腺苷A1受体激动剂CHA对缺血后脑组织β—EP含量的影响

用放射免疫法测定土鼠半球缺血模型脑组织中β－ＥＰ（β－ｅｎｄｏｒｐｈｉｎ）含量，观察缺血后β－ＥＰ含量的变化及腺苷Ａ１受体激动剂ＣＨＡ（ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ）对缺血后β－ＥＰ含量变化的影响。结果显示：沙土鼠缺血８ｈ后β－ＥＰ含量明显增加，且与卒中症状呈正相关，与脑比重呈负相关，ＣＨＡ可以改善卒中症状，减轻脑水肿，抑制缺血后β－ＥＰ的升高，提示缺血后中枢β－ＥＰ增加会加重缺血性损伤     

腺苷A1受体激动剂CHA对缺血性脑水肿的影响

在沙土鼠脑半球缺血模型上，观察了腺苷Ａ１受体激动剂ＣＨＡ（Ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ）对缺血８ｈ内的卒中发生率、卒中症状、以及脑水肿的影响。分析了脑水肿程度与卒中症状的关系。结果显示：ＣＨＡ可以延迟沙土鼠缺血后卒中发生时间，降低卒中发生率，改善卒中症状，减轻缺血性脑水肿。卒中指数与脑组织比重呈明显的负相关。提示腺苷减轻脑水肿，可能是其抗缺血性脑损伤的保护作用之一。     

缺血性脑卒中与脑组织β—EP含量及脑比重的关系及丹参的影响

在沙土鼠脑缺血模型上，用放射免疫分析法测定了脑组织中的β－内啡肽（β－Ｅｎｄｏｒｐｈｉｎ，β－ＥＰ）的含量，观察了缺血后脑组织β－ＥＰ含量的变化及丹参对缺血后β－ＥＰ含量变化和卒中症候的影响。结果显示：沙土鼠缺血８ｈ后β－ＥＰ含量显著增加，且与卒中定候呈正相关，与脑比重呈负相关。丹参可以改善卒中症候，减轻脑水肿，抑制缺血后β－ＥＰ的升高．提示缺血后中枢β－ＥＰ的增加将会加重缺血性损伤，丹参对内源性阿片肽系统具有抑制作用，这可能是其抗缺血性脑损伤的机理之一。     

腺苷A1受体激动剂对缺血后脑组织中精氨酸加压素含量的影响

在沙土鼠半球缺血模型上，用放射免疫法测定了脑组织中精氨酸加压素（Ａｒｇｉｎｉｎｅｖａｓｏｐｒｅｓｉｎ，ＡＶＰ）的含量，观察了缺血后ＡＶＰ含量的变化及腺苷Ａ１受体激动剂Ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ（ＣＨＡ）对缺血后ＡＶＰ含量变化的影响。结果发现：沙土鼠缺血８ｈ后结扎侧大脑半球ＡＶＰ含量明显增加，且与卒中症状呈正相关，与脑比重呈负相关。ＣＨＡ可以改善卒中症状，减轻脑水肿，抑制缺血后ＡＶＰ的升高。提示缺血后中枢ＡＶＰ的增加将加重缺血性损伤，而腺苷对内源性ＡＶＰ系统具有抑制作用，腺苷抑制ＡＶＰ的升高可能是其抗缺血性脑损伤的又一机制     

血管性痴呆大鼠脑区和血浆中β－内啡肽含量的变化

采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ４血管闭塞法（４ＶＯ）的改良法建立大鼠血管性痴呆（ＶＤ）动物模型，用Ｔ型水迷宫试验检查动物的学习和记忆能力，并以放射免疫测定法测定ＶＤ大鼠４个脑区（额叶皮质、海马、丘脑和纹状体）和周围血浆中β－内啡肽（β－ＥＰ）含量。结果表明，ＶＤ组大鼠出现严重的学习、记忆障碍的同时其额叶皮质、海马丘脑和纹状体中β－ＥＰ含量分别为相应对照组的４１％、６６％、６８％和４３％，比对照组显著降低（降低３２％～５９％，Ｐ＜０．０５）。血浆β－ＥＰ含量在两组间则无显著差异。提示ＶＤ动物学习与记忆障碍可能与脑缺血后多脑区内β－ＥＰ含量降低有关。     

