原发性肝癌肝动脉化疗栓塞合并LAK/IL-2灌注治疗的临床Ⅲ期观察

评价肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗原发性肝癌的初步疗效。方法不能切除的肝癌患者经肝动脉化疗栓塞后灌注自体ＬＡＫ细胞及ＩＬ┐２，并与单独行肝动脉化疗栓塞的不能切除肝癌患者比较其肿瘤大小，生活质量的变化及毒副反应。结果经肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗的２２例肝癌有效率（ＣＲ＋ＰＲ）为１３．６％，包括１例完全缓解和２例部分缓解，而单独化疗栓塞对照组１７例中仅１例显示部分缓解（有效率５．９％）。化疗栓塞＋ＬＡＫ／ＩＬ┐２治疗组与单独化疗栓塞对照组中ＭＲ、ＳＤ、ＰＤ分别为５、１２、１例和１、１１、４例。治疗组中大多数病人生活质量改善或稳定，而对照组中生活质量则无提高。两组病人的毒副反应均较轻而短暂。结论经肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗原发性肝癌疗效较优于单独肝动脉化疗栓塞治疗，原发性肝癌更有效的综合治疗方案有待进一步探索     

IL-2治疗癌性胸水疗效观察

观察ＩＬ┐２或ＩＬ┐２＋ＤＤＰ胸内注射治疗癌性胸水的疗效。方法ＩＬ┐２或ＩＬ┐２＋ＤＤＰ胸内注射。结果ＩＬ┐２胸内注射２３例，ＣＲ５例，ＰＲ１１例，ＰＤ７例，有效率６９．５７％。ＩＬ┐２＋ＤＤＰ胸内注射２９例，ＣＲ８例，ＰＲ１６例，ＰＤ５例，有效率８２．７６％。ＤＤＰ胸内注射２３例，ＣＲ２例，ＰＲ９例，ＰＤ１２例，有效率４７．８３％。ＩＬ┐２和ＩＬ┐２＋ＤＤＰ治疗后ＮＫ活性显著提高。结论ＩＬ┐２胸内注射治疗癌性胸水有较好疗效且与ＤＤＰ有协同作用，其疗效可能与ＩＬ┐２改善机体免疫功能有关     

晚期胃癌外周血CD_4~ 、CD_8~ 与IL-2及IFNγ量相关研究

目的探讨晚期胃癌外周血细胞免疫水平的研究。方法５１例晚期胃癌患者外周血ＣＤ＋４、ＣＤ＋８细胞与其外周血淋巴细胞经ＰＨＡ┐Ｐ诱生ＩＬ┐２、ＩＦＮγ量之间相关分析；结果晚期胃癌患者ＩＬ┐２与ＩＦＮγ的产生量与ＣＤ＋４、ＣＤ＋８细胞数目无相关性，ＩＬ┐２与ＩＦＮγ之间亦无平行关系；而正常对照组（健康献血者）ＩＬ┐２量与ＣＤ＋４细胞数呈正相关，与ＣＤ＋８数呈负相关；ＩＦＮγ则与ＣＤ＋４亦呈正相关，而与ＣＤ＋８呈负相关；ＩＬ┐２与ＩＦＮγ量之间呈平行正相关；表明，晚期胃癌患者细胞免疫功能改变不仅单纯表现为ＣＤ＋４、ＣＤ＋８细胞数量改变，更重要的是机体ＣＤ＋４细胞、ＣＤ＋８细胞产生ＩＬ┐２及ＩＦＮγ量显著下降。结论检测机体外周血淋巴细胞产生ＩＬ┐２及ＩＦＮγ水平更能全面反应胃癌患者免疫功能真实状况，从而更有利于晚期胃癌患者综合治疗     

原发性肝癌肝动脉化学栓塞合并免疫治疗的临床观察

临床观察经肝动脉化学栓塞合并ＩＬ┐２加入胚胸腺ＬＡＫ细胞免疫治疗原发性肝癌后患者免疫功能和肝功能反应。方法２４例原发性肝细胞癌，其中８例化学栓塞５┐ＦＵ，ＤＤＰ合并免疫治疗（称合并组），１６例单纯化学栓塞治疗（称单纯组）。两组比较治疗后的免疫因子水平和肝功能变化。结果合并组较单纯组血清ＩＬ┐２和Ｔａｃ反应升高，ｓＩＬ┐２Ｒ和ＴＮＦα降低，血清ＡＬＴ和总胆红素明显降低。结论ＩＬ┐２和人胚胸腺ＬＡＫ细胞能改善肝癌病人的免疫功能和肝功能     

