球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞凋亡及相关基因表达 …

目的：探讨球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞（ＳＭＣ）凋亡的机制。方法：采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学技术检测球囊损伤内皮后血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）凋亡及Ｂａｘ,Ｂｃｌ－２蛋白的变化,结果：球囊损伤内皮后第３ｄ,血管中层出现凋亡的ＳＭＣ;损伤后第７ｄ,内膜和中层ＳＭＣ凋亡率最高,凋亡的ＳＭＣ主要分布内膜层;以后爱渐降低,至损伤后第２８ｄ,仅内膜     

L—精氨酸,牛磺酸对大鼠血管损伤后血管平滑肌细胞增生的影响

在大鼠血管内皮剥脱模型上，观察了Ｌ－精氨酸，牛磺酸及Ｌ－精氨酸＋牛磺酸对血管损伤诱导的血管平滑肌细胞增生的影响。结果发现，内皮剥脱可致ＶＳＭＣ增生，同膜增厚；应用Ｌ－精氨酸，牛磺酸及Ｌ－精氨酸＋牛磺酸治疗后，剥脱组ＶＳＭＣ增生明显受抑制，且Ｌ－精氨酸＋牛磺酸对ＶＳＭＣ的抑制效应强于单纯应用Ｌ－精氨酸或牛磺酸组；Ｌ－精氨酸及Ｌ－精氨酸＿＋牛磺酸治疗后，血管对乙酰胆碱的内皮依赖性舒张，血ｃＧＭＰ含量明     

人endostatin体外诱导血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨人endostatin抑制血管内皮细胞增殖的作用机制。方法 在含重组人endostatin蛋白和10%小牛血清的DMEM培养基中，培养人脐静脉内皮细胞ECV304。72h后，采用透射电镜，流式细胞术细胞周期分析和细胞核DNA的1.5%琼脂糖凝胶电泳，检测重组人endostatin蛋白作用后，血管内皮细胞的凋亡。结果 透射电镜下可见实验组ECV304细胞核染色质浓缩，边集，核碎裂及胞浆浓缩等，呈典型的凋亡细胞的形态学表现，流式细胞术细胞周期分析显示，在G1期峰前存在1个凋亡峰（20.6%)，1.5%琼脂糖凝胶电泳显示，细胞核DNA呈梯状，对照组ECV304细胞表达正常。结论 重组人endostatin蛋白可诱导血管内皮细胞凋亡，是其抑制血管内皮细胞增殖的原因之一。     

血管平滑肌细胞凋亡在血管再狭窄中作用的研究进展

血管平滑肌细胞构成新生内膜增生的重要部分,且在血管腔内治疗术后再狭窄的心血管疾病的发生和发展中具有重要作用。血管平滑肌细胞凋亡能有效抑制血管球囊损伤和血管旁路移植术后新生内膜增生,从而可为血管术后再狭窄提供治疗手段。     

bcl—2在一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡中的作用

目的：对一氧化氮（NO）作用下血管平滑肌细胞（VSMC）中bcl-2蛋白表达的变化进行定量检测,并进一步探讨bcl-2过表达对NO诱导VSMC凋亡的影响,以确定bcl-2在NO诱导VSMC凋亡中的作用。方法以亚硝基乙酰青霉胺（SNAP）作为NO供体,将5－8代的大鼠VSMC接种于Petri培养皿中,条件培养液培养24－48h,换成含0．5mmol/LSNAP的条件培养液8－10h后,固定细胞、间接免疫荧光法检测抗原,借助粘附式细胞仪对细胞中bcl-2蛋白表达进行定量检测,通过逆转录病毒载体将bcl-2基因导入VSMC,使其过量表达,检测SNAP作用下细胞的凋亡率,并与未经转染的VSMC进行比较,结果：SNAP使得VSMC中B蛋白表达下调,而bcl-2过表达能够抑制SNAP作用下VSMC的凋亡。结论下调bcl-2表达是SNAP诱导VSMC凋亡的途径之一。     

与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的形态学和生长增殖

目的　探讨平滑肌细胞对内皮细胞形态和增殖的影响 ,为内皮细胞种植的组织工程学提供理论基础。　方法　模拟血管壁的内层结构及内皮细胞平滑肌细胞间的相互影响途径 ,建立内皮细胞与平滑肌细胞联合培养的模型 ,应用形态学、细胞计数对内皮细胞的结构和增殖进行研究。　结果　联合培养的新内皮细胞呈伸长性生长 ,沿细胞长轴排列的微丝增多 ,增殖受抑制。　结论　内皮细胞和平滑肌细胞联合培养的新模型是目前研究这两种细胞间相互影响的最佳方式。联合培养的内皮细胞的形态结构更接近于在体生理状态 ,这一变化可能更有利于其抗应力功能的调节     

