德氮吡格对人肝癌细胞株QGY-7701增殖和凋亡的影响

目的观察德氮吡格(TNBG)对人肝癌细胞株QGY-7701的作用，初步探讨TNBG抗肿瘤作用机制。方法运用^3H-TdR掺入法、MTT法检测TNBG对肿瘤细胞的抑制增殖和细胞毒作用，光镜及透射电镜观察药物处理后细胞形态的改变，流式细胞仪分析细胞周期阻滞和产生凋亡的情况。结果2／μg／mlTNBG作用24h即对QGY-7701细胞有明显的增殖抑制作用，而其细胞毒作用则呈时间、剂量依赖性，光镜下发现大量脂滴潴留在胞浆，电镜观察证实胞浆中存在脂滴聚积，流式细胞仪检测到细胞阻滞于G2／M期，并有明显的细胞凋亡。结论TNBG能抑制肿瘤细胞增殖，将肿瘤细胞阻滞于G2／M期，并诱导其发生凋亡，从而达到抗肿瘤的效应。     

过氧化氢对人肝癌细胞株HepG2增殖的促进作用

目的:探讨低剂量过氧化氢(H2O2)对人肝癌细胞株HepG2的促增殖作用及该作用与NF-κB和细胞周期的关系. 方法: 不同剂量H2O2直接作用于培养的HepG2细胞;20 μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)预处理细胞2 h, 50 μmol/L的H2O2作用HepG2细胞;50 μmol/L H2O2分别作用于G1, G2/M, S期细胞,MTT法测定细胞增殖活性. 结果: 50 μmol/L的H2O2具有明显的促进HepG2细胞生长的作用,此作用可以被PDTC抑制;50 μmol/L的H2O2可以明显的促进G1期HepG2细胞生长. 结论: 低剂量H2O2可诱导HepG2细胞增殖,该过程可能包含依赖NF-κB的信号途径的参与;H2O2诱导HepG2细胞增殖在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导G1期细胞增殖.     

不同结构大豆皂甙对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖抑制作用

目的 研究3种结构形式的大豆皂甙(大豆总皂甙、大豆皂醇A和大豆皂醇B)对人肝癌细胞增殖的抑制作用.方法 采用MTT比色法观察不同浓度(10～400 μg/mL)的3种大豆皂甙对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响,采用Annexin V-FITC/PI双染凋亡法检测其对HepG2细胞凋亡的影响.结果 大豆总皂甙、大豆皂醇A和大豆皂醇B均能呈时间和浓度依赖性地抑制HepG2细胞增殖和诱导细胞凋亡,其对HepG2细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为(1.96±0.51)mg/mL、(0.98±0.17)mg/mL和(0.50±0.02)mg/mL.结论 大豆皂甙可通过诱导细胞凋亡而发挥抗肝癌作用,且大豆皂醇的抑癌活性高于大豆总皂甙.     

HMGB1对人肝癌细胞株HepG2体外增殖的影响

目的：观察HMGB1对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响并初步探讨其可能机制。方法：采用不同剂量(0,10,50,100 ng/mL)重组HMGB1(rHMGB1)刺激HepG2细胞24 h,用MTT法检测HepG2细胞增殖,Western印迹和RT PCR法检测cyclin D1,PCNA的表达。结果：不同剂量(10,50,100 ng/mL)rHMGB1组HepG2细胞增殖能力均明显高于对照组（P＜0.05）。HMGB1抗体（20 μg/mL）能中和HMGB1(10ng/mL)对HepG2细胞的促增殖作用（P＜0.05）。Western印迹和RT PCR显示,与对照组比较,HMGB1能明显促进HepG2细胞PCNA,cyclin Dl蛋白和mRNA的表达（P＜0.05）,HMGB1抗体能明显抑制HMGB1上调PCNA,cyclin Dl蛋白和mRNA的表达（P＜0.05）。结论：HMGB1可能通过上调cyclin Dl和PCNA表达,促进HepG2细胞增殖。HMGB1抗体对肝细胞癌可能有治疗作用。     

蟾酥注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究蟾酥注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响.方法 CCK-8法检测SMMC-7721细胞活力;DCFH-DA染色法检测SMMC-7721细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;荧光染色法观察SMMC-7721细胞线粒体膜电位变化;流式细胞术检测SMMC-7721...     

Smac过表达增强氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制和促凋亡作用

目的:研究Smac过表达联合氯化镉(CdCl2)对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响,为以Smac为基础的肿瘤基因治疗以及镉作为抗肝癌药物的开发提供实验依据.方法:实验共设立5组,分别为对照组、pcDNA3.1+组、pcDNA3.1+-hSmac组、CdCl2组以及CdCl2联合Smac组.对照组细胞不进行细...     

