银杏叶提取物对大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的研究急性高眼压缺血再灌注模型中银杏叶提取物对视网膜神经节细胞的保护作用。方法实验用SD大鼠30只分为3组,分别为阴性对照组、阳性对照组、用药组,每组各10只。大鼠右眼为损伤眼,分别行前房穿刺灌注形成110mmHg的眼压维持60min,左眼未做损伤,作为正常对照。阴性对照组于损伤后2h及此后每日腹腔分别灌胃生理盐水5mL/kg。按这种给药方法,阳性对照组给予1%灯盏细辛5mL/kg,用药组给予1%银杏叶提取物5mL/kg,实验持续时间28d。动物安死术前5d用3%荧光金双上丘注射,逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜定向铺片,距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片。利用彩色颗粒分析软件做节细胞计数,计算各组节细胞的存活率并做统计分析。结果阴性对照组、阳性对照组、用药组节细胞存活率分别为61.46%、72.73%、76.20%。用药组与阴性对照组的节细胞存活率存在显著性差异(P<0.05),用药组与阳性对照组无显著性差异(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论在急性高眼压缺血再灌注模型中,银杏叶提取物能有效地保护视网膜节细胞,与阳性对照药灯盏细辛比较,保护节细胞的效果两者接近。     

银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

目的:观察银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞凋亡的影响并初步探讨可能机制。方法:体外培养ARPE-19细胞株,分为正常组(5.5 mmol·L-1葡萄糖),高糖组(30 mmol·L-1葡萄糖),银杏叶提取物组(30mmol·L-1葡萄糖+12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原-2(Bcl-2),白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关因子(Fas),Fas受体(Fas L)mRNA和蛋白的表达。Western blot检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化及核JNK表达变化。结果:高糖组吸光度A明显低于正常组(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组A明显升高(P0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常组,12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组细胞凋亡率明显降低(P0.05);与正常组比较,高糖组Bax和Caspase-3,Fas和Fas L表达升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组能降低Bax和Caspase-3的表达,升高Bcl-2表达水平,降低Fas和Fas L表达(P0.05);与正常组比较,高糖组JNK磷酸化及核JNK蛋白水平升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物降低JNK磷酸化及核JNK表达(P0.05)。结论:银杏叶提取物能通过JNK通路,抑制细胞凋亡,改善糖尿病视网膜病变。     

银杏叶提取物对H2O2诱导的胰岛RIN-mβ细胞凋亡的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb761)对过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)诱导的胰岛RIN-mβ细胞株凋亡的影响。方法:以500μmol/L H2O2作用于胰岛RIN-mβ细胞6 h建立凋亡模型;分别设空白对照组(Control)、阴性对照组(H2O2)、阳性对照组(槲皮素Que 100μmol/L)、EGb 761单用对照组(EGb 761100μmol/L),EGb 761给药组(EGb 761 10、30、100μg/ml);采用MTT检测细胞存活率,Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态变化,PI单染色法和Annexin V-PI双染色法流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果:与空白对照组比较,阴性对照组500μmol/L H2O2作用6 h后,细胞存活率明显降低、细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,EGb 761显著降低H2O2诱导的细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:过氧化氢可诱导胰岛RIN-mβ细胞凋亡,EGb 761对H2O2诱导的RIN-mβ细胞损伤和凋亡具有明显的保护作用。     

银杏叶提取物对高脂胆固醇喂饲家兔血管神经酰胺含量和泡沫细胞凋亡的影响

目的：观察预防性应用银杏叶提取物对家兔实验性动脉粥样硬化的形成、血管壁神经酰胺量和泡沫细胞凋亡的影响，探讨银杏叶提取物抗AS的作用及可能机制。方法：将24只新西兰家兔随机分为3组：正常对照组、高胆固醇组、银杏叶提取物组。分别给予普通饲料(正常对照组)和高胆固醇饮食(其它2组)喂养；银杏叶提取物组另预防性给予银杏叶提出物；实验结束后，运用图象分析法测定主动脉内膜脂质斑块面积百分比；用高效薄层层析扫描分析血管组织神经酰胺的变化；用Tunel法检测血管组织泡沫细胞的凋亡指数。结果：银杏叶提取物可明显缩小主动脉内膜脂质斑块面积，降低动脉组织神经酰胺浓度，减少血管壁泡沫细胞凋亡的数量。结论：银杏叶提取物具有较好的抗AS作用，神经酰胺与动脉粥样硬化形成和泡沫细胞凋亡有关。     

