变应性鼻炎肾阳虚复合豚鼠模型筛选与评价

目的:在卵清蛋白致敏变应性鼻炎豚鼠模型基础上,采用糖皮质激素、羟基脲、腺嘌呤3种不同阳虚诱导剂诱发,建立变应性鼻炎肾阳虚复合模型,以筛选建立理想而稳定的变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR)病证结合动物模型。方法:采用卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导建立变应性鼻炎豚鼠模型,同时给予糖皮质激素、羟基脲或腺嘌呤建立肾阳虚复合模型,观察动物宏观体征及死亡情况、局部过敏症状,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)法测血清中s Ig E和组胺含量,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察肾和睾丸组织形态学改变。结果:糖皮质激素、羟基脲和腺嘌呤3种致肾阳虚药物均可使动物表现出肾阳虚症状及体征、体重下降并具有一定的致死率。与空白组相比,糖皮质激素对肾脏和睾丸组织形态影响较小,羟基脲和腺嘌呤对肾脏和睾丸等形态结构影响较大。结论:对比3个肾阳虚复合模型,羟基脲复合组模型比激素复合组和腺嘌呤复合组模型更稳定,且死亡率较低,较为理想。不过变应性鼻炎病证结合动物模型的指标评价标准尚待进一步研究。     

豚鼠肾阳虚变应性鼻炎模型的建立

目的建立一种新的肾阳虚变应性鼻炎动物模型的方法.方法将45只Hartley豚鼠,随机分为4组,即羟基脲 卵清蛋白组、强的松龙 卵清蛋白组、羟基脲 卵清蛋白 肾气汤组、正常对照组.观察各组豚鼠的行为表现,测定试验前后的体重,给药结束后行组胺刺激试验,处死豚鼠作鼻中隔黏膜病理切片观察.结果羟基脲 卵清蛋白组模型同时具有变应性鼻炎(AR)和肾阳虚的特征,该模型比强的松 卵清蛋白组致敏效果好,成模时间短.结论肾阳虚与AR有一定的相关性.用羟基脲 卵清蛋白制作肾阳虚变应性鼻炎豚鼠模型是一种新的可行的方法,为进一步研究变应性鼻炎提供新的途径.     

固本祛风汤对变应性鼻炎豚鼠模型行为学的影响

目的:探讨中药固本祛风汤治疗变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的疗效以及对其行为学的影响.方法:将90只豚鼠随机分成正常对照组、模型组、辛芩颗粒组和中药治疗组,以卵清蛋白致敏激发造成变应性鼻炎豚鼠模型,分别给予中药和辛芩颗粒,观察各组动物的行为学改变.结果:中药治疗组症状显著低于模型组,其差别有统计学意义(P＜0.05).结论:固本祛风汤可明显改善变应性鼻炎豚鼠模型的症状,从而发挥对AR的治疗作用.     

寒、热证豚鼠变应性鼻炎细胞功能及形态学观察

目的：研究寒证及热证豚鼠变应性鼻炎（AR）细胞功能和形态学特征。方法：以寒性、热性中药分别给予豚鼠造成寒证、热证模型，然后以甲苯二异氰酸酯和盐酸萘甲唑啉点鼻，分别造成AR和鼻炎模型，观察其细胞功能、数量及电镜下超微形态学特点。结果：AR模型豚鼠血嗜碱性粒细胞（BC）脱颗粒指数高于鼻炎模型豚鼠；其中寒证AR豚鼠又高于热证AR豚鼠（P＜0．05）。寒证AR豚鼠鼻粘膜肥大细胞（MC）及嗜酸性粒细胞（EC）数量多，浸润广泛，颗粒包膜不清，密度不均，颗粒内见空泡、融合及管道；而热证AR豚鼠及对照组豚鼠MC及EC数量少，无浸润，颗粒包膜清，密度均一，无颗粒空泡、融合及管道。结论：寒证AR豚鼠BC、MC、EC呈明显活化状态。     