榄香烯注射液对人肝癌细胞系HepG2体外增殖的影响

目的:观察榄香烯注射液对人肝癌HepG2细胞株体外增殖的影响及其特点,并初步探讨其可能的相关作用机制。方法:以5-氟尿嘧啶(5-FU)为阳性对照组,应用噻唑蓝比色法检测不同浓度榄香烯实验组HepG2细胞的吸光度值、增殖抑制率,并应用流式细胞检测技术(FCM)测定HepG2细胞周期分布特点。结果:HepG2细胞经榄香烯作用36 h后折光率减弱,细胞体积缩小、漂浮细胞增多,细胞生长受到显著抑制,并呈现出明显的时间依赖效应关系。在细胞周期分布特点及抑制率参数上,榄香烯组与空白对照组相比有统计学差异(P<0. 01),而与5-Fu组比较,二者之间无统计学差异(P>0. 05)。同时榄香烯使HepG2细胞周期分布特点发生改变,表现为G0/G1期和G2/M期细胞比例上升,S期细胞比例下降,并且与5-Fu组呈现出相似的趋势。结论:榄香烯注射液在体外能通过抑制肝癌HepG2细胞株DNA复制发挥抑制其增殖的作用。     

高浓度胰岛素抑制人白血病细胞株K562增殖的实验研究

目的 探讨高浓度胰岛素(insulin,INS)对K562细胞株增殖的抑制作用及其机理。方法 用不同浓度胰岛素处理K562细胞,分别用CCK-8法、细胞计数法和台盼蓝拒染法检测K562细胞的增殖活性,同时检测培养基中葡萄糖浓度变化;流式细胞术检测K562细胞的凋亡效应;并分别采用不同浓度的胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和IGF-1受体非特异性阻滞剂苏拉明（Suramin）对高浓度胰岛素影响K562细胞增殖作用进行干预。结果 胰岛素在0.1～1 mU/mL浓度下具有明显促进K562细胞增殖的作用,而高浓度胰岛素（1.6～100 mU/mL）则相反;无论培养基中葡萄糖浓度高低,高浓度胰岛素都有对K562细胞增殖的抑制作用;高浓度胰岛素抑制K562细胞增殖呈时效和量效关系;0.1、1、10、100 mU/mL胰岛素处理K562细胞48 h,与对照组比较,0.1、1 mU/mL浓度下抑制细胞凋亡,而10、100 mU/mL浓度下促进细胞凋亡（P均<0.05）;IGF-1能逆转高浓度胰岛素对K562细胞增殖的抑制作用,并且具有量效和时效关系;Suramin能增强高浓度胰岛素对K562细胞增殖的抑制作用,并且具有量效和时效关系。结论 胰岛素对K562细胞有双重作用,即在0.1～1 U/mL浓度下促进细胞增殖、抑制凋亡,高浓度（1.6～100 mU/mL）下抑制细胞增殖、促进凋亡,且其抑制作用与培养基中葡萄糖代谢无关与抑制IGF-1途径有关。     

双氢青蒿素体外抑制人肝癌细胞株HepG2生长作用的实验研究

目的研究双氢青蒿素（DHA）对体外培养的人肝癌细胞株HepG2的生长抑制作用及诱导凋亡作用。方法常规体外培养人肝癌细胞株HepG2,将不同浓度DHA在不同时间内作用于人肝癌细胞株HepG2,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果不同浓度DHA均可抑制体外培养的人肝癌细胞株HepG2细胞生长,并可诱导其发生凋亡,且呈一定的剂量-效应、时间-效应关系。结论 DHA对体外培养的人肝癌细胞株HepG2有明显的生长抑制作用及诱导凋亡作用。     

钼酸盐对人肝癌细胞抑制增殖和诱导凋亡作用的实验研究

目的 观察钼酸氨对体外培养人肝癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用.方法 应用CCK-8法检测不同浓度钼酸氨对HepG2细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 钼酸氨能明显抑制HepG2细胞增殖、诱导细胞凋亡、影响细胞周期,并存在剂量-效应关系和时间-效应关系,随着钼酸氨浓度升高和作用时间延长,凋亡细胞和G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期及G2/M期细胞减少,并出现凋亡峰.结论 钼酸氨能抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,影响细胞周期,将细胞特异性地阻滞在G1期.     

