脂质体莪术醇联合顺铂抗人卵巢癌细胞作用和机制研究

目的 研究脂质体莪术醇(LC)联合顺铂抗人卵巢癌细胞的作用和机制.方法 实验以卵巢癌细胞株SKOV3和HO8910为研究对象,以10 μg/ml LC为基准,联合不同浓度的顺铂(0、2、4、8、16、32、64 μg/ml)进行分组,MTT、Transwell和流式法分别检测各组细胞增殖、侵袭、迁移能力和凋亡率的变化,Western blot检测各组AKT、p-AKT和cleaved-Caspase8、9、3蛋白表达的变化.结果 MTF结果显示,与单用顺铂或者LC组比较,联合用药组的肿瘤细胞增殖率降低(P＜0.05),联合用药中顺铂对SKOV3的IC50为(12.67±2.03)μg/ml[单用顺铂的IC50:(38.28±5.98)μg/ml];联合用药中顺铂对HO8910的IC50为(10.55±1.55)μg/ml[单用顺铂的IC50:(26.41 ±2.30) μg/ml].联合组(8μg/ml的顺铂+ 10 μg/ml的LC)的卵巢癌细胞侵袭和迁移率均降低(P＜0.05),凋亡率最高(P＜0.05).Western blot结果提示联合用药组卵巢癌细胞的p-AKT蛋白的表达水平降低(P＜0.05),cleaved-Caspase8、9、3蛋白水平上升(P＜0.05).结论 低剂量LC可以增强顺铂抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进肿瘤细胞凋亡,联合用药可能通过PI3K/AKT通路促进卵巢癌细胞凋亡.     

邻苯二甲酸二丁酯暴露对青春期雌性大鼠卵巢P450scc基因表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期雌性大鼠的生殖毒性作用及作用机制.方法:21d龄SPF级雌性SD大鼠,随机分为DBP250 mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg3个染毒组和溶剂对照组(玉米油),连续8周灌胃染毒.染毒结束后,在动情前期对大鼠实施处死,取动脉血,利用放射免疫荧光法检测血清中孕酮(P)水平;取卵巢组织提取mRNA,实时荧光定量RT-PCR检测大鼠卵巢组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)mRNA表达水平.结果:各处理组间大鼠血清P水平有统计学差异(F=4.306,P=0.014),与对照组比较,DBP 1 000 mg/kg剂量组大鼠血清P水平降低(P＜0.05),与对照组比较,250mg/kg及500mg/kg剂量大鼠血清P水平无统计学差异.各处理组间大鼠卵巢P450scc mRNA表达水平有统计学差异(H=15.591,P＜0.01),与对照组比较,DBP 250 mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg剂量组大鼠卵巢P450scc mRNA表达水平降低(P＜0.01),各剂量组间卵巢P450scc mRNA表达水平比较无统计学差异(P＞0.05).结论:DBP可使青春期雌性大鼠卵巢P450scc表达降低,提示DBP对雌性大鼠产生生殖毒性.     

基于MITF与PI3K/AKT信号通路探讨多种单味中药对黄褐斑的作用机制研究

目的：基于小眼畸形相关转录因子(MITF)与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究多种单味中药对黄褐斑的作用机制。方法：水煎法制备甘草、当归、赤芍药液。黑素细胞分为0 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml、500 μg/ml、1000 μg/ml、1000 μg/ml+LY294002组,培养基中加入相应浓度的中药药液与25 nM LY294002,MTT法检测不同剂量药物细胞毒性,测定酪氨酸酶活性与黑色素含量,WB检测MITF、PI3K/Akt信号通路相关分子水平。30只豚鼠随机分为对照组、模型组、甘草组、当归组、赤芍组,每组6只。中波紫外线(UVB)照射建立黄褐斑模型,甘草组、当归组、赤芍组分别接受0.3 mg/kg甘草、当归、赤芍药液灌胃,对照组、模型组接受等体积生理盐水灌胃,持续4周。切取豚鼠背部造模处皮肤,测定黑色素含量,HE、Fontana-Masson染色观察皮肤组织形态,WB、免疫组化检测MITF、PI3K/Akt信号通路相关分子水平。结果：与各组0 μg/ml组相比,甘草、当归、赤芍500、1000 μg/ml组细胞活力降低(P＜0.05)；甘草500、1000 μg/ml组、当归100、500、1000 μg/ml组、赤芍1000 μg/ml组酪氨酸酶活性降低(P＜0.05)；甘草500、1000 μg/ml组、当归50、100、500、1000 μg/ml组、赤芍100、500、1000 μg/ml组黑色素含量降低(P＜0.05)。WB检测结果显示,与各组0 μg/ml组相比,1000 μg/ml组MITF表达水平降低(P＜0.05),p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高(P＜0.05)。与对照组相比,模型组、甘草组、当归组、赤芍组背部皮肤黑色素含量升高(P＜0.05),皮肤组织结构紊乱,黑色素沉积明显增多；与模型组相比,甘草组、当归组、赤芍组背部皮肤黑色素含量降低(P＜0.05),皮肤组织结构较为完整,黑色素沉积减少。WB、免疫组化检测结果显示,与对照组相比,模型组MITF表达水平升高(P＜0.05),p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平降低(P＜0.05),甘草组、当归组、赤芍组MITF、p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高(P＜0.05)；与模型组相比,甘草组、当归组、赤芍组MITF表达水平降低(P＜0.05)。结论：甘草、当归、赤芍可通过激活PI3K/AKT信号通路,抑制MITF表达,减少皮肤黑色素沉积,进而缓解黄褐斑症状。     

