免疫比浊法D二聚体测定在全自动生化分析仪上的使用

目的对胶乳增强免疫比浊法D二聚体试剂定量测定血浆D二聚体的方法进行临床实验评价。方法实验评价包括精密度、线性测定、前带试验、相关性、回收实验以及干扰实验。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清D二聚体批内精密度测定变异系数（CV）为1.8%-3.9%,批间精密度测定CV为3.6%-4.5%,回收率在95.2%-99.3%。线性测定良好,可达60μg/mL,回归方程为Y=1.007X-0.2536,不同浓度的标准品检测相关性r^2=0.9997,Y=1.0048X-0.045 4。对胆红素、血红蛋白、三酰甘油、纤维蛋白原及相关联物质可溶性纤维蛋白、D单体均具有很好的抗干扰能力。结论利用胶乳增强免疫比浊法在全自动生化仪上测定D二聚体的结果符合临床使用的要求。     

胶乳增强免疫比浊法两种定量试剂检测D-二聚体的评价

目的应用胶乳增强免疫比浊法对两种定量试剂(西门子,九强)检测D-二聚体(D-D)的准确度、精密度及检测结果的一致性进行评价。方法收集新鲜凝血标本50份,应用两种不同试剂在sysmex CA-7000全自动凝血分析仪进行D-二聚体检测,比较其检测结果的一致性,通过对质控品的测定来比较两种试剂的精密度和准确度。结果准确度通过检测自身质控品和对方质控品进行评价,西门子试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.0%和-8.7%,九强试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.2%和26%;精密度通过20次室内质控结果进行评价,西门子试剂的检测均值为4.9±0.19 mg/L,CV为3.88%,差异无统计学意义(t=0.117,P>0.05),九强试剂检测的均值为4.5±0.17 mg/L,CV为3.69%,差异无统计学意义(t=0.132,P>0.05);检测结果一致性的对比显示:在D-D<0.5　mg/L时,两种定量试剂差异无统计学意义(P>0.05);在0.5　mg/L0.05);但在D-D>5　mg/L时,九强试剂显著高于西门子试剂,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论两种试剂的精密度良好,准确度在检测对方质控品时结果不令人满意,九强试剂在D-D>5 mg/L时的准确度尚需进一步论证。     

胶乳增强免疫比浊法在甲胎蛋白测定的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法(LEIA法)测定甲胎蛋白(AFP)水平,并进行方法学评价。方法用LEIA法测定178例血清的AFP水平,同时采用化学发光免疫分析仪法(CLIA法)对AFP水平进行测定。结果 LEIA法测定AFP的灵敏度为0.65 ng/mL,低、中、高水平的批内CV分别为0.98%、0.92%、0.89%;批间CV分别为1.63%、1.53%、1.45%。回收率96.3%~102.9%。结论 LEIA法是测定AFP较好的方法,适合普及推广。     

透射免疫比浊法定量测定血清中D—二聚体的实验评价

目的 对透射免疫比浊法定量测定血清D—二聚体的方法进行临床实验评价。方法 实验评价包括精密度、线性测定、回收实验以及干扰实验。结果 该D—二聚体定量测定试剂在精密度测定CV％小于5％。回收率在95～99％。线性测定良好，可达16μg／ml，回归方程为Y=1．0133X—0．0076，相关系数r=0．9997。对胆红素、血红蛋白、甘油三酯均具有很好的抗干扰能力。结论 该试剂符合临床使用的要求。     

胶乳增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白的方法学评价

目的应用美国,旌床实验室标准化委员会的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc进行方法学评价。方法依据标准化文件要求,分析胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc的精密度、线性范围、回收率和干扰因素,并考察其与高效液相色谱法的相关性。结果该法总变异系数为3．19％（低值）,3．53％（中值）和4．11％（高值）。平均回收率100．2％,在4．4％～13．5％范围内线性良好。胆红素在884μmol／L,三酰甘油在13．5mmol／L时对测定存在干扰。试剂和样本在低温保存时可稳定10天。该法与HPLC法结果明显相关,r=0．994,但整体略高于HPLC法的结果。结论胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc方法符合NCCLS标准要求,适应临床需要。临床实验室在建立或引进新的检验项目时需要进行系统的方法学评价以验证检测的有效性和完整性。     

