清洁级新西兰兔阶段生长指标的测定

为了提高新西兰兔的生物学等级 ,我部于 2 0 0 0年在广东地区通过剖腹产人工哺乳净化的方式培育出第一批清洁级新西兰兔。在清洁级兔的生产繁育过程中 ,对清洁级兔不同年龄的阶段生长指标进行了测定 ,对部分生物学特性有了初步的了解。1　材料和方法1 1　动物　无菌剖腹产新西兰兔 39只。1 2　饲养环境　清洁级饲养环境。1 3　清洁级兔的饲料　第一阶段 (0～ 4 2d)饲料配方为 :每10 0 0ml人工乳中含全脂奶粉 2 0 0g ,复方氨基酸 2 5g ,复合多维 6g ,矿物质 6g,食盐 5g。人工乳中全部成分经6 0 Co γ照射消毒后无菌配制成人工乳 ,饲喂前预热…     

SPF级和普通级新西兰兔主要脏器系数的比较

目的测定3月龄SPF级和普通级新西兰兔的主要脏器系数，并进行对比研究。方法选用3月龄SPF级和普通级新西兰兔各30只（♂15只，♀15只），用电子天平分别测定心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胃、睾丸、附睾和子宫的脏器系数。结果（1）SPF级新西兰兔的主要脏器系数与普通级新西兰兔的相比，除了肾上腺的脏器系数二者之间差异不显著之外（P〉0．05），前者其余主要脏器的脏器系数均显著低于后者（P〈0．01）；（2）SPF级新西兰雄兔除了肝、脾、肾的脏器系数显著高于雌兔之外（P〈0．01），雄兔其余脏器的脏器系数与雌兔相比差异均不存在显著性（P〉0．05）。结论不同环境条件和饲养管理对SPF级和普通级新西兰兔主要脏器系数有一定影响。     

SPF级新西兰兔用于热原检查的试验探讨

目的了解SPF级和普通级新西兰兔及其不同性别之间初筛合格率的差异。方法按照《中国药典》2005年版中对热原检测的要求，对试验用兔进行测温。结果SPF级与普通级合格率．同级别间雌雄合格率间均存在显著性差异（分别为x^2=4．110，P=0．046；x^2=13．767，P=0．000；x^2=5．508，P=0．025），而不同级别雌性新西兰兔初筛合格率之间没有显著差异（x^2=1．580，P=-0．259），雄性新西兰兔初筛合格率之间存在显著性差异（x^2=4．953，P=0．034）。不同级别的新西兰兔初筛体温分布存在显著差异（x^2=95．536，P=0．000）。相同实验次数，SPF级新西兰兔意外死亡率较普通级新西兰兔低（x^2=7．467，P=0．008）。结论SPF级新西兰兔初筛合格率较普通级高，雄性新西兰兔初筛合格率较雌性高。     

SPF级实验兔研究进展

SPF级实验兔的研究始于1950年代末,至今已有50多年的发展历程.为更好了解国内外SPF级实验兔的发展状况,为今后的研究提供更丰富的资料,本文从SPF级实验兔的培育和饲养管理、生物学特性和应用研究三个方面进行阐述.     

新西兰兔烫伤模型的建立

目的：建立一种简易的可控制面积及深度的烫伤模型．方法：以医用纱布作为热载体,确定可持续保温的最佳纱布层数．将恒温热水浴中加热至99℃的纱布分别在新西兰兔背部烫3,5,7,9,11,13,15,17,19,21,23,25s共计12个时间点．伤后24h取标本,经HE染色评价烫伤程度,并埘烫伤的时间和程度作相关性分析．结果：确定可持续保温的纱布最佳层数为35层,并且烫伤程度和时间具有很好的相关性：Ⅰ度烫伤模型的致伤时间3—5S;浅Ⅱ度烫伤模型的致伤时间7—13s;深Ⅱ度烫伤模型的致伤时间15～19S;Ⅲ度烫伤模型的致伤时间21—25s．结论：该模型选用纱布作为热载体,具有烫伤面积及深度控制准确,操作简便、重复性好的优点,是研究创伤修复机制的较好模型．     

氧氟沙星ELISA检测方法的建立

目的:建立氧氟沙星(OFL)的ELISA快速检测方法。方法:在制备抗OFL单克隆抗体基础上,采用间接竞争酶联免疫吸附方法(ciELISA)检测OFL的含量。结果:筛选得到特异性分泌抗OFL的单克隆抗体细胞株3G3和3D9,应用3G3所制备腹水建立的ciELISA工作曲线的线性范围为0.5-128 ng/mL(r2=0.985 8),最低检出浓度为0.5 ng/mL,半数抑制浓度IC50为7.0 ng/mL,样品加样回收率为84%~120%,批内变异系数和批间变异系数均小于15%。结论:本文建立的氧氟沙星ELISA检测法可满足OFL残留检测的需要。     

