甲状腺乳头状癌中 BIM 基因表达及其与 BRAFV600E 突变的相关性研究

通过检测甲状腺乳头状癌(PTC)中 BRAFV600E突变与促凋亡基因 BIM 表达的情况,探讨两者的关系以及它们与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。应用突变等位基因特异性扩增(MASA-PCR)和直接测序法,qPCR 技术分别检测61例 PTC 组织及与其配对正常甲状腺组织中 BRAFV600E突变和 BIM 基因表达情况,分析 BRAFV600E突变与 BIM 基因表达的相关性及其与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。结果提示 PTC 中 BRAFV600E突变率为54.1%,首次报道含有 BRAFV600E突变的 PTC 组织中 BIM 基因的表达水平比野生型和正常甲状腺组织中低,且 BRAFV600E突变与更高的临床 TNM(Ⅲ/Ⅳ)分期有关(P<0.05),而BIM 基因的低表达与肿瘤大小及更高的 TNM 临床分期相关(P<0.05)。本研究有助于进一步了解 PTC 的发病机制,为临床诊断和治疗 PTC 提供了新的线索。     

BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌的临床病理关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中BRAFV600E基因突变与临床病理的关系。方法回顾性分析115例PTC患者临床资料,术后均采用实时荧光PCR技术检测组织BRAFV600E基因突变情况,22例未发生BRAFV600E基因突变纳入对照组,93例发生BRAFV600E基因突变纳入实验组。收集两组性别、年龄、癌灶直径、癌灶个数、是否侵袭被膜、颈部淋巴结是否转移及TNM分期,分析其与BRAFV600E基因突变的相关性。多因素Logistic回归分析BRAFV600E基因突变与PTC复发危险因素等病理参数的相关性。结果两组性别、癌灶直径、是否侵袭被膜、颈部淋巴结是否转移和TNM分期比较,差异有统计学意义(P0.05)。两组年龄和癌灶个数比较差异无统计学意义(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示:BRAFV600E基因突变与性别、癌灶直径、是否侵袭被膜、颈部淋巴结是否转移及TNM分期相关。结论性别、癌灶直径、是否侵袭被膜、颈部淋巴结是否转移及TNM分期是PTC患者BRAFV600E基因突变的危险因素,可能是影响肿瘤进展的因素。     

BRAFV600E在甲状腺乳头状癌与桥本甲状腺炎相关性中的研究

目的 研究BRAFV600E在甲状腺乳头状癌与桥本甲状腺炎中的表达,探讨甲状腺乳头状癌与桥本甲状腺炎的相关性.方法 北京空军总医院2012年1月-2014年6月经病理证实的甲状腺石蜡标本,甲状腺乳头状癌40例、桥本甲状腺炎20例、甲状腺乳头状癌伴桥本甲状腺炎20例、甲状腺腺瘤20例,采用免疫组化(Envision法)检测BRAFV600E的表达并进行半定量分析,比较其在各组中的表达差异.结果 甲状腺乳头状癌BRAFV600E阳性率为77.5％ (31/40),桥本甲状腺炎BRAFV600E阳性率为45.0％(9/20,P=0.012).甲状腺乳头状癌伴桥本甲状腺炎的肿瘤组织区域BRAFV600E阳性率为70.0％(14/20),与单纯甲状腺乳头状癌的阳性率差异无统计学意义(P=0.156);而桥本甲状腺炎区域BRAFV600E阳性率为55％(11/20,P=0.527),与单纯桥本甲状腺炎BRAFV600E的阳性率差异亦无统计学意义(P＞0.05).甲状腺乳头状癌有转移者BRAFV600E阳性率(88.2％,15/17)高于甲状腺乳头状癌未转移者(69.5％,16/23,P=0.030).甲状腺腺瘤中未检测到BRAFV600E.结论 甲状腺乳头状癌和桥本甲状腺炎均呈现较高的BRAFV600E突变率.     