侧脑室注射腺苷A1受体激动剂对硝酸甘油偏头痛模型大鼠的影响

目的通过对硝酸甘油偏头痛模型大鼠侧脑室注射腺苷A1受体激动剂(R-phenylisopropyl-adenosine,R-PIA),探讨腺苷在偏头痛中的作用及机制。方法观察各组大鼠不同时间段内挠头、爬笼次数及心率变化,采用Elisa、免疫组织化学法、Western blot技术检测血液、三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)、三叉神经脊束核尾核(spinal trigeminal nucleus caudalis,TNC)处降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的表达。结果(1)与模型组相比,治疗组大鼠挠头、爬笼次数均减少并呈剂量依赖性(P0.05),且大鼠心率没有明显变化;(2)治疗组大鼠血液、TG、TNC部位CGRP的表达较模型组均降低(P0.05)。结论激活的腺苷A1受体能够通过抑制神经源性炎症反应及痛觉传导,从而抑制三叉神经血管系统的激活及痛觉敏化,对偏头痛产生镇痛作用。     

静痛灵胶囊对偏头痛病人血浆β－内啡肽水平的影响

双盲对照法研究１０７例偏头痛病人服用静痛灵胶囊和安慰剂前后血浆β－内啡肽水平的变化，同时观察静痛灵胶囊的近期疗效。结果表明，静痛灵胶囊可明显升高偏头痛病人血浆β－内啡肽水平，其近期疗效明显优于安慰剂。对静痛灵胶囊可能的药物作用机理作了初步探讨。     

缺血再灌注时脑组织中NO含量的变化及腺苷的影响

为了探讨腺苷和一氧化氮（nitric oxide,NO)在缺血再灌注损伤中的作用及二者间的关系，我们在四血管结扎大鼠缺血再灌注模型上，观察了缺血再灌注后脑组织中NO含量的变化及腺苷Al受体激动剂CHA(cyclohexyledenosine)的影响，结果显示，大鼠全脑缺血30分钟，再灌注15分钟后脑组织中的NO含量提高，提示NO参与了缺血再灌注损伤的病理过程，CHA可以降低缺血再灌注时NO的含量，提示腺苷对脑缺血再灌注时的保护作用可能与抑制缺血时脑组织中NO的过度增高有关。     

中性粘多糖对缺血再灌流脑组织ATP含量的影响

为观察中性粘多糖对缺血再灌流脑组织损伤的作用。我们应用沙土鼠制成的全脑缺血模型，测定缺血组织中的三磷酸腺苷、超氧化物歧化酶及脂质过氧化物。结果显示，提前服用ＮＭ，在缺血时可使脑组织ＡＴＰ含量恢复到正常水平，也可提高再灌流时脑组织ＡＴＰ水平，且后者随着ＳＯＤ活力升高，ＬＰＯ的含量降低，其含量有所恢复。     

腺苷A1受体激动剂对缺血损伤的兔脊髓神经元凋亡的影响

目的观察腺苷A1受体激动剂对脊髓缺血性损伤后的神经元凋亡的影响。方法建立兔脊髓缺血模型,给予腺苷A1受体激动剂(CPA),观察兔神经功能恢复,通过病理切片,计算脊髓前角正常神经元,再应用免疫荧光染色检测BCL-2表达水平,western-blot的方法观察caspase3、caspase9、BCL-2、BCL-X1、BAX、BAD表达水平。结果与DMSO组相比,CPA组兔神经功能明显改善。caspase3、caspase9、BCL-2、BCL-X1表达水平显著高于DMSO组,而BAX、BAD表达水平则明显降低。结论腺苷A1受体激动剂可能通过抑制神经元凋亡对脊髓缺血损伤发挥保护作用。     