离体兔缺血性心房颤动模型的建立

目的建立离体兔的缺血性心房颤动模型。方法 40只健康雄性的新西兰兔(2.2～2.5 kg),随机分为正常流量灌流组、正常流量灌流+短促高频电刺激组、低灌流模拟心肌缺血组、低灌流模拟心肌缺血+短促高频电刺激组,每组10只。采用Langendorff灌流装置行主动脉逆行灌流,通过缺血和短促高频电刺激诱发心房颤动。结果正常流量灌流组、正常流量灌流+短促高频电刺激、低灌流模拟心肌缺血组心房颤动的发生率为0%,而低灌流模拟心肌缺血+短促高频电刺激组心房颤动的发生率为90%。结论通过Langendorff心脏灌流中模拟心肌缺血,并给予短促高频电刺激模拟应激事件,可以稳定地诱导心房颤动的发生。     

乙酰胆碱诱导的离体兔心房颤动模型的建立

目的建立乙酰胆碱诱导的离体Langendorff灌流的兔的心房颤动模型。方法健康雄性的新西兰兔40只,2.2～2.5kg分为4组,分别为正常灌流组、正常灌流+burst刺激组、正常灌流+乙酰胆碱灌注组和正常灌流+乙酰胆碱灌注+burst刺激组,每组各10只。在Langendorff灌流装置下行主动脉逆行灌流,通过乙酰胆碱灌注和burst刺激诱发心房颤动。结果正常灌流组、正常灌流+burst刺激组和正常灌流+乙酰胆碱灌注组均没有发生心房颤动,而正常灌流+乙酰胆碱灌注+burst刺激组心房颤动的发生率为50%。结论在Langendorff心脏灌流时,给予乙酰胆碱灌注模拟胆碱能激活,并给予burst刺激模拟应激事件,可以稳定地诱导心房颤动的发生。     

兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法

为了有效地预防和根除山羊痘，研制能够区分自然感染和疫苗免疫的标记疫苗。本研究在山羊痘病毒（goat pox virus，GPV）疫苗株AV41胸苷激酶（thymidine kinase，TK）基因克隆、鉴定的基础上，构建转移载体。将痘苗病毒（Vaccinia Virus，VV）晚期启动子P11和大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因（LacZ）报告基因片段插入含有TK片段同源臂的载体pTK的KpnI酶切位点，经酶切、PCR鉴定出，命名为pTK-LacZ。用脂质体法转染感染了GPVAV41株的犊牛睾丸（bovine testes，BT）细胞，待出现80%以上的细胞病变时收获病毒，经过连续9代蓝色蚀斑筛选、纯化和PCR鉴定，获得纯化的表达LacZ基因、TK功能缺失的重组病毒，命名为rGPV-LacZ。生物学特性研究显示，LacZ基因的插入不影响重组病毒的增殖特性，其毒力、生长特性与亲本株相似，保持原有疫苗株的生长特性，而且在BT细胞和羔羊睾丸（lamb testes，LT）细胞连续传20代遗传性状很稳定。本研究筛选、纯化的重组病毒rGPV-LacZ可以区分自然感染和疫苗免疫动物，为进一步研制山羊痘病毒基因工程标记疫苗奠定了基础。     

兔黄体细胞模型的建立

应用PMSG-hCG诱发兔黄体产生并用胶原酶-DNAase混合液分散黄体细胞方法,观察了黄体细胞存活率以及机能的变化,结果表明,该法制得的黄体细胞其存活率高达94％,孕酮分泌功能旺盛,提示黄体细胞结构完整,机能健全。可利用此细胞模型对激素的合成及影响因素加以研究。     

巨噬细胞移动抑制因子ELISA方法的建立和应用研究

目的建立检测巨噬细胞移动抑制因子含量的ELISA检测法。方法采用方阵滴定法,比较4种封闭液、不同稀释度的捕获抗体、检测抗体和辣根过氧化酶标记链菌素对检测结果的影响,确定ELISA法的最佳实验条件。结果包被用捕获抗体的最适浓度为4mg/L,检测抗体的最适浓度为200mg/L,Streptavidin-HRP的最适稀释度为1∶5000。该方法的检测灵敏度为0.156μg/L,变异系数为7.3%～9.6%,回收率为91.2%～113.6%,与VEGF、TNF-α、IL-6、ICAM-1、胆红素、血红蛋白及甘油三酯均无交叉反应。结论建立的ELISA检测法简便、特异且灵敏,适用于检测血清中的MIF水平。     

呼肠孤病毒Ⅲ型免疫荧光检测方法的建立及初步应用

目的 建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于人用动物源性生物材料及生物制品外源Reo3的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选Reo3敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,方阵法滴定免疫荧光素最佳工作浓度。并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BSC-1细胞作为Reo3敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-5.8/mL;免疫荧光素最佳工作浓度为1∶100;与小鼠鼠痘(Ect)病毒、小鼠肝炎(MHV)病毒均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶1280;可检测到的病毒滴度最低为10-4.1/mL。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于人用动物源性生物材料及生物制品Reo3的检测。     