BRAF突变与乳头状甲状腺癌的不良预后

很多研究表明BRAF突变与乳头状甲状腺癌(PTC)不良预后有很大相关性.本文从BRAF突变与PTC 临床病理高危因素和PTC的复发的联系以及与PTC进展为分化程度更低的肿瘤的关系这几方面来简介最新的研究进展,并阐述了其对临床决策的影响.     

VEGF-C及TNF-α在乳头状与滤泡状甲状腺癌中的表达及其意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)-C和肿瘤坏死因子(TNF)-α在甲状腺乳头状癌(PTC)和甲状腺滤泡状癌(FTC)中的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测甲状腺乳头状癌45例(其中31例伴颈淋巴结转移)、甲状腺滤泡状癌17例(其中3例伴颈淋巴结转移)及18例正常甲状腺组织标本中VEGF-C及TNF-α表达情况.结果 在甲状腺癌中VEGF-C及TNF-α均有不同程度的表达,在乳头状癌中表达程度高于滤泡状癌,有淋巴结转移的肿瘤较无转移的肿瘤表达升高(均P＜0.05).结论 VEGF-C和TNF-α在PTC 中的表达高于FTC,提示VEGF-C和TNF-α可促进PTC与FTC发生淋巴转移.     

老年甲状腺乳头状癌患者超声造影特征与BARF V600E突变的相关性

目的 探讨老年甲状腺乳头状癌患者超声造影特征与鼠类肉瘤滤过性毒素菌致癌同源体B1(BARF)V600E突变的相关性。方法 纳入157例老年乳头状癌患者,均行超声造影检查。使用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测组织病理标本中BARF V600E突变情况。分析BARF V600E突变组和野生组在临床特征、常规超声和超声造影特征方面的差异。结果 86例(54.78%)存在BRAF V600E突变。同BARF V600E野生组相比,BARF V600E突变组结节纵横比≥1、微钙化、造影后结节增大、向心性增强及增强时间为同步或快进的比例均显著升高(均P<0.01)。多因素分析结果表明,纵横比≥1(OR=3.65)、微钙化(OR=5.17)及造影后结节大小增大(OR=5.32)与BRAF V600E突变率升高有关,其在模型中的分值分别为1、2、2分。当模型总分>2分时,该模型预测结节BRAF V600E突变的曲线下面积为0.83,敏感性和特异性分别为88.4%和60.6%。结论 常规超声检查和超声造影中结节纵横比≥1、微钙化、造影后结节增大3个特征与BRAF V600E突变相关,...     

免疫组化检测63例原发甲状腺癌中BRAF~(V600E)突变及其价值研究

正甲状腺乳头状癌是最为常见的甲状腺恶性肿瘤。BRAFV600E突变是甲状腺乳头状癌中最为常见的基因突变之一。据报道,45%的甲状腺乳头状癌病例会出现BRAFV600E基因突变[1]。BRAFV600E的突变对于甲状腺乳头状癌的确诊以及预测不良预后非常重要。目前可用于BRAFV600E突变的检测方法有Sanger测序法、焦磷酸测序高分辨率熔解曲线分析及等位基因特异扩增(PCR)等方法[1]。     

甲状腺乳头状癌中细胞周期素E的表达及临床意义

甲状腺是人体重要的内分泌腺,它在机体新陈代谢方面具有重要地位,是内分泌系统中发病率最高的器官。甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤之一,约占全身恶性肿瘤的1．5％,男女比约为1：2．5～3。甲状腺癌多发于青壮年,平均年龄约40岁,统计显示近年来甲状腺癌的发病率呈增高趋势。     

