RAPD法构建黑水缬草基因组DNA指纹图谱

目的采用RAPD技术对黑水缬草、缬草、毛节缬草及黄花败酱等4种药用植物进行分子水平的鉴定,并获得清晰可靠的DNA指纹图谱。方法采用植物基因组DNA快速提取试剂盒提取4种供试材料基因组DNA,以随机引物进行随机扩增。结果 4种供试材料DNA指纹图谱具有共同的位点,但又有各自的特征性位点。结论 RAPD法能有效的将4种药用植物区分开。     

安徽金寨产天麻药材HPLC指纹图谱的研究

目的 本研究旨在建立安徽金寨产区天麻药材的标准指纹图谱,以期建立鉴别产地药材真伪和质量优劣的评价标准.方法 主要是利用高效液相色谱法来进行天麻药材色谱指纹图谱的研究.结果 实验表明,采自金寨县不同产地的天麻药材,经适当处理后,会产生相当稳定和重现性强的HPLC图谱.结论 本研究所获得的方法可以用来鉴别金寨天麻药材的道地性和质量的优劣.     

天麻指纹图谱的研究进展

天麻是我国名贵的中草药,随着近年来其商品的多样化,掺伪、假冒品不断增多,对其进行更全面、系统的质量控制尤为重要。目前,指纹图谱已成为国际公认的控制中药质量的有效手段之一,主要的研究方法有液相色谱法、薄层色谱法、毛细管电泳色谱、红外光谱、核磁共振、X射线粉末衍射、分子生物学指纹图谱和电化学指纹图谱等,本文对近年来天麻指纹图谱的研究情况进行了归纳总结,为进一步建立该药的质量控制提供了方法和依据。     

天麻胶囊HPLC指纹图谱的建立和聚类分析

摘要：目的:建立天麻胶囊的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为265 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。以天麻素为参照,绘制10批样品的HPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004年A版）进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 22.0软件对10批样品进行聚类分析。结果:10批天麻胶囊指纹图谱标定了共有峰15个,指认了其中8个化学成分。10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.997。聚类分析结果显示,10批样品可聚为3类,S1、S2、S6、S7聚为一类,S3、S4、S5、S10聚为一类,S8、S9聚为一类。结论:所建立的HPLC指纹图谱和聚类分析结果可为天麻胶囊的质量评价提供参考。     

磐安产有性和无性繁殖天麻药材HPLC指纹图谱的比较

目的:对磐安产的2种方法种植的天麻药材的 HPLC 指纹图谱进行比较,考察其质量是否存在差异。方法:HPLC 法,大连依利持 Hypersil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相以0.1%磷酸溶液-0.1%磷酸甲醇溶液梯度洗脱,0→15 min(97:3→93:7),15～65 min(93:7→0:100);流速1.0 mL·min~(-1);检测波长:226 nm。结果:分别对不同方法种植的天麻药材各10批建立指纹图谱进行比较,相似度除个别样品离群外均大于0.90。结论:采用 HPLC 指纹图谱检测技术可有效控制天麻药材的品质,有性和无性繁殖的天麻药材所含成分基本一致。     

天麻配方颗粒高效液相色谱指纹图谱研究

目的 研究天麻配方颗粒的高效液相色谱指纹图谱,为其质量控制提供更可靠的方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Megres5-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.05%磷酸溶液进行梯度洗脱,柱温为30 ℃,体积流量为0.8mL/min,检测波长为220 nm。结果 初步建立了天麻配方颗粒的高效液相色谱指纹图谱,确定了6 个特征峰。结论 高效液相色谱指纹图谱可为天麻配方颗粒的鉴别和质量控制提供参考。     

乌红天麻的高效液相色谱指纹图谱测定

目的建立测定乌红天麻高效液相色谱指纹图谱的高效液相层析色谱法。方法采用高效液相色谱法测定乌红天麻中的天麻素，色谱柱：NUCLEOSIL C18(10 μm，4.6 mm×250 mm);柱温：30 ℃;流动相：甲醇 磷酸盐溶液(0.1 mol·L^-1磷酸二氢钾和 0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液等量混合)-纯化水(1.5∶3∶95.5);流速：1.0 mL·min-1;检测波长：270 nm;AT：4。结果乌红天麻与野生正品天麻都含有相同成分天麻素，指纹图谱无明显差别，有6个共有峰。共有峰的峰号(相对保留时间)为1(6.37 min)，2(8.26 min)，3(18.18 min)，4(27.96 min)，5(55.21 min)，6(23.78 min)。除上述共有峰以外的所有峰均为非共有峰。重复性实验，RSD＝0.58%。结论该方法重现性和准确性好，稳定易行，可用于天麻药材的质量控制。     

不同产地和品种天麻的HPLC指纹图谱研究

目的 研究不同产地和不同品种天麻的HPLC指纹图谱.方法 色谱柱为Diamonil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长220 nm,流速1 mL·min-1,柱温35℃.对20批天麻样品的HPLC指纹图谱进行相似度评价和聚类分析.结果 确立了13个共有峰,建立了天麻药材HPLC指纹图谱共有峰模式.20批不同产地和品种天麻的相似度为0.829 ～1.000,综合评判得分为-0.77～1.07.结论 建立的HPLC指纹图谱反映了天麻药材中的化学成分信息,同一产地天麻的化学成分趋同,而不同产地的天麻差异较大,表明产地因素对其化学成分的影响较大.     

