芦荟多糖的分离纯化及其相对分子质量和含量测定

目的 研究库拉索芦荟多糖的分离纯化,测定分离得到的纯化多糖PSA2的相对分子质量及其多糖和蛋白质的含量. 方法采用水提醇沉法提取粗多糖,反复冻融法除蛋白质,DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100凝胶色谱柱纯化多糖,得到纯化组分(PSA2),高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测定PSA2的相对分子质量,苯酚 硫酸法测定其多糖含量,考马斯亮蓝G-250法测定其蛋白质含量. 结果 PSA2的相对分子质量为8 457.4,其多糖含量为 61.0%,蛋白质含量为0.7%. 结论 多糖的提取工艺简单可行,HPGPC法,苯酚 硫酸法和考马斯亮蓝G-250法准确快捷.     

缢蛏多糖的提取、分离和结构分析

目的从缢蛏中提取和分离纯化多糖,对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用100℃热水提和碱提方法从缢蛏中提取粗多糖,采用Q Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振波谱(NMR)进行化学结构解析。结果从缢蛏中经热水提粗多糖(YC-S)和碱提粗多糖(YC-J)均为葡聚糖,进一步分离纯化得到了4种水溶性多糖组分。对其中1种热水提多糖纯化组分YC-S2采用高效液相凝胶色谱法测得其相对分子质量为482kD,且色谱峰单一对称,表明其具有较高的纯度。结构分析表明,YC-S2是1种以α-(1→4)Glc为主链,含有少量的β-(1→3,4)和β-(1→4)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从缢蛏中提取分离得到了4种多糖组分,并初步确定了1种水溶性葡聚糖的结构,为缢蛏多糖结构和活性的深入研究提供了基础。     

紫贻贝多糖的提取、分离和基本理化性质分析

目的从紫贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质进行分析,为贻贝多糖的结构和活性研究提供依据。方法依次采用冷水,木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解的方法提取贻贝粗多糖,并对粗多糖的总糖、蛋白、糖醛酸、糖胺聚糖和硫酸根含量进行分析。分别采用Sephacryl S-300凝胶柱层析和QSepharose 4 Fast Flow阴离子交换柱层析对粗多糖进行分离和纯化,并对纯化后的组分进行单糖组成、纯度及相对分子质量分析。结果从紫贻贝中经提取和分离共得到了8种水溶性多糖组分,其中水提组分LTS1-A单糖组成较简单,只含Glc。其余各组分单糖组成相对复杂,主要含有Man、GlcN、Gal和Fuc。采用高效凝胶渗透色谱法对各多糖组分进行分析都呈现较为均一的色谱峰,表明具有较好的纯度,各组分相对分子质量范围约为3.0~40 kD。结论采用水提和酶提方法得到了具有不同理化性质的多糖,经两步层析分离能够得到纯度较高的多糖组分,为下一步紫贻贝多糖结构和活性的深入研究提供了依据。     

当归多糖X—C—3—Ⅱ的分离纯化与组成研究

目的对中药岷当归[Angelicasinensis(Oliv)Diels]的水溶性成分进行研究,分离出有活性的单一的多糖组分.方法采用热水提取、乙醇沉淀、DEAE-SephadexA-25柱层析进行分离,凝胶色谱法测定相对分子质量,利用气相色谱法鉴定多糖组分中所含单糖的种类和它们之间的摩尔比.结果分离得到一个多糖组分X-C3-Ⅱ,相对分子质量为1.0×105,其中所含单糖的种类和它们之间的摩尔比为葡萄糖半乳糖阿拉伯糖鼠李糖半乳糖醛酸=56.022.118.91.91.1.结论x-C-3-Ⅱ为首次从该植物中分离得到,并且为均一性多糖.     