银杏叶提取物对糖尿病视网膜病变的作用观察

目的观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病NOD小鼠视网膜血管内皮生长因(VEGF)蛋白表达及对视网膜细胞凋亡的影响。方法糖尿病NOD小鼠分为正常组,糖尿病组和GBE治疗组。TUNEL法检测0、4、12周视网膜细胞的凋亡,ELISA法检测0、4、12周视网膜VEGF表达。结果GBE治疗组视网膜细胞凋亡明显较糖尿病组减轻(P<0.01)。GBE治疗组视网膜VEGF表达水平明显较糖尿病组降低(4周:26±8vs 33±7,P<0.05;12周:102±7vs 165±9pg/mg,P<0.01)。结论GBE可减少糖尿病视网膜VEGF表达,抑制糖尿病视网膜神经节细胞凋亡。     

银杏叶提取物对缺血再灌注小鼠脑细胞凋亡的保护作用

目的探讨银杏叶提取物对脑缺血再灌注诱导小鼠脑细胞凋亡损伤的保护机制。方法小鼠采用双侧颈总动脉结扎法建立重复全脑缺血再灌注模型。术后48h,制备石蜡切片(HE染色)检测脑组织海马CA1区锥体细胞形态学变化;用紫外分光光度计检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,同时用RT-PCR技术检测缺血再灌注过程中小鼠海马凋亡蛋白抑制剂XIAP(X-chromosome linked inhibitor of apoptosis protein)mRNA的表达。结果全脑重复缺血再灌注可以使海马CA1区幸存的锥体细胞数量减少(P<0.01),降低SOD活性,提高MDA水平,同时伴随着XIAPmRNA表达显著下调(P<0.01)。5、20、40mg/kg银杏叶提取物能剂量依赖性减少缺血小鼠海马CA1区神经细胞的死亡(P<0.05、0.01),提高SOD活性(P<0.05、0.01),降低MDA水平(P<0.05、0.01),并抑制XIAPmRNA表达的下调(P<0.05、0.01)。结论银杏叶提取物可通过抗氧化作用抑制神经细胞凋亡而减轻缺血再灌注引起的脑损伤。     

银杏叶提取物对皮肤鳞状细胞癌增殖和凋亡的影响及作用机制研究北大核心

目的:探讨银杏叶提取物对皮肤鳞状细胞癌增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:采用0、80、160、320、400、500 mg/L银杏叶提取物处理人表皮癌细胞株A431,CCK-8检测细胞存活率;EDU检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达;实时荧光定量PCR检测Caspase-3 mRNA表达。结果:A431细胞增殖率随银杏叶提取物浓度的升高而降低,当银杏叶提取物浓度为160~500 mg/L时,A431细胞增殖率及Bcl-2蛋白表达显著低于对照组;当银杏叶提取物浓度为80~500 mg/L时,A431细胞凋亡率显著高于对照组;银杏叶提取物浓度为400、500 mg/L时,A431细胞中Caspase-3 mRNA及Bax蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可通过活化Caspase-3,上调细胞促凋亡因子Bax表达,下调细胞抗凋亡因子Bcl-2表达,从而抑制人表皮鳞状细胞增殖,促进细胞凋亡。     

银杏叶提取物对糖尿病视网膜病变的临床疗效评价

目的探讨银杏叶提取物对糖尿病视网膜病变的治疗效果。方法对照组给予临床常规治疗,研究组在上述常规治疗基础上加用银杏叶提取物,记录其临床疗效。结果两组糖尿病视网膜病变患者经上述相应措施治疗后,研究组临床总有效率高达86.67%,对照组仅获得66.67%临床总有效率(P0.05)。结论对糖尿病视网膜病变患者给予常规治疗联合银杏叶提取物,可显著提高其临床疗效,有利于保障患者生活质量及降低致残率。     

银杏提取物和潘生丁对兔心肌缺血再灌注后iNOS基因转录和翻译的影响

目的 研究银杏提取物（Egb761）与潘生丁单用及联用对家免心肌缺血再灌注诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。方法 参照文献方法制备兔缺血再灌注模型,35只兔随机分为5组,每组7只,假手术组、模型组、潘生丁（0．8mg／kg）组、银杏（Egb761 40mg／kg）组及联合组,于再灌注30min后分别静脉注射相应的药物,同时检测心肌再灌注晚期iNOS转录水平和翻译水平表达变化。结果 每组动物均存活至实验结束。心肌iNOS转录水平表达分别是假手术组0、模型纽157．11±17．73、潘生丁组202．6±21．84、银杏组356．13±24．18和联合组562．34±35．19,与模型组比较,各用药组心肌iNOS转录水平表达显著增加（P〈0．01）。心肌缺血再灌注中iNOS蛋白翻译水平表达分别是假手术组34．24±15．78、模型组75．70±13．71、潘生丁组116．89±22．57、银杏组143．75±16．05和联合组195．09±22．25,与模型组比较,各用药组iNOS蛋白翻译水平表达均显著增加（P〈0．05或P〈0．01）。结论 潘生丁与银杏提取物单用和联用均增加家兔心肌缺血再灌注晚期iNOS表达,联用增加更明显。     

