尿激酶溶栓治疗大鼠急性脑梗死的实验研究

目的 :观察尿激酶 (UK)静脉溶栓治疗大鼠急性脑梗死的疗效。方法 :制作改良大鼠自体血栓性大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,在MCAO后 3 0min静脉注入尿激酶 2 0 0 0 0U·kg-1(A组 )、5 0 0 0 0U·kg-1(B组 ) ,MCAO后 12h通过神经功能缺损评分、梗死体积、血管再通率、出血并发症及病理检查等比较研究不同剂量尿激酶溶栓的疗效。结果 :A、B组MCAO后 12h神经功能缺损评分增加、梗死体积减少均较对照组有显著性差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,B组较A组梗死体积小 (P <0 0 5 ) ,并发出血率 3组无显著差异。结论 :UK溶栓能显著改善脑梗死大鼠的神经功能缺损程度、使血管完全或部分再通、减少梗死体积 ,MCAO后 3 0min溶栓不增加出血性转换的发生率     

尿激酶联合镁剂治疗大鼠急性脑梗死的实验研究

目的　观察尿激酶溶栓联合硫酸镁神经保护对大鼠急性脑梗死的疗效。方法　应用光化学诱导法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别于术后2 h、6 h和10 h 3 个时间点进行干预,每个时间点内再分为生理盐水对照组、尿激酶溶栓组、尿激酶加硫酸镁治疗组,术后24 h观察大鼠神经功能缺损评分及脑梗死体积的变化。结果　MCAO后2 h尿激酶溶栓组神经功能显著改善,梗死体积缩小(与生理盐水对照组相比,P<0.01),尿激酶加硫酸镁治疗组效果更好;MCAO后6 h、10 h尿激酶溶栓组与生理盐水对照组相比无显著性差异(P>0.05),而尿激酶加硫酸镁治疗组的神经功能缺损评分、脑梗死体积与生理盐水对照组及尿激酶溶栓组相比有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论　早期脑梗死特别是2 h内的超早期脑梗死应用尿激酶溶栓有效;加用镁剂进行神经保护可对尿激酶溶栓疗效产生协同作用,并可能扩大脑梗死溶栓治疗的时间窗。     

在改良法血栓栓塞性脑卒中大鼠模型上进行尿激酶静脉溶栓治疗

目的　在改良法自体血血栓栓塞性脑卒中大鼠模型上使用尿激酶静脉溶栓 ,试图建立理想化的溶栓治疗脑卒中研究的模型体系。方法　治疗组于大脑中动脉闭塞后 0 .5h尿激酶进行静脉溶栓。 5h和2 4h后进行神经功能缺损评分 ,用TTC染色法测定梗死灶体积 ,并观察梗死后 6h的脑组织病理变化。结果　此模型可产生范围较恒定的梗死灶 ,治疗组梗死灶体积明显小于对照组 (P <0 .0 1)。但两组 5h和 2 4h神经功能缺损评分无显著性差异。结论　这种模型超早期使用尿激酶静脉溶栓疗效好 ,由于可能存在缺血性神经元顿抑 ,尽管溶栓组脑梗死体积减小 ,但早期神经功能恢复不明显。     

阿托伐他汀联合尿激酶溶栓治疗对大脑中动脉梗死大鼠caspase-3表达的影响

目的观察阿托伐他汀联合尿激酶溶栓治疗对大脑中动脉梗死(MCAO)大鼠脑组织caspase-3表达的影响。方法采用血栓栓塞法制备SD大鼠大脑中动脉急性脑梗死模型,随机分为阿托伐他汀组、尿激酶组、联合治疗组和对照组。缺血3 h给予阿托伐他汀或相同体积生理盐水,缺血4 h给予尿激酶或相同体积生理盐水治疗。治疗前3h和缺血24h行神经功能缺损评分,缺血24h取脑,采用氯化三苯四唑(TTC)染色法观察脑梗死体积,免疫组织化学法检测大鼠脑组织caspase-3的表达。结果与对照组比较,阿托伐他汀组、尿激酶组和联合治疗组大鼠缺血24 h神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),梗死体积明显缩小(P<0.05)。与阿托伐他汀组比较,尿激酶组和联合治疗组神经功能改善程度及梗死体积减小程度更显著(P<0.05)。各组大鼠均未发现脑出血。与对照组相比,阿托伐他汀组和联合治疗组caspase-3表达显著减少(P<0.05)。与阿托伐他汀组比较,联合治疗组caspase-3减少更为明显(P<0.05)。与对照组相比,尿激酶组caspase-3表达无统计学差异(P>0.05)。结论阿托伐他汀联合尿激酶溶栓治疗脑梗死能更大程度降低caspase-3的表达,有提高疗效的趋势。     

