联合检测HIV抗体的试剂盒对抗-HIV-2的敏感性

许多检测人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体的试剂盒可同时检测血清中抗HIV-1和HIV-2抗体。为调查其中9种试剂盒对抗-HIV-2的敏感性,作者从塞内加尔、塞拉利昂、葡萄牙、法国和英国收集了16份HIV-2感染病人的血清样品,用阴性人血清进行稀释。所有16份样品经竞争性抗-HIV-2放射免疫法(RIA)(92%以上抑制)测定及与HIV-2包膜抗原gp36均呈强反应。用竞争性抗-HIV-1 RIA检测或与HIV-1包膜抗原gp41均无反应。8种联合检测HIV-1/HIV-2     

用检测唾液的方法诊断甲型肝炎和乙型肝炎

作者报道了用唾液标本诊断急性病毒性肝炎的研究结果.为进一步证实甲型肝炎(HA)的临床诊断,还从一些黄疸患者中采集血液标本进行血清IgM抗-HAV测定.检测方法有3种:(1)竞争性的放射免疫法(RIA)检测血清中总抗-HAV或抗-HBc.(2)IgG抗体捕获RIA检测血清或唾液中的抗-HAV和抗-HBc.(3)IgM抗体捕获RIA检测唾液中的抗-HAV和抗-HBc.结果表明,用唾液标本诊断HA时,从29例因黄疸住院、血清学证实为急性期HA     

应用细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒药物

目的探讨采用已建立的细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒(HIV)药物的可靠性。方法以齐多夫定为阳性对照,使用HIV-1急性感染系统(MT-4/HIV-1ⅢB)、HIV-1耐药性毒株系统(MT-4/3TC耐药株)、HIV-1慢性感染系统(H9/HIV-1ⅢB)和HIV-1临床分离株感染系统(PBMC/HIV-1GX02),分别测定药物的细胞毒性和抗HIV-1活性,计算药物的半数细胞毒性浓度(TC50)、半抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI)。同时对4种药物DPC961、牛膝多糖、艾乃吉1号和痰热清注射液进行了抗HIV活性检测。结果测定了齐多夫定在4种细胞-病毒系统的TC50,IC50和TI与文献报道相近。DPC961在4种细胞/病毒培养系统的TI分别为979,5348,3912和2745;牛膝多糖分别为323,223,2777和173;艾乃吉1号仅在MT-4/HIV-1ⅢB模型上T1为2.6。结论使用本细胞模型通过检测药物的TC50,IC50及TI进行药物初筛是可靠的。药物DPC961、牛膝多糖和艾乃吉Ⅰ号具有不同程度的体外抗HIV-1活性,痰热清注射液未检测到抗HIV-1活性。     

VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV-1药物的条件优化及应用

目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进一步验证了该模型的可行性与有效性。最后,应用该系统对特定靶点化合物进行筛选,并与HIV-1_(ⅢB)病毒筛选体系所得结果进行比较。结果 VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对CRFK细胞的感染力最强,报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1_(ⅢB)所得EC_(50)基本一致。结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒的抗HIV药物筛选系统。     

去甲斑蝥素体外抗HIV-1作用研究

为从天然产物中获得与现有药物作用机制不同、结构新颖的有效抗HIV-1化合物, 在细胞培养系统 及体外无细胞复制酶系统中进行抗HIV-1药物筛选。结果发现, 去甲斑蝥素 (NCTD) 在传代和原代淋巴细胞培养系统内抑制HIV-1实验室传代病毒株的p24抗原, 在人外周血单核细胞培养系统内对临床分离的AZT敏感病毒株和耐药病毒株也有抑制作用, 半数抑制浓度为1.8～20.2 μmol·L⁻¹, 在MT-4细胞培养系统内与AZT合用的联合指数<0.3, 具有明显的协同抗HIV-1作用, 但在体外NCTD对HIV-1逆转录酶、整合酶和蛋白酶均无抑制作用。由于NCTD结构简单, 不同于现有结构类型的抗HIV-1药物, 如经修饰改造并优化, 可望获得高效低毒的新型抗HIV-1化合物。     