Histatin1 improves proliferation and migration in human human skin fibroblasts

目的 了解富组蛋白1(histatin1,Hst1)对人成纤维细胞增殖和迁移功能的影响.方法 将人成纤维细胞按常规方法传代培养,分为空白对照组(DMEM+1％小牛血清)、A组(100 μg/ml Hst1)、B组(30 μg/ml Hst1)、C组(3μg/mlHst1),细胞计数法观察不同浓度Hst1(3～ 100μg/ml)在不同时相点(24、48、72 h)对人成纤维细胞增殖功能的影响;将已融合的人成纤维细胞分为丝裂霉素C处理组及丝裂霉索C未处理组,各组中再次分为空白对照组(DMEM +1％小牛血清)、Ⅰ组(30 μg/ml Hst1)、Ⅱ组(10 ng/ml rhEGF)、Ⅲ组(30 μg/ml Hst1+ 10 ng/ml rhEGF)、Ⅳ组(15 μg/ml Hst1 +5 ng/ml rhEGF)、Ⅴ组(15 μg/ml Hst1+ 10 ng/ml rhEGF),通过体外细胞划痕实验考察Hst1对人成纤维细胞迁移功能的影响.结果 ①不同浓度的Hst1能够促进人成纤维细胞增殖,与浓度及时间无明显依赖关系,24h时间点A、B组细胞数显著高于其余各组(P ＜0.01);②30μg/ml Hst1能促进细胞划痕创面愈合,8h划痕愈合率约37.7％,与rhEGF联合应用时促划痕愈合率高于单独用药;利用丝裂霉素C排除细胞增殖作用后,30 μg/ml Hst1较空白对照组无促进细胞迁移功能(P＞0.05),划痕愈合率较丝裂霉素C未处理对应组下降,但无统计学意义,且与rhEGF联合应用时促划痕愈合率与单独用药无统计学差异(P＞0.05).结论 Hst1能够促进人成纤维细胞增殖,但促迁移功能不明显.Hst1联合rhEGF使用时对人成纤维细胞划痕创伤愈合具有协同促进作用.     

不同剂量舒芬太尼对心脏瓣膜置换术病人气管插管应激反应的影响

目的:探讨不同剂量舒芬太尼对心脏瓣膜置换术病人气管插管应激反应的影响,并与芬太尼进行比较.方法:将60例择期瓣膜置换术病人随机均分成芬太尼10 μg/kg(A)、舒芬太尼1 μg/kg(B)、舒芬太尼1.5 μg/kg(C)与舒芬太尼2 μg/kg(D)四组.分别给予芬太尼10 μg/kg,舒芬太尼1μg/kg、舒芬太尼1.5 μg/kg与舒芬太尼2 μg/kg加咪唑安定、维库溴铵诱导插管.记录麻醉诱导前(T0),麻醉诱导后(T1),插管后1 min(T2)、3 min(T3)、5 min(T4)、10 min(T5)时收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR),并计算出相应的心率和收缩压乘积(RPP).于T0、T2、T5各时间点抽血测定血糖.结果:四组病人T0时SBP,DBP,MAP,HR,RPP比较均无统计学差异(P＞0.05);T1时上述参数与T0比较明显下降(P＜0.01),但组间无差异(P＞0.05).A组T2,T3时SBP,DBP,MAP较T1有所升高(P＜0.01～0.05),但与T0比较无统计学差异(P＞0.05);B,C,D三组SBP,MAP在T2,T3时低于A组(P＜0.01～0.05),D组在T4时仍低于A组(P＜0.05).A组在T2时HR较T1有所上升(P＜0.05),但仍未达到T0水平,B,C,D三组在T2时HR较T1变化不大,T2时D组HR低于A组(P＜0.05);T5时A,D组HR明显低于B组(P＜0.05).B,C,D三组在T1直至T5时RPP均较T0明显降低(P＜0.01),在T2时A组RPP高于B,C,D三组(P＜0.01).A,B,C,D四组在诱导插管期间使用阿托品的例数分别为5(33.3%),0(0%),4(26.7%),5(33.3%),B组明显低于A,D两组(P＜0.05).A,B,C,D四组各时间点血糖值变化无明显统计学意义(P＞0.05).结论:三组剂量舒芬太尼均能有效抑制心脏瓣膜置换病人气管插管应激反应,其中1 μg/kg组插管期间血流动力学更加稳定.     

