宽叶缬草治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的：探讨宽叶缬草对局灶性脑缺血的影响。方法：60只健康、雄性Wistar大鼠分为正常组、假手术组、大脑中动脉闭塞组(MCAO组)、对照组(NS组)、宽叶缬草组(VOL组)。制作可复流大脑中动脉闭塞大鼠模型。NS组、VOL组大鼠大脑中动脉闭塞后2h分别以生理盐水及宽叶缬草灌胃，每8h 1次；术后第5d进行Nissl、TTC染色及脑梗死体积比测定。结果：VOL组的脑梗死体积比显著低于MCAO组；VOL组海马各区及大脑皮层神经元损伤轻．丢失相对较少。结论：宽叶缬草可以减轻局灶性脑缺血后脑组织病理学损害。具有脑保护作用。     

纳洛酮对大鼠局灶性脑缺血后海马各区C-Fos表达的影响

目的 观察纳洛酮对大鼠局灶性脑缺血后海马各区C-Fos表达的影响。方法 采用Koizumi's线栓法制作可复流大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型。32只雄性大鼠随机分为正常组，MCAO组，生理盐水对照组，纳洛酮治疗组，MCAO后第3天处死动物，取脑组织进行C-Fos免疫组化检测，检测结果经CMIAS图像分析系统进行定量分析。结果 正常组海马各区无C-Fos阳性细胞；MCAO后海马各区均可见C-Fos阳性细胞；纳洛酮治疗后，海马各区C-Fos阳性细胞的数密度值较MCAO组均有不同程度的减低。结论 纳洛酮可能抑制大鼠局灶性脑缺血后C-Fos的表达，阻断脑缺血后自杀基因的转录，减轻脑缺血后的损伤。     

三磷酸胞苷二钠对局灶性脑缺血大鼠海马CA3区脑源性神经生长因子表达的影响

目的：观察三磷酸胞苷二钠（CTP）对缺血神经元修复、再生及结构重建的影响及其作用机制。方法：实验于2002-03／10在河北医科大学组胚教研室及河北医科大学第三医院中心实验室进行。选取SD大鼠60只，随机分为脑缺血自然恢复组、药物干预组和假手术对照组，每组20只。采用线栓法建立大脑中动脉脑缺血大鼠模型，药物干预组大鼠术后立即将三磷酸胞苷二钠（70mg／kg体质量）经1mL生理盐水溶解后给予腹腔注射，此后以相同剂量每日一次腹腔注射；自然恢复组及假手术组大鼠给予生理盐水1mL每日一次腹腔注射，分别于术后7、14、21及30d时各取5只大鼠处死，应用苏木精-伊红染色、免疫组化技术观察海马CA3区脑源性神经生长因子的表达，比较各组脑缺血后脑源性神经生长因子阳性细胞吸光度值。结果：实验选取的各组大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑缺血后细胞形态观察结果：假手术组大鼠顶叶及海马区神经元排列整齐，形态完整，细胞数量较多，细胞核圆大且核仁明显。缺血组可见梗死灶，表现为正常结构消失，排列紊乱，细胞数量减少，胞核浓缩呈梭形或三角形，细胞质深染。②免疫组化染色及图像分析结果：光镜下观察，假手术组海马CA3区脑源性神经生长因子免疫组化染色阳性细胞神经元的胞浆内充满弥漫性的棕黄色颗粒，但其表达数量较少、染色较浅，自然恢复组脑源性神经生长因子表达与假手术组相比逐渐增多，第21天时达到高峰，并且免疫反应产物染色较深，部分神经元可见长的轴突，三磷酸胞苷二钠干预组脑源性神经生长因子阳性表达同自然恢复组相比均明显增加。③脐缺血后各组脑源性神经生长因子阳性细胞吸光度值的比较：与假手术组相比，自然恢复组脑源性神经生长因子吸光度值明显升高且差异有显著性（P〈0．01）。与自然恢复组相比，三磷酸胞苷二钠干预组各时间点吸光度值均升高，而且7d和14d时同自然恢复组比较差异有显著性（P〈0．01）。结论：脑缺血损伤可诱导海马CA3区脑源性神经生长因子表达增多。三磷酸胞苷二钠可上调脑缺血后脑源性神经生长因子的表达，具有促进缺血神经元的修复、再生及结构重建的作用。     

