三种内生真菌对铁皮石斛、金线莲生长影响的研究

目的：研究开唇兰小菇，石斛小菇，兰小菇等3种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛，金线莲生长的促进作用。方法：采用植物无菌原球茎及试管苗与真菌进行双重培养，观察原球茎增殖及苗的生长情况，结果：接种3种内生真菌后，铁皮石斛苗的生长量高于对照3－5倍，石斛小菇，兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用（P＜0．05），接种3种真菌的金线莲苗，侧芽及侧根数均显著高于对照.。结论：3种小菇属内生真菌能够促进铁皮石斛幼苗生长，促进金线莲侧芽及侧根的萌发，对铁皮石斛，金线莲的成功栽培具有实际应用价值。     

离体培养时真菌对铁皮石斛和金钗石斛生长的影响

目的研究离体培养时瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)真菌AR-18对铁皮石斛和金钗石斛生长的影响.方法采用琼脂作支持物,考察真菌对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的影响;采用蛭石作支持物,考察真菌和营养液对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的影响.结果在琼脂培养基上,真菌AR-18对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的增加均没有显著性影响(P＞0.05).在蛭石基质上,真菌AR-18对金钗石斛鲜重的增加具有显著促进作用(P＜0.05),接菌的金钗石斛的鲜重较不接菌提高16%;真菌AR-18对金钗石斛干重的增加具有极显著促进作用(P＜0.01),接菌的金钗石斛的干重较不接菌提高21%.在蛭石基质上,真菌AR-18配合使用蒸馏水极显著促进了金钗石斛鲜重的增加(P＜0.01),接菌的金钗石斛的鲜重较不接菌提高47%,真菌AR-18配合使用营养液对金钗石斛鲜重的增加没有显著性影响(P＞0.05);真菌配合使用营养液或配合使用蒸馏水对金钗石斛干物质的积累没有显著性影响(P＞0.05),所以最佳处理组合为真菌AR-18配合使用蒸馏水.在蛭石基质上,真菌AR-18和营养液对铁皮石斛的鲜重和干重的增加没有显著性影响(P＞0.05).结论在离体培养条件下选择合适的基质和控制真菌的适度生长是建立稳定的共生平衡系统和促进金钗石斛生长的重要条件.在人工栽培金钗石斛的过程中,使用真菌AR-18作为菌肥,有可能取得较好的效果.     

珍稀中草药金线莲的RAPD研究

为了鉴别金线莲的品种,探索同属植物之间的亲缘关系及同种植物不同产地的遗传变异,并制定正品金线莲的DNA指纹图谱,采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii(Wall．)．Lindl．、台湾开唇兰A.formosanus Hay．进行了鉴定,结果选择的7个引物对3个品种共扩增出98个位点,其中3个引物为高特异性引物。结论 RAPD技术不仅能鉴别种间差异,而且能揭示同种不同产地植物的遗传变异。     

稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

铁皮石斛通过GLUT4和HK2对肺癌及肺癌细胞糖酵解的影响机制

目的 研究铁皮石斛通过葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和己糖激酶2(HK2)对肺癌及肺癌细胞糖酵解的影响机制。方法 采用MTT法检测铁皮石斛提取物对人肺癌细胞A549活力的影响,并分析A549细胞中葡萄糖消耗量和乳酸生成量;建立LLC肺癌细胞荷瘤小鼠模型,设立对照组、灌胃铁皮石斛提取物低剂量组及高剂量组,观察各组小鼠体重变化和肿瘤生长,通过免疫印迹法(Western blot)检测铁皮石斛提取物对A549细胞、肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织中GLUT4、HK2和PKM2蛋白表达水平的影响。结果 与空白对照组相比,25.0～800.0 mg/L铁皮石斛提取物作用于A549细胞的活力呈剂量依赖性降低(P<0.05),且能够明显降低A549细胞中葡萄糖消耗量和乳酸生成量(P<0.05);肺癌荷瘤小鼠体内实验结果表明,200.0 mg/kg和400.0 mg/kg铁皮石斛提取物能够抑制肺癌荷瘤小鼠体内肿瘤生长,并且不引起小鼠体重变化,表现出良好的药物安全性;铁皮石斛提取物能够下调A549细胞和肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织中GLUT4和HK2蛋白表达,对PKM2表达影响不明显。结论 铁皮石斛提取物治疗肿...     