活化蛋白C对脂多糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞凋亡的影响研究

目的：观察不同剂量活化蛋白C(APC)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）凋亡的作用。方法:将培养成功的HUVECs通过LPS（1 mg/L）孵育诱导细胞凋亡模型，并给予APC（10 μg/L）或APC（50 μg/L）建立药物治疗组，同时设立正常对照细胞组和单独LPS（1 mg/L）诱导细胞凋亡组。应用电镜观察细胞超微结构；DNA ladder与TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡情况；Annexin-Ⅴ/PI双标记行流式细胞仪测定定量观察细胞凋亡率。同时采用MTT法测定细胞存活率和Western blotting测定增殖细胞核抗原（PCNA），以观察细胞的增殖变化。结果:通过细胞形态，DNA ladder和TUNEL荧光染色发现单独LPS诱导组的细胞可见明显的凋亡现象，而通过APC治疗组的细胞凋亡改变明显减轻和细胞凋亡率下降，同时细胞存活率和PCNA表达率增高，尤其在50 μg/L时，与单独LPS诱导组细胞比较差异显著（P<0.05）。结论:APC拮抗LPS诱导的血管内皮细胞凋亡并促进细胞的增殖，发挥保护细胞的作用。     

血管平滑肌细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是人体组织细胞普遍存在的由基因编制程序控制的另一种细胞死亡形式，它包括信息传导、基因表达、蛋白合成等多个环节，许多基因（包括癌基因、抑癌基因和病毒基因）参与此调节过程。它存在于各种组织和器官中。最近研究表明，在动脉粥样硬化斑块、血管受损模型和血管重塑中发现细胞凋亡现象，这些发现为人们从一种全新的研究角度认识和探讨血管疾病的发生机理及防治提供了新的理论基础。     

增殖细胞核抗原表达对激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的：探讨体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖细胞核抗原（PCNA）表达对其凋亡的激光诱导率的影响。方法：组织贴块法培养VSMC,饥 饿法同步化,在不同的刺激因子作用之后,免疫组化法检测细胞PCNA表达率,各组细胞经510．6nm的铜蒸汽激光照射,TUNEL法记数细胞凋亡率。结果：PCNA表达高的细胞,在激光的诱导下易发生凋亡;相反,PCNA表达低细胞,凋亡诱导率较低,结构：经不同生长因子刺激后VSMC的PCNA表达率不同,PCNA表达率的不同对激光的凋亡诱导率产生影响。     

人造血管制作中从单根脐带获取内皮细胞和平滑肌细胞的方法

随着人造血管内皮化研究的深入 ,需要同时进行内皮细胞和平滑肌细胞的培养 ,再分层种植于人造血管内腔 ,模拟正常血管壁结构[1～ 3 ] 。我们利用单根脐带 ,同时获取内皮细胞和平滑肌细胞 ,方便有效 ,经济实用 ,以利于进一步进行相关研究。1　材料和方法1 .1　人脐静脉内皮细胞原代培养[4 ] 　取长 3 0ｃｍ脐带 ,用Ｄ Ｈａｎｋ’ｓ液冲净其内腔 ,注入混合酶 (0 .0 1 %Ｉ型胶原酶 3ｍｌ+0 .2 5 %胰蛋白酶 1 5ｍｌ) ,夹闭后放于3 7℃消化 2 0ｍｉｎ。收集消化液 ,离心 5ｍｉｎ× 2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ ,弃上清 ,加培液打匀 ,以细胞数为 1× 1 0 5个…     

硝苯地平导致高血压大鼠血管平滑肌细胞的凋亡

血管平滑肌细胞的凋亡 (程序性死亡 )在血管管壁结构的调节中是一个基本的必经的过程。目前一些抗高血压药物的药理学效应就是促进血管平滑肌细胞的凋亡。血管平滑肌细胞凋亡的生物化学的规律是复杂的。我们选择一些抗高血压的药物作用于培养的正常血压大鼠 (ＷＫＹ)和高血压大鼠(ＳＨＲ)的血管平滑肌细胞。观察这些药物能否导致这两种大鼠平滑肌细胞的凋亡。我们选择的药物是 :Ｌ型Ｃａ通道拮抗剂—硝苯地平 ;一氧化氮的供体—硝普钠 ;毛喉素 (一种腺苷酰环化酶的活化剂 )。或一种肌浆网选择性抑制Ｃａ2 +—三磷酸腺苷酶。用这些药物对比它…     

高糖、高脂血症大鼠血管内皮细胞及平滑肌细胞的形态和功能改变

复制高糖、是动物模型,利用血管功能测定,组织培养和放射免疫分析等方法观察长期高糖,高脂血症对血管内皮细胞和平骨肌细胞功能的影响及相互作用,结果表明,高糖、高脂对血和内皮细胞均有影响,两者有协同作用;对血管平滑肌细胞两者均可促进其增强,加速了糖尿病血管并发症的发生发展。     

雌二醇对培养的兔血管平滑肌细胞表现型转变及增生的直接影响

实验应用民镜形态定量，细胞增生试验及＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入试验，观察了１７－β雌二醇对体外培养的家兔主动脉平滑肌细胞表现型转变及对不同表现型ＳＭＣ增生的影响。结果显示，Ｅ２在体外可显著抑制收缩型ＳＭＥ向合成型ＳＭＣ转化，导致这些细胞推迟进入增殖高峰期。     