免疫比浊法检测血浆D-二聚体在早期DIC诊断中的意义

目的探讨免疫比浊法检测血浆D-二聚体水平对早期DIC诊断的临床意义。方法采用免疫比浊法检测30例DIC患者、20例可疑DIC患者及140例非DIC患者血浆中D-二聚体的水平。结果DIC患者血浆D-二聚体水平明显高于正常对照组(P<0.01);经动态观察20例可疑DIC组中有8例发展为典型DIG,其血浆D-二聚体水平随病程的进展而逐渐增高,随病情好转逐渐降低;未发展为DIC者其血浆D-二聚体持续保持相对较低水平。结论血浆D-二聚体水平作为DIC早期诊断指标具有较高的实用价值。     

应用免疫比浊法在离心式分析仪上测定转铁蛋白的实验探讨

本文建立了在ENCORE离心式分析仪上按仪器原编程序用国产自配试剂测定Tf的免疫比浊方法。随后应用于IgG、IgA、IgM等测定亦获得满意结果。作者发现,除市售抗血清的纯度和效价直接影响测定灵敏度。必要时须作纯化处理外,缓冲稀释液以含有PEG 6000 48g/L,NaCl 9g/L的0.01mol/L pH7.2PB较为适宜。抗血清应用液的稀释度应按每批抗血清的实际效价滴定结果来选定。用本法测定Tf的线性范围至少可达9.0g/L,回收率为101.3%。批间CV<5%。与国外同类进口试剂平行检测40份不同Tf含量(0.467～7.75g/L)标本结果无差异(t=1.129,P>0.05)相关良好(r=0.998,回归方程(?)=0.995x 0.044)。     

免疫比浊法定量检测D-二聚体的实验程序优化及实际价值

目的优化实验程序以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围。方法分别以未稀释样本及预稀释样本方式在CA 1500全自动血凝仪上建立两套程序。应用D-二聚体标准品分别建立两套程序相应的定量标准曲线,一条为未稀释标准曲线,另一为预稀释标准曲线。在两条标准曲线模式下,分别对D-二聚体高值质控血浆和临床收集的43例D-二聚体异常升高血浆样本进行D-二聚体测定。结果未稀释标准曲线与预稀释标准曲线对应的D-二聚体检测线性范围分别是124~3 980μg/L和498~7 960μg/L。在未稀释标准曲线模式下,上述样本的D-二聚体均不能直接测出;而在预稀释标准曲线模式下,所有样本D-二聚体均可直接测出,其中D-二聚体高值质控血浆的D-二聚体测定结果为3 328±194μg/L,43例临床样本D-二聚体结果在1 386~6 185μg/L之间,平均为3 009±1 497μg/L。结论在应用免疫比浊法进行D-二聚体测定中,另外建立一套预稀释程序可以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围,而且可以较好地解决D-二聚体异常升高样本不能直接测定的问题。     

胶乳凝集法和免疫比浊法检测D-二聚体结果比较

目的通过手工胶乳凝集法和全自动免疫比浊法对血浆D-二聚体进行测定,探讨全自动免疫比浊法测定血浆D-二聚体是否具有优越性。方法用手工胶乳凝集法和全自动免疫比浊法对130例住院患者进行血浆D-二聚体检测。结果经配对四格表χ2检验,胶乳凝集法和免疫比浊法测定D-二聚体结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论免疫比浊法较胶乳凝集法灵敏度更高,特异性更强。     