人BRAF野生型及V600E突变型真核表达载体的构建及表达

目的:构建BRAF野生型和V600E突变型真核表达载体;转染并筛选稳定表达BRAF的胰腺癌细胞株,为探讨BRAF V600E突变在胰腺癌发生发展中的作用提供合适的细胞模型.方法:将BRAF野生型及V600E突变型cDNA克隆于真核表达载体pCMV-Myc中,构建pCMV-Myc-BRAFW)及pCMV-Myc-BRAFV600E重组质粒,酶切鉴定、测序证实序列正确后,利用脂质体将重组质粒转染胰腺癌细胞Panc-1,经G418培养筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和Western blot鉴定野生型和V600E突变型BRAF基因在Panc-1细胞中的表达.结果.酶切鉴定和序列分析证实,重组克隆pCMV-Myc—和pCMV-Myc—BRAFV600E序列正确,RT-PCR和Western blot结果显示G418筛选获得的转基因Panc-1细胞稳定表达BRAF和BRAF V600E.结论:成功构建了pCMV-Myc-BRAFW和pCMV-Myc-BRAFV600E真核表达载体,建立了稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.     

甲状腺癌组织中Smad4蛋白表达变化及意义

目的 探讨甲状腺癌组织中Smad4蛋白表达变化及意义.方法 采用免疫组化ABC法检测在甲状腺癌组织、癌旁正常甲状腺组织中的smad4,并选取CD34标记血管内皮细胞以测定微血管密度(MDV).结果 Smad4在甲状腺癌组织、癌旁正常甲状腺组织中的阳性表达率分别为47.1%、87.5%,两者相比,P＜0.05;MDV在甲状腺癌组织、癌旁正常甲状腺组织中分别为(26.85±8.27)、(8.83±4.94)条/cm2,两者相比,P＜0.01.Smad4蛋白阳性表达率与甲状腺癌的组织学类型、淋巴结转移有关(P＜0.05);Smad4蛋白表达与MDV呈负相关(r=-0.496,P＜0.05).结论 Smad4蛋白在甲状腺癌组织中的低表达可能与肿瘤的发生、浸润与转移有关,可作为预测甲状腺癌预后的重要指标.     

五种基质金属蛋白酶基因在乳头状甲状腺癌中的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinase ,MMP)基因表达与乳头状甲状腺癌的关系。方法　取甲状腺手术标本 ,包括乳头状甲状腺癌 8例、桥本甲状腺炎 7例、甲状腺腺瘤 8例和正常甲状腺组织 8例 ,提取其总RNA。分别进行RT PCR扩增MMP 2、MMP 9、MMP 14、MMP 2 5与MMP 2 6基因 ,其产物经 1%琼脂糖凝胶电泳后进行荧光强度扫描 ,并进行统计学分析 ,比较各种基因在不同组中的表达水平。结果　在乳头状甲状腺癌组织中 ,MMP 2、MMP 9、MMP 14的表达阳性率及表达水平明显高于桥本甲状腺炎、甲状腺腺瘤和正常对照组 (均P <0 .0 5 ) ,其它 3组间差异则无显著性。MMP 2 5、MMP 2 6在 4组甲状腺组织表达阳性率及表达水平都极低 ,4组间差异无显著性。结论　MMP 2、MMP 9、MMP 14在乳头状甲状腺癌中的表达增强很可能与乳头状甲状腺癌的发生有关。     

TBX2及p53在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨甲状腺癌组织中TBX2及p53表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学技术,检测正常甲状腺及甲状腺癌组织中TBX2及p53表达.结果 TBX2及p53在甲状腺癌组织中的阳性表达明显高于其在正常甲状腺组织中的阳性表达(P<0.05);TBX2及p53在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌的组织学分型及分化程度有关(P<0.05).结论 TBX2及p53在甲状腺癌的发生、发展中起着重要的作用,检测甲状腺癌中TBX2及p53表达可为临床甲状腺癌的诊断、治疗方案的选择及预后评估提供参考指标,同时也为甲状腺癌的治疗提供新靶点.     