茶多酚对草甘膦诱导小鼠睾丸支持细胞损伤的影响

目的:探讨茶多酚(TP)对草甘膦诱导的小鼠睾丸支持细胞损伤的影响。方法:原代培养小鼠睾丸支持细胞,采用油红O染色鉴别支持细胞纯度。将细胞随机分为正常对照组、草甘膦染毒组(90μg/ml)、TP预处理组(经40、80、160μg/ml TP预处理12 h后,再用草甘膦作用于细胞24 h)。MTT法检测细胞存活率,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性,TUNEL法原位检测细胞凋亡。结果:与对照组和TP预处理组比较,草甘膦染毒组能降低细胞存活率、增加LDH释放与细胞凋亡率(P0.01);40、80μg/ml TP预处理组能明显提高支持细胞存活率,减少LDH释放量,降低支持细胞凋亡率(P0.01);160μg/mlTP预处理组与草甘膦染毒组差异均无统计学意义(P0.05)。结论:一定剂量的TP(40、80μg/ml)能保护由草甘膦诱导的小鼠睾丸支持细胞损伤。     

泼尼松对白细胞介素-17/白细胞介素-23炎症轴调节作用的分子机制

目的 探讨泼尼松对IL-23/IL-17炎症轴的影响.方法 分离昆明小鼠脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,MTT法检测不同浓度(0、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1 000 μm)泼尼松对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响.另取小鼠脾淋巴细胞分为4组,A组用空白完全培养液培养、B组用含0.001 μm泼尼松的培养液培养24 h后用含有转化生长因子-β1 (TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)培养液继续培养48 h;C、D组用含TGF-β1、IL-6、IL-23培养液培养48 h后,C组改用含0.001 μm泼尼松的培养液、D组改用空白培养液继续培养24h.收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法检测IL-17a含量;采用实时荧光定量反转录PCR检测IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达水平.结果 0.001 μm泼尼松对小鼠脾淋巴细胞的增殖即有抑制作用(P＜0.05).B组IL-17含量低于A、C、D组(P＜0.05),C组IL-17含量低于A组、D组(P＜0.05).A、B两组IL-23 mRNA表达量比较,差异无统计学差异意义(P＞0.05),C组IL-23 mRNA表达量低于D组(P＜0.05).结论 泼尼松能够抑制淋巴细胞的增殖,当机体免疫系统失衡促炎因子高表达时,泼尼松能够抑制IL-17分泌,抑制IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达而发挥免疫抑制作用.     

PM2.5 对支气管上皮细胞中 VEGF、ROS 的影响

探讨细颗粒物（PM2.5）对支气管上皮细胞中血管内皮生长因子（VEGF）、活性氧类（ROS）的影响。方法 培养支气管上皮细胞 16HBE,分为 4 组：生理盐水对照组、25 μg/ml PM2.5 组、50μg/ml PM2.5组和 100μg/ml PM2.5 组,测定各组细胞增殖活性、ROS 及 VEGF 表达水平。结果 50 μg/ml PM2.5 组和100μg/ml PM2.5 组细胞增殖活性分别为（89.80±5.85）%和（77.20±7.70）%,低于生理盐水对照组（ <0.05）;50μg/ml PM2.5 组和 100μg/ml PM2.5 组染毒 12 和 24 h ROS 均高于生理盐水对照组（ <0.05）,其中 100μg/mlPM2.5 组染毒 12 和 24 h ROS 水平均最高,分别为（16.60±0.40）和（24.01±0.55）;50 μg/ml PM2.5 组和100 μg/ml PM2.5 组 VEGF 蛋白表达高于生理盐水对照组（ <0.05）,其中 100 μg/ml PM2.5 组 VEGF 蛋白表达水平最高（0.892±0.028）。结论 PM2.5 能对支气管上皮细胞造成氧化损伤,上调 VEGF 蛋白表达。     

