胚胎脊髓不同移植方法对大鼠损伤脊髓N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

创伤后一个重要的继发性损伤是释放兴奋性氨基酸 (EAA) ,随后作用于N 甲基 D 天门冬氨酸受体 (NMDAR )。NMDAR是EAA受体的一种重要亚型 ,参与EAA释放的调节。近年来发现中枢神经系统损伤时NMDAR过度激活可引起神经细胞内Ca2 + 超载和Na+ 积蓄 ,由此产生细胞内高渗压和激活细胞内一系列钙依赖性酶学反应 ,导致神经细胞的凋亡和死亡[1] 。我们用胚胎脊髓、大网膜以及腺病毒介导的脑源性神经生长因子 (AxCA BDNF)基因转染的成肌细胞移植 ,应用免疫组织化学和氚标记的地卓西平马来酸盐 ( [3 H]MK 80 1)放射性配基分析 ,观察上…     

神经生长因子对脊髓损伤后神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体和一氧化氮生成的影响

我们用原位杂交法通过检测神经生长因子 (ＮＧＦ)作用于损伤脊髓前后Ｎ 甲基 Ｄ 天门冬氨酸受体 (ＮＭＤＡＲ) 1及固有型一氧化氮 (ＮＯ)合酶 (ｎｃＮＯＳ)ｍＲＮＡ的表达变化来探讨ＮＧＦ保护损伤脊髓的机理 ,现报道如下。一、材料和方法1 .动物及分组 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 65只 ,体重 2 0 0～ 2 50 ｇ ,雌雄不分 ,随机分成 3组 :正常组 :5只 ,不作手术 ,作为测量脊髓ＮＭＤＡＲ1和ｎｃＮＯＳ的正常数值 ;生理盐水 (ＮＳ)组 :30只 ,经蛛网膜下腔导管注入生理盐水 ;ＮＧＦ组 :30只 ,经导管注入ＮＧＦ。2 .动物模型的建立 :以 1 0 ｇ× 2 .5ｃ…     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓凋亡的影响

[目的]探讨大鼠脊髓损伤后N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后对大鼠脊髓细胞凋亡的影响.[方法]将动物分为大鼠脊髓半切洞损伤后,分为应用胚胎脊髓和MK-801治疗组(A组),大鼠脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组(B组),单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组(C组).手术后1、3、7、14 d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TUNEL),以及Bcl-2蛋白免疫反应表达的测定(免疫组化法).采用计算机图像分析技术,进行定量分析.[结果]A、B、C三组中均发现凋亡细胞及BCL-2蛋白免疫反应阳性细胞,图像分析发现,细胞凋亡率为:C＞B＞A,Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为:A＞B＞C.[结论]大鼠脊髓损伤后应用NMDA受体拮抗剂MK-801和胚胎脊髓移植能抑制脊髓损伤后细胞凋亡.     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体在大鼠中枢炎性痛形成中的作用

目的探讨N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体在大鼠中枢炎性痛形成中的作用。方法SD大鼠30只,体重220～250 g,随机分为3组（n=10）：对照组（C组）、脂多糖组（LPS组）和MK-801组。MK-801组于鞘内注射LPS前2 h,腹腔注射MK-801 0.3 mg/kg,LPS组和C组腹腔注射等容量生理盐水。LPS组和MK-801组鞘内注射LPS 0.1 mg,C组鞘内注射等量生理盐水。于鞘内注射LPS前即刻、鞘内注射LPS后1、3、6、12、24 h时,测定热伤害性刺激痛阈和机械性触痛痛阈。鞘内注射LPS后24 h取腰段脊髓,测定一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性。结果鞘内注射LPS后,与C组比较,LPS组热伤害性刺激痛阈降低、机械性触痛痛阈升高,MK-801组热伤害性刺激痛阈升高、机械性触痛痛阈降低（P〈0.05）;与LPS组比较,MK-801组热伤害性刺激痛阈升高、机械性触痛痛阈降低（P〈0.01）。鞘内注射LPS后,与C组比较,LPS组NO含量、NOS和iNOS活性均升高,MK-801组NO含量降低,NOS活性升高（P〈0.01）;与LPS组比较,MK-801组NO含量、NOS和iNOS活性均降低（P〈0.05）。结论NMDA受体的激活通过升高脊髓NO含量、NOS和iNOS活性,参与了鞘内注射LPS诱导的大鼠中枢炎性痛的形成。     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体在高氨血症和肝性脑病中的作用