社区动脉硬化早期检测适宜技术应用研究

目的探讨社区人群脉搏波速度(PWV)与心血管疾病危险因素之间的关系及在社区开展动脉硬化早期检测适宜技术的意义。方法选取2009年10月—2010年2月在什刹海社区卫生服务中心就诊的患者,取其资料完整者400例作为本研究对象。按是否患有高血压、糖尿病、脑卒中、冠心病、高脂血症分为慢性病组和对照组,进行流行病学调查,收集相关临床资料并检测相关生化指标。应用日本科林公司的全自动动脉硬化检测仪VP-1000检测研究对象的肱-踝脉搏波速度(baPWV)和踝臂指数(ABI)。采用SAS 6.2统计软件进行数据分析和处理。结果慢性病组的baPWV值显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。Logistic回归分析显示,收缩压和baPWV是慢性病的独立危险因素(P<0.01);年龄和空腹血糖是影响baPWV的独立因子(P<0.01),尤其是45岁以上人群baPWV值显著升高。对照组中有28.05%的人baPWV值异常。结论 baPWV是慢性病的独立预测因子,baPWV与年龄、空腹血糖相关;baPWV测定可作为早期诊断动脉硬化的首选和常规检查手段,适合在社区推广。     

犬瘟热病毒（CDV）ELISA检测方法的建立与应用

目的 建立犬CDV抗体ELISA检测方法.方法培养vero细胞,接种CDV病毒,制备vero正常抗原和CDV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验.结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为1∶32 000、10 μg/mL和1∶8 000;正常、特异抗原批内变异系数分别为9.1%和5.8%,批间平均变异系数分别为8.8%和6.6%;检测灵敏度为1∶2 560;与犬细小病毒(CPV)、犬肝炎病毒(ICHV)均无交叉反应.稳定性试验相对偏差小于25%.结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强.可用于犬CDV抗体的检测.     

健康管理模式的国内外发展概况

健康一直是人们普遍关注的问题,健康管理作为一种新兴的医疗卫生服务模式已在国内外兴起和发展,却还没有被大众广泛认识。本文参阅了近年来国内外（以美国为代表）有关健康管理的研究文献并进行整理、分析、归纳和综述,介绍了健康管理的概念、理论基础及在中、美的研究进展,为更好地发展我国健康管理提供理论依据,也为健康管理的进一步研究提供参考资料。     

可溶性FL酶联检测试剂盒的研制及其运用

目的建立灵敏、特异和稳定的人可溶性FL（sFL）酶联检测试剂盒,探讨其临床检测意义。方法采用鼠抗人FL单克隆抗体2D2为包被抗体,识别人FL不同位点的商品化多克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心的人sFL酶联免疫检测方法（sFL-ELISA）。在此基础上,分别对不同血清样本中sFL的含量进行定量分析。结果成功研制人sFL酶联检测试剂盒,灵敏度为7.8pg/ml。该试剂盒4℃放置3个月,离散度（CV%）〈7.6%,加入rh-FL/Fc重组蛋白后的回收率在97%～110%。应用该试剂盒测得的健康供血员、再生障碍性贫血患者和白血病患者血清中sFL含量分别为（328.6±42.89）、（2607±286.8）、（1091±255.2）pg/ml。结论研制成灵敏、特异和稳定的人sFL酶联检测试剂盒,能对血清中sFL进行准确定量分析,具有良好的应用前景。     

骨性关节炎的病因及治疗进展

骨性关节炎(OA)是骨科常见疾病之一,病变从膝关节软骨退行性改变开始逐步累及软骨下骨质、滑膜、关节囊等关节重要结构,随着分子生物学、免疫学的发展,发现一些细胞因子在其发病过程中起着十分重要的作用,随着医疗技术的不断发展,生物学治疗和药物治疗不断发展。在此就OA的病因及治疗进展进行综述。     

中药袋泡剂的研究与应用进展

中药袋泡剂是符合中药现代化要求的新剂型,具有服用方便、无需煎煮、体积小、用量准确、利于贮存和携带、疗效显著及不良反应小等特点,值得临床推广。中药袋泡剂还具有明确的实验药理,生产工艺简单,适合于医院制剂,具有良好的开发前景。该文就中药袋泡剂的制剂工艺研究、质量标准研究、药理学研究及其在临床的实际应用等方面的研究与应用进展予以综述。     

新型禽用抗病毒制剂的研制与应用

目的以重组禽干扰素α(IFNα)为基础,针对禽病毒性疾病的预防和治疗,研制禽用抗病毒制剂。方法将禽干扰素α、胸腺肽α等进行基因重组改造,结合先进的发酵工艺,在E.coli和Pichapastoris高效表达系统中分别表达,再分离、纯化。结果不同载体和不同菌株表达的IFN-THY融合蛋白的IFN活性测定结果有一定的差异。96hIFN活力在0.13×104￣8.12×104IU/ml,110h为1.22×105￣3.27×106IU/ml。结论48￣110h不同样品均有明显的THY活性。