斑蝥酸钠诱导人胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究

目的观察斑蝥酸钠体外对人胃癌BGC823细胞凋亡的影响。方法应用MTT法及流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠对人胃癌BGC823细胞的生长和凋亡的影响。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24 h均可使人胃癌BGC823细胞生长明显抑制(P<0.01),并出现典型的凋亡峰,细胞增殖阻滞于G1期。结论斑蝥酸钠对人胃癌BGC823细胞生长有抑制作用,可诱导胃癌细胞凋亡。      

斑蝥酸钠对体外培养的EJ细胞的实验研究

目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法检测斑蝥酸钠对EJ细胞增值抑制的影响,荧光倒置显微镜下观察细胞的凋亡情况,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况。结果以0.5、1、5、10、15 mg/L 5个浓度的斑蝥酸钠作用于EJ细胞24 h,EJ细胞的增殖出现不同程度的抑制,且与药物浓度成正相关。1、2、3、4、5组抑制率与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。对照组S期细胞比例为8.94%,G2/M期为4.16%,G0/G1期为86.91%,与1、2、3、4、5组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。使用斑蝥酸钠作用EJ细胞24 h后,电泳出现凋亡特有的阶梯状条带,随着药物浓度的增加,凋亡带增多,而对照组则没有出现凋亡带。荧光显微镜下,对照组未出现凋亡小体,加入斑蝥酸钠的药物组有凋亡小体出现,0.5、5 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较少,15 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较多。结论斑蝥酸钠对体外培养EJ细胞增殖有显著的抑制作用,诱导EJ细胞凋亡。     

斑蝥酸钠协同雷公藤甲素诱导肝癌细胞株7721凋亡

目的：探讨斑蝥酸钠协同雷公藤甲素对人肝癌7721细胞生长的影响及机制。方法：采用系列浓度的斑蝥酸钠与雷公藤甲素单独或联合作用于人肝癌7721细胞,应用MTT法检测它们对人肝癌7721细胞生长抑制率的影响,荧光倒置显微镜法观察细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法分别测定各组用药对人肝癌7721细胞中NF-κB p65和caspase-3表达的影响。结果：斑蝥酸钠和雷公藤甲素单独用药均可抑制人肝癌7721细胞的生长(P<0.05),且呈剂量和时间依赖性。两药联合作用对人肝癌7721细胞生长抑制率和凋亡率均大于单独用药(P<0.05) ,并且两药联用可以显著下调NF-κB p65表达(P<0.05),显著上调caspase-3的表达(P<0.05)。结论：斑蝥酸钠和雷公藤甲素均可抑制人肝癌7721细胞的生长,通过影响凋亡相关蛋白的表达诱导细胞凋亡;斑蝥酸钠可协同雷公藤甲素上调caspase-3的表达并下调NF-κB p65表达,联合用药效应明显。     

斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗肝癌38例临床观察

目的 研究斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗肝癌的临床疗效；方法 将68例住院肝癌患者，随机分为斑蝥酸钠维生素B6治疗组和一般对照组，两组均采用一般支持治疗和对症治疗，治疗组加用斑蝥酸钠维生素B6注射液0.5mg静滴,一日一次，两周一疗程，连用两疗程，1个月后观察症状、体征变化及再评估Karnofsky分，作近期疗效评定；结果 治疗组近期疗效与对照组相比有显著差异，治疗组治疗前后症状、体征变化亦有显著差异；结论 斑蝥酸钠维生素B6可抑制肿瘤细胞生长，提高患者生存质量。     

斑蝥酸钠治疗原发性肝癌的机制及临床应用进展

<正>斑蝥酸钠是从斑蝥体内提取的一种单萜烯类物质——斑蝥素的半合成衍生物,其相对分子质量小,易于进入细胞内,可较早产生细胞毒作用,具有较强的抗肿瘤作用,是一种较为理想的抗癌中药西制制剂,通过多种直接机制和间接机制起到抗癌作用,同时具有减轻其他抗癌方式的副作用,减少化疗药物的剂量及费用,提高患者生活质量等功效。为了更加系统地了解斑蝥酸钠治疗原发性肝癌的机制和应用效果,笔者就近年来的相关文献进行了整理总结,     