Llansola M等人进行一项研究，分析了N-甲基-D-天门冬氨酸受体与高氨血症和肝性脑病的关系。N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体是一种调节学习和记忆功能的谷氨酸盐受体，但是NMDA受体的过度活化会导致神经元变性和死亡。高氨血症和肝衰竭状态能够改变NMDA受体的功能及其所介导的相关信号转导通路。NMDA受体功能活性的改变在急性、慢性高氨血症和肝衰竭中是不同的。     

利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N-甲基-D-天门冬氨酸受体表达的变化

目的 评价利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达的变化.方法 健康雄性SD大鼠24只,体重220～250 g,6月龄,采用随机数字表发法,将其分为2组(n=12):生理盐水组(N组)和利多卡因组(L组).L组经尾静脉输注2％利多卡因4 mg· kg-1·min-1至大鼠发生RacineⅢ级惊厥,N组以等容量等速率生理盐水替代.于惊厥停止后即刻、6、12 h(T1～3)时取海马,采用免疫印迹和RT-PCR法检测NR2B蛋白及mRNA的表达水平.结果 与N组比较,L组NR2B蛋白及mRNA表达上调.与T1时比较,L组T2,3时NR2B蛋白及mRNA表达下调(P＜0.05).与T2时比较,L组T3时NR2B蛋白表达下调(P＜0.05).结论 利多卡因诱发大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的NMDA受体表达上调,该变化可能与利多卡因诱发惊厥发作有关.     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体与吸入麻醉药对小鼠催眠、镇痛作用的关系

目的探讨N．甲基．D．天门冬氨酸(NMDA)受体与安氟醚、异氟醚、七氟醚对小鼠催眠及镇痛作用的关系。方法实验动物选用昆明种小鼠,雌雄不拘。第一部分为催眠实验,120只小鼠随机分成安氟醚、异氟醚、七氟醚三组,分别腹腔注射安氟醚2 ITIl·kg～、异氟醚1．2IrIl·kg～、七氟醚5 rnl·奴～,每组又分成人工脑脊液(aCSF‘)、NMDA 25、NMDA 50及NMDA 75亚组,每亚组10只,各组翻正反射消失后立即侧脑室注射aCSF、NDMA25、50、75 mg 10 m,记录翻正反射恢复(RT)时间。第二部分为镇痛实验,160只小鼠随机分成对照、安氟醚、异氟醚、七氟醚组,对照组不给予任何处理,安氟醚、异氟醚、七氟醚组分别皮下注射安氟醚1．5 llll·kg一、异氟醚0．8 Jnl·kg一、七氟醚4．5 llll·kg～,各组又分成 aCSF、NMDA 2．5、NMDA5及NMDA 10亚组,每亚组10只,各组注药后10 min鞘内注射aCSF或2．5、5、 10 ng NMDA lO出,1 min后腹腔注射O．6％冰醋酸,记录扭体次数。结果催眠实验中,安氟醚、异氟醚、七氟醚组的亚组间比较RT差异无统计学意义(P>0．05)。镇痛实验中,与aCSF亚组比较,对照组的NMDA 2．5亚组、NMDA 5亚组、NMDA 10亚组扭体次数差异无统计学意义,安氟醚、异氟醚、七氟醚组的NMDA 5 ng亚组、NMDA 10 ng亚组扭体次数增加(P相似文献   