抑制基质金属蛋白酶-9可延长大鼠脑栓塞后尿激酶溶栓时间窗

目的研究基质金属蛋白酶抑制剂强力霉素和三七皂甙对大鼠脑栓塞后不同时间尿激酶静脉溶栓效果及并发症的干预作用,评价基质金属蛋白酶抑制剂对尿激酶溶栓治疗时间窗的干预效果。方法采用大鼠自体血栓塞大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别用免疫组织化学法、TTC染色、伊文氏蓝法和分光光度计法对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、脑梗死体积、血脑屏障通透性和脑出血量进行检测。结果相应时间段尿激酶(UK)溶栓组与缺血对照组比较MMP-9表达显著增高,血脑屏障通透性和脑出血量均有增加趋势,以12h UK组明显;6h UK组较缺血对照组脑梗死体积明显降低。强力霉素和三七皂甙联合尿激酶治疗的各组与相应时间点单用尿激酶组比较MMP-9表达显著降低,脑梗死体积明显下降,血脑屏障通透性和脑出血量均有改善。结论基质金属蛋白酶抑制剂联合溶栓治疗,提高溶栓疗效,减轻溶栓后血脑屏障破坏和出血性转化,可能有延长溶栓治疗时间窗的作用。     

不同升压维持时间对脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨升压治疗局灶性脑缺血的保护作用及治疗的维持时间.方法40只大鼠随机分为5组:对照组(A组),升压维持时间15 min组(B组)、45 min组(C组)、90 min组(D组)和120 min组(E组).采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察各组脑梗死体积和神经功能缺损评分.结果B、C、D和E组脑梗死灶体积(P＜0.01),B、C和D组神经功能缺损评分(P＜0.05)均明显低于A组,B组明显低于C、D和E组(P＜0.01).结论缺血3 h再灌注时升压维持时间在2 h以内对脑损伤有保护作用,升压最佳维持时间是15 min.     

不同时间窗急性脑梗死静脉溶栓的临床研究

目的　探讨在不同时间窗内尿激酶静脉溶栓的疗效。方法　收集符合标准的患者 5 3例 ,分 4组 ,采用欧洲卒中量表(ESS)来评价神经功能恢复情况。结果　不同时间窗的脑梗死患者溶栓后ESS评分均有显著增加 ,治疗时间窗越短ESS评分增加越明显。结论　尿激酶静脉溶栓治疗脑梗死有效。提倡溶栓在 6h内进行 ,进展性脑梗死治疗时间窗可适当延长。     

超选择性动脉溶栓治疗急性脑梗死12例临床报告

目的 :观察尿激酶超选择性动脉内溶栓治疗急性脑梗死的方法、用药剂量、临床疗效及安全性。方法 :12例急性脑梗死超早期进行脑血管造影后 ,超选择性地把微导管插至梗死灶近端 ,注入尿激酶接触溶栓并在治疗前和治疗后分别查头颅CT ,对病人进行神经功能评分。结果 :12例患者中 5例溶栓治疗术中复流再通 ,3例部分恢复血供 (仍存部分狭窄 )。溶栓后 2周神经功能评分达 10 0分 5例 ,神经功能评分≥ 84分 5例 ,6 4分 1例 ,死亡 1例。结论 :超选择性动脉内溶栓治疗急性脑梗死 ,可使梗死血管复流再通 ,神经功能迅速恢复 ,是急性脑梗死最有效的治疗方法     