自体可溶性肿瘤抗原协同IL-2诱导外周血PBMC增殖及杀瘤

探讨自体可溶性肿瘤抗原（ＴＳＡ）与ＩＬ┐２共同诱导ＰＢＭＣ增殖及杀瘤作用。方法分三组用ＡＰＡＡＰ法观察细胞表型，ＭＴＴ法测定细胞增殖及杀瘤活性（靶细胞为ＭＮＫ４５系人胃低分化腺癌细胞）。结果培养第７天ＴＳＡ（１０μｇ／ｍｌ）协同ＩＬ┐２诱导ＰＢＭＣ增殖显著高于单独ＩＬ┐２诱导（Ｐ＜０．０１）。且ＣＤ＋８及ＣＤ＋２５表达率增高，差异有显著性（Ｐ＜０．０１０，当效／靶比为８０∶１时ＩＬ┐２诱导的ＰＢＭＣ杀瘤活性为４８．６％，而１０μｇ／ｍｌＴＳＡ协同诱导ＰＢＭＣ杀瘤活性为８６．３％。结论为研究ＴＡＫ细胞提供了实验依据，提示该类细胞具有临床过继免疫治疗应用的潜能     

CD3AK细胞和LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床和实验研究

将５１例晚期恶性肿瘤患者（男性２３例，女性２８例）分成两组，其中一组（３１例）以ＣＤ３ＭｃＡｂ（ＣＤ３单克隆抗体）和小剂量ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）共同诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞治疗，另一组（２０例）输注大剂量ＩＬ－２（１０００ｕ／ｍｌ）诱导的常规ＬＡＫ细胞治疗，以探讨降低ＩＬ－２用量、提高杀伤细胞细胞毒活性的可能性。结果显示ＣＤ３ＡＫ组患者生活质量改善、症状缓解均优于ＬＡＫ组。ＣＤ３ＡＫ组ＰＲ＋ＭＲ率较ＬＡＫ组高２９．０％，Ｓ＋Ｐ率和死亡率分别较ＬＡＫ组低１２．４％和９．６％。同时比较了ＣＤ３ＡＫ细胞与ＬＡＫ细胞的体外增殖和细胞毒活性，结果表明ＣＤ３ＡＫ细胞增殖率高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者在０．０５水平无显著差异。提示ＣＤ３ＭｃＡｂ在刺激杀伤细胞活性，尤其在提高其增殖能力方面，具有显著的作用，ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２能更有效地治疗晚期恶性肿瘤。     

低剂量IL—2诱导的人胚胎脾脏CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤效果及…

用ＣＤ３ＭｃＡｂ和低剂量ＩＬ－２诱导的人胎脾ＣＤ３ＡＫ细胞治疗４３例晚期恶性肿瘤患者，取得疗效。经２－８疗程治疗，多数患者症状缓解，生活改善，ＰＲ＋ＭＲ１８例，Ｓ＋Ｐ２５雎，死亡９例。全组无严重毒副反应发生。同时比较ＣＤＡＫ细胞和常规ＬＡＫ细胞体外增殖及其杀伤活性，表明前者１４４ｈ增殖力高于后者，靶细胞抑制率二者无显著差异。     

低剂量IL-2诱导的人胚胎脾脏CD_3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤效果及实验研究

用ＣＤ３ＭｃＡｂ和低剂量ＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）诱导的人胎脾ＣＤ３ＡＫ细胞治疗４３例晚期恶性肿瘤患者，取得疗效。经２～８疗程治疗，多数患者症状缓解，生活质量改善，ＰＲ＋ＭＲ１８例（４１．９％），Ｓ＋Ｐ２５例（５８．１％），死亡９例（２０．９％）。全组无严重毒副反应发生。同时比较ＣＤ３ＡＫ细胞和常规ＬＡＫ细胞体外增殖及其杀伤活性，表明前者１４４ｈ增殖力高于后者（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。初步表明ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２疗法效果肯定，毒副作用小，可能成为继ＬＡＫ／ＩＬ－２之后更为有效的肿瘤辅助治疗。     