斑蝥酸钠的研究进展

近年来对斑蝥素的研究主要集中于对其抗癌机制的探讨、衍生物的研制和新剂型的开发[1]。相继合成了多种斑蝥素衍生物,如斑蝥酸钠、羟基斑蝥胺、甲基斑蝥胺、去甲斑蝥素等。这些化合物较斑蝥素毒性明显降低,并且药理作用更加明确。这对于进一步开发利用药用斑蝥资源,造福人类健康,具有重要的指导作用。本文对斑蝥素衍生物斑蝥酸钠(sodium cantharidate,SCA)的化学组成、作用机制、临床应用以及新药研发等综述如下:1化学组成斑蝥酸钠是斑蝥素与氢氧化钠共热时水解生成[2]。斑蝥酸钠不仅保持了斑蝥素特有的抗癌活性,且毒副作用比斑蝥素小。斑…     

去甲斑蝥酸钠联合肝动脉栓塞化疗术治疗中晚期肝癌的临床研究

目的观察去甲斑蝥酸钠(SNCTD)联合肝动脉栓塞化疗(TACE)术治疗中晚期肝癌的临床疗效及不良反应。方法选取我院2006年1月至2009年2月收治的128例原发性肝癌患者,随机分为治疗组(SNCTD联合TACE)64例与对照组(单纯TACE)64例,观察两组近期疗效、前3年生存率、治疗前后生活质量卡氏评分(KPS)及不良反应。结果治疗组与对照组治疗前后近期总有效率分别为82.81%、56.25%,治疗组前3年生存率分别为78.13%、65.63%、34.38%。对照组前3年生存率分别为46.88%、32.81%、14.06%,外周血象、生活质量KPS评分值均比治疗前有不同程度的提高,两组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNCTD联合TACE术治疗中晚期肝癌能协同增效,对延长患者的生存时间,改善患者生活质量,降低粒细胞减少的发生方面有一定的临床价值。     

斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株毒性作用的研究

目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用. 方法:采用5,10,20 μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况. 结果:5 μg/ml斑蝥酸钠作用2,4 h后细胞无明显改变,10,20 μg/ml作用2,4 h后细胞出现水肿、空泡、核固缩以及细胞溶解现象;药物作用细胞后其抑制率显著增高(P<0.05);细胞周期中G2/M期延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05). 结论:斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株有明显的毒性作用,通过诱导细胞凋亡的途径抑制细胞生长.     

大黄素在体外诱导人肝癌细胞smmc-7721凋亡的实验研究

目的:研究Emodin(大黄素)对人肝癌细胞smmc-7721的作用及探讨其诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制.方法:肝癌细胞smmc-7721经emodin(大黄素)处理后,用MTT法观察emodin对肝癌细胞株smmc-7721细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪分析诱导凋亡作用,采用western blot 检测p53、p21蛋白水平变化,采用细胞免疫组化方法检测Fas的表达变化.结果:与对照组相比,emodin能明显抑制smmc-7721细胞的生长,其IC50为49.6umol/L.荧光显微镜观察示emodin处理的肝癌细胞胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞可见新月型改变,固缩或片段化的核.DNA凝胶电泳可见典型的梯状条带,细胞凋亡与emodin作用的浓度和时间相关.流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰 ",emodin能浓度依赖地诱导smmc-7721细胞发生G2/M期阻滞.Emodin处理smmc-7721细胞后,western blot 检测结果显示p53、p21蛋白表达明显增加,免疫组化方法检测结果显示Fas的表达明显增强.结论: emodin对人肝癌细胞smmc-7721株有强烈的增殖抑制作用,其分子机制可能是诱导smmc-7721细胞发生凋亡.Emodin 诱导smmc-7721细胞发生凋亡是p53依赖性的,即与p53、p21有关,并且Fas表达水平的上调在此过程中也起了一定作用.     