瑞替加滨对大鼠局灶性缺血再灌注损伤的保护机制

目的研究M型钾离子通道开放剂瑞替加滨(retigabine,RTG)对大鼠局灶性缺血再灌注损伤的影响。方法选取SD大鼠110只,随机分为假手术组(10只,Sham组),模型对照组(20只,MCAO组),治疗组(80只,RTG组)。按照给药时间再将RTG组分为0h、1h、3h及6h4个亚组,每组20只。采用线栓-再通法建立大鼠模型,于脑缺血2h后恢复灌注。RTG组经尾静脉注射瑞替加滨10.5mg/kg,假手术组和缺血再灌注组给予等量生理盐水。比较脑梗死体积变化,并进行神经功能评分,检测各组大鼠缺血半影区星形胶质细胞的增殖和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达,观察梗死皮质区域神经元的存活数量。结果 Sham组未发现脑梗死病灶,无神经功能损伤,Caspase-3阳性细胞及星形胶质细胞少见,脑皮质含有大量神经元。MCAO组和RTG组均可见大脑中动脉供血区梗死灶及神经功能损伤,但RTG治疗组梗死体积及神经功能评分均较MCAO组明显减少(P0.05),RTG6h组较其他给药组大鼠脑梗死体积及神经功能评分增加(P0.05)。MCAO组大鼠梗死周围区Caspase-3阳性细胞数、星形胶质细胞明显增多,梗死区神经元数量明显减少,但RTG各组大鼠梗死周围区Caspase-3阳性细胞数、星形胶质细胞均较MCAO组明显下降(P0.05),梗死区神经元的存活数量明显增加(P0.05),RTG0h组、RTG1h、RTG3h组最为明显。结论瑞替加滨对缺血性脑卒中具有脑保护作用,其机制可能是降低神经细胞的兴奋性,减轻缺血半影区的炎症反应,从而抑制细胞凋亡。瑞替加滨的脑保护作用具有时间依赖性,即超过一定的时间窗,脑保护作用会减弱。     

溶栓合剂超早期颈内动脉溶栓的实验研究

目的　探讨溶栓合剂的超早期颈内动脉溶栓疗效。方法　采用改进的微栓子法建立大鼠局灶脑缺血模型 ,缺血后 3h颈内动脉逆向插管溶栓治疗 ,分别在缺血后 2h、溶栓后 2 .5h和溶栓后 2 3 .5h评定神经功能 ,溶栓后 2 4h取脑采用TTC染色的方法测定梗死体积百分比 ,溶栓后 2 4h取脑制备HE染色光镜标本及透射电镜标本观察病理学改变。结果　 (1 )A、B、C 3组 (A组为生理盐水对照组 ,B组为尿激酶治疗组 ,C组为溶栓合剂治疗组 )的神经功能评分两两对比 ,给药前无显著差别 ,给药后C组与A组有显著差别 ,B组与A组无显著差别 ;(2 )A、B、C 3组的梗死体积百分比分别为 44 .2 9%、39.0 4 %、2 7.51 % ,两两相比差别均有显著意义 ;(3)A、B、C 3组的光镜病理学分级评分结果分别为 3 .0 6± 0 .93、2 .64± 1 .2 2、2 .1 1± 1 .0 8,C组与A组相比差别有显著意义 (P <0 .0 5) ;B组与A组相比无显著差别。透射电镜观察结果 ,A组病变最重 ,B组其次 ,C组最轻。结论　 (1 )溶栓合剂能够改善大鼠脑缺血后的神经功能、减少梗死体积、减轻病理改变 ;(2 )尿激酶只能减少梗死体积 ,对神经功能的改善及病理改变的影响无显著意义。     

溶栓治疗对脑梗死大鼠细胞骨架结构微管相关蛋白-2的影响

目的:观察尿激酶溶栓治疗对神经细胞骨架结构微管相关蛋白-2(MAP-2)的影响。方法:用自体血栓法制 作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,在MCAO后30min静脉注射尿激酶(UK)溶栓,通过神经功能评分判断溶栓的疗 效,HE染色进行病理观察,用免疫组织化学的方法研究溶栓对缺血皮层和海马MAP-2蛋白表达的影响。结果:溶栓组 神经功能评分较未溶栓组有显著提高,HE染色见病变范围明显缩小。MCAO后2h缺血区树突MAP-2表达较对照组 即有明显下降(P<0．05),随着缺血时间延长树突及胞体MAP-2降解增加,而溶栓治疗各时间点MAP-2表达较未溶栓 组显著提高(P<0．01)。结论:减少MAP-2的降解可能是溶栓治疗改善神经功能的机制之一。溶栓治疗后早期半暗带 区MAP-2表达在树突减少而在神经元胞体基本正常,这可能是缺血后神经元顿抑的形态学基础。     

