多发性骨髓瘤患者外周血Th17细胞功能研究

本研究探讨Th17细胞及其分泌的细胞因子IL-17、IL-21在多发性骨髓瘤（MM）发生发展中所起的作用.将55例MM患者分为未缓解组（A组,30例）和缓解组（B组,25例）,健康自愿者作为对照组（C组,30例）.采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测外周血单个核细胞（PBMNC）刺激培养上清液中IL-17、IL-21和IL-6的水平,并用流式细胞术分析PBMNC中Th17细胞的比例.结果表明,A组IL-6、IL-17及IL-21的水平与Th17细胞比例均明显高于B组和C组,差异有统计学意义（P＜0.05）;B组与C组相比,IL-6、IL-17及IL-21的水平与Th17比例差异均无统计学意义（P＞0.05）;未缓解组MM患者IL-17与IL-6的水平呈正相关（r=0.782,P＜0.05）,IL-21与IL-6的水平呈正相关（r =0.778,P＜0.05）.结论：Th17细胞可能作为启动因素参与了MM患者的免疫发病过程,并促进病情的进展.     

急性荨麻疹患者外周血Th17细胞数量和功能的变化

目的分析急性荨麻疹患者外周血辅助性T细胞17(Th17)细胞数量和功能的变化,探讨Th17细胞在急性荨麻疹免疫致病机制中的作用。方法收集50例急性荨麻疹患者和50例健康体检者外周血标本,流式细胞术分析其外周血Th17细胞数量,实时荧光定量PCR(qPCR)法分析其转录因子维甲酸相关孤儿素受体γt(RORγt)mRNA水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法分析其外周血Th17细胞相关细胞因子转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A、IL-17F和IL-23水平。结果急性荨麻疹患者Th17细胞数量(t=36.634 1,P0.05)和RORγt mRNA水平(t=23.840 1,P0.05)明显高于对照组,Th17细胞相关细胞因子TGF-β(t=15.521 1,P0.05)、IL-6(t=7.247 3,P0.05)、IL-17A(t=15.415 3,P0.05)和IL-17F(t=13.032 1,P0.05)水平均明显高于对照组。结论 Th17细胞可能通过分泌IL-17A、IL-17F和IL-6等炎症因子在急性荨麻疹发病过程中发挥作用。     

类风湿关节炎患者外周血Th17细胞的检测及其临床意义

目的探讨Th17细胞与类风湿关节炎(RA)疾病的相关性。方法采用RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞的特异性转录因子视磺醛酸相关的孤儿核受体(RORγt)mRNA;酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例健康体检者和22例RA患者外周血单个核细胞(PBMCs)刺激培养后,上清液中白细胞介素-17(IL-17)的水平。结果与健康对照组相比,RA患者PBMCs刺激后产生IL-17的量明显增高(P<0.01),RORγtmRNA也高于健康对照组(P<0.01)。结论 Th17细胞参与了RA发病及病情发展。     

原因不明复发性流产患者外周血Th17和Treg细胞频率及其细胞因子水平变化

目的:探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血Thl7和Treg细胞频率及其细胞因子水平变化.方法:应用流式细胞技术检测URSA患者外周血Thl7和Treg细胞频率;应用ELISA方法检测URSA患者外周血Thl7细胞因子(IL-17、IL-23)和Treg细胞因子(TGFβ1和IL-10)水平.结果:URSA患者Thl7细胞在外周淋巴细胞和CD4+T细胞中的频率显著高于正常早孕者(P<0.01);而URSA患者Treg细胞在外周淋巴细胞和CD4+T细胞中的频率显著低于正常早孕者(P<0.01).URSA患者血清中IL-17、IL-23水平明显高于正常早孕者,而TGF-β1、IL-10水平显著低于正常早孕者(P<0.01).结论:URSA的发生与外周血中Thl7和Treg细胞密切相关.     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞和IL-17检测及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Th17细胞表达频率和白细胞介素(IL)17浓度并探讨其临床意义。方法细胞内因子染色法结合流式细胞术检测20例CHB患者、6例慢加急性肝衰竭(ACLF)患者和19例健康对照(HC)组外周血Th17细胞表达频率,酶联免疫吸附法检测血浆IL-17浓度,分析Th17细胞表达频率和IL-17浓度与HBV DNA载量以及谷丙转氨酶(ALT)、凝血酶原活动度(PTA)、总胆红素(TB)水平之间的相关性。结果 CHB和ACLF患者Th17细胞表达频率为(3.34±1.79)%和(3.89±1.67)%,均高于健康对照组(2.01±0.78)%,CHB患者Th17细胞表达频率与ALT呈正相关(r=0.6188,P=0.0062)。CHB和ACLF患者血浆IL-17浓度[(168.8±53.86)pg/ml和(185.5±63.66)pg/ml]均低于健康对照[(260.8±100.30)pg/ml],CHB患者IL-17浓度与PTA负相关(r=-0.5803,P=0.0073),ACLF患者IL-17浓度与HBV DNA水平负相关(r=-0.8605,P=0.0278)。结论 CHB患...     