三磷酸胞苷二钠对局灶性脑缺血大鼠海马CA3区脑源性神经生长因子表达的影响

目的:观察三磷酸胞苷二钠(CTP)对缺血神经元修复、再生及结构重建的影响及其作用机制。方法:实验于2002-03/10在河北医科大学组胚教研室及河北医科大学第三医院中心实验室进行。选取SD大鼠60只,随机分为脑缺血自然恢复组、药物干预组和假手术对照组,每组20只。采用线栓法建立大脑中动脉脑缺血大鼠模型,药物干预组大鼠术后立即将三磷酸胞苷二钠(70mg/kg体质量)经1mL生理盐水溶解后给予腹腔注射,此后以相同剂量每日一次腹腔注射;自然恢复组及假手术组大鼠给予生理盐水1mL每日一次腹腔注射,分别于术后7、14、21及30d时各取5只大鼠处死,应用苏木精-伊红染色、免疫组化技术观察海马CA3区脑源性神经生长因子的表达,比较各组脑缺血后脑源性神经生长因子阳性细胞吸光度值。结果:实验选取的各组大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑缺血后细胞形态观察结果:假手术组大鼠顶叶及海马区神经元排列整齐,形态完整,细胞数量较多,细胞核圆大且核仁明显。缺血组可见梗死灶,表现为正常结构消失,排列紊乱,细胞数量减少,胞核浓缩呈梭形或三角形,细胞质深染。②免疫组化染色及图像分析结果:光镜下观察,假手术组海马CA3区脑源性神经生长因子免疫组化染色阳性细胞神经元的胞浆内充满弥漫性的棕黄色颗粒,但其表达数量较少、染色较浅,自然恢复组脑源性神经生长因子表达与假手术组相比逐渐增多,第21天时达到高峰,并且免疫反应产物染色较深,部分神经元可见长的轴突,三磷酸胞苷二钠干预组脑源性神经生长因子阳性表达同自然恢复组相比均明显增加。③脑缺血后各组脑源性神经生长因子阳性细胞吸光度值的比较:与假手术组相比,自然恢复组脑源性神经生长因子吸光度值明显升高且差异有显著性(P<0.01),与自然恢复组相比,三磷酸胞苷二钠干预组各时间点吸光度值均升高,而且7d和14d时同自然恢复组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:脑缺血损伤可诱导海马CA3区脑源性神经生长因子表达增多。三磷酸胞苷二钠可上调脑缺血后脑源性神经生长因子的表达,具有促进缺血神经元的修复、再生及结构重建的作用。     

行为学训练对局灶性脑缺血大鼠梗死侧海马CA3区突触结构的影响

目的:研究行为学训练对局灶性脑缺血大鼠梗死侧海马CA3区突触结构的影响并探讨其机制。方法:48只健康雄性Wistar大鼠制成右侧大脑中动脉脑梗死模型后随机分为训练组和对照组,每组各24只,2组又随机分为7d、14d和21d3个时段进行观察,每个时段8只。训练组于造模1d后,给予Morris水迷宫训练,对照组置于普通笼中正常喂养,不给予干预。透射电子显微镜下观察各时间点不同组大鼠梗死侧海马CA3区突触结构参数的变化。结果:电镜下观察到各时段电针组梗死侧海马CA3区突触后致密物(PSD)厚度、活性区宽度、突触后膜曲率均较对照组明显增加,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:行为学训练可以改善局灶性脑梗死大鼠梗死侧海马CA3区突触结构参数的表达,促进神经功能的恢复,从而改善脑梗死大鼠的学习记忆能力。     

康复训练对局灶性脑缺血动物的影响

脑血管意外是一类发病率、死亡率和致残率都很高的疾病．在中国．脑血管意外的致残率在众多疾病中居于首位。随着脑血管疾病的患病群体逐渐年轻化，要更好的促进脑血管意外患者的恢复．减少残疾和残障，提高生存质量，尽早回归社会已显得越来越重要。有研究表明，康复治疗对缺血性脑梗死的患者在改善感觉，运动及行为能力方面已获得明显的疗效。长期以来．对实验动物模型的研究已涉及到康复治疗的诸多方面，包括运动训练、丰富环境（含社交，social interaction）、药物辅助治疗等：还提出各种治疗手段在缺血性脑损伤的动物脑内所产生的一系列病理、生理、解剖和功能的变化，如突触发生、树突分支生长（dendritic arborization），星形胶质细胞增生、血管生成、脑功能重建等，这些都为理解康复治疗的机制打下了基础。     