Ginkgo Biloba Extract Attenuates Oxidative Stress and Apoptosis in Mouse Cochlear Neural Stem Cells

In the organ or Corti, oxidative stress could result in damage to the hearing, and neural stem cells (NSCs) hold great therapeutic potential in treating hearing loss. Ginkgo biloba extract (GBE) has been widely shown to exhibit anti‐oxidative and anti‐apoptotic effects in treatments of neural damage and disorder. Using hydrogen peroxide to induced oxidative stress as a model, we investigated the anti‐oxidative role of GBE in isolated mouse cochlear NSCs. GBE treatment was found to significantly promote viability of NSCs, by markedly attenuating hydrogen peroxide induced oxidative stress. In addition, this anti‐oxidative function of GBE was also able to prevent mitochondrial depolarization and subsequent apoptosis. Moreover, the anti‐apoptotic role of GBE was mediated by antagonizing the intrinsic mitochondrial apoptotic pathway, where GBE could reverse the changes in key intrinsic apoptosis pathway factors including Bcl‐2, Bax, and Caspase‐3. Our data provided the first report on the beneficial role of GBE in protecting cochlear NSCs, by attenuating oxidative stress triggered intrinsic apoptosis, therefore supporting the potential therapeutic value of GBE in preventing oxidative stress‐related hearing loss. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

银杏叶提取物活性成分及其药理作用

银杏叶的化学成分主要为黄酮类、萜类内酯、有机酸、烷基酚和烷基酚酸、甾体、花青素及微量元素等。不同的成分其药理作用分别为抗氧化,降脂,溶栓,心、脑、肝、中枢神经系统保护作用,治疗认知功能障碍、耳聋,抗肿瘤等。     

银杏叶提取物对大鼠动脉粥样硬化的防治作用

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对大鼠动脉粥样硬化(AS)的防治作用。方法将Wistar大鼠随机分为4组:空白组、模型组、叶酸组、EGb组。各组分别予灌胃1%CMC(羟甲基纤维素钠)液2ml、3%高同型半胱氨酸(HHcy)混悬液 1%CMC液各1ml、3%HHcy混悬液 叶酸混悬液各1ml、3%HHcy混悬液 EGb混悬液各1ml,1次/d。8周后,测定各组动物血浆的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1(α6-keto-PGF1α)含量变化。结果与空白组比较,模型组血浆6-keto-PGF1α、SOD含量下降,TXB2、MDA含量升高,有显著性差异(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,叶酸组和EGb组均可使血浆6-keto-PGF1α、SOD含量升高,TXB2、MDA含量下降,有显著性差异(P<0.05或P<0.01);叶酸组与EGb组间比较,6-keto-PGF1α、SOD、TXB2和MDA含量的差异均无显著性(P>0.05)。结论EGb具有防治和治疗HHcy诱导动脉粥样硬化的作用。     

一氧化氮和内皮素在银杏叶提取物治疗老年冠心病中的作用

目的:研究血浆一氧化氮和内皮素在银杏叶提取物治疗老年冠心病中的作用。方法:采用西药常规和银杏叶提取物注射液治疗老年冠心病,60例经冠状动脉造影证实的老年冠心病患者随机分为治疗组和对照组(各30例),观察心绞痛症状,检测老年冠心病患者冠状动脉左前降支(LAD)血流;并采用硝酸还原酶法和放免法测定血浆一氧化氮(NO)和内皮素(ET)水平。结果:治疗组的总有效率优于对照组(P<0.01);银杏叶提取物显著增加LAD舒张期峰值流速(P<0.01),收缩期峰值流速(P<0.01),舒张期时间速度积分(P<0.01);同时,血浆NO水平升高(P<0.01),ET水平下降(P<0.01),NO/ET比值升高(P<0.01);而对照组冠脉血流,血浆NO和ET水平无明显变化(P>0.05)。Pearson线性相关分析显示,LAD血流流速的增加与血浆NO水平升高,ET水平下降,以及NO/ET比值升高显著相关(P<0.01)。结论:银杏叶提取物注射液可有效治疗老年冠心病心绞痛,其机制可能与改善血浆NO和ET平衡有关。     