内生真菌对离体培养的福建金线莲生长的影响

目的研究离体培养时瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)真菌AR-15和AR-18对福建金线莲生长的影响。方法采用琼脂作支持物,考察真菌对福建金线莲鲜质量和增高的影响;采用蛭石作支持物,考察真菌和营养液对金线莲鲜质量和增高的影响。结果在琼脂培养基上,与对照相比,接菌AR-15和AR-18可使金线莲苗的增高分别提高97%和81.5%(P<0.01)。在蛭石基质上,真菌AR-15和蒸馏水组合极显著促进金线莲的增质量和苗的增高(P<0.01),分别是不接菌的3.26倍和1.51倍;真菌AR-15和营养液组合极显著促进金线莲增质量1.41倍(P<0.01),显著促进金线莲增高1.17倍(P<0.05)。真菌AR-18和蒸馏水组合极显著促进金线莲鲜质量的增加和苗的增高(P<0.01),分别是不接菌的3.86倍和1.45倍;真菌AR-18和营养液组合极显著促进金线莲增质量1.96倍(P<0.01),显著促进金线莲增高1.25倍(P<0.05)。结论在离体培养条件下,真菌AR-15和AR-18可促进福建金线莲的生长;在人工栽培金线莲的过程中,使用真菌AR-15和AR-18为菌肥,有可能取得较好的效果。     

金线莲提取物对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

金线莲（Herba Anoectochili）为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰（Anoectochilus roxburghii（Wall．）lindl．）的全草，在民间素有“药王”、“神草”、“乌人参”等美称，其性甘、平，具有清热凉血、固肾平肝、祛风利湿等功效，常被应用于肝炎、肾炎、肺炎及小儿急惊风等症，是一味名贵珍稀中草药。由于野生金线莲药源稀少，曾一度限制了对金线莲的研究开发。     

白芨种子萌发和幼苗生长与紫萁小菇等4种真菌的关系

本文报道白芨种子荫发特点及紫萁小菇等4种真菌在其萌发中的作用。实验结果表明:白芨种子在常规条件下能正常发芽,为兰科植物中易萌发的种子类型。种子伴紫萁小菇等4种真菌播种,真菌对原球茎的子叶分化、生长及假根形成均有显著促进作用。用紫萁小菇培养物的醇、水粗提液及二者混合液播种种子,混合液有利于种子萌发;醇提液可加快原球茎子叶的分化与生长,且效果显著。     

金线莲乙酸乙酯提取物降血糖作用的研究

目的 探讨金线莲乙酸乙酯提取物的降血糖作用及其机制.方法 将正常和糖尿病小鼠随机分为5组,14 d后,测定各实验组小鼠肝糖原、血糖等指标.结果 金线莲乙酸乙酯提取物能显著降低糖尿病小鼠的血糖,使糖尿病小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,丙二醛(MDA)、三酰甘油 (TG)、总胆固醇(TC)的含量显著降低,小鼠肝糖原含量明显增加.结论 金线莲乙酸乙酯提取物有降血糖作用,其降糖机制可能与其调节血脂水平、增加外周组织对葡萄糖的利用及提高糖尿病小鼠的抗氧化能力有关.     

台湾金线莲丛生芽诱导和组培研究

台湾金线莲（Anoectoehilus formosanus）为兰科开唇兰属植物，又称“宝石兰”，分布于中国、日本、斯里兰卡等国，是一种珍贵的药用植物。本文研究了濒危植物台湾金线莲（Anoeetoehilus formosanus）种子播种材料丛生芽诱导的途径，初步建立了台湾金线莲试管苗的组培快繁流程。研究结果表明，培养基最佳pH为5．1～5．4。丛生芽诱导的培养基为1／2MS＋6-BA5．0（mg／L）＋NAA1.0，继代培养采用液体培养基1／2MS附加6-BA2．0（mg／L），振荡培养2个月，可使其生长旺盛。添加0．2％活性碳和150g／L香蕉汁对其发根具有良好的效果。     