早期胃癌cyclin E表达的生物学意义

目的研究早期胃癌ｃｙｃｌｉｎＥ表达的生物学意义．方法用免疫组化法检测１０８例早期胃癌组织中ｃｙｃｌｉｎＥ和Ｐ５３的表达．结果正常胃腺体细胞几乎不染色,３３％（３６／１０８）的胃癌呈棕黄色．ＣｙｃｌｉｎＥ的总阳性率,在幽门部为４８％（２４／５０）,肉眼观混合型４６％（６／１３）,组织学分化型４０％（３１／７８）,Ｐ５３阳性者５４％（１９／３５）,均显著高于对照组．ＣｙｃｌｉｎＥ的强阳性率,在癌侵入粘膜下者是１８％（９／５１）,侵入静脉者２８％（５／１８）,侵入淋巴管者２８％（９／３２）,侵入淋巴结者３０％（４／１３）,都显著高于对照组．ＣｙｃｌｉｎＥ强阳性者五年生存率４０％（４／１０）,显著低下．结论ＣｙｃｌｉｎＥ阳性尤其是强阳性者恶性程度高     

细胞角蛋白-19基因在甲状腺癌中的表达及意义

目的探讨细胞角蛋白-19（CK-19）mRNA在甲状腺癌中的表达及其意义。方法用RT—PCR方法检测甲状腺癌（27例）、良性甲状腺疾病（18例）及正常甲状腺（9例）组织中CK-19mRNA的表达。结果CK-19mRNA在甲状腺癌组中表达为2．63±2．14,与非癌组相比．P〈0．05;在有淋巴转移的甲状腺癌组的表达为3．41±2．63,明显高于无转移者的1．79±0．97,P〈0．05。结论CK-19mRNA在甲状腺癌组织中表达明显增强,且与淋巴结转移有关,提示CK-19可能参与了甲状腺癌的发生发展,并对肿瘤转移有促进作用。     

小儿喉乳头状瘤组织中p63表达及意义

目的寻找小儿喉乳头状瘤的特异性标记物。方法用免疫组化二步法（PV-9000）检测47份小儿喉乳头状瘤标本[初次手术标本15份（不典型增生7份）,复发标本32份（不典型增生25份）]及13份腭扁桃体旁上皮组织标本中p63的表达。结果喉乳头状瘤与腭扁桃体旁组织均被覆鳞状上皮,上皮组织基底细胞层、棘细胞层与表层p63基因均见表达。喉乳头状瘤各层p6S表达均明显高于腭扁桃体旁组织,P均〈0．01;典型增生组织基底层、棘层063表型细胞数低于不典型增生组织,P均〈0．01;复发标本各层p63表型细胞数均明显高于初次手术标本,P均〈0．05。结论p63可作为小儿喉乳头状瘤特异性标记物,其上调可作为推测小儿乳头状瘤发生、发展及复发的重要指标之一。     

TGF-β1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1在甲状腺乳头状癌的表达及意义。方法分别应用免疫组织化学法和Western印迹法检测TGF-β1在甲状腺乳头状癌及癌周正常组织中的表达。结果 TGF-β1在甲状腺乳头状癌组织中的表达主要分布于胞质和胞外基质中,在胞质中表达明显降低,而在基质中表达升高。结论 TGF-β1在细胞外基质高表达,与肿瘤侵袭、转移有关,在甲状腺乳头状癌的临床诊治中具有重要意义。     

乳头状和滤泡状甲状腺癌的处理

由于乳头状和滤泡状甲状腺癌确诊时病人的年龄,癌瘤所长的阶段和初期治疗的不同,其预后有很大别。及时、合理的初期治疗及长期密切的随访,可使90％的病人人长期存活,最佳的治疗方案是甲状腺近全切和术后及时的I^131治疗。随访分为3期,主要的临床测指标是全身扫描和血清Tg测定。     

乳头状和滤泡状甲状腺癌的处理

由于乳头状和滤泡状甲状腺癌确诊时病人的年龄、癌瘤所处的阶段和初期治疗的不同 ,其预后有很大区别。及时、合理的初期治疗及长期密切的随访 ,可使 90 %的病人长期存活。最佳的治疗方案是甲状腺近全切和术后及时的 131I治疗。随访分为 3期 ,主要的监测指标是全身扫描和血清Tg测定。