三氧化二砷抑制兔血管平滑肌细胞增殖及诱导凋亡的相关机制

目的 研究三氧化二砷（As2O3）对免血管平滑肌细胞（VSMC）的抑制增殖、促进凋亡及诱导细胞周期停滞的作用.方法 经组织块贴壁法原代培养的兔VSMC,应用3H-胸腺嘧啶胞苷渗入法、透射电镜、TUNEL法、流式细胞术和基因芯片测定As2O3对VSMC的细胞活力、生长、增殖及凋亡.结果 随着三氧化二砷浓度的增加显著抑制了细胞生长,且呈剂量依赖性,透射电镜下可见凋亡小体,TUNEL检测出现了凋亡细胞,流式细胞术出现了典型的凋亡峰.基因芯片扫描杂交结果数据显示其中26条基因表达有差异.结论 As2O3对VSMC具有抑制增殖、促凋亡、阻滞细胞周期进程的作用.     

内皮细胞对血管平滑肌细胞整合素β1表达的影响

目的:探讨内皮细胞(endothelial cells,Ecs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)整合素β1(β1-integrin)表达的影响,为研究血管壁细胞功能提供理论依据.方法:应用血管ECsVSMCs联合培养系统.以Western Blot和细胞免疫荧光技术,检测与Ecs联合培养12 h后VSMCs的β1-integrin表达和分布变化.结果:与Ecs的联合培养.能明显增强VSMCs的β1-integrin蛋白表达,同时诱导VSMCs表面β1-integfin的激活.结论:Ecs可能通过调节VSMCs的β1-integrin表达,从而影响VSMCs的功能.     

大鼠提睾肌缺血再灌注损伤时血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖与凋亡

目的研究大鼠提睾肌缺血再灌注后血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖和凋亡。方法以免疫组织化学SP法和末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)对大鼠提睾肌缺血再灌注后的血管平滑肌细胞和内皮细胞的Bcl-2、Bax、P53和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达进行观察研究。结果缺血再灌注后 ,血管平滑肌细胞和内皮细胞均有Bcl-2、Bax、P53和PCNA的表达 ,在平滑肌细胞 ,Bcl-2阳性细胞数量明显高于Bax和P53。PCNA阳性细胞明显增多。在内皮细胞 ,Bax和P53的表达最强 ,TUNEL阳性细胞率最高。结论大鼠提睾肌缺血再灌注可造成平滑细胞的增殖和内皮细胞的凋亡 ,其结果可能与微循环障碍有关。     

三氧化二砷抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖并促进细胞凋亡

目的研究三氧化二砷(As2O3)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的抑制增殖、促进凋亡及诱导细胞周期停滞的作用。方法经组织块贴壁法原代培养的大鼠VSMCs,应用MTT法、台盼蓝拒染法3、H-胸腺嘧啶胞苷掺入法测定VSMCs的细胞活力、生长及增殖;应用流式细胞仪、DNA梯带法分析细胞周期分布及凋亡;应用Western blot法检测凋亡相关基因产物P53及细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P21waf1/cip1。结果1~16μmol/L As2O3对VSMCs细胞活力无明显影响,但可显著抑制细胞生长及DNA合成(P<0.05),并呈时间和剂量依赖性。8μmol/L As2O3可使细胞周期S期减少(P<0.05)、G0G1期增加(P<0.05),并出现sub-G1期凋亡峰。16μmol/L As2O3对VSMCs作用不同时间后出现典型的凋亡梯带样DNA片段。8μmol/L As2O3可显著上调VSMCs的P53及P21waf1/cip1蛋白产物(P<0.05),且呈时间依赖性。结论As2O3对VSMCs具有明确的抗增殖、促凋亡、阻滞细胞周期进程的作用,并且与P53、P21waf1/cip1表达上调密切相关。     

内皮细胞和平滑肌细胞联合种植研究

内皮细胞在人工器官表面的种植是当前组织工程学研究领域的热点课题这一，平滑肌细胞是内皮细胞的周细胞，对内皮细胞的形态结构，生理功能，再生和修复有重要影响。本文综述了进行内皮细胞和平滑肌细胞联合种植的定义，方法及联合种植后内皮细胞功率变化的研究概况，并对研究中有解决的问题作了进一步的分析和探讨。     

干扰素α通过P204和P21诱导大鼠原代血管平滑肌细胞凋亡

目的 探讨干扰素-α(IFN-α)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响.方法 应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,RT-PCR法检测P204及P21mRNA表达,Western blot检测P204及P21蛋白表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡.结果 与对照组比较,IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.01),细胞凋亡增多(P＜0.01),伴P21 mRNA和蛋白表达增多(P＜0.01);IFI204 siRNA转染组P204 mRNA和蛋白表达下调(P＜0.01),细胞凋亡减少(P＜0.01),P21mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01);转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预,P204 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.01),但P21 mRNA及蛋白表达增多(P＜0.01),促进细胞凋亡(P＜0.01).结论 P204及P21参与IFN-α诱导大鼠VSMCs凋亡过程的调控.