仙鹤草多糖的分离纯化及理化性质研究

目的从中药仙鹤草中提取仙鹤草多糖,并对其理化性质进行研究。方法利用水提醇沉法得粗多糖,并依次经纤维素DE-52柱和Superdex-200凝胶柱色谱进行纯化。采用光谱法和色谱法对其总糖含量、单糖组成、相对分子质量等理化性质进行研究。结果分离纯化的仙鹤草多糖HAPⅢ总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为81%,3.4%,45%,由半乳糖、葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、岩藻糖、木糖组成,摩尔比为5.65∶2.67∶2.61∶1.86∶1.12∶1.09∶1。其平均相对分子质量为1.90×105。结论仙鹤草多糖HAPⅢ是一水溶性酸性杂多糖。     

一种鲍鱼脏器多糖的鉴定及活性研究

目的 对鲍鱼脏器中获得的一种多糖AHP-12进行纯度和组成的鉴定,并对其抗肿瘤活性进行分析.方法 高效液相色谱和琼脂糖凝胶电泳鉴定纯度;凝胶色谱法测定相对分子质量;明胶比浊法测定硫酸根含量;比色法测定氨基己糖含量;气相色谱测定单糖组成;MTT法检测其体外抗肿瘤活性.结果 鲍鱼脏器多糖AHP-12为一种均一的多糖组分;其相对分子质量约为3×105;硫酸根舍量为13.07%;氨基己糖含量为4.98%;单糖组成为鼠李糖、岩藻糖和半乳糖组成,其摩尔比为: Rha:Fuc : Gal=1:2.2 : 1.7;AHP-12对HeLa细胞增殖有一定的抑制作用.结论 从鲍鱼脏器中提取经分离纯化得到的多糖AHP-12是一种均一的多糖,且为硫酸酯多糖和氨基多糖,具有较弱的体外抗肿瘤活性.     

树舌多糖组分的高效液相色谱分析

目的:分析树舌多糖组分的重均相对分子质量(Mw)及其分布,分析树舌多糖的单糖组成.方法:采用高效凝胶液相色谱法、示差折光检测器测定多糖组分的重均相对分子质量;气相色谱法测定单糖组成.结果:树舌多糖由3种具有不同重均相对分子质量的多糖组分组成;树舌多糖中含有6种单糖.结论:高效液相凝胶色谱法可有效分析树舌多糖组分的质量控制.     

太平洋牡蛎多糖的提取、分离和结构分析

目的　从太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)肉中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法　将牡蛎鲜肉制成丙酮粉,依次采用室温水,60 ℃热水和稀碱提取牡蛎粗多糖,对其总糖含量、蛋白含量和单糖组成进行分析。采用DEAE Sepharose FF阴离子交换和Sephacryl S-400凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对获得的纯化组分采用红外光谱 (IR)、甲基化、气质联用 (GC-MS)、电喷雾质谱 (ESI-MS) 和核磁共振波谱 (NMR) 等方法进行化学结构分析。结果　从牡蛎肉中提取得到了3种牡蛎粗多糖,单糖组成都只含有葡萄糖 (Glc)。对粗多糖进一步分离,得到了5种多糖纯化组分。对水溶性多糖纯化组分 MC-11 的结构进行了分析,表明其是以 →4)-α-D-Glc-(1→ 为主链,含有 →3,4)- β-D-Glc-(1→和 →2,4)- β-D-Glc-(1→ 分支的 D-吡喃型葡聚糖,相对分子质量为1299 kDa。结论　从太平洋牡蛎肉中分离纯化得到了5种多糖组分,并采用多种方法确定了1种纯化组分 MC-11 的结构,为牡蛎多糖结构与活性关系的深入研究提供了基础。     

海胆黄多糖的分离、纯化及免疫活性测定

目的从光棘球海胆中分离纯化海胆黄多糖(polysaccharidefromtheeggsofStrongylocentrotusnu-dus,简称SEP),确定其纯度和分子量,并现察其免疫活性。方法海胆黄先经丙酮脱脂,根据正交实验和活性分析确定最佳热水提取条件,然后热水提取、去蛋白、醇沉得海胆黄粗多糖。粗多糖经超滤、DEAESepharoseFastFlow及SephacrylS-400柱层析纯化得多糖精品SEP。经高效液相色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳及纸层析鉴定其纯度。高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定其分子量。体外脾淋巴细胞增殖实验测定其免疫活性。结果从海胆黄中分离纯化得到的均一多糖组分SEP,经检测其分子量为1950KD左右。脾淋巴细胞增殖实验表明SEP可显著促进脾淋巴细胞的增殖。结论从海胆黄中分离纯化得到的均一多糖组分SEP具有较强的体外免疫活性。     