胶乳增强免疫比浊法测定降钙素原方法学评价及临床意义

目的：对降钙素原（PCT）胶乳增强免疫比浊检测试剂盒进行性能评估并且探讨在脓毒症评估中的应用价值。方法采用胶乳增强免疫比浊试剂测定 PCT,根据美国临床实验室标准化协会（CLSI）的标准化评价方案对方法进行精密度、回收率、线性、抗干扰等评价及临床应用。结果在0.5μg／L 和2.0μg／L 这2个医学诊断水平,此方法批内和日间变异系数分别为CV＜5.0％和 CV＜2.0％,平均回收率为100.6％。检测线性范围为0.05～60μg／L,判断依据为 r2＝0.996。试剂在开口1个月和37℃水浴8 d 保存过程中,测值偏差小于10％。跟 Roche PCT 试剂（化学发光法）相比具有高度的相关性。抗干扰性强,总胆红素小于或等于600μmol／L,血红蛋白小于或等于400 mg／dL,三酰甘油小于或等于1000 mg／dL,类风湿因子小于或等于200 IU／mL 对试剂盒的测定均无影响。实验组血清 PCT 检测结果为（14.783±5.654）μg／L,与健康对照组（0.237±0.107）μg／L 比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清 PCT 快速、准确、稳定、可靠、适用于临床脓毒症诊断。     

散射免疫比浊法与乳胶凝集法测定D-二聚体的结果分析

目的乳胶凝集法和散射免疫比浊法测定D-二聚体作出临床应用评价.方法两种方法同时测定68例正常对照组;70例肝炎病人,30例口服华法令病人,20例恶性肿瘤病人,12例DIC病人的D-二聚体,然后进行统计学分析.结果68例正常对照组中乳胶凝集法有2例阳性,散射免疫比浊法测定的结果为0.23±0.21μg/ml,剔除2例阳性则结果为0.21±016μg/ml,与文献参考值无显著差异.70例肝炎病人,30例口服华法令病人,20例恶性肿瘤病人,12例DIC病人乳胶凝集法测定的阳性例数分别为36、17、4、12,各病种阳性病人散射免疫比浊法的测定结果分别为0.65±0.31μg/m1,0.57±0.24μg/ml,0.41±0.08μg/ml,2.43±0.62μg/ml,与正常对照组、各病种阴性组的D-二聚体值存在显著差异,且DIC病人D-二聚集显著高于其它病组.结论散射免疫比浊法测定D-二聚体的参考值为0.21±0.16μg/ml,是测定D-二聚体较好的方法,可定量观察继发性纤溶的变化,而乳胶凝集法虽为定法,但同样具有较好的阳性预期值,可作为经继发性纤溶的初筛试验.     

D-二聚体测定在肺栓塞诊断中的应用价值

近年来随着生活水平的提高和生活方式的改变 ,我国的肺栓塞发病率也呈现逐年升高趋势 ,其病死率仅次于心肌梗塞和肿瘤。及时准确诊断为肺栓塞者 ,其死亡仅为 7% ,反之其死亡率为 6 0 % ,其中 33%在发病后第 1小时内死亡。所以早期诊断肺栓塞是临床医生极为关注的问题。[1] 用全自动免疫系统 (VIDAS)DD法检测D 二聚体在诊断肺栓塞中有一定的应用价值。现将本实验的情况报道如下 :1　材料和方法1.1　材料1.1.1　对象选择 2 0 0 1年 11月～ 2 0 0 3年 1月可疑肺栓塞患者 98例 ,其中男 5 8例 ,女 4 0例 ,患者平均年龄为 5 9岁 (范围为 2 0～…     

胶乳免疫散射比浊法测定β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用研究

目的探讨胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液中的β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用。方法采用Hi-tachi7170S全自动生化分析仪,终点法测定,主波长540nm,副波长700nm,温度37℃,血清∶试剂1∶试剂2为:3μl∶270μl∶30μl,并与放射免疫方法进行对比。结果对比试验:取50份血清及30份尿液标本分别用全自动生化分析仪胶乳凝集比浊法和放免法进行测定,两法差异无显著性。精密度实验:血清批内CV值为2.3%,批间3.4%;尿液批内CV值2.5%,批间4.4%。回收实验:回收率在96%~103%之间,平均99.6%。线性测定:该法线性范围为0~18mg/L。结论应用胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液β2微球蛋白在全自动生化分析仪测定,其反应的线性、准确性、精密度良好,方法简便稳定,适用于临床应用。     