LOX-1介导ox-LDL诱导大鼠系膜细胞表达TGF-β1及分泌细胞外基质

目的:观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠肾小球系膜细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及分泌细胞外基质(ECM)的影响,并观察LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(PIA)对ox-LDL上述作用的影响.方法:体外培养肾小球系膜细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、25、50、100 μg/ml)ox-LDL组肾小球系膜细胞 LOX-1 mRNA的表达;RT-PCR观察空白组、ox-LDL组(50 μg/ml)和PIA组(50 μg/ml ox-LDL 250 μg/ml PIA)肾小球系膜细胞 LOX-1、TGF-β1 mRNA的表达,ELISA法检测上述3组肾小球系膜细胞培养上清中TGF-β1、纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)的含量.结果:RT-PCR结果表明,25、50、100 μg/ml ox-LDL组LOX-1 mRNA表达明显高于0 μg/ml组(P＜0.05),其中50 μg/ml组表达最高;50 μg/ml ox-LDL组肾小球系膜细胞 LOX-1、TGF-β1 mRNA表达明显高于空白组和PIA组(P＜0.01).ELISA结果表明50 μg/ml ox-LDL组肾小球系膜细胞培养上清中TGF-β1 、FN、Col Ⅳ的含量明显高于空白组和PIA组(P＜0.05).结论:ox-LDL体外可促进大鼠肾小球系膜细胞表达LOX-1、TGF-β1及分泌细胞外基质,PIA可抑制ox-LDL的上述作用,提示LOX-1可能介导了ox-LDL对肾小球系膜细胞的损伤,参与了肾小球硬化的发生和发展.     

前列地尔联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变40例

目的 观察前列地尔联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的疗效. 方法 67例糖尿病周围神经病变患者随机分为两组,治疗组40例给予前列地尔60 μg加入0.9%氯化钠100 ml静脉滴注,1次/d;甲钴胺500 μg肌内注射,1次/d;对照组27倒单用甲钴胺500 μg肌内注射,1次/d.两组疗程均为1个月.观察两组治疗前、后患者四肢末梢感觉异常或感觉障碍及膝、跟腱反射的变化. 结果 治疗组总有效率(85%)高于对照组(70%),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).治疗组治疗后的四肢末梢感觉异常或感觉障碍及膝、跟腱反射均比治疗前有明显改善(P＜0.01). 结论 前列地尔联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的疗效优于单用甲钴胺.     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

大鼠脑出血灶周围星形胶质细胞内糖原含量的变化

目的：研究脑出血后局部超微结构的变化，探讨脑出血的病理生理过程，为临床治疗提供理论依据．方法：健康雄性SD大鼠4只，随机等分为实验组和对照组．实验组采用细菌胶原酶注射制作纹状体脑出血模型，对照组采用相同方法在相应部位注入等体积生理盐水，采用透射电镜观察脑出血后24h病变局部及其周围和对照组超微结构的变化和糖原的水平变化．结果：电镜观察到在脑出血动物出血灶周围区，不同类型的细胞内均可见到各种各样的超微结构改变．最为醒目的是在脑内血肿周围星形胶质细胞胞质和突起内有大量的糖原颗粒聚集，尤其在毛细血管周围的胶质细胞突起内非常明显；小胶质细胞和少突胶质细胞内均未发现明显糖原颗粒存在．在生理盐水对照组动物，相应部位的各种细胞的超微结构正常；而且神经元、各种胶质细胞和毛细血管内皮细胞内均无明显糖原颗粒聚集．结论：脑出血周围糖原含量增高，局部存在明显的糖代谢障碍．     

云南省2006年登革热监测分析

目的了解云南省登革热的疫情动态、人群抗体水平、媒介伊蚊种群（包括成幼虫孳生和密度变化）的动态变化、为登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法各级医疗、卫生、检疫机构的医务人员对疑似、临床病例进行及时发现和诊断;在流行季节前随机抽取正常人群血清,-20℃保存,用ELISA方法进行血清学检测;在6～10月采用定时、定点调查法,对登革热的主要传播媒介白纹伊蚊、埃及伊蚊的种群、孳生环境、伊蚊幼虫指数和成蚊密度进行监测,每月1次。结果2006年云南省发生输入性登革热病例18例;健康人群登革热IgG抗体阳性率8．09％。伊蚊幼虫密度布雷图指数（BI）、容器指数（Cl）分别在14～98、4．7～73．68之间,白纹伊蚊成蚊密度在3．5～34只,人工小时之间。结论云南省输入性登革热疫情有不断上升的趋势;人群抗体水平登革热IgG抗体阳性率较高,提示当地人群中可能存在该病毒的既往感染或隐性感染;媒介伊蚊幼虫布雷图指数、容器指数和白纹伊蚊成蚊密度均较高。对登革热传播具有极高的危险性,应引起高度注意。     