竹黄菌发酵液化学成分研究

目的研究竹黄菌发酵液的化学成分。方法从竹黄菌发酵液的乙酸乙酯萃取部分运用色谱方法分离纯化化合物,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的化学结构。结果从竹黄发酵液的乙酸乙酯萃取部分,分离得到6个化合物,分别为：棕榈酸甲酯（1）;棕榈酸（2）;5α,8α-epidiory-（22E,24R）-ergosta-6,22-dien-3β-ol（3）;D-阿洛醇（4）;胡萝卜苷（5）;4-羟基-苯甲酸（6）。结论所有化合物均为首次从该真菌中分离得到。     

半夏内生菌SY-Z5不同发酵方式代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性研究

[目的]通过固体和液体两种方式对实验室保存的半夏内生菌SY-Z5进行发酵,分别提取代谢产物,初步研究其抑菌和抗肿瘤活性。[方法]将固体培养和摇床发酵的产物预处理后,分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,通过抑菌实验和抗肿瘤实验初步检测其提取物活性。[结果]SY-Z5两种发酵方式的代谢产物均具有抑菌和抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯粗提物效果最明显,固体发酵效果好于液体发酵。[结论]内生菌SY-Z5代谢产物具有抑菌和抗肿瘤活性,活性代谢产物主要存在于乙酸乙酯相中,为进一步分离抑菌和抗肿瘤活性物质和新药开发筛选前体化合物奠定基础。     

银杏叶发酵与未发酵提取物的抑菌活性研究

目的 对比银杏叶发酵与未发酵萃取物提取物的抑菌活性.方法 利用冠突散囊菌在银杏叶培养基中发酵培养,将得到的发酵液以及未发酵的银杏叶水提物依次进行石油醚、乙酸乙酯的萃取,选取各部位提取物进行对指示菌种（枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌）进行药敏纸片法抑菌试验.选取未发酵部分乙酸乙酯提取物进行最小抑菌浓度的测定.结果 银杏叶未发酵乙酸乙酯提取物对供试菌的抑制作用较显著,而且抑菌活性与样品浓度不成正相关.未发酵乙酸乙酯提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为：2.5、2.5、5.0、10.0 g/mL.结论 银杏叶发酵与未发酵的乙酸乙酯提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌均有一定的抑制作用,而未发酵作用较明显.石油醚提取物在发酵前后抑菌活性变化不大.说明银杏叶中主要的抑菌成分存在于乙酸乙酯极性段,发酵过程中,由于微生物转化,造成银杏叶中抑菌活性成分减少.     

铁皮石斛与金钗石斛化学成分的比较

目的比较铁皮石斛和金钗石斛在化学成分上的差别。方法用高效液相色谱-质谱联用(HPLC/MS)法,比较铁皮石斛和金钗石斛氨性氯仿提取物中各成分的色谱峰相对积分面积和含量。结果铁皮石斛和金钗石斛中电喷雾电离质谱质量数为偶数的色谱峰的相对积分面积和分别为2·34%和41·87%。铁皮石斛和金钗石斛中共有的25个相同的化学成分,相对积分面积和分别为97·12%和50·09%,其中有23个成分在铁皮石斛中的含量高于金钗石斛。结论铁皮石斛和金钗石斛在生物碱类成分的数量和含量上有很大差别,但就所含的相同化学成分而言,铁皮石斛的质量好于金钗石斛。     

铁皮石斛原球茎液体悬浮培养的研究

目的研究铁皮石斛Dendrobiumcandidum原球茎液体悬浮培养的可行性以及接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。方法利用完全随机实验设计和正交试验设计研究不同基本培养基、接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。结果无论鲜重还是干重,铁皮石斛原球茎在液体培养基上均极显著好于固体培养基(P<0.001)。不同基本培养基对铁皮石斛原球茎生长影响的研究表明,培养天数为30d时,对于鲜重67-V极显著好于B5(P<0.01),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS显著好于MS(P<0.05);对于干重67-V与B5没有显著性差异(P>0.05),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS极显著好于MS(P<0.01)。接种量和培养液体积对原球茎生长影响的研究表明,接种量影响最大,体积其次,互作最小,若不考虑互作,对于鲜重和干重,最佳处理为接种量6.194g/瓶 培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶;对于干重,若考虑互作,接种量为6.194g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为3.102g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为1.693g/瓶时,应选150mL/瓶或50mL/瓶。结论液体悬浮培养对铁皮石斛原球茎的生长有利,获得了最佳基本培养基、接种量和培养液体积的最佳搭配方案,表明通过液体悬浮培养生产铁皮石斛原球茎具有较好的开发应用前景。     