健康成人血浆D-二聚体免疫比浊法正常参考区间的建立

目的建立宝安区健康成人不同年龄段血浆D-二聚体免疫比浊法生物参考区间,为临床诊断和治疗提供更科学更有价值的参考依据。方法随机选取2014年6月~2015年1月深圳市宝安区福永人民医院门诊、住院及体检科不同年龄健康成人1 156例,其中男性417例,女性739例。按年龄分为18～49岁,50～59岁及>60岁三组。采用Sysmex CA1500全自动凝血分析仪免疫比浊法检测血浆D-二聚体浓度,采用SPSS19.0对数据进行统计分析,血浆D-二聚体浓度呈偏态分布,采用百分位数(P95) 表示参考区间的单侧上限,确定该区相应的生物参考区间,并分析比较不同年龄和不同性别之间血浆D-二聚体浓度之间的差异性。结果同年龄组男性和女性D-二聚体浓度水平比较差异无统计学意义(t=0.372~1.092,P均>0.05);18～49岁组和50～59岁组健康成人血浆D-二聚体浓度水平比较差异无统计学意义(t=0.954,P>0.05),>60岁组与其他两组比较,血浆D-二聚体浓度差异有统计学意义(t=5.972,P<0.05);18～59岁组D-二聚体正常参考区间为0~225　mg/L;>60岁组D-二聚体正常参考区间为0~297 mg/L。结论血浆D-二聚体浓度水平与性别无关,而与年龄有关,随年龄增高D-二聚体水平呈上升趋势。因此,不同地区应建立健康成人不同年龄段D-二聚体正常值参考区间。     

类风湿因子对免疫比浊法测定D-二聚体结果的干扰分析

目的了解类风湿因子对两种D-二聚体检测试剂测定D-二聚体结果的干扰情况。方法采用DDimer PLUS试剂和INNOVANCE DDimer试剂分别测定加入不同浓度类风湿因子干扰物的实验血浆D-二聚体含量。结果类风湿因子阳性的标本对两种试剂测定结果影响均较大,在类风湿因子浓度为30.9IU/mL时,DDimer PLUS试剂检测结果影响度为11.4%,INNOVANCE DDimer试剂检测结果影响度为11.68%,两种试剂检测结果影响度均随类风湿因子浓度增加而增大。结论 D-二聚体两种试剂均受类风湿因子干扰,类风湿因子浓度越高,干扰越严重。     

胶乳免疫比浊法检测肌酸激酶同工酶的性能评价

目的采用胶乳免疫比浊法对肌酸激酶同工酶(CK-MB)进行测定,以验证其性能是否满足厂家声明和临床诊断的要求。方法依据美国临床实验室标准化协会文件和卫生行业标准要求,对CK-MB的功能灵敏度、精密度、分析测量范围、临床可报告范围、生物参考区间和抗干扰能力进行验证评价,并与传统的化学发光法结果进行比较。结果验证后CK-MB功能灵敏度为1.30ng/mL。高、低浓度质控品的批内不精密度分别为1.05%、2.24%,日间不精密度分别为1.41%、2.88%。分析CK-MB检测范围为3.07～185.67ng/mL,临床可报告范围为1.30～1 485.36ng/mL,生物参考区间为0～5ng/mL。当标本血红蛋白≤15g/L,三酰甘油≤11.4mmol/L,胆红素≤684μmol/L时,对CK-MB检测结果无明显干扰。胶乳免疫比浊法与化学发光法总体符合率为88.0%,线性回归方程为Y=0.882 5 X-0.397 4,r2=0.985,相关性良好。结论在贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪上采用胶乳免疫比浊法检测CK-MB的性能达到厂家声明,并且可满足临床需求。     