苓甘五味姜辛汤加味对变应性鼻炎豚鼠IL-4和IFN-γ含量的影响

目的：观察苓甘五味姜辛汤加味对变应性鼻炎（AR）豚鼠血浆IL-4含量和IFN-γ含量影响,揭示苓甘五味姜辛汤加味治疗AR的部分现代生物学基础。方法：将40只Wistar雄性豚鼠按体重随机分成生理盐水对照组、变应性鼻炎模型对照组、苓甘五味姜辛汤加味治疗组、息斯敏治疗组,每组10只。采用卵蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,观察苓甘五味姜辛汤加味治疗后血浆IL-4含量和IFN-γ含量的变化,结果进行统计学分析。结果：模型组血浆IL-4含量和IFN-γ含量明显升高,苓甘五味姜辛汤加味治疗组血浆IL-4含量和IFN-γ含量明显降低。苓甘五味姜辛汤加味治疗组优于息斯敏治疗组。结论：苓甘五味姜辛汤加味治疗AR的作用机制之一可能是通过降低IL-4含量和提高IFN-γ含量,从而减轻鼻黏膜变应性炎症,减轻AR的症状或减缓AR的发作,以达到治疗AR的目的。     

摄涕止鼽汤对实验性变应性鼻炎IL-5、ECP含量的影响

目的:探讨摄涕止鼽汤治疗变应性鼻炎(AR)的疗效机制。方法:在卵清蛋白致敏复制AR大鼠模型的基础上,应用氢化考的松及恐吓大鼠造成肾阳虚AR模型,予以摄涕止鼽汤治疗,观察药物对肾阳虚AR模型动物血清IL-5和嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)表达的影响。结果:治疗各组模型动物血清中IL-5、ECP均降低,且高剂量组与阳性对照组相当。结论:摄涕止鼽汤治疗变应性鼻炎的作用机制,可能是通过调节细胞因子的表达实现的。     

固本祛风汤对变应性鼻炎豚鼠模型组织病理学的影响

目的探讨固本祛风汤治疗变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的疗效以及对其组织病理学的影响。方法将90只豚鼠随机分成正常对照组、模型组、辛芩颗粒组和中药治疗组,以卵清蛋白致敏激发造成变应性鼻炎豚鼠模型,分别给予中药和辛芩颗粒,治疗后进行组织病理学观察。结果中药治疗组鼻黏膜炎性细胞浸润及水肿、充血程度明显低于模型组(P<0.05)。结论固本祛风汤可显著减轻AR豚鼠模型鼻黏膜的炎症反应,从而发挥对AR的治疗作用。     

寒、热证豚鼠变应性鼻炎糖皮质激素受体活性研究

目的：研究寒、热证豚鼠变应性鼻炎糖皮质激素受体(GCR)活性。方法：以寒、热性中药灌胃造成豚鼠寒、热证证候，再以10％甲苯二异氰酸酯的橄榄油溶液点鼻造成变应性鼻炎模型，观察变应性鼻炎模型豚鼠外周血白细胞GCR的活性。结果：外周血白细胞GCR活性以寒证变应性鼻炎豚鼠最低，热证组次之，正常对照组较高。结论：外周血白细胞GCR活性在寒证变应性鼻炎呈低下状态。     