肝硬化门静脉高压对大鼠认知功能和N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基表达的影响

目的 研究肝硬化门静脉高压对大鼠认知功能及N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NR) 2B亚基(NR2B)表达的影响. 方法 雄性SD大鼠37只,按照完全随机法分为两组:肝硬化组(25只),采用四氯化碳-花生油溶液方法制造肝硬化门静脉高压大鼠模型;对照组(12只).两组于造模前及造模成功后第1、3、5、7天分别利用跳台法和Y-迷宫法对各大鼠进行行为学测试;测试完成后处死大鼠,取海马组织,RT-PCR方法检测大鼠海马NR2B mRNA的水平,Western blot检测海马NR2B蛋白表达水平,免疫组化法检测大鼠海马CA1区NR2B蛋白分布的变化.ELISA法检测肝损伤相关指标ALT、AST、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、TNF-α、IL-1、IL-6的含量.结果 肝硬化组AST、ALT、TNF-α、IL-1、IL-6、MDA分别为(261±7)、(178±7) U/L、(206±18)、(0.46±0.11)、(298±41) μg/L、(19.7±2.5) μmol/L,较对照组明显升高(P＜0.01),SOD为(96±7) U/ml,较对照组明显降低(P＜0.01).与对照组比较:肝硬化组跳台潜伏时间延长、y-迷宫、错误次数增加(P＜0.0l),海马中NR2B mRNA的水平及NR2B的蛋白表达明显降低(P＜0.01),海马CA1区NR2B免疫组化表达明显下降(P＜0.01). 结论 肝硬化门静脉高压引起大鼠认知功能的降低,同时下调海马中NR2BmRNA和蛋白的表达及CA1区锥形细胞中NR2B的表达.     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基抗原表位DNA疫苗免疫大鼠的效应

目的 采用N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基抗原表位(eNg2B)插人质粒载体pDC515中制备的DNA疫苗(pDC515/eNR2B)免疫大鼠,评价其免疫效应.方法 成年雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组(C组)、PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组,每组10只.PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组分别肌肉注射PBS 100 μl、pDC515 100 μg和pDC515/eNR2B 100 μg进行免疫,1周后以等剂量再次免疫.于第1次免疫前、第2次免疫后8、14、21 d时,截尾法采集尾静脉血,分离血清,ELISA法检测NR2B抗体水平.于第2次免疫后21 d时处死大鼠取脊髓,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测NB2B抗体与自身腰段脊髓组织NR2B特异性结合情况.结果 第2次免疫后8 d,pDC515/eNR2B组血清中可检测到NR2B抗体,14 d时达高峰,并高滴度持续至21 d(P＜0.05);C组、PBS组和pDC515组均未检测到相应NR2B抗体;免疫组织化学法和Western blot法检测到pDC515/eNR2B组血清NR2B抗体可与自身脊髓组织NR2B结合.结论 pDC515/eNR2B可诱导SD大鼠产生体液免疫反应,所产生的自身抗体在血液中可高滴度存在一定时间.     

脑源性神经营养因子转基因细胞移植和神经节苷脂对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

目的研究脑源性神经营养因子（BDNF）转基因细胞移植和神经节苷脂（GM-1）对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体的影响。方法将成年大鼠分为四组，A组：单纯脊髓损伤组；B组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组；C组：脊髓损伤＋GM-1组；D组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植＋GM-1组。伤后1、3、7、14d采用[^3H]MK-801放射性配基分析法检测大鼠损伤后脊髓NMDA受体的变化。结果发现各组[^3H]MK-801放射性配基分析最大结合容量都有不同程度的减少，其减少程度顺序是A组〉B组〉C组〉D组。结论应用GM-1和BDNF转基因细胞移植后可以通过影响脊髓NMDA受体，从而减轻脊髓继发性损伤。     