TNFα影响LAK细胞、化疗药物抗胃癌细胞作用的实验研究

观察ＴＮＦα对ＬＡＫ细胞、化疗药物抗胃癌作用的影响。方法以不同浓度ＴＮＦα与ＩＬ┐２配伍培养ＬＡＫ细胞，并使ＴＮＦα单抗阻断试验；以ＴＮＦα预处理胃癌细胞，观察ＴＮＦα影响ＬＡＫ抗瘤活性的特性及胃癌细胞对ＰＢＭＣ及ＬＡＫ的敏感性变化；以ＴＮＦα联用５┐ＦＵ，ＡＤＭ或ＭＭＣ观察体外、ＴＮＦ联用ＭＭＣ观察荷胃癌裸鼠体内的抗胃癌效应。结果ＴＮＦα在低浓度ＩＬ┐２下增加ＬＡＫ活性，使ＩＬ┐２诱导同等ＬＡＫ活性的浓度下降约１０倍；ＴＮＦα预处理胃癌细胞使ＰＢＭＣ、ＬＡＫ对其的抗瘤活性提高约１０％、９％。ＴＮＦα与５┐ＦＵ、ＡＤＭ或ＭＭＣ联合组体外、ＴＮＦ与ＭＭＣ联用组体内抑制胃癌细胞生长效应明显优于单用组，差异显著。结论ＴＮＦα在低浓度ＩＬ┐２下增加ＬＡＫ抗胃癌活性，ＴＮＦα预处理使胃癌细胞对ＰＢＭＣ及ＬＡＫ的敏感性增加；ＴＮＦα联合化疗药物５┐ＦＵ、ＡＤＭ或ＭＭＣ可使抗胃癌效应提高     

NK和sIL-2R在肺癌化疗中的临床价值

为了评价肺癌患者化疗后血清ＮＫ细胞活性及ｓＩＬ－２Ｒ水平变化的临床价值，作者采用ＬＤＨ释放法和双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测４７例肺癌病人和４１例正常对照者的血清ＮＫ细胞活性和ｓＩＬ－２Ｒ水平。结果显示，与正常人相比，肺癌病人血清ｓＩＬ－２Ｒ水平增高（Ｐ＜０．０１），ＮＫ细胞活性降低（Ｐ＜０．０５），且化疗后有效病人血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显低于化疗前（Ｐ＜０．０１）。结果提示血清ＮＫ细胞活性和ｓＩＬ－２Ｒ水平可以作为判断肺癌疗效和预后的指标。     

自体与异体LAK细胞对肝癌患者免疫功能影响的研究

应用自体及同种异体ＬＡＫ细胞对２组晚期原发性肝癌患者进行治疗。结果示治疗后２组患者外周血ｍＩＬ－２Ｒ表达阳性率、ＮＫ细胞活性及ＣＤ４／ＣＤ３比值均较治疗前显著升高，血清ｓＩＬ－２Ｒ会量则较治疗前降低，提示机体免疫功能得到明显提高。两种不同来源ＬＡＫ细胞在改善肝癌患者免疫功能上无明显差异。显示胚胎胸腺与脾脏亦是理想ＬＡＫ前体细胞的来源之一。     

人胚胸腺LAK细胞治疗后患者的免疫反应观察

观察经ＩＬ┐２和人胚胸腺ＬＡＫ细胞治疗２～４个疗程的肿瘤病人的免疫反应。方法检测治疗前后患者血清抗核抗体、抗心磷脂抗体、类风湿因子、抗ＬＡＫ细胞膜和胞浆抗体、ＴＮＦα及受体与供体相互刺激杀伤作用。结果２年内监测血清抗核抗体、抗心磷脂抗体、类风湿因子均无变化，特异性抗胸腺ＬＡＫ细胞膜ＩｇＧ抗体有少量产生，但无抗胞浆蛋白抗体，胸腺ＬＡＫ细胞与受体ＰＢＭＣ亦无相互刺激杀伤作用。结论人胚胸腺ＬＡＫ细胞治疗癌症未观察到自身免疫的异常反应     