温肾补阳法对肾阳虚变应性鼻炎大鼠模型血清Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的研究肾阳虚因素对Th1/Th2细胞因子平衡的影响,以及温补肾阳法对Th1/Th2细胞因子平衡调控作用,为变应性鼻炎的中医病因学说和治疗方法提供科学依据。方法在腺嘌呤致肾阳虚病理模型的基础上,用卵清蛋白为过敏原对大鼠致敏,建立肾阳虚变应性鼻炎大鼠模型。以温补肾阳代表方剂金匮肾气丸灌胃,观察其行为学差异,进行鼻腔分泌物涂片及鼻腔黏膜组织学检查;用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清中Th1细胞因子IFN-γ、IL-2和Th2细胞因子IL-4、IL-5进行检测。结果变应性鼻炎组和肾阳虚变应性鼻炎组行为学积分明显高于温补肾阳组和正常对照组,差异有显著性(P<0.05);温补肾阳组鼻黏膜炎性反应明显轻于变应性鼻炎组、肾阳虚变应性鼻炎组;温补肾阳组IFN-γ、IL-2水平明显高于变应性鼻炎组和肾阳虚变应性鼻炎组,差异有显著性(P<0.05),与正常组比较无显著性差异;温补肾阳组IL-4、IL-5表达水平明显低于变应性鼻炎组和肾阳虚变应性鼻炎组,差异有显著性意义(P<0.05),与正常组比较无显著性差异。结论温肾补阳法能调节Th1和Th2细胞因子的表达,纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网,因而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

实验性变应性鼻炎与血清元素锌铜钙及细胞因子的相关性研究

目的通过建立肺气虚变应性鼻炎(AR)病证复合动物模型,分别检测动物体内血清元素及细胞因子水平,观察细胞因子网络Th1/Th2失衡对于AR及肺气虚证的影响,及血清元素在体内的含量变化与细胞因子的相关性。方法采用烟熏法及TDI鼻腔激发法,建立豚鼠肺气虚变应性鼻炎病证结合模型,运用原子吸收分光光度法检测致敏豚鼠血清Zn,Cu,Ca含量,运用双抗体夹心ELISA法检测致敏豚鼠血清IFN-r,IL-4水平,并对元素值和细胞因子水平之间进行相关分析。结果肺气虚变应性鼻炎豚鼠血清IL-4升高,IFN-r下降,IFN-r/IL-4比值降低,与正常对照组比较,差异显著(P<0.01),并见血清Zn值升高(P<0.05)。相关分析示Zn与IL-4呈正相关,与IFN-r/IL-4比值呈负相关,Ca与IL-4呈负相关,与IFN-r/IL-4比值呈正相关。结论AR疾病及肺气虚证均与Th1/Th2失衡有关,认为变应性鼻炎(AR)是以鼻腔黏膜Th2免疫反应为主的变应性炎症反应,肺气虚证是细胞因子网络自稳态动态平衡破坏的结果;在AR疾病中,Zn,Ca元素参与影响Th1/Th2平衡调节机制,提示可通过血清元素的补损,达到治疗AR的目的。     

脾虚型AR大鼠鼻黏膜白介素mRNA的活性表达

目的：观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-2,4,6（IL-2,4,6,）mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性。方法以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型（AR模型组）和脾气虚变应性鼻炎模型（脾虚AR模型组）,分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-2,4,6,mR-NA表达水平,进行组间比较。结果IL-2mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-2mRNA的表达明显降低。IL-4mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-4mRNA的表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。IL-6mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-6mRNA的表达明显升高,但AR模型组升高更明显。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-2表达明显降低,IL-4,6表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。说明IL-2,IL-4,IL-6活性表达水平可能是脾虚型变应性鼻炎的一个重要因素。     

补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎的治疗作用

目的 探讨补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的影响。方法 将花色豚鼠随机分为AR(A)组、AR 脾气虚(B)组、补中益气汤(C)组和空白对照(D)组。各组用卵清蛋白(D组用生理盐水代替)行基础致敏，结束后行PCA试验，确定卵清蛋白IgE抗体效价升高后，以卵清蛋白滴入鼻腔行局部致敏(D组滴入生理盐水)，C组同时给予灌胃补中益气汤(5．6g／kg)，观察豚鼠鼻部症状的变化。实验结束时处死豚鼠，行鼻分泌物涂片子找嗜酸细胞(EOS)及取鼻粘膜病理切片子找嗜酸细胞与肥大细胞。结果 A、B、C组在局部致敏的前期，均出现了抓鼻、打喷嚏、流清涕等典型的鼻部症状，至后期，C组鼻部症状减轻；C、D组鼻分泌物及鼻粘膜EOS阳性率均低于A、B组，而C、D组之间别无显著性差异；鼻粘膜肥大细胞计数C组亦低于A、B组。结论 补中益气汤能抑制脾虚AR豚鼠鼻粘膜嗜酸细胞及肥大细胞的浸润，从而改善鼻部症状。     