2001年我国医药研究的若干进展

随着国内外生命科学和生物技术等的飞速发展,我国医药技术在2001年取得了长足的进步。提前完成了我国所承担的人类基因组汁划中的1％测序任务,到2000年,中国科学家在功能基因研究和基因组多样性领域共完成研究论文1850篇,遍及医药各领域,研究手段和水平可于国际先进水平媲美,中国完全有条件在“后基因时代”成为主角之一。     

黄芪在体内抗氧化作用的实验研究

目的:探讨黄芪水提物抗氧化、清除体内自由基的生物活性。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组和黄芪低、中、高剂量组,每组10只。连续灌胃给药7天,采血后,迅速取出肝组织,制成匀浆。测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪可减少MDA含量,增强SOD活力。结论:黄芪可有效清除体内的氧自由基,具有减少氧化应激引起的器官损伤和延缓机体衰老的作用。     

Cohort Mortality Study in Three Ceramic Factories in Jingdezhen in China

To investigate the health impacts of crystalline silica mixed dust and other potential occupational hazards on workers in ceramic factories, a cohort study of 4851 workers registered in the employment records in 3 ceramic factories in Jingdezhen city of China between 1972 and 1974 was identified. The cohort mortality was traced throughout 2003 with an accumulation of 128970.2 person-years, revealed 1542 deaths. Standardized mortality ratios （SMRs） were calculated for the main causes of death by using Chinese national mortality rates as reference. The mortality from all causes in three ceramic factories was 12.0‰ and the cumulative mortality was 31.8%. Malignant neoplasm, cardiovascular diseases, respiratory diseases, infectious diseases were the first four illnesses that threaten workers’ life, and they accounted for 73.2% of all deaths. The results of this study showed that the standardized mortality ratio for all subjects was 1.02, which is very close to that expected on the basis of the China national mortality rates. Statistically significant mortality excesses for respiratory disease （SMR=1.36）, pneumoconiosis （SMR=37.34）, infectious disease （SMR=5.70） and pul- monary tuberculosis （SMR=3.88） were observed. The mortality of 2938 dust-exposed workers was higher than that of 1913 non dust-exposed workers. Except for pneumoconiosis, the mortality from lung cancer, non-malignant respiratory diseases and pulmonary tuberculosis in dust-exposed workers were significantly increased as compared with that in non-exposed workers, and the relative risks （RRs） were 1.86 （1.16–2.99）, 2.50 （1.84–3.40）, 1.81 （1.34–2.45）. The exposure-response relationships between cumulative dust exposure level and mortality from all causes, colorectal cancer, lung cancer, respiratory diseases, and pulmonary tuberculosis were also identified. The findings indicated that silica mixed dust in ceramic factories has harmful impact on the workers’ health and life span in ceramic factory.     

2005年汕头市登革热定点监测结果分析

目的 通过定点监测为汕头市登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法收集监测点的登革热疫情、人群抗体水平和媒介伊蚊等监测资料，用EPI2002软件统计分析。结果2005年汕头市无登革热疫情，抗登革热病毒IgG、IgM阳性率低，伊蚊幼虫孳生密度高峰在6、8、9、10月份，低谷在4、7、11月份，孳生情况随着月平均降水量、平均气温变化而变化；孳生场所以农村、暂时性容器为主。结论汕头市有登革热流行的自然、社会环境条件，人群普遍对登革热易感，8～10月是发动爱国卫生运动，清除伊蚊孳生地，预防、控制登革热流行的适当时机。     

2009年泉州市流感监测结果分析

目的了解泉州市2009年流感活动情况及其型别特征。结论通过流行病学和病原学监测,对泉州市流感流行情况进行分析。结果 2009年全市流感样病例占就诊人数的0.26%～2.34%;全年采集监测标本1392份,经RT-PCR法检测样本阳性率为22.34%;经MDCK细胞分离流感毒株134株,其中季节性H3N2和HINl型各占60.45%和11.19%,甲型H1N1流感占21.64%,B型占6.70%。结论 2009年泉州市流感春夏季以季节性H3N2亚型流感为优势毒株,秋冬季以甲型H1N1流感为流行株,需加强泉州市流感监测和流感病毒抗原变异研究。