亚低温对大鼠脑损伤后脑组织谷氨酸含量及c-fos基因表达的影响

目的 研究亚低温对脑创伤后谷氨酸细胞外释放及c-fosmRNA表达的影响。方法 原位杂交法并图像分析系统来评估c-fosmRNA表达。以脑脊液的谷氨酸含量评价其细胞外的释放程度。随机分为亚低温和常温组。每一组又分假手术和伤后10、30、60、120分钟亚组。结果 常温组谷氨酸明显高于亚低温组(P＜0．05)，而c-fosmRNA产物在亚低温组明显高于常温组(P＜0．05)，假手术组无阳性细胞。结论 亚低温能显著降低创伤性脑损伤引起的谷氨酸细胞外释放，同时更能促进c-fos mRNA表达。     

大鼠二次脑损伤后脑内c-fos基因表达和血浆β-内啡肽的变化及意义

目的 探讨脑内c-fos基因表达及血浆β-内啡肽的变化在二次脑损伤（SBI）中的作用。方法 125只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血组、颅脑损伤组和SBI组。分别采用免疫组化及放免分析测定大鼠脑内c-fos蛋白与血浆β-EP的含量，并对脑组织进行病理学观察。结果 SBI组c-fos基因表达分别于伤后3h、24h出现两个高峰．伤后3～48hc-fos基因表达均明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。SBI组大鼠血浆β-EP水平在伤后1h达高峰，至伤后48h仍未恢复正常（P〈0．05），伤后各时间点均明显高于颅脑损伤组和脑缺血组（P〈0．05）。在伤后12hSBI组脑含水量达高峰；伤后3～48h明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。伤后648hSBI组神经元损伤数目明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。结论 伤后大鼠脑内c-fos基因表达增加、血浆β-EP水平明显升高参与了SBI后病理生理过程，提示两者同SBI发展密切相关。     

天舒胶囊对偏头痛大鼠血浆β内啡肽、五羟色胺含量及其脑组织c-fos表达的影响

目的研究天舒胶囊对偏头痛大鼠血浆β内啡肽(β-EP)、五羟色胺(5-HT)含量及其脑组织c-fos表达的影响。方法皮下注射硝酸甘油建立偏头痛大鼠模型,给予天舒胶囊高、中、低剂量灌胃(剂量为7.5g/kg、3.75g/kg和1.88g/kg),按治疗和预防两种方式给药。空白对照组和模型组予以相应剂量的生理盐水灌胃。采用放免法和高效液相色谱法分别测定大鼠静脉血中β-EP、5-HT含量;免疫组化染色观察中脑导水管周围灰质β-EP、5-HT和c-fos阳性表达。结果与模型组比较,天舒胶囊高剂量治疗和预防组、中剂量预防组血浆β-EP水平明显升高(均P<0.05),天舒胶囊高、中、低剂量治疗和预防组血浆5-HT水平明显降低(均P<0.05);天舒胶囊中剂量治疗和预防组中脑导水管周围灰质c-fos表达明显降低(均P<0.05),而β-EP、5-HT表达增高(均P<0.05)。结论天舒胶囊可改善偏头痛发作时血管活性物质和神经递质水平失常,从而改善偏头痛症状。     

脑梗塞患者血浆β—内啡肽及强啡肽A1—13含量的变化

应用放射免疫分析法对４２例脑梗塞患者血浆β－ＥＰ、ＤｙｎＡ１－１３含量进行了测定。结果显示，脑梗塞急性期且梗塞灶体积大者血浆β－ＥＰ含量明显升高，ＤｙｎＡ１－１３含量显著降低（Ｐ＜０．０５）。脑梗塞病情程度越重，β－ＥＰ含量升高越明显，两者呈正相关（ｒ＝０．０５）。提示内源性阿片肽在缺血性脑梗塞中具有重要作用，β－ＥＰ促进了脑损伤缺血性脑水肿的形成和发展，而ＤｙｎＡ１－１３对其可能具有保护作用。     