RECQL基因沉默对HCC细胞株体外增殖的抑制作用

目的观察RECQL基因沉默表达对人肝细胞癌(humanhepatocelullarcarcinoma,HCC)细胞株体外增殖的影响,探讨RECQL作为肝癌治疗潜在靶向基因的可能性。方法以BEL7404、SK-HEP-1、Hep3B、SNU-761HCC细胞为研究对象,采用Westernblot和免疫组化法观察解旋酶RECQL蛋白的表达情况,通过RNA干扰技术抑制RECQL表达,测定HCC细胞和正常肝细胞（THLE-2细胞）的存活率和死亡率,并采用Westernblot法分析凋亡相关蛋白的变化,FACS法检测细胞周期分布。结果RECQL蛋白在BEL7404、SK-HEP-1、Hep3B中为阳性表达,SNU-761中为阴性表达。RECQL-siRNA在阳性表达组中抑制HCC细胞的增殖,引起细胞存活率降低和死亡率增加（均P＜0.01）,但对阴性表达组和THLE-2细胞存活率和死亡率无影响（均P＞0.05）。RECQL-siRNA处理的SK-HEP-1细胞中,剪切型凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3和cleavedPARP的表达变化不大,而G2/M期细胞的比例明显增加（P＜0.05或0.01）。结论RECQL基因沉默表达可以抑制HCC细胞的增殖,且这种抑制作用依赖于RECQL的高表达,并对正常肝细胞无影响,其可能机制是阻滞细胞G2/M期,可以作为治疗肝癌的潜在靶向基因。     

p115和MIF在肝癌细胞和正常肝细胞的表达情况

目的:研究人肝癌低分化SMCC-7721细胞株,高分化HepG2细胞株和人正常肝细胞株LO2的高尔基体转运蛋白p115和巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)的表达情况.方法:采用RT-PCR方法检测3组细胞株中p115和MIF的mRNA表达水平.用...     

重组人内皮抑素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响

目的 初步研究Wnt通路在重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,ES)诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡过程中的作用及可能机制.方法 分别以50、100、200、400 μg/ml ES体外处理人肝癌细胞株SMMC-7721,利用MTT比色法检测不同浓度、时间ES作用下的细胞增殖状态;利用流式细胞仪检...     

STAT3基因在人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中的表达及意义

目的：探讨STAT3基因异常活化在人原发性肝癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法：应用免疫组化染色法、RT-PCR和Western blotting法检测人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中STAT3基因的mRNA和蛋白水平表达。 结果：肝癌细胞株SMMC7721、Bel7402和HepG2中均有STAT3基因的高表达,3种肝癌细胞间表达量比较差异无显著性（P>0.05）。原发性肝癌组织和癌旁组织中均有STAT3的mRNA及蛋白水平的高表达,与正常肝组织比较差异有显著性（P<0.05）,而肝癌组织与癌旁组织比较差异无显著性（P>0.05）。肝癌组织中VEGF、survivin和c-myc 的mRNA表达上调,p53的mRNA表达下调。结论：STAT3
的异常活化可能发生在癌变的早期,在肝癌的形成和发展中可能起重要的促进作用。     

阿司匹林对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨阿司匹林对肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的影响。方法:SMMC-7721细胞体外培养,阿司匹林处理细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增殖程度,Tunel法检测细胞凋亡指数。结果:不同浓度的阿司匹林能明显抑制细胞增殖,且抑制程度呈现剂量和时间依赖关系。细胞凋亡指数也随阿司匹林浓度的增加而增加。结论:阿司匹林对SMMC-7721的增殖具有抑制作用,抑制程度与阿司匹林的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡来抑制细胞的增殖。     

柴胡皂甙D对SMMC-7721细胞株体外分化的研究

摘要：目的　观察柴胡皂甙D（SSD）对SMMC-7721细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法　通过观察细胞毒作用、平均核面积、细胞周期改变和P38MAPK、NF-κB信号转导分子的表达变化初步揭示其作用机制。结果　SSD具有明显的细胞抑制作用且,呈一定的量效关系;SSD2.5 mg/L、5 mg/L处理组能明显缩小平均核面积（p<0.05）;能使细胞周期阻滞于G0/G1期（p<0.005）;能明显上调P38MAP kinase表达（p<0.05）,显著抑制NF－κB的核内表达 (P<0.05)。结论　SSD对SMMC－7721细胞具有显著诱导分化作用;并且将SMMC-7721的细胞周期明显阻滞于G0/G1期,从而使细胞增殖活性降低,进而趋于分化或凋亡;其作用机制可能是通过上调 P38MAPK,下调NF－κB表达有关。     

Hyperthermia enhances the anticancer-drug induced cytotoxicity in hepatocellular carcinoma cell line SMMC-7721