灵芝多糖的提纯、组成及活性研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、单糖组成以及抗肿瘤活性。方法采用热水提取,Sevag法去蛋白质,乙醇分级沉淀,DEAE-32离子交换色谱法从灵芝子实体粉中分离得到灵芝多糖。用SephadexG-100凝胶柱色谱法判断其纯度及相对分子质量,用薄层色谱法及气相色谱法鉴定其单糖组成,溴化四唑蓝法测定其体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体粉中分离得到两种粗多糖GLPⅠ、GLPⅡ。GLPⅠ进一步分离得到两种均一多糖GLPH1、GLPH2。GLPH1糖苷键为β型,相对分子质量为45000。GLPH1由葡萄糖、半乳糖和痕量甘露糖、岩藻糖组成。GLPH1对KB细胞、BGC细胞、B16细胞的增殖具有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPH1可望开发成抗肿瘤药或辅助抗肿瘤药。     

灵芝多糖分离鉴定及抗肿瘤活性的研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、理化性质及初步抗肿瘤活性。方法采用热水提取 ,乙醇分级沉淀 ,DEAE 32离子交换柱色谱等方法从灵芝子实体中分离得到灵芝多糖。用SephadexG 10 0凝胶柱色谱法测定其纯度和平均分子量。用薄层色谱及气相色谱法测定其单糖组成。溴化四唑蓝法测定其初步体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体中分离得到 4种均一多糖 (GLPL1 ～GLPL4 ) ,其中GLPL1 和GLPL3为主要成分 ,其分子量为 4 10 0和 5 70 0。GLPL1 由葡萄糖组成 ;GLPL3由葡萄糖和半乳糖组成。GLPL1 和GLPL3对人鼻咽癌细胞增殖有显著的抑制作用 ,GLPL3还对人胃癌细胞、人结肠癌细胞增殖有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPL1 、GLPL3是很有潜力的抗肿瘤或辅助抗肿瘤药物     

石莼硫酸多糖的分离纯化及结构解析

目的:研究石莼硫酸多糖的分离纯化条件并对其结构进行解析。方法:对石莼水溶性硫酸多糖的分离、纯化条件进行优化,用苯酚-硫酸法测定粗多糖中多糖的含量;高效凝胶色谱测定多糖分子量;红外光谱和碳谱分析多糖结构。结果:石莼硫酸多糖最佳提取条件为材料粉碎20目,用20倍量水85℃煎煮3次,每次2h。多糖含量为22.64%,分子量为1156112。所得可溶性多糖结构中主要含有β-葡糖醛酸和鼠李糖2种单糖,且多糖中含有大量的硫酸根。结论:本方法操作简便、结果稳定,可为工业生产提供理论依据。     

发菜基因组DNA提取方法比较与分子鉴定研究

目的 以发菜为研究对象比较不同的提取DNA方法,筛选出了一种适合快速提取发菜DNA的方法。方法 分别利用自主研发的硅珠DNA纯化技术、细菌试DNA提取试剂盒和植物DNA提取试剂盒提取发菜基因组DNA。结果 本实验室开发的硅珠DNA提取纯化技术具有快速、无毒以及获得的发菜DNA纯度高等优势。通过PCR扩增和测序得到16S rRNA基因,利用Blast软件进行序列比对,与发菜同源性为99%。结论 本研究研制的发菜基因组DNA提取方法可用于发菜源性的分子鉴定。     

一种南海软珊瑚多糖的提取、分离及活性评价D

目的 从南海软珊瑚Sinularia sp.中提取、分离和纯化多糖,分析其基本理化性质,并对其生物活性进行初步评价。方法 采用酸性蛋白酶从软珊瑚Sinularia sp.中提取粗多糖,利用碱性蛋白酶和732型阳离子交换树脂去除蛋白,利用Q Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析对多糖进行分离纯化,并对多糖组分进行总糖含量、蛋白含量和单糖组成分析。将得到的多糖组分采用三氧化硫-吡啶法进行硫酸酯化修饰并对其进行抗病毒、抗凝血生物活性评价。结果 从软珊瑚Sinularia sp.中提取分离得到3种多糖组分,单糖组成较复杂,主要含有Ara, Gal及Rha;软珊瑚多糖硫酸酯可以明显抑制HBsAg和HBeAg的表达量;体外抗凝实验中可延长APTT和PT值。结论 从软珊瑚Sinularia sp.中得到了3种多糖组分,硫酸酯化修饰的软珊瑚多糖具有良好的抗病毒、抗凝血活性,为软珊瑚多糖的深入研究提供了基础。     