不同产区天麻HPLC指纹图谱研究

目的 通过构建天麻Gastrodia elata Bl.的化学成分HPLC指纹图谱,结合多元统计方法等对不同产区天麻进行比对,为天麻产地鉴别和道地性提供科学依据。方法 采用HPLC测定不同产区天麻的化学成分指纹图谱,Shiseido CAPCELL PAK MGⅡC₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0 mm）,柱温30℃,以甲醇-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,分析时间35 min,流速1.0 mL·min^-1,进样量10 mL,检测波长220 nm。共计检测79份不同产地的天麻样品。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012版）进行指纹图谱信息统计内含成分峰面积,利用SPSS 23.0统计软件进行主成分分析和聚类分析。结果 不同产地的天麻样品具有良好的一致性,通过构建天麻HPLC指纹图谱,采用主成分分析和聚类分析可以将天麻样品分别划分为云南产天麻和非云南产天麻。结论 可利用指纹图谱技术对天麻产地进行鉴别,为天麻的道地性研究提供科学依据。     

天麻药材高效液相色谱指纹图谱研究

目的研究天麻药材的高效液相色谱指纹图谱,为其质量控制提供可靠的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为Ultimate XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸水溶液(梯度洗脱),柱温为30℃,流速1 mL/min,检测波长270 nm。结果初步建立了天麻药材的高效液相色谱指纹图谱,标定出16个共有峰;天麻素的加样加收率为102.66%,RSD<2.5%(n=6)。结论高效液相色谱指纹图谱为天麻药材质量控制提供了一种新方法,并为未知天麻样品的鉴别提供一个准确、快捷的工具。     

安徽金寨红天麻、红乌天麻高效液相色谱法指纹图谱与化学成分比较

目的 建立安徽金寨红天麻与红乌天麻高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱,结合相似度分析、含量测定、聚类分析和主成分分析,比较22批红乌天麻与13批红天麻质量。方法 本研究起止时间为2020年12月至2021年6月,采用HPLC测定天麻指纹图谱;以天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷E的含量为指标,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）和SPSS 23.0对其进行指纹图谱分析、聚类分析及主成分分析。结果 红天麻与红乌天麻的指纹图谱差异显著,其中红天麻有14个共有峰,红乌天麻有16个共有峰;以巴利森苷为参照,两种天麻共确定13个共有峰,指认了天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E共6个成分;红天麻和红乌天麻与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.9,红天麻和红乌天麻两品种间相似度为0.781。两种天麻中天麻素、巴利森苷、巴利森苷B和巴利森苷C含量差异有统计学意义（P<0.01）,且红天麻含量高于红乌天麻;当欧式距离取为25时,35批药材分为两类,除S27以外的红天麻和红乌天麻中S6、S7、S18、S19聚为一类,剩下的天麻聚...     

不同产地天麻药材的指纹图谱建立及分析

摘要：目的:收集来自8个省份的38份天麻药材,通过高效液相色谱-二极管阵列检测器法（HPLC-DAD）测定样品,比较色谱图,建立天麻指纹图谱并评估药材质量。方法:采用BDS HYPERSIL C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长:220 nm,流速:1 ml·min-1,柱温:35℃。通过对38份样品的测定,建立天麻指纹图谱,并进行相似度评价、主成分分析。结果:38份天麻药材的色谱图相似,相似度为0.826～0.996,36批药材的相似度大于0.90,确立14个共有峰,表明化学成分基本相似。选取6个主要色谱峰作为天麻指纹图谱的特征峰,与10种标准品比对,经鉴别分别为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A。38批天麻药材的特征峰的含量差异较大,其中天麻素、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷A的含量较高。同产于贵州的红天麻、绿天麻和乌天麻的指纹图谱相似度较高,化学成分相似,特征峰含量有区别。结论:该方法简便、稳定性和重复性良好,采样全面,通过建立天麻药材HPLC指纹图谱,进行相关统计分析,主要反映天麻药材中的化学成分信息,为天麻药材的质量监测提供较全面的检验依据。     