Treadmill training effects on neurological outcome after middle cerebral artery occlusion in rats

BACKGROUND: Treadmill training is used for promoting rhythmical vigorous walking and for task-related training in patients with stroke. The neurological impact of treadmill training has not been established. The present investigation is aimed at (1) examining neurological changes over a four-week period after middle cerebral artery occlusion (MCAO) in rats and (2) assessing the impact of one-week, two-week and four-week treadmill training in MCAO rats. METHODS: Male Sprague-Dawley rats were subjected to 60-minute right MCAO. All rats were randomly assigned to one of seven groups. Infarct volume and neurological score were measured. RESULTS: Rats sacrificed 24 hours post MCAO had the largest infarct volumes (171.4 +/- 14.4 mm3) and the highest neurological score (median: 2, range: 1-3). We noted that without treadmill training, infarct sizes and neurological score diminished with time. Treadmill training for at least one week further reduced infarct volume and significantly improved neurologic function in MCAO rats. CONCLUSION: Treadmill training after focal cerebral ischemia significantly improves neurological outcome in MCAO rats. Treadmill training may be beneficial for ischemic brain recovery.     

Characterizing the diffusion/perfusion mismatch in experimental focal cerebral ischemia

Diffusion-weighted imaging (DWI) and perfusion-weighted imaging (PWI) can rapidly detect lesions in acute ischemic stroke patients. The PWI volume is typically substantially larger than the DWI volume shortly after onset, that is, a diffusion/ perfusion mismatch. The aims of this study were to follow the evolution of the diffusion/ perfusion mismatch in permanent and 60- minute temporary focal experimental ischemia models in Sprague-Dawley rats using the intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) method. DWI and arterial spin-labeled PWI were performed at 30, 60, 90, 120, and 180 minutes after occlusion and lesion volumes (mm(3)) calculated At 24 hours after MCAO, and infarct volume was determined using triphenyltetrazolium chloride staining. In the permanent MCAO group, the lesion volume on the ADC maps was significantly smaller than that on the cerebral blood flow maps through the first 60 minutes after MCAO; but not after 90 minutes of occlusion. With 60 minutes of transient ischemia, the diffusion/perfusion mismatch was similar, but after reperfusion, the lesion volumes on ADC and cerebral blood flow maps became much smaller. There was a significant difference in 24- hour infarct volumes between the permanent and temporary occlusion groups.     

Reduced infarct volume and differential effects on glial cell activation after hyperbaric oxygen treatment in rat permanent focal cerebral ischaemia

Permanent middle cerebral artery occlusion (MCAO) causes neurodegeneration and a robust activation of glial cells primarily in sensorimotor brain regions of rats. It has been shown that hyperbaric oxygen (HBO) increases oxygen supply to ischaemic areas and reduces neuronal cell loss. The effects of HBO treatment on microgliosis and astrogliosis in permanent cerebral ischaemia have not been addressed so far, but might be critical for neurodegeneration and neuroprotection, respectively. Therefore, we used spontaneously hypertensive rats with permanent MCAO to investigate the time window to start HBO and to compare the effects of different HBO treatment frequencies on infarct volume and on differences with regard to microgliosis and astrogliosis. Seven days after MCAO the infarct volume was calculated from Nissl-stained brain sections by image analysis. HBO significantly decreased the infarct volume when used as early as 15, 90 or 180 min post-MCAO by 24%, 16% and 13%, respectively, in the single-treatment group. Repetitive HBO treatment (first HBO session 90 min after MCAO) was not effective. Microglial cells and astrocytes were detected by cytochemical fluorescent labelling and confocal laser scanning microscopy. In the single-treatment group we observed significantly higher astrocyte immunoreactivity but decreased microglial density in the peri-infarct region. These effects of HBO treatment on glial cells were not present in rats where HBO did not reduce the infarct volume (360 min after MCAO). Our data indicate that HBO-induced suppression of microgliosis and aggravated response of astrocytes might contribute to the reported beneficial effects of early HBO treatment in cerebral ischaemia.     