MTT法及AO/EB荧光染色法分析斑蝥酸钠对HepG2的生长抑制的研究

目的:观察不同剂量斑蝥酸钠在体外作用24h对人肝癌细胞HepG2生长的影响。方法:用MTT法及AO/EB荧光染色法分析斑蝥酸钠对HepG2的生长抑制情况。结果:小、中、大剂量斑蝥酸钠作用24h,对HepG2的抑制率分别为0、24.37%、25.54%,大剂量有明显抑制作用(P<0.01);荧光染色法显微镜下可观察到凋亡小体。结论:斑蝥酸钠能抑制肝癌细胞生长,并且可诱导其凋亡。     

大黄素对化疗药诱导肝癌细胞凋亡的增强作用

目的 观察大黄素对化疗药5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱导肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法 不同浓度大黄素单用或与5-Fu联合作用HepG2细胞，以流式细胞仪（FCM）及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡；免疫组织化学（sP）法检测Bax、Bcl-2、凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达的改变。结果 2、4μg／m1大黄素分别与5-Fu联用，作用细胞16、24、48h后，时间依赖性地诱导HepG2细胞凋亡，且随大黄素浓度的增加细胞凋亡率有增加的趋势。联用组细胞凋亡率及Bax、Bcl-2、AIF蛋白表达与5-Fu单用组相比差异均有极显著性意义（均P〈0．01）。各组细胞凋亡率与Bax蛋白表达呈正相关（r=0．881，P〈0．05），与Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0．942，P〈0．01），与AIF蛋白表达呈正相关（r=0．900，P〈0．05）。结论 大黄素可显著增强5-Fu诱导HepG2细胞凋亡的作用，可能与调控Bax、Bcl-2、AIF蛋白表达有关。     

紫杉醇诱导人食管癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究紫杉醇诱导人食管癌细胞的凋亡作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制。方法：通过形态学观察,流式细胞仪技术分析研究紫杉醇对人食管癌细胞的凋亡作用,免疫组化测定bcl-2、p53、p21在紫杉醇处理前后的变化。结果：紫杉醇作用于Eea109细胞后,可见到较典型的细胞凋亡形态学变化：细胞核固缩、解聚以及凋亡小体。流式细胞仪检测显示,G1峰前有一明显的凋亡峰。免疫组化显示,bcl-2、p53在紫杉醇处理前后无变化,而p21表达增加。结论：紫杉醇可能通过p21诱导人食管癌细胞凋亡。     

奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC7721的体外抗肿瘤作用

目的研究奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC7721生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法以不同浓度的奥沙利铂作用于SMMC7721细胞,应用MTT法检测奥沙利铂对SMMC7721细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;采用分光光度法检测caspase-3、cas-pase-8、caspase-9的活性。结果奥沙利铂可抑制SMMC7721细胞的生长并具有时间和剂量依赖性,Hoechst33258荧光染色可见典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测到细胞阻滞于S期和SubG1峰。经过奥沙利铂诱导,caspase-3、caspase-9活性被上调,较对照组明显升高（P〈0.05）,caspase-8活性未见明显改变（P〉0.05）。结论奥沙利铂具有抑制肝癌细胞株SMMC7721增殖及诱导凋亡作用,此作用可能通过激活内源性凋亡途径实现。     

Bax蛋白在丁酸钠诱导食管癌细胞凋亡中的表达

目的:探讨丁酸钠对人食管癌Eca-109细胞凋亡的作用。方法:以1 mmol/L、2.5 mmol/L和5 mmol/L丁酸钠分别与人食管癌Eca-109细胞共培养,倒置显微镜观察细胞生长情况,免疫组化(SP)法检测凋亡抑制基因bax蛋白的表达。结果:Eca-109细胞经丁酸钠处理后,在倒置显微镜下观察到丁酸钠处理后的Eca-109细胞形态学发生了改变,细胞生长明显受到抑制;免疫组化检测实验组细胞的bax蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:丁酸钠可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因bax蛋白表达有关。     

链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞及人正常肝细胞生长的影响

目的观察链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞及人Chang氏正常肝细胞生长增生的影响。方法常规培养链球菌,提取细菌全蛋白并通过阴离子交换层析获得蛋白分离组分SpⅠ和SpⅡ。不同浓度链球菌蛋白(10、50、100mg/L)作用于人肝癌Bel-7402细胞及人Chang氏正常肝细胞24～72h后,采用MTT法检测两种细胞的增生活性。倒置显微镜下观察50mg/L链球菌全蛋白和SpⅡ对两种细胞的形态学变化。结果MTT结果显示,链球菌全蛋白及SpⅡ能显著抑制Bel-7402细胞的生长,与蛋白剂量和作用时间呈负相关关系;SpⅠ对Bel-7402细胞未显示出明显增生抑制作用。链球菌全蛋白及SpⅡ对人Chang氏正常肝细胞显示出不同程度的刺激生长作用。倒置显微镜下观察,链球菌全蛋白及SpⅡ作用后的Bel-7402细胞,细胞稀疏、脱落、排列紊乱,失去正常形态,而人Chang氏细胞未发现明显的形态学变化。结论链球菌全蛋白及SpⅡ能抑制人肝癌Bel-7402细胞的增生,并且能在一定程度上促进人Chang氏正常肝细胞增生。     