亚低温对颅脑创伤大鼠脑组织中β-分泌酶表达的影响

目的 研究亚低温对大鼠颅脑创伤(TBI)后β-分泌酶(BACE)的影响.方法 应用液压冲击装置制作大鼠颅脑创伤模型,实验分为假手术组、创伤常温组(37℃)和创伤亚低温组(32℃),每组12只大鼠.采用免疫组织化学和免疫荧光法检测BACE表达部位,采用RT - PCR和免疫印迹法研究BACE mRNA和蛋白表达水平.结果 与假手术组比较,创伤常温组大鼠脑组织BACE免疫阳性细胞数明显增多,BACE mRNA和蛋白表达上升(P＜0.05).但是,可以看出BACE在给予亚低温处理后的免疫阳性细胞数量以及蛋白水平显著低于常温处理组(P＜0.05),与假手术组比较差异无统计学意义.结论 亚低温可以通过降低颅脑创伤后BACE表达水平来减轻继发性脑损伤程度,起到神经保护作用.     

纳洛酮对早产儿血浆β-内啡呔的影响

目的探讨早产儿疾病中血浆β-EP(β-内啡肽)的变化及纳洛酮对其影响.方法将我院NICU住院的早产儿49例,从两方面进行比较(1)无合并症的早产儿与正常足月儿比较.(2)患病早产儿应用纳洛酮治疗与不用纳洛酮治疗,监测其血浆β-EP水平.结果正常早产儿血浆β-EP比正常足月儿高(P＜0.05);患病早产儿经纳洛酮治疗组血浆β-EP明显下降(P＜0.01).结论早产儿β-EP血浆水平比足月儿高,纳洛酮能有效降低早产儿血浆β-EP水平,从而拮抗β-EP对呼吸、循环的抑制作用,提高治愈率.     

腺苷A1受体对杏仁核点燃癫痫大鼠海马神经元损伤作用机制

目的 探讨腺苷A1受体活性对点燃癫痫大鼠海马神经元损伤的作用.方法 选择84只SPF级雄性Wistar大鼠,根据随机数字表法将动物分为正常组、致痫组、致痫+腺苷A1 R拮抗剂(8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤,DPCPX)组、致痫+腺苷A1 R激动剂(2-氯化腺苷,2-CADO)组,每组21只.致痫组、致痫+DPCPX组、致痫+2-CADO组采用电刺激点燃癫痫模型.正常组未进行手术和电刺激致痫等处理;致痫组癫痫模型建立成功前后未注射任何药物;致痫+DPCPX组大鼠癫痫模型建立成功前1 h和成功后1 h尾部静脉注射0.3 mg/kg DPCPX;致痫+2-CADO组大鼠癫痫模型成功前1 h和成功后1 h尾部静脉注射0.6 mg/kg 2-CADO.采用苏木精-伊红染色法和TUNEL神经元凋亡测定法观察各组在癫痫模型建立成功后1 d、15 d、30 d时的海马CA3区组织学病理变化及神经元凋亡指数(AI)变化情况.结果 致痫组、致痫+DPCPX组、致痫+2-CADO组动物在点燃癫痫后1 d、15 d、30 d均出现不同程度的神经元细胞排列松散无规则,轮廓模糊,边缘欠清晰,胞核萎缩,胞浆空泡等神经元结构损害;相同时间点,致痫+DPCPX组的神经元结构损害程度较致痫组加重,致痫+2-CADO组较致痫组减轻.正常组在不同时间点的AI变化不明显(P>0.05),致痫组、致痫+DPCPX组、致痫+2-CADO组的AI随着癫痫发作时间的延长,AI逐渐增加(P<0.05);在相同时间点,致痫组、致痫+DPCPX组、致痫+2-CADO组的AI均明显高于正常组(P<0.05),致痫+DPCPX组的AI均明显高于致痫组(P<0.05);致痫+2-CADO组的AI明显低于致痫组和致痫+DPCPX组(P<0.05).结论 癫痫发作会引起神经元损伤和凋亡,其可能与腺苷A1 R活性降低,兴奋性氨基酸谷氨酸浓度增加有关,谷氨酸兴奋性增加可诱导神经元凋亡,这可能是癫痫发作后神经元损伤的机制之一.     