噬菌体展示的肽库中N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基模拟抗原表位的筛选

目的 从噬菌体展示的随机十二肽库中筛选N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDAR）2B亚基模拟抗原表位。方法以NMDAR2B单克隆抗体为配基，免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机十二肽。经过3轮筛选，从第3轮洗脱物中随机挑选12个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定，用酶标仪测定450nm处的吸光值（A450）。对这12个单克隆噬菌体分别进行扩增、纯化，并对DNA测序，以确定插入十二肽的氨基酸序列。通过细胞竞争ELISA法分析阳性单克隆噬菌体对NMDAR2B天然抗原表位与其特异性抗体结合的竞争性抑制。结果经过3轮筛选后能与NMDAR2B单克隆抗体特异性结合的噬菌体得到了有效富积，12个单克隆噬菌体中有9个单克隆噬菌体的A450高于其它3个。DNA测序结果表明这9个单克隆噬菌体表达了一个共同氨基酸序列：SHPPVMPWPTST，将其命名为阳性克隆噬菌体，该阳性克隆噬菌体可以竞争性抑制细胞表面天然抗原与特异性抗体的结合，抑制率（45土3）％，具有抗原模拟性。结论从噬菌体展示的随机十二肽库中成功筛选到了能与NMDAR2B特异性抗体结合的短肽，该肽模拟了天然抗原的某个表位。     

脊髓N-甲基-D-天冬氨酸受体在大鼠慢性内脏痛中的作用

内脏痛觉过敏的产生涉及外周敏化和中枢敏化两种机制.中枢敏化在内脏痛的发生发展过程中起重要作用[1].中枢敏化的形成涉及多种神经递质受体,尤其是脊髓N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体在组织损伤和炎症导致躯体痛的中枢敏化形成中起重要作用[2,3].有研究表明,脊髓NMDA受体参与了急性内脏痛的发生[4,5],而其在慢性内脏痛中的作用尚不明确.本研究拟评价脊髓NMDA受体在大鼠慢性内脏痛中的作用.     

N-甲基-D-天冬氨酸受体在梗阻性黄疸时中枢神经系统损伤中的作用

目的评价N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体在机体梗阻性黄疸时中枢神经系统损伤中的作用。方法收集近年来国内外关于NMDA受体及高胆红素血症时中枢神经系统损伤的相关文献并进行综述。结果高胆红素血症时神经系统损伤的发生与NMDA受体的过度活化有关,由于NMDA受体的过度激活导致了神经细胞的变性和坏死,应用NMDA受体阻滞剂MK-801可减轻高胆红素血症时的神经系统损伤。结论 NMDA受体在高胆红素血症时中枢神经系统损伤过程中发挥重要作用,MNDA受体阻滞剂对此有保护作用,但目前仍无临床应用MK-801的研究报道。     

氯胺酮对局灶性脑缺血损伤大鼠脑N-甲基-D-天冬氨酸受体-1表达的影响

目的研究氯胺酮对局灶性脑缺血损伤大鼠脑N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)-1 (NRⅠ)表达的影响。方法40只雄性SD大鼠,随机分为2组(n=20)：氯胺酮组和戊巴比妥组,分别腹腔注射氯胺酮60 mg·kg~(-1)或戊巴比妥40 mg·kg~(-1),翻正反向消失时,用线栓法阻塞大脑中动脉阻塞制备脑缺血模型。缺血24h时每组分别腹腔注射上述剂量的氯胺酮或戊巴比妥处死5只大鼠,测定脑梗塞体积,缺血24、72h分别腹腔注射上述剂量的氯胺酮或戊巴比妥处死4只大鼠,脑组织切片甲苯胺蓝染色后,观察半暗带内存活神经元情况,并行免疫组化染色,测定NR1表达水平。结果与戊巴比妥组比较,氯胺酮组大鼠脑梗塞体积减小,半暗带内神经元密度升高,NR1表达降低(P＜0.05)。结论氯胺酮抗大鼠脑缺血损伤的作用与下调NRⅠ表达有关。     