实验性大鼠血栓栓塞性脑梗死出血性转换的机制研究

目的研究大鼠血栓栓塞性脑梗死后并发出血性转换(hemorrhagic transformation,HT)的自然发生率、特点及溶栓治疗对其影响,探讨HT的可能机制.方法采用单一血栓大脑中动脉栓塞模型,通过伊文(氏)蓝、红四氮唑染色、病理观察以及动态MR扫描比较HT组和非HT组血-脑脊液屏障破坏范围、梗死体积、出血类型和部位以及栓塞后30、90 min开始溶栓对其影响.结果HT自然发生率为27.27%,30 min溶栓组为9.09%,有降低趋势.晚期溶栓不增加其发生率,但多发性血肿增多.HT组血-脑脊液屏障破坏范围、梗死体积[(207.33±15.42)和(178.00±54.91)mm3]均大于非HT组[(141.22±48.88)和(113.25±43.08)mm3,均P＜0.05].结论血栓栓塞性脑梗死HT发生率高,早期溶栓不增加其发生率,但溶栓治疗使多发性血肿的发生率增加.大面积梗死后血栓迁移、延迟再通与栓塞性脑梗死并发HT有关.     

Exendin-4对MCAO再灌注导致的脑缺血/再灌注损伤具有神经保护作用

目的 探讨GLP-1受体激动剂Exendin-4腹腔给药对大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注所致大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。方法 SD大鼠术前1 h腹腔注射Exendin-4,MCAO再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,TTC染色计算脑梗死体积,免疫荧光观察神经元和小胶质细胞生存数量及检测凋亡通路相关蛋白的相对表达水平。结果 Exendin-4能够保护由于MCAO再灌注后所致的脑缺血再灌注损伤,减少了脑梗死体积,降低皮层凋亡蛋白的相对表达水平,抑制神经元凋亡。结论 Exendin-4可以对MCAO再灌注所致脑缺血/再灌注损伤具有神经保护作用,该作用是通过抑制凋亡蛋白的产生,从而抑制细胞凋亡。     

胰岛素对局灶性脑缺血再灌注损伤的作用

目的　观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用。方法　制备易卒中型肾血管性高血压大鼠（ Ｒ Ｈ Ｒ Ｓ Ｐ） ,用线栓法复制大脑中动脉阻塞（ Ｍ Ｃ Ａ Ｏ） ,造成缺血６ ｈ 再灌注１８ ｈ ,术后立即及６ 小时后即时使用胰岛素,测定神经功能障碍评分及脑梗死体积的变化。结果　胰岛素可使神经功能障碍评分显著减低,梗死灶体积及其占全大脑体积比值,两半球体积差值显著减小。结论　胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤,早期用药效果更好。     

不同时间窗大鼠脑血栓溶解治疗后梗死体积和脑电图的研究

目的：研究不同时间窗脑血栓溶解治疗后脑电变化与梗死体积的关系。方法：应用肾血管性高血压大鼠,用光化学法制成一侧大脑中动脉闭塞模型,在血栓形成后不同时间应用尿激酶静脉溶栓,观察脑电图变化与梗死体积的大小。结果：缺血２小时之内实行溶栓治疗,可缩小梗死性。ＭＣＡＯ３０分钟后溶栓复流后,ＥＥＧ有改善,一小时后慢波减少,２４小时ＥＥＧ可恢复到基本正常。     

高压氧预处理减少局灶性脑缺血后泛素化蛋白聚集

目的探讨泛素-蛋白酶体系统在重复高压氧（HBO）预处理导致的脑缺血耐受中所起的作用。方法采用大脑中动脉阻闭（MCAO）制备大鼠局灶性脑缺血模型,将33只SD大鼠随机分为假手术组（Sham）组、MCAO组和HBO组,分别观察各组大鼠脑梗死灶的大小和神经功能学评分,并用免疫组织化学染色检测再灌注2h、24h时相点大鼠脑组织CA1区异常泛素化蛋白聚集的变化。结果 HBO组脑梗死容积小于MCAO组,差异有统计学意义（P〈0.05）,其神经功能学评分也明显优于MCAO组（P〈0.05）。再灌注各时相点,HBO组泛素化蛋白聚集明显少于MCAO组（P〈0.05）。结论高压氧预处理所诱导的脑缺血耐受的机制可能与泛素化蛋白聚集降低有关。