三氧化二砷诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的初步研究

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人喉癌Hep - 2细胞的生物学效应及其作用机制。 方法　Hep - 2细胞经不同浓度的As2 O3 处理 4 8h ,通过MTT法计算细胞生长抑制率 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果　As2 O3在 2、1、0 .5、0 .2 5 μmol/L的浓度范围作用Hep - 2细胞 4 8h ,细胞生长抑制率分别为 82 %、6 5 %、33%、15 % ,IC50 为0 .85± 0 .2 5 μmol/L ;细胞凋亡率分别为 2 1.7%、19%、5 .2 %、4 .6 %。 结论　As2 O3 对人喉癌Hep - 2细胞的抑制作用呈剂量依赖性 ,细胞生长抑制率与细胞凋亡率呈正的直线相关关系 (P <0 .0 5 )。     

丁酸钠诱导的人大肠癌细胞成熟分化中的表型变化

目的：探索食物纤维成分之一丁酸钠对人大肠癌细胞生长,分化的影响。方法：应用MTT、流式细胞仪、光镜及电镜技术、观察经丁酸钠诱导后低分化大肠癌细胞系Clone-A细胞生长及形态学变化。结果：经丁酸钠诱导后,Clone-A细胞生长受到明显抑制：G0／G1期细胞百分比增加,S期细胞百分比减少,细胞增殖指数下降,诱导后Clone-A细胞变长,出现胞浆突起,由圆形、不规则形变为扁平的成纤维细胞样形态,同时,丁酸钠作用2d后,细胞表面伸出丝状伪足,4d后明显变长,胞浆内质网、高尔基体数量及密度增加,内质网集核周围并铺展于胞质内,形态趋于正常。结论：丁酸钠能够抑制低分化人大肠癌细胞生长,诱导其成熟分化,使其一些恶性表型逆转。     

三氧化二砷对Bel-7402人肝癌细胞株的促凋亡作用

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )在体外是否具有抗肝癌作用 ,并对其作用机制进行初步探讨。方法 :用不同浓度的As2 O3 处理Bel 740 2人肝癌细胞株及L 0 2正常人肝细胞株 ,应用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )观察As2 O3 对细胞生长的影响 ,并用电镜、流式细胞仪、DNA电泳等检测方法研究其作用机制。结果 :MTT法发现As2 O3 0 .5～ 2 .0mg·L-1的浓度均可显著抑制Bel 740 2人肝癌细胞株的生长 ,而对L 0 2正常人肝细胞株的抑制作用较弱。经As2 O3 作用后 ,透射电镜和扫描电镜观察均显示Bel 740 2细胞发生了显著的凋亡形态改变 ;提取细胞DNA行琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯形条带 ;流式细胞仪分析可见有亚G1峰出现 ,凋亡率呈时间和剂量双重依赖性特点。结论 :As2 O3 在体外可显著抑制肝癌细胞株生长 ,其作用机制主要是诱导肿瘤细胞凋亡     

人肝癌细胞和成纤维细胞共育时超微结构的改变

采用定位培养技术 ,将人肝癌细胞和成纤维细胞有序地接种在同一容器内培养 ,电镜下观察 2种细胞接触时细胞切面超微结构的变化。结果 :与肝癌细胞伪足接触的成纤维细胞膜下出现多个吞饮泡 ,使骨架纤维下移 ,局部断裂。 2种细胞的线粒体肿胀 ,溶酶体增多 ,胞质中出现许多泡状结构。提示 ,在肝癌细胞侵袭成纤维细胞早期、成纤维细胞膜尚未受到破坏时 ,细胞内的结构已发生了改变。