胶乳增强免疫比浊法定量测定D-二聚体

目的 建立胶乳增强免疫比浊法在全自动生化分析仪上定量测定D-二聚体（DD）的方法 .方法 用胶乳增强免疫比浊法定量测定D-二聚体,并对其重复性、准确性、线性范围、试剂稳定性加以评价.结果 2种浓度D-二聚体批内CV分别为5.48%,和4.04%;批间CV为7.38%和6.41%;线性范围为0.3～22.0 mg/L;平均回收率为99.1%.试剂在仪器2～8℃的条件下放置至少可用20 d.结论 本次实验较好的把胶乳增强免疫比浊法和全自动生化分析仪结合在一起,定量测定血浆中D-二聚体的含量,特异性强、重复性好、检测灵敏度高、线性范围宽,自动化程度高,操作简便快速.     

散射免疫比浊法与乳胶凝集法测定D—二聚体的结果分析

目的乳胶凝集法和散射免疫比浊法测定D-二聚体作出临床应用评价。方法两种方法同时测定68例正常对照组;70例肝炎病人,30例口服华法令病人,20例恶性肿瘤病人,12例DIC病人的D-二聚体,然后进行统计学分析。结果68例正常对照组中乳胶凝集法有2例阳性,散射免疫比浊法测定的结果为0.23±0.21μg/ml,剔除2例阳性则结果为0.21±0.16μg/ml,与文献参考值无显著差异。70例肝炎病人,30例口服华法令病人,20例恶性肿瘤病人,12例DIC病人乳胶凝集法测定的阳性例数分别为36、17、4、12,各病种阳性病人散射免疫比浊法的测定结果分别为0.65±0.31μg/ml,0.57±0.24μg/ml,0.41±0.08μg/ml,2.43±0.62μg/ml,与正常对照组、各病种阴性组的D-二聚体值存在显著差异,且DIC病人D-二聚集显著高于其它病组。结论散射免疫比浊法测定D-二聚体的参考值为0.21±0.16μg/ml,是测定D-二聚体较好的方法,可定量观察继发性纤溶的变化,而乳胶凝集法虽为定法,但同样具有较好的阳性预期值,可作为经继发性纤溶的初筛试验。     

D-二聚体测定在肺栓塞诊断中的应用价值

目的 探讨全自动免疫分析系统（VIDAS）快速定量检测D－二聚体（DD）在诊断肺栓塞中的临床价值。方法 使用VIDAS DD测定法对可疑静脉血栓塞患者血浆中纤维蛋白降解产物D－二聚体进行检测，并对这些可疑肺栓塞患者进行3个月的随访，了解是否有肺栓塞或深部静脉栓塞的症状。结果 共有104例患者参加检测，32例患者（30.8%）的D－二聚体检测值＜494ng/ml，72例患者血浆中的D－二聚体检测值＞494ng/ml，其中有16例患者通过肺通气－灌注扫描（V／Q）证实为肺栓塞。VIDAS DD法的敏感性为100％，阴性预期值为100％。结论 VIDAS DD法可作为排除诊断肺栓塞的首选筛选试验，可在临床诊断中推广应用。     

NCCLS评价方案在肌红蛋白免疫比浊法的方法学评价中的应用

[目的]应用NCCLS评价方案对人血浆肌红蛋白免疫比浊检测法进行评价，进而探讨该方法在早期诊断急性冠脉综合征的临床检测价值。[方法]对肌红蛋白免疫比浊法的精密度、灵敏度、干扰、线性、标本储存条件进行评价。其中精密度、干扰、线性的评价按照NCCLS评价方案进行。[结果]免疫比浊法的精密度良好，MYO高、中、低（420、102、45ng,／ml）3个水平的批内变异、批间及总变异均小于5％。灵敏度为1ng／ml，在0—750ng／ml有良好的线性（Y=0．198＋0．994X）。脂血、黄疽、溶血对实验结果基本无影响。在避免反复冻溶的情况下标本保存温度和时间对实验结果无影响。[结论]免疫比浊法检测人血浆中的肌红蛋白准确、灵敏、可靠，可以很好的应用于急性冠脉综合征的早期诊断和溶栓疗效的监测。