胃癌患者外周血Th17细胞相关因子检测及其临床意义

目的探讨检测外周血Th17细胞相关因子在胃癌患者中的意义。方法将我院收治的86例胃癌患者纳入胃癌组,并根据胃癌分期标准分为早期胃癌组46例和中晚期胃癌组40例,将同期35例健康体检者纳入对照组。检测所有研究对象的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平。结果胃癌组患者的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显高于对照组(P<0.01);早期胃癌组患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显低于中晚期对照组患者(P<0.01)。结论胃癌患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1等Th17细胞相关因子明显升高,且随着病情的进展,Th17细胞相关因子水平持续升高,因此检测Th17细胞相关因子水平有助于疾病进展的判断。     

胃癌患者外周血Th17细胞相关因子检测及其临床意义

目的探讨胃癌患者外周血Th17细胞相关因子的临床价值。方法收集该院2012年6月至2013年6月间30例胃癌患者的外周血,同时检测30例健康者外周血作为健康对照者,采用酶联免疫吸附试验检测血浆Th17细胞相关因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-23(IL-23)、白细胞介素-17(IL-17)水平。结果胃癌患者IL-1β、IL-6、IL-23、IL-17水平均显著高于健康对照者,差异有统计学意义(P0.01);且晚期胃癌患者IL-6、IL-23、IL-17水平显著高于早期胃癌患者,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Th17细胞相关因子与胃癌密切相关,检测其水平有助于疾病的判断。     

基因工程Th17细胞的研制及其功能探讨

目的 探讨并优化制备基因工程Th17细胞的方法,评估制备的工程Th17细胞是否具有同天然Th17细胞类似的表型和功能.方法 包装含RORγt基因的重组慢病毒pXZ9-RORγt和空载体对照质粒pXZ9.C57BL6小鼠CD4+ CD25 - na(i)ve T细胞体外活化36 h后依据感染慢病毒颗粒的不同及是否添加TGF-β和IL-6,分为五组:pXZ9-RORγt组、TGF-β+ IL-6组(pXZ9+ TGF-β+ IL-6组)、联合组(pXZ9-RORγt+ TGF-β+ IL-6组)、空载体对照组(pXZ9组)及空白对照组.流式细胞术检测各组IL-17A阳性细胞比例,荧光定量PCR检测各组细胞IL-17A、IL-17F、IL-21和IFN-γ表达水平.通过小鼠实验性变应性脑脊髓炎(EAE)模型评估各组细胞是否具有加重EAE的功能.结果 ①pXZ9-RORγt组、TGF-β +IL-6组和联合组均制备出工程Th17细胞,其中联合组IL-17A阳性率达(60.59±8.15)％,明显高于pXZ9-RORγt组[(40.25±5.46)％]和TGF-β+IL-6组[(14.36±5.27)％].②各组工程Th17细胞均表达IL-17A与IL-17F,而IL-21仅在给予TGF-β和IL-6时明显升高.③各组工程Th17细胞均可加重小鼠EAE.结论 成功建立了制备高效工程Th17细胞的方法,其中过表达RORγt基因与联合TGF-β和IL-6不仅可提高Th17细胞的制备效率,而且制备的工程Th17细胞在表型和功能上与天然Th17细胞相类似.     

幽门螺杆菌感染患者外周血Th17与Th22细胞的改变

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染患者外周血中Th17及Th22细胞的改变。方法收集HP感染者66例(HP感染组)及体检健康者30例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中Th17与Th22细胞水平,同时采用ELISA法检测血清中IL-17与IL-22的表达水平。结果与对照组比较,HP感染组Th17、Th22、IL-17、IL-22水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示,HP感染患者的HP感染者活度值(DPM)与Th17、Th22、IL-17、IL-22水平均呈正相关(P<0.01)。结论HP感染患者体内存在Th17与Th22细胞的激活,同时引起相关免疫效应分子IL-17、IL-22的高表达,促进免疫损害的进展。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义。方法取20例AS患者(分AS病情稳定组及活动组各10例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC)、免疫磁珠分选CD4+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(anti-CD3、anti-CD28),然后加佛被酯/离子霉素,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术检测CD4+T细胞内白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、及IL-6水平。结果免疫磁珠分选CD4+T细胞纯度达90%以上。AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。用anti-CD3、anti-CD28刺激后,CD4+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加。AS患者CD4+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现与IL-17表达相似的特点。结论 AS患者外周血CD4+T细胞胞内IL-17和IFN-γ呈高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程。     

桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞与Th17细胞的动态变化及其意义

目的研究桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞(Treg)与Th17细胞的动态变化与意义。方法采用回顾性研究方法,选取2016年8月至2017年4月陕西省安康市人民医院内分泌科收治的桥本甲状腺炎患者40例(观察组)以及同期健康体检者40例(对照组),比较两组外周血单个核细胞(PBMC)中Th7/Treg细胞比值、细胞特异性转录因子Foxp3、RORγt的mRNA表达以及血清中的IL-17A与TGF-β含量。结果观察组患者的TSH、TPO-Ab、Tg Ab明显高于对照组,FT3、FT4明显低于对照组(P0.05);观察组PBMC中的Treg与Th17细胞比率明显低于对照组(P0.05),Th7/Treg细胞比值明显高于对照组(P0.05),Foxp3中mRNA表达水平明显低于对照组(P0.05),RORγt的mRNA表达水平明显高于对照组(P0.05);观察组患者血清IL-17A水平明显高于对照组(P0.05)。结论桥本甲状腺炎患者的Th17/Treg细胞比值会发生明显的改变,可能与甲状腺抗体存在联系,Th17/Treg细胞亚群免疫功能失衡与疾病有密切的关系。     

桥本甲状腺炎患者外周血Th17与Th1细胞及其相关因子表达水平研究

目的研究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中Th17与Th1细胞及其因子的表达情况及其意义。方法流式细胞方法检测42例HT患者和20例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Th1细胞的比例,ELISA检测血清中相关细胞因子IL-17及IFN-γ的含量。结果 HT患者PBMC中Th17比例显著高于对照组(P<0.01),Th1细胞也高于对照组(P<0.05);此外,HT患者血清中IL-17和IFN-γ的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Th17和Th1细胞可能在HT发病机制中发挥重要作用。     

过敏性哮喘患者外周血Th17细胞及IL-17水平的变化

目的:探讨Th17细胞及其细胞因子IL-17水平在过敏性哮喘患者外周血中的变化及意义。方法:通过测定屋尘螨特异性IgE(sIgE)而选取19例轻度、16例中重度过敏性哮喘患者作为研究对象,并行肺功能及哮喘控制问卷(ACQ)调查,18名正常人作为对照。采用流式细胞术检测外周血Th17细胞的百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆以及重组屋尘螨抗原蛋白1(rDerp1)刺激48h后外周血单个核细胞(PBMC)上清液中的IL-17水平。结果:中重度过敏性哮喘患者外周血Th17细胞百分率、血浆以及rDerp1刺激后PBMC上清液中的IL-17水平高于轻度哮喘患者(P值分别为<0.01、<0.01、<0.05)及正常对照组(P值分别为<0.01、<0.01、<0.05)。哮喘患者外周血中Th17细胞百分率、血浆IL-17水平与第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分率(%)呈负相关,与ACQ平均分呈正相关(P值均<0.01)。结论:Th17细胞应答增强可能促进哮喘加重,并影响其症状控制。     

支气管哮喘患儿外周血Th17和Th9细胞及其细胞因子的表达及临床意义研究

目的检测儿童支气管哮喘患者T细胞17(Th17)、外周血辅助性T细胞9(Th9)的比例及血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-9(IL-9)和总IgE的表达,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用及临床意义。方法选取46例哮喘患儿,分为哮喘发作组(26例)、哮喘缓解组(20例),并设健康对照组(20例)。采用流式细胞术分别检测3组外周血中Th17细胞和Th9细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组儿童血清中IL-17和IL-9的水平;应用特定蛋白分析仪检测3组儿童血清中总IgE的水平。结果与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组外周血Th17和Th9细胞比例较高,差异有统计学意义(P0.05)。与健康对照组相比,哮喘缓解组外周血Th17和Th9细胞比例较高,比较差异有统计学意义(P0.05)。与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组血清中IL-17、IL-9和总IgE水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。与健康对照组相比,哮喘缓解组血清中IL-17、IL-9和总IgE水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。相关性分析结果表明,支气管哮喘患儿血清中IL-17、IL-9与总IgE水平均呈正相关(r值分别为0.717、0.491、0.786,P0.05)。结论支气管哮喘患儿外周血Th17和Th9细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘发病中发挥重要作用,并与哮喘的严重程度呈正相关。     