烫伤大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型基因表达的变化

目的　观察严重烫伤应激后大鼠海马N 甲基 D 天冬氨酸受体 (N methyl D aspartatere ceptorsNMDAR)亚型基因表达的变化。　方法　制作 30 %TBSAⅢ度烫伤大鼠应激模型 ,以大鼠背部剃毛 ,浸入温水 10s为对照 ,利用RT PCR技术 ,分别检测对照组及烫伤后 0 .5、1、2、4h各时相点海马NMDAR的主要亚型NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B、NMDAR2DmRNA的表达。　结果　伤后 0 .5h及1hNMDAR各亚单位mRNA表达无显著变化 ;伤后 2h及 4hNMDAR1mRNA表达比对照组增加 2 4 .3%及 2 0 .9% (P <0 .0 5 ) ,NMDAR2AmRNA表达比对照组增加 2 7.8%及 2 7.6 % (P <0 0 5 ) ,NM DAR2B及NMDAR2D的mRNA表达无明显变化。　结论　海马NMDAR1/NMDAR2A构成的受体通道在烫伤 2h后表达增强 ,这种变化可能导致了烫伤应激时NMDAR的进一步开放 ,从而可能参与烫伤应激HPA轴失调及其后续的病理生理改变     

脊髓损伤后N—甲基—D—天门冬氨酸受体及其mRNA的变化

脊髓损伤后Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸受体及其ｍＲＮＡ的变化叶晓健李明李家顺赵定麟贾连顺⒇近年来的研究已经表明脊髓损伤触发了一系列相关的化学、代谢和生理改变，最终导致迟发性组织坏死〔１〕，而创伤后兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）的释放及其与相应受体反应似乎是这些继...     

人体缺血性疼痛用N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂右美沙芬无镇痛作用

长时间使用阿片类药物往往造成耐受和药物依赖性,其机制可能涉及中枢神经系统的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体与谷氨酸的关系,而可能发生和维持疼痛持续状态。NMDA受体拮抗剂是否具有减少阿片类药物的这些副反应并保持镇痛效果,经动物实验和临床研究却得出相互矛盾的结论。作者为了评估NMDA受体非竞争性拮抗剂     

实验性脊髓损伤后N－甲基－D－天门冬氨酸受体的变化及其意义

兴奋性氨基酸（ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄ，ＥＡＡ）已被证明在中枢神经系统的创伤中具有神经毒性作用。为进一步揭示其受体机制，本实验用大鼠脊髓突触质膜作受体制剂，［３Ｈ］ＣＰＰ作标记配基，建立体外Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体分析的方法，并以Ａｌｅｎ脊髓损伤模型分析了脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变。结果表明脊髓ＮＭＤＡ受体亲和力（Ｋｄ）为３．５１±０．２６ｎＭ，最大结合数量（Ｂｍａｘ）为６６２．８２±４７．５９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白质。脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变具有时间相关性，创伤后［３Ｈ］ＣＰＰ特异结合在损伤后急性期内逐渐减少，其中伤后４小时减少最明显（Ｐ＜０．０１），至２４小时已有恢复。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明ＮＭＤＡ受体的改变表现为受体数量的减少（Ｐ＜０．０１），受体亲和力未见显著改变。这些结果为ＮＭＤＡ受体参与脊髓继发性损伤提供了证据。     

实验性脊髓损伤后N—甲基—D—天门冬氨酸受体的变化及其意义

兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）已被证明在中枢神经系统的创伤中具有神经毒性作用。为进一步揭示其受体机制，本实验用大鼠脊髓突触质膜作受体制剂，［＾３Ｈ］ＣＰＰ作标记配基，建立体外Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体分析的方法，并以Ａｌｌｅｎ脊髓损伤模型分析了脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变。结果表明脊髓ＮＭＤＡ受体亲和力（Ｋｄ）为３．５１±０．２６ｎＭ，最大结合数量为６６２．８２±４７．５９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白     

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎患者麻醉管理的研究进展

<正>抗N-甲基-D-天冬氨酸(anti-N-methyl-D-aspartate receptor, NMDA)受体脑炎是一种新的神经性自身免疫性疾病,由其产生的NMDA受体抗体所引起的NMDA受体可逆性减少导致的一系列神经系统功能紊乱~([1-2])。本病好发于伴有卵巢畸胎瘤的年轻女性,开始多表现为精神行为异常和/或记忆障碍,逐渐出现阵发性交感神经亢进、中枢性通气功能不足,并迅速进展为需要ICU支持的多种神经缺损,如癫痫、昏迷等~([2-3])。现已