用HPLC指纹图谱宏观全定性全定量评价天麻质量

目的采用双定性双定量相似度为评价指标,建立宏观全定性全定量控制天麻质量的方法。方法采用反相HPLC法．以色谱指纹图谱指数F为目标函数优化选择指纹图谱条件．测定12批不同产地天麻HPLC指纹图谱,以双定性相似度（SF与SF’）和双定量相似度（C与P）评价不同产地天麻质量。结果以天麻素峰为参照物峰。确定26个指纹峰．通过聚类分析确定用8批天麻生成对照指纹图谱（RFP）,以此评价12个产地的天麻药材质量。结论所建立指纹图谱具有较好的精密度和重现性,可作为天麻药材质量控制和真伪鉴别的有效方法。     

DNA指纹图谱技术及其在中药研究中的应用

目的介绍DNA指纹图谱技术，阐述其在中药研究中的作用。方法综合介绍建立DNA指纹图谱的一般技术步骤，结合近年来国内外在这方面的研究，探讨其在中药有关领域的应用。结论作为中药指纹图谱的一个组成部分，DNA指纹图谱这一现代分子生物学技术在现代中药研究中有其独特的作用，目前应用于中药研究的DNA指纹技术有RFLP、PCR、RAPD、PCR—RFLP、RAPD-RFLP、AFLP等。DNA指纹图谱技术在药材鍪别、GAP实施、道地药材研究、遗传育种和种质资源研究及中成药质量控制等领域有重要价值和广阔的应用前景。     

AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱

目的　采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术,分析人参、西洋参基因组DNA多态性。方法　人参、西洋参干燥根基因组DNA,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增。结果　经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱。结论　AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用。     

指纹图谱应用概况

阐述了指纹图谱的含义及其在国内外的应用状况.并指出指纹图谱的类型及特点.探讨了指纹图谱在中药研究中的作用及意义.     

仙茅指纹图谱的研究

目的　应用 RP-HPLC( DAD)对仙茅药材进行指纹图谱研究。方法 　用 Nova-pak C1 8( 2 5 0 mm× 4.6mm,4μm)色谱柱 ,乙腈 -0 .1%醋酸水梯度洗脱 ,检测波长为 2 85 nm。流速为 1.0 ml· min- 1。结果 　指纹图谱对仙茅中各皂苷类成分均有较好分离 .结论 　该方法简便 ,准确 ,重现性好 ,可作为仙茅具有专属性的指纹图谱     

知母栽培品和野生品的指纹图谱建立及差异性成分确认

目的建立知母栽培品和野生品的指纹图谱,确认两者的差异性成分。方法采用蒸发光散射检测器,以高效液相色谱法结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立14批知母栽培品和14批知母野生品的指纹图谱,并进行相似度评价,通过与混合对照品色谱图比对指认共有峰。同法测定知母栽培品和野生品中指认共有峰对应成分的含量,通过主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析确认两者的差异性成分,并比较其含量。结果在28批知母药材中共有10个共有峰,指认出新芒果苷(峰1)、芒果苷(峰2)、异芒果苷(峰3)、知母皂苷BⅡ(峰7)、知母皂苷BⅢ(峰8)、知母皂苷Ⅰ(峰9)、知母皂苷AⅢ(峰10)7个成分;各样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均不低于0.963。知母栽培品与野生品中7个成分的平均总含量分别为74.18、84.72 mg/g,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。知母栽培品与野生品可被分为两类,差异性成分为新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ(变量投影重要性值均大于1)。知母栽培品中新芒果苷含量明显高于野生品(P<0.05),芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷AⅢ含量均明显低于野生品(P<0.05)。结论成功建立了知母的指纹图谱,并初步确认了知母栽培品和野生品的差异性成分。     

牛黄解毒丸高效液相色谱定量指纹图谱和组方定量指纹图谱研究

目的建立牛黄解毒丸HPLC定量指纹图谱和组方定量指纹图谱。方法以22批牛黄解毒丸建立的标准指纹图谱为评价基准,用SQFM法评价两类不同药量的4种预测模式。以物理混样和化学混样的HPLC定量指纹图谱来验证混合煎煮与物理混样的药效物质总差异。结果用SQFM法评价两类不同药量的4种HPLC指纹图谱预测模式的平均值为是S_m=0.928,P_m=104.8%;物理混样和化学混样的平均结果是S_m=0.953,P_m=100.6%。以上结果表明能够通过单味药HPLC定量指纹图谱对中成药质量进行组方智能预测。结论通过合理校正单味药称样量,基于HPLC定量指纹图谱和组方定量指纹图谱能实现中药制剂质量的定量预测,结果误差在5%以内。利用组方指纹图谱能实现对中药制剂产品质量的智能预测,这为中药临床提供了一种智能化的质量预测新模式。