Objective： Hyperthermia is an attractive addition to multidisciplinary approaches to clinical cancer treatment. The efficiency of hyperthermia depends on the elevation of the temperature and the duration of treatment. It has been reported that in vitro and in vivo hyperthermia enhanced the cytotoxic effect of certain anticancer drugs. However, this enhancement varies, depending on the drug used and the scheduling of treatments. Thus, the combination effect of chemotherapy and hyperthermia remains unclear. In this study, we aimed to investigate whether concurrent exposure of human hepatocellular carcinoma cells SMMC-7721 to chemotherapeutic agents andhyperthermia could increase anticancer effects. Methods ： Two chemotherapeutic agents, cisplatin and hydroxycamptothecin, were applied. The MTT assay was performed to evaluate the growth inhibition of SMMC-7721 induced by anticancer drugs with and without hyperthermia. Flow cytometric analysis was used for the assessment of apoptosis after treatments. Results： The percentages of growth inhibition of SMMC-7721 induced by cisplatin （10μg/ml） alone, hydroxycamptothecin （1μg/ml）alone, hyperthermia alone, cisplatin and hyperthermia, hydroxycamptothecin and hyperthermia, were 20.77%, 13.65%, 32.46%, 62.76%, 71.89%, respectively. The percentages of apoptosis of five treatments are 5.56%, 3.96%, 10.16%, 24.32%, 20.42%, respectively. Conclusion： While both hyperthermia and anticancer drugs can individually induce apoptosis and anti-proliferation effect, the combination of the two treatments induce significantly higher apoptosis and cytotoxicity than hyperthermia or anticancer drugs treatment alone. These data suggest a synergistic benefit when hyperthermia and anticancer drugs used concurrently.     

细胞增殖上调因子对肝细胞癌预后的预测作用

目的 研究细胞增殖上调因子(URGCP)在预测肝癌的预后和在肝癌的进展和发展中的潜在价值.方法 取材中山大学肿瘤医院病理科278例肝癌石蜡包埋标本,标本患者的手术日期在1995-2003年,在15个肝癌细胞株及10对肝癌与癌旁组织进行实时定量PCR和免疫印迹检测URGCP的表达.采用免疫组织化学检测278例肝癌样本,对URGCP表达进行分析,统计与临床数据的相关性,分析URGCP蛋白与肝癌患者预后的相关性.结果 免疫组化显示,URGCP在所有测试的肝癌细胞株及122例(43.8％)石蜡包埋肝癌标本中高表达.URGCP主要为胞质表达,随着肝癌级别的增高,URGCP的表达水平增高.URGCP的表达水平与临床分期显著正相关,与肝癌患者的预后生存显著负相关,与患者年龄、肿瘤个数、大小、AFP不相关.结论 URGCP在促进肝癌细胞增殖和肿瘤形成中起着重要的作用,并可能代表了一种新的预后标志物和治疗疾病的靶标.     

三氧化二砷与全反式维甲酸联合应用对HepG2细胞的体外抑制作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)和全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)联合应用对人肝母细胞瘤HepG2的抑制作用与单独应用的差异。方法采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制作用；倒置显微镜观察药物对HepG2细胞形态学的影响。结果As2O3和ATRA联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用优于单独应用，抑制率与药物浓度、时间呈正相关。结论As2O3和ATRA联合治疗肿瘤细胞具有协同作用，毒副反应降低，没有交叉耐药作用，且促进相互作用敏感性。     

下瘀血汤抑制肝癌细胞生长的研究*

目的：研究下瘀血汤对肝癌HepG2细胞生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法：选取对数期生长阶段的HepG2细胞,分别加入不含药血清、10%含药血清、20%含药血清,通过CCK-8法检测下瘀血汤含药血清对Hep-G2细胞的增殖影响;通过流式细胞仪（FCM）检测下瘀血汤含药血清对Hep-G2细胞的凋亡和周期的影响;通过PCR及Western-blot检测下瘀血汤含药血清对核仁纺锤体相关蛋白1（nucleolar spindle-associated pretein 1,NuSAP1）的抑制作用。结果：通过CCK-8实验,发现10%、20%含药血清在48小时（P<0.05）及72小时（P<0.01）均能够明显抑制HepG2细胞的增殖;细胞周期实验发现,10%及20%含药血清能够抑制HepG2细胞的增殖,使细胞阻滞于S期及G2期,差异具有统计学意义（P<0.05）,且具有浓度依赖的特点（P<0.05）;流式细胞技术检测凋亡结果显示不同浓度含药血清均能够促进HepG2细胞的凋亡,并且具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。通过PCR及Western-blot实验发现,10%及20%含药血清均能够抑制NuSAP1 mRNA及蛋白水平的表达,并随着含药血清的浓度增加,这一作用更为明显,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：下瘀血汤含药血清可能通过抑制Nusap1表达来抑制Hep-G2细胞的增殖及周期,促进其凋亡,下瘀血汤有望成为治疗肝细胞肝癌的有效中药。