藏药波棱瓜子的血清药物化学初步研究

目的：对波棱瓜子乙酸乙酯提取物进行血清药物化学研究,为筛选确定波棱瓜子的药效成分奠定基础。方法：建立波棱瓜子乙酸乙酯提取物及大鼠含药血浆、空白血浆的HPLC指纹图谱分析方法;通过比较波棱瓜子乙酸乙酯提取物、含药血浆及空白血浆指纹图谱,确定其血浆移行成分。结果：在含药血浆中发现了5个移行成分,其中1个为原型成分,3个是代谢产物,另外一个在其提取物、空白血浆和含药血浆中均有出现,有待进一步研究。结论：血中移行成分和代谢产物可能成为波棱瓜子的体内直接作用物质,对其进行更深入的研究有助于探索其药效物质基础及作用机制。     

褐皮马勃发酵液的化学成分

目的研究褐皮马勃的化学成分。方法从褐皮马勃发酵液的乙酸乙酯萃取部分运用色谱方法分离纯化化合物,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的化学结构。结果从褐皮马勃的乙酸乙酯萃取部分共分离得到13个化合物,分别为：麦角甾-7,22-二烯-3β-醇,麦角甾-4,6,8,22-四烯-3-酮,（22E,24R）-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇,胡萝卜苷,麦角甾-7,22-二烯-3-酮,4-酮戊酸,IlludinsⅠ,2-（4-羟基苯基）乙酸乙酯,D-蒜糖醇,对羟基苯甲酸,5-羟甲基-2-呋喃甲醛,甘油的亚油酸三酯,硬脂酸。结论褐皮马勃与《中华人民共和国药典》收载的中药脱皮马勃在化学成分上存在较大差异。     

槲寄生不同溶剂提取物对血小板活化因子的拮抗作用观察

目的：观察中药槲寄生不同溶剂提取物对血小板活化因子(PAF)的拮抗作用。方法：应用血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集，以槲寄生的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物分别给兔灌胃。观察灌胃前，灌胃后4h和8h各提取物对兔血小板聚集功能的影响。结果与结论：槲寄生对PAF诱导的血小板聚集有抑制作用。槲寄生水提取物及乙酸乙酯提取物均有拮抗PAF的作用。     

骆驼蓬醇提取物对5种植物病原菌作用的初探

骆驼蓬地上部分的醇提物经萃取分为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水5个极性不同的部分,采用抑制菌丝生长法研究以上5部分对5种常见植物病原菌的抑制作用。结果表明:石油醚部分和正丁醇部分对所测试病原菌呈抑制作用,在供试浓度为相当于原材料0.05g/mL的条件下石油醚部分的抑制率高于其它萃取物相应的抑制率,其中对苹果干腐病菌和番茄早疫病菌的抑制效果显著抑制率分别为48.10%和48.97%;水部分几乎无抑制作用,但有一定的促进作用。     

西南白头翁不同提取物的抗肿瘤作用研究

目的探讨西南白头翁不同提取部位的抗肿瘤活性。方法溶剂法提取分离西南白头翁得乙酸乙酯和正丁醇提取物,用MTT法检测不同提取物对细胞生长抑制作用,求得IC50值;用流式细胞术（FCM）比较不同提取物对细胞凋亡的影响。结果乙酸乙酯和正丁醇提取部位均有一定的抑制细胞生长的作用,并有一定的剂量依赖关系;提取物浓度在0．05mg／ml时有促进细胞凋亡的作用,对不同细胞株的结果并不一致。结论西南白头翁正丁醇提取部位作用强,乙酸乙酯部位活动性较弱;诱导肿瘤细胞死亡的主要途径是凋亡。