枸杞多糖联合LAK／IL－2疗法对75例晚期肿瘤的疗效观察

用枸杞多糖（ＬｙｃｉｕｍＢａｒｂａｒｕｍＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＢＰ）联合ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法临床试验治疗７９例晚期肿瘤患者，其中７５例可评估病人资料分析提示，ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法组疗效（４０．９％）显著优于ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法组（１６．１％）。两种治疗方案对恶性黑色素瘤、肾癌、直结肠癌、肺癌、恶性胸水和鼻咽癌有一定的疗效。ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组的缓解持续时间显著长于ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组。ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组治疗前后外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）的ＮＫ、ＬＡＫ活性增高程度均显著大于ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组，说明ＬＢＰ能够提高ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法对晚期肿瘤的治疗效果。     

抗表皮生长因子受体与抗CD_3双功能抗体的制备及细胞毒的研究

制备抗ＥＧＦ┐Ｒ与抗ＣＤ３双功能单克隆抗体及其细胞毒的研究方法通过杂交－杂交瘤技术制备双功能单克隆抗体细胞株Ｅｔ２２，并了解其与ＩＬ┐２联合体外激活ＰＢＬｓ细胞对Ａ４３１癌细胞的杀伤活性。结果ＩＬ┐２激活的ＰＢＬｓ和未经ＩＬ┐２刺激培养的ＰＢＬｓ对靶细胞Ａ４３１的杀伤活性，效靶比为２０∶１的条件下，杀伤率分别为４９％，１７％。Ｅｔ２２双功能抗体介导ＩＬ┐２激活的效应细胞杀伤靶细胞（Ａ４３１）为７５％。结论双功能单克隆抗体（ＥＱ７５×ＯＫＴ３）介导ＩＬ┐２激活的效应细胞杀伤靶细胞（Ａ４３１）活性高于两种亲本单抗（ＣＤ３或ＥＱ７５     

过继性免疫治疗对肺癌围术期细胞免疫功能的影响

对６９例可手术的非小细胞肺癌病例，随机分组分成ＬＡＫ细胞＋ＩＬ－２治疗的研究组２３例，单纯手术的对照组４６例，采用多元方差和单因素方差的统计方法，分析术后辅助性ＬＡＫ细胞过继性免疫治疗对围术期非小细胞肺癌细胞免疫功能的影响。结果显示，对ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８比率、ＮＫ细胞活性和淋巴细胞转化率４个指标的综合分析，两组间在围术期不同时间段上的细胞免疫功能都无显著性差异（各组间的ＨｏｔｅｌｉｎｇＴ２检验，Ｐ值均大于０．０５），但研究组术后１２ｄ的ＮＫ细胞活性较术前下降（单因素方差分析Ｐ＜０．０５），与对照组比较，差异也有统计学上的显著性意义（多元方差分析Ｆ＝４．５７１１，Ｐ＜０．０５）。     

联合应用IL-2和LAK细胞治疗脑星形细胞瘤预后分析

探讨联合应用ＩＬ┐２和ＬＡＫ细胞对脑星形细胞瘤预后的影响。方法５３例经病理证实的星形细胞瘤患者，术后行全脑放射治疗，其中１３例联合应用ＩＬ┐２和ＬＡＫ细胞治疗。结果应用Ｌｏｇｒａｎｋ检验进行单因素分析显示：肿瘤部位、病理分级、手术方式和联合应用ＩＬ┐２／ＬＡＫ细胞对生存期的影响具有统计学意义；多因素Ｃｏｘ模型分析结果显示：病理分级、手术方式、Ｋａｒｎｏｆｓｋｙ评分和联合应用ＩＬ┐２／ＬＡＫ细胞与生存期关系密切。结论全切肿瘤后联合应用ＩＬ┐２／ＬＡＫ细胞有助于延长颅内星形细胞瘤患者的生存期     