电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区突触结构的影响

目的:探讨针刺对缺血性脑损伤后的突触可塑性促进作用的机制。方法:36只SD大鼠分为假手术2、5周,缺血2、5周,缺血+针刺2、5周共6个组,采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型,研究缺血2和5周后缺血区皮质突触超微结构的变化规律和针刺对其影响。结果:造模后突触的面数密度(Nv)、突触连接带面密度(Sv)和突触后膜致密物质(PSD)显著下降。缺血5周组大鼠缺血脑区Nv,Sv为(0.879±0.104)个/μm3,(0.082±0.003)μm2/μm3,均多于缺血2周组(0.489±0.122),(0.038±0.002)μm2/μm3;其中Sv和PSD在电针治疗2和5周时均显著上升,而Nv,在电针治疗5周时才显著增加(P<0.05);造模后突触的体密度和突触界面曲率数值都会显著减少(P<0.05),电针似不能提高这两个指标的数值。结论:提示电针可以保护与改善脑缺血模型大鼠皮质的神经突触结构,为电针促进缺血性脑损伤后的恢复提供了有力的物质形态学基础。     

镁对局灶脑缺血神经保护作用的实验研究

目的 :观察MgSO4 、Mg2 + -ATP对局灶脑缺血的治疗作用。方法 :线栓法制备SD大鼠可逆性右侧大脑中动脉缺血模型 (MCAO) ,缺血 2h后再灌流 ,72小时后处死大鼠。观察神经功能缺损评分 ,用图象分析技术测定脑梗死体积 (比 )、脑水肿体积 (比 ) ;并原位标记DNA片断 ,检测TUNEL法染色阳性细胞数 ;测定血清神经元特异性烯醇化酶 (NSE)水平 ;动态观察血清镁和血糖浓度。结果 :MgSO4 组、Mg2 + -ATP组较对照组再灌注后 2小时神经功能缺损评分无差异 ,而 72小时评分有显著差异 (P <0 0 0 1) ,且脑梗死体积 (比 )、脑水肿体积 (比 )、TUNEL阳性细胞数 ,血清NSE水平均低于对照组 (P <0 0 5 ) ;但MgSO4 组、Mg2 + -ATP组两组之间各项指标无显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :镁能减轻局灶脑缺血后脑损伤 ,这种保护作用可能与镁减少迟发性神经元损伤有关 ;Mg2 + -ATP未能加强镁的作用。     

电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区突触结构的影响

目的：探讨针刺对缺血性脑损伤后的突触可塑性促进作用的机制。方法：36只SD大鼠分为假手术2、5周，缺血2、5周，缺血+针刺2、5周共6个组，采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型．研究缺血2和5周后缺血区皮质突触超微结构的变化规律和针刺对其影响。结果：造模后突触的面数密度(Nv)、突触连接带面密度(Sv)和突触后膜致密物质(PSD)显著下降。缺血5周组大鼠缺血脑区Nv．Sv为(0．8．79&;#177;0．104)个／μm^3，(0．082&;#177;0．003)μm^2／μm^3，均多于缺血2周组(0．489&;#177;0．122)，(0．038&;#177;0.002)μm^2／μm^3；其中Sv和PSD在电针治疗2和5周时均显著上升，而Nv，在电针治疗5周时才显著增加(P&;lt;0.05)；造模后突触的体密度和突触界面曲率数值都会显著减少(P&;lt;0．05)，电针似不能提高这两个指标的数值。结论：提示电针可以保护与改善脑缺血模型大鼠皮质的神经突触结构，为电针促进缺血性脑损伤后的恢复提供了有力的物质形态学基础。     

牛磺酸对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞巢蛋白表达的影响

【目的】研究牛磺酸治疗对成年大鼠脑缺血后缺血侧神经干细胞巢蛋白(nestin)表达的影响,探讨牛磺酸治疗缺血性脑损伤的作用机制。【方法】采用开颅热凝闭法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,随机分为正常组、假手术组、模型组与牛磺酸组,采用腹腔注射每天给予牛磺酸,采用巢蛋白免疫组化法观察脑缺血后3d,7d,14d与21d四个不同时相巢蛋白表达阳性细胞的数量。【结果】脑缺血后不同时相缺血侧皮质、海马齿状回和纹状体均有巢蛋白表达阳性细胞,其中7d时各区的阳性细胞数量明显增加(均P<0.05);而牛磺酸组在不同时相的巢蛋白阳性细胞数量均较同时相模型组有明显的增加(P<0.05)。【结论】牛磺酸可促进缺血后相关脑区巢蛋白阳性细胞数量的增加,提示这种作用可能是牛磺酸治疗脑缺血的重要作用机制之一。     