紫草酸B的抗HIV-1活性研究

目的研究紫草酸B(lithospermic acid B,LAB)在体外和细胞培养内的抗HIV-1作用及小鼠口服后的血清在细胞培养内的抗HIV-1活性.方法在体外无细胞系统内采用放射性核素3H掺入法、荧光方法和酶联免疫吸附法分别测定其对HIV-1逆转录酶、蛋白酶和整合酶的半数抑制浓度(IC50);以传代人T淋巴细胞MT-4细胞感染实验病毒株HIV-1 Ⅲ B测定其对细胞的毒性和对HIV-1 P24抗原的抑制作用;给小鼠单剂量灌胃LAB 200 mg·kg-1后不同时间取血,分离血清,测定其在MT-4细胞培养内对HIV-1 Ⅲ B P24抗原的抑制率.结果LAB在体外抑制HIV-1整合酶和蛋白酶,其Ic50分别为(7.91±1.59)和(34.84 4±1.11)μmol.L-1,对HIV-1逆转录酶无效.在MT-4细胞培养内对细胞的半数有毒浓度(CC50)为(13.31 ±3.05)μmol稬-1,对MT-4细胞感染HIV-1 ⅢB后的P24抗原表达有抑制作用,IC50为(0.240±0.003)μmol稬-1,选择指数为54;与临床应用的HIV-1逆转率酶抑制剂核苷类齐多夫定(AZT)和非核苷类奈韦拉平(NVP)联合用药,均有协同抗HIV-1的作用,联合指数(CI值)分别为0.09和0.41.小鼠灌胃LAB 200 mg.kg-1后血清在细胞培养内有抑制HIV-1 ⅢB P24抗原的活性.结论LAB在MT-4细胞培养内抑制HIV-1的P24抗原表达,与临床应用的逆转录酶抑制有协同抗HIV-1的作用,但小鼠口服生物利用度较低.     

第四代HIV-Ag/Ab检测法缩短阳转血清检测窗口期

最近 ,一种适用于大规模血源筛查的第四代人类免疫缺陷症病毒 (HIV)检测技术Vironostika HIV Uni- Form Ag/Ab已问世 ,它是 HIV p2 4抗原与抗 HIV- 1 /2及抗HIV- 1 O亚群抗体的联合检测方法。作者就这一方法对血清阳转样本的检测进行了再评价 ,以反映这种方法对缩短窗口期样本检测的性能 ,及分析它对 HIV- 1 p2 4抗原及抗HIV- 1抗体亚型的检测灵敏度。　　样本包括不同亚型 HIV- 1 (M亚群 A至 F亚型及 O亚群 )的参比血清WWRB30 1 ,HIV血清阳转参比样本及 HIV-1 O亚群参比血清 PRB30 2 ,不同亚型 HIV- 1的细胞培养上清…     

具有抗HIV-1活性的新核糖体失活蛋白-栝楼蛋白(英文)

目的:研究新核糖体失活蛋白-栝楼蛋白是否具有抗HIV-1活性。方法:合胞体抑制实验以光镜检查,以ELISA测定HIV-1 p24抗原表达水平,用间接免疫荧光技术测定HIV抗原阳性细胞的百分率。结果:栝楼蛋白对HIV-1诱导C8166细胞形成合胞体有显著的抑制作用。栝楼蛋白显著地抑制了HIV-1急性感染T细胞中p24核心抗原的表达水平和减少了HIV抗原阳性细胞的百分率。栝楼蛋白抑制合胞体形成和HIV抗原阳性细胞的IC_(50)分别是5μg·L~(-1)和0.09mg·L~(-1)。栝楼蛋白不影响慢性感染T细胞中HIV-1 p24抗原表达水平。结论:栝楼蛋白是具有抗HIV-1活性的新的核糖体失活蛋白。     