脓毒症患者外周血中Th17细胞检测及意义

脓毒症是严重创伤、烧伤、感染、手术后常见的并发症,患者住院时间长,预后差,病死率高.全世界每年大约1000人中就有3人发生严重感染,并呈现不断增长的趋势[1-2].脓毒症发病机制复杂,涉及感染、炎症反应、免疫等一系列问题,并与机体多系统多器官的病理生理改变密切相关[3],因此对脓毒症的深入研究具有十分重要的意义.     

子痫前期患者外周血中Th17、Treg细胞变化及意义

目的研究CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg）以及Th17细胞在子痫前期（PE）患者外周血比例的变化,并探讨其在子痫前期免疫耐受失衡中的作用。方法选取子痫前期患者20例,同期正常晚期妊娠20例。分别采集子痫前期患者、正常晚期妊娠妇女外周血,采用细胞内染色的流式细胞术检测CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg以及CD4＋IL-17A＋的表达。结果子痫前期患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋细胞的比例明显低于正常晚期妊娠者（P〈0．05）;而CD4＋IL-17A＋／CD4＋细胞的比例明显偏高（P〈0．05）。结论子痫前期患者上调Th17的表达,Treg细胞表达下降,可能产生Th17／Treg平衡偏移,这一结果造成母胎免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生。     

外周血Th22和Th17细胞对HBV相关性肝衰竭的预测价值

目的 探讨外周血Th22、Th17细胞对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关性肝衰竭的预测价值.方法 采用流式细胞技术检测36例HBV相关性肝衰竭患者(肝衰竭组)、29例HBV相关慢性肝炎患者(慢性肝炎组)和16例体检健康者(对照组)外周血Th22、Th17水平,计算Th17/Th22,分析外周血Th22、Th17与HBV相关性肝衰竭患者肝功能、凝血酶原时间的相关性,以及对HBV相关性肝衰竭的预测价值.结果 肝衰竭组外周血Th22、Th17、Th17/Th22分别为(8.275±3.147)％、(9.542±2.507)％、1.261±0.428,慢性肝炎组分别为(5.365±1.691)％、(6.261±1.843)％、1.255±0.487,对照组分别为(2.330±1.097)％、(3.392±1.637)％、1.613±0.696,肝衰竭组、慢性肝炎组以上指标与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),肝衰竭组外周血Th22、Th17水平与慢性肝炎组比较差异有统计学意义(P＜0.01);肝衰竭组外周血Th22与Th17呈正相关(r=0.706,P=0.000),Th22、Th17细胞与白蛋白(r=-0.540、P=0.000,r=-0.500、P=0.000)、总胆红素(r=0.420、P=0.001,r=0.437、P=0.000)、凝血酶原时间(r=0.495、P=0.000、r=0.492、P=0.000)相关;外周血Th22、Th17预测HBV相关性肝衰竭发生的特异性、阳性预测值分别为89.7％、87.0％及93.1％、92.6％.结论 Th22、Th17在一定程度上可反映HBV相关肝脏疾病的严重程度,可作为HBV相关性肝衰竭的预测指标.     

强直性脊柱炎中HLA-B27表达及其与RF、外周血Th17细胞比率的关系

目的探讨强直性脊柱炎中人体白细胞抗原(HLA-B27)表达及其与类风湿因子(RF)、辅助性T细胞17(Th17)细胞比率的关系。方法选择某院2016年5月至2018年6月确诊为强直性脊柱炎的患者131例,活动期患者60例,稳定期患者71例,另选择同期接收健康体检者80例,所有人均进行HLA-B27及RF、Th17细胞检测,分析检测结果。结果强直性脊柱炎患者HLA-B27表达率明显高于对照组患者,且活动期患者明显高于稳定期患者,差异有统计学意义,P0.05;强直性脊柱炎患者的HLA-B27、RF、Th17细胞比率阳性率明显高于对照组,且活动期患者HLA-B27、RF、Th17细胞比率阳性率明显高于稳定期患者,差异有统计学意义,P0.05;HLA-B27表达与Th17细胞比率呈正相关,P0.01。结论 HLA-B27与Th17同时检测,更有助于强直性脊柱炎活动期的诊断。