电针对脑缺血大鼠血管生成素及其受体表达的影响

目的：观察电针能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的功能恢复,并观察电针对血管生成素及其受体表达的影响,从而探讨其促进功能恢复的内在机制。方法：成年雄性SD大鼠18只,随机分成电针组、对照组和假手术组,每组6只。大脑中动脉闭塞（MCAO）法造模24h后,电针组给予针刺百会、曲池、足三里,每天30min,连续治疗2周,对照组及假手术组以相同的方法予以抓取和固定。采用神经行为学评分评价神经功能恢复情况;免疫组化法从蛋白水平观察Ang-1、2,Tie-2的表达情况。结果：2周后,电针治疗组的神经行为学评分明显高于对照组（P〈0.05）,并低于假手术组（P〈0.05）;Ang-1、Ang-2及Tie-2的表达显著高于对照组（P〈0.05）。结论：电针能够促进脑缺血大鼠神经功能恢复,这种改变可能与Ang/Tie-2通路上调有关。     

rTMS对脑梗死大鼠记忆功能及海马IL-1的影响研究

目的:研究重复经颅磁刺激(rTMS)对脑梗死大鼠空间记忆功能的影响,并探讨其可能机制。方法:45只大鼠随机分为假手术组、对照组和rTMS组各15只,采用大脑中动脉栓塞再灌注(tMCAO)法制作脑梗死大鼠模型。采用Morris水迷宫评定学习记忆功能变化,通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)观察患侧海马白细胞白介素1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及梗死灶区(IL-1β)mRNA表达量。结果:与假手术组相比,对照组及rTMS组大鼠逃避潜伏期显著延长(P0.01),而rTMS组较对照组的逃避潜伏期则明显缩短(P0.05)。对照组、rTMS组IL-1βmRNA在患侧海马及皮层的表达量均较假手术组增高(P0.01),rTMS组患侧海马IL-1βmRNA表达较对照组显著增高(P0.01),患侧皮层IL-1βmRNA表达较对照组无明显变化。对照组、rTMS组iNOS、TNF-αmRNA表达量均较假手术组增高(P0.01),rTMS组与对照组无明显差异。结论:rTMS治疗可促进脑梗死后空间学习记忆功能恢复,并可能通过增加患侧海马区IL-1βmRNA表达来实现。     

亚低温联合升压治疗对局灶性脑缺血的脑保护作用

目的 :观察升压联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血的脑保护作用。方法 :6 8只大鼠随机分为对照组、升压治疗组、亚低温治疗组及升压联合亚低温治疗组 ;制作大鼠局灶性脑缺血模型 ,观察各组的神经功能缺失评分、脑梗死体积和脑组织水含量。结果 :升压治疗组、亚低温治疗组及升压联合亚低温治疗组的神经功能缺失评分、脑梗死体积均明显低于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;升压联合亚低温治疗组脑梗死体积小于升压治疗组和亚低温治疗组 (P均 <0 .0 5 ) ,升压组、亚低温治疗组和联合治疗组脑组织水含量均明显低于对照组(P均 <0 .0 5 )。结论 :升压和亚低温对局灶性脑缺血大鼠有明显的脑保护作用 ,联合应用保护作用更强。     

Evaluation of antioxidant and neuroprotective effect of ethanolic extract of Embelia ribes Burm in focal cerebral ischemia/reperfusion-induced oxidative stress in rats

Antioxidants have been the focus of studies for developing neuroprotective agents to be used in the therapy for stroke, which is an acute and progressive neurodegenerative disorder and is the second leading cause of death throughout the world. In fact, many herbal antioxidants have been developed in in vitro and in vivo experiments and some of these have been tested in clinical studies of stroke. Embelia ribes have been reported to have antioxidant and antidiabetic effects. In addition to these effects, this study was designed to investigate the neuroprotective effect of ethanolic extract of E. ribes Burm fruits on middle cerebral artery occlusion (MCAO)-induced focal cerebral ischemia in rats. Male Wistar albino rats were fed ethanolic E. ribes extract (100 and 200 mg/kg body weight; p.o.) for 30 days. After 30 days of feeding, all animals were anaesthetized with chloral hydrate (400 mg/kg, i.p.). The right middle cerebral artery was occluded with a 4-0 suture for 2 h. The suture was removed after 2 h to allow reperfusion injury. Ischemia followed by reperfusion in ischemic group rats significantly (P < 0.001) reduced the grip strength activity and non-enzymatic (reduced glutathione, GSH) and enzymatic [glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR) and glutathione-S-transferase (GST)] antioxidant levels in hippocampus and frontal cortex compared to sham-operated rats. Further, serum lactate dehydrogenase (LDH) and thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) levels in hippocampus and frontal cortex were significantly increased in ischemic group compared to sham-operated rats. Furthermore, ethanolic E. ribes extracts pretreatment significantly (P < 0.001) increased the grip strength activity, and GSH, GPx, GR and GST levels in hippocampus and frontal cortex with significant decrease in LDH levels in serum and TBARS levels in hippocampus and frontal cortex compared to MCAO + vehicle group rats. The data from this study suggest that chronic treatment with ethanolic E. ribes extract enhances the antioxidant defense against MCAO- induced focal cerebral ischemia in rats and exhibits neuroprotective activity.     