细辛挥发油对过敏性鼻炎豚鼠鼻黏膜和组胺影响的初步研究

目的:探讨细辛挥发油对过敏性鼻炎(AR)豚鼠行为学指标、鼻黏膜病理形态和血液组胺含量的影响。方法:将FMMU豚鼠40只按体重随机分为生理盐水对照组、AR模型组、辛芩颗粒组、细辛挥发油组,每组10只。采用鸡卵清蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,对照组和模型组给予生理盐水,辛芩颗粒组给予辛芩颗粒4.65g·kg-1,细辛挥发油组给予细辛挥发油按生药量计0.45 g·kg-1,观察豚鼠行为学指标和鼻黏膜病理形态的变化,测定血液组胺含量。结果:细辛挥发油组鼻痒、喷嚏、清涕等行为学指标及鼻黏膜炎症程度均有明显改善,血液组胺含量明显降低。结论:细辛挥发油能有效缓解过敏性鼻炎的局部症状,降低血液组胺含量,改善鼻黏膜炎症的局部浸润,达到治疗过敏性鼻炎的目的。     

制附子总碱的急性毒性及对过敏性鼻炎豚鼠鼻黏膜和组胺的影响

目的:探讨制附子总碱对过敏性鼻炎(AR)豚鼠行为学指标、鼻黏膜病理形态和血液组胺含量的影响,同时测定制附子总碱的半数致死量(LD50),对其临床应用进行安全性评价。方法:40只FMMU豚鼠按体质量随机分为正常对照组、AR模型组、辛芩颗粒组、制附子总碱组,每组10只。采用卵清蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,正常对照组和AR模型组给予生理盐水,辛芩颗粒组每天给予辛芩颗粒4.65g/kg,制附子总碱组每天给予总碱提取物按生药量计1.13g/kg,观察豚鼠行为学指标和鼻黏膜病理形态的变化,测定血液组胺含量;对制附子总碱进行小鼠急性毒性实验。结果:制附子总碱组鼻痒、喷嚏、清涕等行为学指标及鼻黏膜炎症程度均有明显改善,血液组胺含量明显降低;制附子总碱的LD50为56.3g/kg制附子。结论:制附子总碱在临床用药方面是安全的;制附子总碱能有效缓解过敏性鼻炎的症状,降低血液组胺含量,改善鼻黏膜炎症的局部浸润,达到治疗过敏性鼻炎的目的。     

脾气虚变应性鼻炎大鼠鼻中隔黏膜P物质及雌激素受体阳性细胞的表达

目的观察鼻中隔黏膜P物质(SP)、雌激素受体阳性(Estron Receptor Positive,ER+)细胞在变应性鼻炎大鼠及脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表达变化,以研究脾气虚证与变应性鼻炎的相关性。方法以卵清蛋白为变应原建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组),饮食不节加劳倦过度综合因素再加上卵清蛋白建立大鼠脾气虚变应性鼻炎模型(脾气虚AR组)。取该2组和健康大鼠血清行组胺检测,并取鼻中隔黏膜行常规HE染色,采用免疫组化法检测3组动物鼻中隔黏膜SP、ER+细胞表达。结果SP、ER+在2组动物中的表达均增高,与AR组相比,脾气虚AR组鼻中隔黏膜SP表达有进一步增强的趋势,但2组间相比较无显著性差异;鼻黏膜ER+细胞数目没有明显变化。结论SP的表达增加可能是脾气虚型变应性鼻炎病情加重的一个重要原因,而鼻黏膜ER+可能与脾气虚变应性鼻炎大鼠病情加重没有明显关系。