麻黄碱对缺氧缺血性脑损伤后新生大鼠脑组织Nogo-A和突触素表达的影响

背景：围产期窒息所致的新生儿缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain damage HIBD）是严重威胁新生儿生命和健康的常见病之一,而髓鞘相关蛋白Nogo-A等抑制神经生长的因子的存在,形成了一个不利于神经再生与修复的微环境。新近研究表明,Nogo-A主要存在于髓磷脂和少突胶质中,调控着脑缺血损伤后神经锥再生抑制的病理发展过程,在中枢神经系统再生修复中起着重要作用。然而对于Nogo-A在缺氧缺血性脑组织中表达的干预尚需深入研究。 目的：探讨髓鞘相关蛋白Nogo-A和突触素在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的表达特点及麻黄碱对其表达的影响。 设计,时间和单位：完全随机设计,实验于2008年8月至2009年3月在重庆医科大学附属儿童医院儿研所免疫组化实验室完成,为重庆市重点实验室。 材料：Sprague-Dawley (SD) 妊娠大鼠由重庆医科大学附属儿童医院实验动物中心提供,分笼单独喂养,提供水和实验室饲料。96只自然分娩新生鼠由母鼠喂养。 方法：健康SD新生大鼠96只,随机分为假手术组,HIBD组和麻黄碱治疗组,每组32只。于7日龄行左侧颈总动脉结扎,吸入8%O2+ 92%N2混合气体行缺氧处理2小时,制成HIBD模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎,不作缺氧处理。麻黄碱组于建模成功后腹腔注射麻黄碱1.5 mg•kg-1,假手术组和HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水。上述各组干预均为每日1次,共7日。 主要观察指标：术后1、2、3、4周,各组大鼠均随机抽取8只,于麻醉下处死取脑,HE染色观察脑组织病理变化,免疫组化法检测髓鞘相关蛋白Nogo-A和突触素表达情况。 结果：假手术组各时间点大鼠脑组织Nogo-A表达无明显变化,差异无统计学意义( P > 0.05);与假手术组相比,HIBD组术后各时间点脑组织Nogo-A表达均增高,差异有统计学意义( P < 0.01);与HIBD组相比,麻黄碱治疗组第2,3,4周Nogo-A表达明显减少,差异有统计学意义( P < 0.01)。与假手术组相比,HIBD组术后各时间点脑组织突触素表达均减少,差异有统计学意义( P < 0.01);与HIBD组相比,麻黄碱治疗组第1,2,3周突触素表达明显增加,差异有统计学意义( P < 0.01)。 结论：新生大鼠HIBD后脑组织Nogo-A表达增高,可能是中枢神经损伤后再生障碍的重要因素之一。麻黄碱可下调脑组HIBD后Nogo-A 的表达,促进突触素的表达,从而有利于新生动物HIBD后神经轴突的再生。     

儿童多动综合征患者的血浆生长抑素、β-内啡肽含量的初步研究

应用放射免疫分析法对３３例儿童多动综合征患者的血浆生长抑索（ＳＳ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）含量进行测定。结果：病例组血浆ＳＳ含量（８．７２±１．４４ｎｇ／Ｌ）明显低于正常同龄对照组（ｎ＝３２，ＳＳ＝３６．９５±４．３１ｎｇ／Ｌ），血浆β－ＥＰ含量在两组间无明显差异。表明低血浆ＳＳ含量可能与儿童多动综合征的发病有关。