天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析

目的：对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析。方法：采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成。相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。结果：天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量（M_w）=42 025;10%大分子部分重均相对分子质量=197 011;10%小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数（D）=2.56;数均相对分子质量（M_n）=16 427。结论：天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子。     

蝙蝠蛾被孢霉多糖的分离纯化及理化性质

目的提取蝙蝠蛾被孢霉多糖,并对其理化性质进行研究。方法利用水提醇沉法得到粗多糖CPSM,采用硫酸-蒽酮法测定粗多糖含量,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,薄层色谱法检查是否含有单糖。CPSM经纤维素DE-52柱分离得CPSM-1和盐洗脱多糖。两种多糖分别经Sephadex系列凝胶柱分离纯化得到CPSM-1a和CPSM-2,采用光谱法和色谱法测定其单糖组成、分子质量等。结果粗多糖CPSM糖含量为61.4%,蛋白含量为1.8%,不含还原糖。CPSM-1a主要含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比约为5∶2∶3;CPSM-2主要含有甘露糖、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和木糖,其摩尔比约为5∶1∶2∶1∶1。CPSM-1a和CPSM-2重均分子质量分别为8.8×103和7.6×103。结论 CPSM-1a为一水溶性中性多糖,CPSM-2为一水溶性酸性多糖。     

银杏细胞培养物多糖与银杏叶多糖的研究

对药用植物银杏悬浮细胞培养物多糖及银杏叶多糖进行较为系统的研究。方法：用银杏悬浮细胞培养方法得到细胞培养物,对细胞培养物中的多糖进行常规提取处理和离子交换凝胶色谱分离,用凝胶过滤色谱法和聚丙烯酰胺凝胶色谱法验证其纯度。结果：从细胞培养物得到五个多糖（ＩＣＰ－１、ＩＣＰ－ ２、ＥＣＰ－１、ＥＣＰ－２、ＥＣＰ－３）,从银杏叶中分得两个多糖（ＬＧＰ－１、ＬＧＰ－２）。确定了其分子量、旋光度、糖含量和糖醛酸含量、单糖组成及其摩尔比。结论：初步分析了ＥＣＰ－１的糖基连接位置和苷键构型;药理实验证明ＬＧＰ具有抗炎和耐缺氧活性,ＩＣＰ具有较强的耐缺氧活性,ＥＣＰ具有显著的抗炎活性。     

茯苓多糖的提取及其分子量测定

目的：优化茯苓多糖的提取工艺,测定茯苓多糖分子量及其分布。方法：采用正交试验设计对影响茯苓多糖提取的因素(超声时间、料液比、提取温度、提取时间)进行优化;以葡萄糖作标曲通过苯酚硫酸法测定茯苓多糖的含量;高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光联用(HPSEC-MALLS-RI)测定其分子量及其分布。 结果：茯苓多糖的最佳提取工艺为超声时间30min,液料比1：50,提取温度100℃,提取时间4h;茯苓多糖含量为93.5%;测得茯苓多糖组分A的重均分子量为4.671×106(±1.003%)Da,组分B的重均分子量为6.144×104(±2.466%)Da。     

杏鲍菇子实体多糖的提取和纯化工艺研究

杏鲍菇是一种珍贵食用菌,杏鲍菇多糖具有多种生物活性,本文对杏鲍菇子实体中多糖的最佳提取条件进行了筛选,同时,应用sevage法除蛋白,乙醇沉淀,离心,真空干燥,得到多糖粗品。再用DEAE-纤维素层析法进行多糖的分离和纯化,最后采用紫外光谱扫描、琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱进行分析检测,最后获得单一多糖组分。