美丽山竹子树皮和茎中具抗HIV-1活性的原萜烷型三萜与二香叶基二苯酮

美丽山竹子(拟)Garcinia speciosa广泛分布于印度、缅甸和泰国。作者从具抗HIV-1活性的该植物树皮甲醇粗提物的乙酸乙酯部位分得3个新的原萜烷型三萜garciosater-pene A(1).B(2),C(3)和1个新的二香叶基二苯酮garciosaphenone A (4)以及4个已知化合物，并对它们进行了抗HIV-1试验。     

一种检测抗-HIV-1和抗-HIV-2的微量ELISA系统

除1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)外,HIV-2也是引起艾滋病的病因。故抗-HIV的筛检试验对HIV-1和HIV-2两种抗体均应充分敏感。本文介绍一种夹心型的免疫试验,采用HIV-1病毒裂解物和HIV-2包膜(env)合成肽联合作固相抗原。HIV-2 env合成肽经液相和固相技术结合制得,通过硅胶层析纯度达95%以上,与牛血清白蛋白     

癫痫儿童拉莫三嗪唾液与血清浓度的相关性

目的:研究癫痫儿童拉莫三嗪(LTG)唾液与血清浓度的相关性。方法:在取得患儿及其家长知情同意的情况下,收集我院诊断为原发性或无需特殊病因治疗的症状性癫痫患儿,达稳态血药浓度后采集肘静脉血1 ml,并同时收集自然分泌状态下的唾液0.5 ml。使用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对血清及唾液浓度进行测定,数据分析采用统计学软件SPSS 11.5。结果:以LTG浓度(C)、LTG与内标的峰面积比(Y)作线性回归,分别得到血清浓度与唾液浓度的回归方程:Y=0.1824C-0.0080,r=0.9998;Y=0.1816C-0.0119,r=0.9997。共收集39例癫痫患儿的53个血清及唾液浓度样本,其中男27人,女12人,平均年龄7.86岁(1~15岁)。LTG血清浓度(x)和唾液浓度(y)之间的相关性如下:y=0.5607x-0.6074(n=53,r=0.9510,P<0.001)。LTG唾液与血清浓度的比值为0.42±0.11。结论:LTG血清和唾液之间有显著的相关性,可以用唾液替代血液对LTG进行治疗药物监测,由于唾液的采集简便无创,尤其适用于儿童患者。     

三个非核苷类逆转录酶抑制剂S-DABO类衍生物的体外抗HIV作用

本文对3个新S-DABO类衍合物 (RZK-4、RZK-5、RZK-6) 的体外抗HIV活性进行了研究。化合物RZK-4、RZK-5和RZK-6在200 µg·mL⁻¹的浓度下均能完全抑制HIV-1逆转录酶的活性。3个化合物对多种细胞均呈现出低毒性, 且均在较低浓度下具有抑制HIV-1病毒实验株、临床株和耐药株的作用, 治疗指数为3 704～38 462。其中, 化合物RZK-6对HIV-1耐药株HIV-1_IIIB A17具有非常显著的抑制作用。结果表明, 这3种S-DABO类衍生物有良好的体外抗HIV-1作用, 具有开发成为抗HIV-1药物的前景。     

由干热灭活的凝血因子浓制剂传播1型人类免疫缺陷症病毒

目前美国许多厂家采用冻干后加热灭活法来消除凝血因子制剂中的1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)。作者报告了他们在两年间收治的400多例使用血液制剂的病例中,有6例为使用干热灭活的因子Ⅷ浓制剂后血清抗-HIV-1阳转。对于收治的病例首先用酶免疫试验(EIA)检测血清抗-HIV-1,阳性者用免疫印迹法复测,并用EIA检测HIV-1 p24抗原。抗-HIV-1阴性病例在使用血液制剂后每6个     

抗HIV-1药物及其复方制剂研究新进展

抗HIV-1感染的治疗具有终身性,而目前临床上的抗HIV-1药物在长期使用的情况下会产生副作用并有耐药性问题,故开发作用于新靶点的抗HIV-1药物成为研发的热点。对近几年上市或在研的抗HIV-1药物及其复方制剂进行综述,并对其前景进行展望。     

ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析

目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标本进行检测,检测内容包括HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体。结果采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性2例,阳性率为0.50%,梅毒抗体阳性3例,阳性率为0.75%,丙型肝炎抗体阳性4例,阳性率为1%;采用化学发光法检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性3例,阳性率为0.75%,梅毒抗体阳性4例,阳性率为1%,丙型肝炎抗体阳性5例,阳性率为1.25%。结论采用化学发光法检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙型肝炎抗体的敏感性高于酶联免疫法检测,可作为首选检测方案,具有良好的临床应用价值。     

多羟基芳香族化合物对HIV-1整合酶的抑制作用

目的研究HIV-1整合酶抑制剂,为艾滋病的治疗提供新作用靶位的抗HIV药物。方法用HIV-1整合酶ELISA法检测3种萘醌类化合物,10种白藜芦醇及其衍生物和7种吡喃香豆素类化合物对整合酶的抑制作用。结果双羟基-1,4-萘醌(NQ-2)对HIV-1整合酶有抑制活性,IC₅₀为78.5 μmol·L^-1,发现萘醌类新化合物NQ-3对HIV-1整合酶的抑制作用优于NQ-2,IC₅₀为37.2 μmol·L^-1。用分步测定法发现NQ-2主要抑制HIV-1整合酶的链转移活性,而NQ-3则对装配和链转移都有较强的抑制。结论萘醌类化合物(NQ-2,3)对HIV-1整合酶有抑制作用,NQ-3为新化合物值得进一步研究。     

人α干扰素在口腔微生物感染中的潜在应用

在体外白细胞介素(IL)1和IL-8能增强吞噬念珠菌的中性粒细胞和巨噬细胞的抗微生物活性,近年来实验发现α干扰素(IFN-α)也有此功能.在免疫功能损害病人 (人类免疫缺陷症病毒感染者,其他免疫缺陷症患者,癌症化疗者和器官移植后免疫抑制剂应用者)的口腔内经常发生各种微生物感染,因此对真菌感染的控制可能是此类病人维持体内稳态的重要步骤.作者以16名22～43岁的健康志愿者为研究对象,在收集唾液标本后,再用生理盐水冲洗口腔收获冲洗细胞并加以培养,以ELISA法检测唾液中和冲洗细胞培养上清中的IL-1α、IL-1β、IL-8和IFN-α,并用相应的抗细胞因子特异性抗体免疫染色冲洗细胞以确定产生细胞因子的细胞.     

HIV-1整合酶及其抑制剂的研究进展

HIV-1整合酶(integrase)是逆转录病毒复制所必需的酶，因而成为抗艾滋病(AIDS)药物设计的一个合理的靶点。本综述了近几年的HIV-1整合酶及其抑制剂的发展现状，就如何将作用于整合酶靶点的先导化合物转变成有效的抗艾滋病药物进行了讨论。     

蒿属植物Artemisiacaruifolia中三-对香豆酰亚精胺等对HIV-1蛋白酶的抑制作用

作者从蒿属植物 A.caruifolia 中分得具抗人免疫缺陷病毒蛋白酶(HIV-1 PR)活性的 N~1,N~5,N~(10)-三-p-香豆酰亚精胺(1),并研究了相关化合物抑制 HIV-1 PR 的活性。该植物地上部分用甲醇回流提取,将提取物悬于水中,分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。乙酸乙酯部位经柱层析,用甲醇-水     

几种抑制HIV-1复制酶的植物成分

植物活性成分结构多样性和其作用多靶点的特点, 已使其成为寻找抗HIV-1药物的重要来源之一。为从植物中获得结构新颖的抗HIV-1活性先导化合物, 本文应用HIV-1蛋白酶(PR)、逆转录酶(RT)和整合酶(IN)筛选模型, 对45个来源于毛茛科、芸香科和五味子科等植物的结构清楚的化合物进行了体外活性测定。12个三萜类化合物中8个具有抑制HIV-1 PR活性, 其中2个还具有抑制IN活性; 15个木脂素类化合物中2个具有抑制HIV-1 RT活性。6个生物碱类、7个黄酮类及5个其他结构类型的化合物都无明显抑制3种复制酶的作用。植物来源的三萜类化合物抑制PR或IN的活性较好, 值得深入研究。