植平均胰岛数量为11200 IEQ/kg。采用无激素免疫抑制治疗。随访7个月~4年,7例完全撤除胰岛素,4例胰岛素用量较术前减少60%以上。术后血糖稳定维持在正常水平,C肽均超过0.5nmol/L,糖化血红蛋白基本正常,肝肾功能稳定维持正常,无胰岛移植并发症。结论新型成人胰岛细胞分离纯化方法可靠,成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床疗效较好,手术简捷,安全性好。     

胰岛移植及胰岛干细胞研究进展

本文综述了近年来胰岛移植相关研究的进展,包括胰岛的分离、纯化、培养、冷冻保存和免疫隔离;同时还介绍了胰岛组织干细胞以及诱导胚胎干细胞分化为胰岛的最新进展,在对胰岛移植治疗糖尿病的现状及研究发展趋势进行全面分析的基础上,笔者认为异体胰岛移植是当前I型糖尿病治疗的重要手段之一,而胰岛干细胞移植则是未来糖尿病治疗的趋势。     

NKG2D mAb对自发性NOD小鼠同种胰岛移植的作用研究

目的 探讨NKG2D mAb能否单独作为共刺激信号阻断剂延长自发性非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠移植移岛的有功能存活期;NKG2DmAb和CD154mAb是否有协同作用.方法 将分离、纯化的BABL/c小鼠胰岛植入自发糖尿病的NOD小鼠左肾包膜下,移植成功的小鼠分成4组:对照组,NKG2D mAb治疗组,CD154 mAb治疗组和联合治疗组(NKG2D mAb+CD154 mAb).通过小鼠尾静脉血监测血糖,记录胰岛移植物有功能存活期;胰岛移植物所在肾脏行HE染色和CD3、CD4、CD8免疫组织化学染色.结果 NKG2D mAb治疗组移植物有功能存活期无延长(5～11 d,对照组6～11 d,两者差异无统计学意义),CD154 mAb治疗能明显延长移植物有功能存活期[20～64 d,中位期41 d,和NKG2D mAb治疗组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)],联合治疗组较CD154 mAb治疗能延长移植物有功能存活期(23～84 d,中位期51 d,但差异无统计学意义).各组发生排斥时胰岛移植所在肾脏均见淋巴细胞浸润,CD3、CD4、CD8染色结果无明显差异.结论 CD154 mAb能明显延长NOD小鼠胰岛移植物有功能生存期;单独使用NKG2DmAb治疗,不能延长胰岛移植物有功能生存期;联合治疗有效,但仍不能诱导移植物长期存活.     

成人胰岛细胞同种移植进展

成人胰岛细胞同种移植是治疗糖尿病的有效方法。治疗I型糖尿病可以达到不依赖胰岛素。应提高胰腺消化、分离、纯化、保存技术，解决移植免疫排斥等问题。     

微囊化的胰岛移植

本文通过利用海藻酸钠 -聚赖氨酸 -海藻酸钠 (APA)制成的微囊包裹胰岛进行同种鼠胰岛移植 ,证明微囊的半透膜通过免疫隔离作用抑制受体对移植物的免疫攻击 ,有效地延长细胞发挥功能和存活时间     

胰岛细胞移植治疗糖尿病

胰岛细胞移植包括从供体器官内提取Langerhans细胞的复杂的纯化过程。患有1型糖尿病的病人移植后,血中葡萄糖显示刚好控制在接近完美的水平上,远比注射胰岛素更有效。严格控制血糖有望避免发生糖尿病的长期并发症。移植细胞是在放射成像的指引下经皮通过门静脉被注入肝脏的,因此可避免大的移植手术,90％以上的病人可在移植当日回家。胰岛细胞移植能提供与全胰腺移植同样的益处,但手术的危险性较小。     

胰岛移植研究进展

当前器官与组织移植在医学上已占有不可取代的特殊地位,使许多过去被认为是不治之症的康复成为可能。长期依赖胰岛素治疗的糖尿病患者,常因代谢紊乱而导致小血管病变造成眼、肾、脑及心血管并发症。因此许多学者寄希望于胰腺或胰岛细胞的移植。早在发现胰岛素之前就曾有人设想移植胰岛素分泌组织来治疗糖尿病。但直到60年代胰岛移植才成为现实。近年来胰岛移植进展较快。本文将就胰岛移植研究中的某些问题作一概要综述。