银杏叶提取物GBE50对缺氧致内皮细胞功能的影响

目的初步探讨缺氧对人脐静脉内皮细胞功能的影响,以及银杏叶提取物GBE50在其中的作用。方法应用流式细胞技术、TUNEL、RT—PCR及Western blot等方法,探讨缺氧及GBE50对内皮细胞功能的影响。结果缺氧干预内皮细胞24h后,细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平及早期、晚期凋亡率均明显增加,伴随内皮素（endothelin-1,ET-1）mRNA水平及内皮型一氧化氮合成酶（endothelial oxide synthase,eNOS）蛋白水平的升高。缺氧前4h给予GBE50干预后发现,GBE5025μg／ml时可显著降低细胞早期及晚期凋亡率及ET-1 mRNA水平（P〈0．05）,部分降低因缺氧导致的ROS水平及eNOS蛋白表达的增高（P〉0．05）。结论缺氧可导致血管内皮功能障碍,而GBE50可部分或显著逆转缺氧所致的内皮功能障碍,GBE50对缺氧所致的内皮功能障碍有一定的保护作用。     

银杏叶提取物对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌 GLUT4 表达的影响

 目的 观察银杏叶提取物对高脂饮食所诱导的胰岛素抵抗大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白 4 （ GLUT4 ）表达的影响,探讨银杏叶提取物改善胰岛素敏感性的分子机制。 方法 采用高脂喂养的方法建立胰岛素抵抗大鼠模型,并给予为期 4 周的不同剂量银杏叶提取物腹腔注射干预,以罗格列酮作为阳性对照。干预后测定大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、空腹胰岛素等指标,高胰岛素 - 正常葡萄糖钳夹实验评价银杏叶提取物的胰岛素增敏作用。 Western Blot 测定大鼠骨骼肌 GLUT4 蛋白水平,实时荧光定量 RT-PCR 测定大鼠骨骼肌 GLUT4 mRNA 表达。 结果 高脂饮食成功建立胰岛素抵抗大鼠模型,与正常对照组相比,葡萄糖输注率显著下降,空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯升高 ( P<0.01) ,骨骼肌 GLUT4 蛋白水平下降 ( P<0.05) ,骨骼肌 GLUT4 mRNA 下降 ( P<0.01) 。银杏叶提取物干预使葡萄糖输注率增加,并不同程度地降低总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、空腹胰岛素,同时骨骼肌 GLUT4 表达上调,中、高剂量银杏叶提取物对上述指标的改善更加明显,优于低剂量组。 结论 银杏叶提取物能够改善高脂饮食诱导的胰岛素抵抗状态,其胰岛素增敏机制与增加骨骼肌 GLUT4 的表达有关。     

银杏叶提取物对肝肺综合征大鼠ET-1和CGRP的影响

目的:探讨银杏叶提取物(GBE)对肝肺综合征(HPS)大鼠血管扩张因子内皮素-1(ET-1)和降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法:雄性成熟SD大鼠32只,随机平均分为4组:模型组、正常对照组、GBE低剂量组、GBE高剂量组,采用胆总管结扎术(CBDL)成功制备大鼠HPS模型,喂养3周后统一处死,用放射免疫分析法检测大鼠血浆和肝组织、肺组织匀浆中ET-l和CGRP的水平。结果:在大鼠HPS形成过程中,模型组、GBE低剂量组、GBE高剂量组血浆(血清)和肝、肺组织匀浆中ET-1、CGRP水平显著升高,经GBE治疗后显著下降,且GBE高剂量组更为显著。结论:GBE可降低HPS大鼠血浆(血清)和肝、肺组织匀浆中ET-1和CGRP水平,且高剂量比低剂量的治疗效果明显。     

人参、银杏叶提取物对PDAPPV717I转基因小鼠海马乙酰胆碱和单胺类神经递质水平的影响

目的探讨人参、银杏叶提取物配伍（脑维康,NWK）对APP转基因小鼠海马神经递质水平的影响及其可能机理。方法以PDAPPV717I转基因小鼠为老年性痴呆动物模型,给药组小鼠每天1次灌胃给予NWK（31mg/kg和62mg/kg）12周。以高效液相电化学方法检测小鼠海马乙酰胆碱（ACh）含量及海马单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果与非转基因小鼠比较,转基因组小鼠海马ACh、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）水平均显著降低（P〈0.01）,5-羟色胺（5-HT）水平显著升高（P〈0.05）,去甲肾上腺素、多巴胺水平分别升高14.6%和17.7%。给药后NWK两个剂量组小鼠海马ACh含量均较转基因非给药组显著升高（P〈0.05）;NWK高剂量组小鼠海马5-HT水平显著下降（P〈0.05）。结论NWK对APP转基因小鼠海马ACh和单胺能系统、特别是胆碱能和5-HT能系统具有明显的调节作用,这可能是其改善多种AD模型动物学习记忆能力的机理之一,从而对老年性痴呆有一定的治疗作用。