电针对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞巢蛋白表达的影响

目的研究电针治疗对成年大鼠脑缺血后缺血侧神经干细胞巢蛋白（nestin）表达的影响,探讨电针治疗缺血性脑损伤的作用机制。方法采用开颅热凝闭法制作大脑中动脉阻塞（MCAO）模型,随机分为模型组与电针组,针刺“大椎”、“百会”,并行电针干预,采用巢蛋白免疫组化法观察脑缺血后3,7,14与21d四个不同时相巢蛋白表达阳性细胞的数量。结果脑缺血后不同时相缺血侧皮质、海马齿状回和纹状体均有巢蛋白表达阳性细胞,其中7d时的阳性细胞数量明显增加（皮质：P〈0．05,海马：P〈0．01。纹状体：P〈0．01）;而电针组在不同时相的巢蛋白阳性细胞数量均较同时相模型组有明显的增加（P〈0．05或P〈0．01）。结论电针可促进缺血后相关脑区巢蛋白阳性细胞数量的增加,提示这种作用可能是电针治疗脑缺血的重要作用机制之一。     

高压氧对持续局灶性脑缺血细胞凋亡的影响及其作用机制

目的 探讨高压氧(HBO)对持续性局灶性脑缺血细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 选择4～5个月龄SD大鼠65只,随机分为缺血组、HBO组和假手术组。观察脑梗死灶体积、凋亡细胞数量及凋亡调控基因蛋白表达的变化。结果 HBO组与缺血组相比,6 h～10 d各相应时间点梗死灶体积均明显缩小,差异均有极显著性意义(P均<0.01);HBO 组缺血48 h后,TUNEL 阳性凋亡细胞数较缺血组明显减少(P<0.01);HBO 组与缺血组相比,在缺血6 h～10 d各时间点 Bcl-2阳性细胞增加;差异有显著性意义;Bax阳性细胞在缺血6 h～10 d各时间点均减少,差异有显著性意义。结论 脑缺血早期暴露于高压氧可以减少局灶性脑缺血梗死灶体积;高压氧能抑制脑缺血细胞凋亡,其作用与上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白表达有关。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时c－fos、bcl－2蛋白的动态变化

目的:探讨细胞凋亡在脑缺血再灌注时脑损伤过程中的作用。方法 :采用免疫组化法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间内c -fos、bcl -2蛋白表达的水平。结果 :(1)脑缺血再灌注时在缺血侧皮层和基底节区可见c -fos阳性表达 ,并于缺血30min再灌注1h时阳性表达达高峰 ;(2)脑缺血再灌注时缺血侧皮层和基底节区均有bcl-2阳性表达 ,并随再灌注时间不同 ,其阳性表达率亦不同。于缺血2h再灌注3h时阳性表达达高峰。结论 :c -fos和bcl-2参与大鼠脑缺血再灌注时缺血性细胞损伤(包括细胞凋亡)的发生     

降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌流损伤的影响

目的探讨降纤酶对局灶性脑缺血再灌流损伤的保护作用。方法用线栓法制成大鼠大脑中动脉闭塞 再灌流模型 ,1 82只大鼠分为 :正常对照组 ;假手术组 ;缺血 3h再灌流 (3h、6h、2 4h、72h) ,缺血 6h再灌流 (3h、6h、2 4h)组 ,缺血再灌注组分为治疗组 :再灌流前 30min尾静脉注射降纤酶 (8U Kg) ,对照组 :静脉注射等容量生理盐水。行大鼠神经功能评分 ;脑组织TTC染色 ,计算梗塞灶体积 ;HE染色观察脑组织病理变化。结果缺血 3h再灌注大鼠降纤酶治疗组各时间点神经功能评分均较对照组低 (P <0 .0 5) ,梗死灶体积较对照组小 (P <0 .0 5)。缺血 6h再灌注组降纤酶治疗组的神经功能评分和梗死灶体积与对照组比较无显著性差异 (P>0 .0 5)。降纤酶组未见脑内出血加重的倾向。结论降纤酶对大鼠局灶脑缺血 3h再灌流引起神经功能障碍和脑组织损伤有保护作用。