粘附性淋巴因子活化的杀伤细胞抗自体白血病细胞作用的研究

建立了一套培养和处理粘附ＬＡＫ细胞（Ａ－ＬＡＫ）的系统，将１２例缓解期急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者（ＲＰＳ）的Ａ－ＬＡＫ细胞与常规制备ＬＡＫ细胞（ＲＴ－ＬＡＫ）进行了对照研究，结果显示ＲＰＳ－Ａ－ＬＡＫ细胞于培养第１０天时其扩增指数（２０．１±１３．９）较ＲＴ－ＬＡＫ细胞的扩增指数（７．５±２．１）明显提高（Ｐ＜０．０５）。形态学研究显示Ａ－ＬＡＫ细胞主要由大颗粒淋巴细胞组成，免疫表型分析显示其主要由ＣＤ１６＋的ＮＫ细胞组成，ＲＴ－ＬＡＫ细胞主要由ＣＤ３＋的Ｔ细胞组成。其杀伤活性与ＣＤ１６＋ＮＫ细胞之间有很好的相关性（ｒ＝０．８２，Ｐ＜０．０５）。这提示ＣＤ１６＋ＮＫ细胞是Ａ－ＬＡＫ细胞的主要组成细胞，代表了杀伤功能最强的亚群。     

IL—2／LAK疗法对肿瘤患者免疫功能的影响

我们观察了２０例肿瘤患者应用ＩＬ－２／ＬＡＫ疗法前后其免疫指标的改善，包括Ｔ淋巴细胞亚群，ＬＡＫ细胞活性，白介素Ⅱ分泌细胞及血清白介素Ⅱ受体。通过治疗显示：ＣＤ４／ＣＤ８比值，ＬＡＫ活性，白介素Ⅱ膜受体及白介素Ⅱ分泌细胞的水平均显著升高，而可溶性白介素Ⅱ受体减少，提示ＩＬ－２／ＬＡＫ可以改善机体免疫，功能。     

小剂量IL-2和IFNα与TNFα联合治疗恶性肿瘤的免疫学与临床研究

目的:研究小剂量细胞因子在恶性肿瘤免疫治疗中的意义。方法:全身应用小剂量重组干扰素(ＩＦＮα２ｂ)、白细胞介素－２(ＩＬ－２)和肿瘤坏死因子(α－ＴＮＦ)联合治疗多种恶性肿瘤６０例。应用ＡＰＡＡＰ法和免疫单向扩散法(ＲＩＤ)分析了治疗前后患者外周血中Ｔ、Ｂ淋巳细胞、ＮＫ细胞、免疫球蛋白(Ｉｇ)和补体Ｃ３活性。结果:治疗１个疗程后外周血中ＣＤ４＋的Ｔ淋巴细胞和ＣＤ２３＋的Ｂ淋巴细胞显著的高于治疗前水平(Ｐ＜０．０５);ＣＤ４＋/ＣＤ８＋比值也明显增高(Ｐ＜０．０１)。免疫球蛋白(ＩｇＭ)活性亦显著的高于治疗前水平(Ｐ＜０．０５)。ＫＰＳ积分较治疗前明显增高(Ｐ＜０．００１)。治疗后细胞因子加化疗组的ＫＰＳ积分平均增高２８．５分(Ｐ＜０．００１);ＣＲ ２６例(６５．０%);ＰＲ １１例(２７．５%),总有效率８２．５%。单纯细胞因子治疗组的ＫＰＳ积分平均增高２３分(Ｐ＜０．００１);ＰＲ １３例(６５．０%),总有效率６５．０%。结论:本方案可以显著的提高多种恶性肿瘤患者的细胞免疫和体液免疫。有可能提高肿瘤的化疗效果和患者的生存质量,延长生存期。     

IL－2／LAK疗法对肿瘤患者免疫功能的影响

我们观察了２０例肿瘤患者应用ＩＬ－２／ＬＡＫ疗法前后其免疫指标的改善，包括Ｔ淋巴细胞亚群、ＬＡＫ细胞活性、白介素Ⅱ膜受体、白介素Ⅱ分泌细胞及血清白介素Ⅱ受体。通过治疗显示：ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＬＡＫ活性、白介素Ⅱ膜受体及白介素Ⅱ分泌细胞的水平均显著升高，而可溶性白介素Ⅱ受体减少，提示ＩＬ－２／ＬＡＫ可以改善机体免疫功能。