大黄虫丸对阿霉素肾硬化大鼠系膜基质增生抑制作用的实验研究

目的:探讨大黄虫丸对阿霉素肾硬化大鼠系膜基质增生的抑制作用。方法:通过单侧肾切除、分次尾静脉注射阿霉素、高脂饲料喂养的方法,制作弥漫性系膜增生伴局灶节段性肾小球硬化动物模型,并应用大黄虫丸进行干预,同时设立假手术组、空白组作阴性对照,观察时间为12周。分别留取各组第4、8、12周末24h尿样标本测定尿蛋白含量。第12周末,处死大鼠,光镜观察肾组织病理形态学变化,计算系膜基质指数;应用免疫组化方法检测纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅳ(CoLⅣ)含量。结果:大黄虫丸可降低阿霉素肾硬化大鼠尿蛋白含量,抑制FN、CoLⅣ的过度表达,减少细胞外基质在肾小球中的积聚。结论:大黄虫丸防治肾小球硬化进展的机制与其减少蛋白尿,抑制系膜细胞、系膜基质增生扩张的功能有关。     

大黄(庶虫)虫丸对阿霉素肾硬化大鼠血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α的影响

目的 探讨大黄(庶虫)虫丸对阿霉素肾硬化大鼠尿蛋白排泄率、血脂、血浆血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的影响.方法 大鼠在单侧肾切除、分次阿霉素尾静脉注射的基础上喂饲高脂饲料,造成弥漫性系膜增生伴局灶节段性肾小球硬化动物模型.将大鼠分为假手术组、空白组、大黄(庶虫)虫丸组、苯那普利组,观察各组大鼠尿蛋白、血脂、血浆TXB2和6-Keto-PGF1α水平.结果 大黄(庶虫)虫丸可明显降低大鼠尿蛋白排出量;降低血浆胆固醇含量;升高血浆6-Keto-PGF1α及降低TXB2水平.结论 大黄(庶虫)虫丸能够祛瘀扶正,促进气血运行,通畅血脉,改善血流动力学,对阿霉素所致的肾损害具有一定的保护作用,其机制可能与其调节血栓素/前列腺素平衡有关.     

大黄(庶虫)虫丸对改良阿霉素肾病肾硬化大鼠模型作用的实验研究

目的:研究大黄虫丸延缓慢性肾小球疾病进展的作用及机理。方法:采用切除右肾,尾静脉注射阿霉素及口服高脂饮食的复合方法塑造大鼠阿霉素肾病肾硬化模型,将实验动物分为正常对照组、肾病模型组、雷公藤多苷组、大黄虫丸小剂量组和大剂量组,分别喂予生理盐水、雷公藤多苷15mg/kg、大黄虫丸0.75g/kg、大黄蜇虫丸1.5g/kg,对各组实验动物的血尿生化及肾脏病理组织变化进行比较研究。结果:大黄虫丸给药后可使肾病大鼠体重增加,摄食量明显增多,明显降低肾病大鼠尿蛋白量,明显降低肾病模型组胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG)值,同时可升高血总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量,高剂量组并可降低血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平,优于雷公藤多苷组。肾组织病理变化观察发现:大黄庶虫虫丸治疗组均表现出减轻炎性细胞浸润、抑制系膜细胞增生和减轻间质纤维化的作用,并且高剂量组改善作用更明显。结论:大黄虫丸具有调脂,减轻炎细胞浸润、抑制系膜细胞增生和减轻间质维化,能防止肾小球硬化的多方面作用。     

大黄虫丸对阿霉素肾硬化大鼠血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)的影响

目的探讨大黄虫丸对阿霉素肾硬化大鼠尿蛋白排泄率、血脂、血浆血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的影响。方法大鼠在单侧肾切除、分次阿霉素尾静脉注射的基础上喂饲高脂饲料,造成弥漫性系膜增生伴局灶节段性肾小球硬化动物模型。将大鼠分为假手术组、空白组、大黄虫丸组、苯那普利组,观察各组大鼠尿蛋白、血脂、血浆TXB2和6-Keto-PGF1α水平。结果大黄虫丸可明显降低大鼠尿蛋白排出量;降低血浆胆固醇含量;升高血浆6-Keto-PGF1α及降低TXB2水平。结论大黄虫丸能够祛瘀扶正,促进气血运行,通畅血脉,改善血流动力学,对阿霉素所致的肾损害具有一定的保护作用,其机制可能与其调节血栓素/前列腺素平衡有关。     

大黄麈虫丸对阿霉素肾硬化大鼠血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α的影响

目的探讨大黄廑虫丸对阿霉素肾硬化大鼠尿蛋白排泄率、血脂、血浆血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-Keto—PGF1α）的影响。方法大鼠在单侧肾切除、分次阿霉素尾静脉注射的基础上喂饲高脂饲料，造成弥漫性系膜增生伴局灶节段性肾小球硬化动物模型。将大鼠分为假手术组、空白组、大黄廑虫丸组、苯那普利组，观察各组大鼠尿蛋白、血脂、血浆TXB2和6-Keto-PGF1α.水平。结果大黄廑虫丸可明显降低大鼠尿蛋白排出量；降低血浆胆固醇含量；升高血浆6-Keto—PGF1α及降低TXB2水平。结论大黄麈虫丸能够祛瘀扶正，促进气血运行，通畅血脉，改善血流动力学，对阿霉素所致的肾损害具有一定的保护作用，其机制可能与其调节血栓素／前列腺素平衡有关。     

大黄(庶虫)虫丸对阿霉素肾病大鼠足细胞骨架蛋白desmin影响的实验研究

目的：探讨大黄（庶虫）虫丸对阿霉素肾病大鼠足细胞损伤的保护作用。方法：SD大鼠一次性尾静脉注射阿霉素5mg／kg，随机分为模型组和大黄（庶虫）虫丸组，另以8只正常大鼠作为对照组，进行对比观察。于实验第7日、14日，各处死4只模型组大鼠，留取肾脏标本待测。实验第28日，大鼠测尿蛋白后，全部处死．观察大鼠肾组织病理形态学变化及超微结构的改变，应用免疫荧光方法定位及半定量分析研究足细胞损伤标志蛋白．desmin的表达变化。结果：与正常对照组比较，阿霉素肾病大鼠肾小球内desmin蛋白表达上调，足细胞部分足突融合，尿白蛋白排泄率增高。结论：大黄（庶虫）虫丸可明显减轻阿霉素肾病大鼠肾小球内desmin蛋白的表达，减轻足细胞足突融合，降低尿白蛋白排泄率。大黄（庶虫）虫丸对阿霉素肾病大鼠的足细胞损害有一定的保护作用。     

肾疏宁防治肾小球硬化机制的实验研究

目的:观察肾疏宁防治肾小球硬化的作用机制。方法:采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射建立大鼠肾小球硬化模型,观察肾疏宁给药8周后肾小球病理表现,免疫组织化学染色法观察肾小球内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)阳性表达,并进行图像分析。结果:肾疏宁治疗组肾小球内α-SMA、FN、LN、ColⅣ和系膜基质较模型组显著减少,与苯那普利无显著性差异。结论:肾疏宁能抑制肾小球系膜细胞表型转化,减少细胞外基质蓄积,对阿霉素肾小球硬化大鼠肾脏具有保护作用。     

褐藻多糖硫酸酯对阿霉素肾硬化大鼠肾组织FN、TGF-β、MMP-9的影响

目的 观察褐藻多糖硫酸酯(FPS)对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用.方法 将40其SD大鼠分成正常组、模型组、海昆肾喜组(褐藻多糖硫酸酯组)、盐酸贝那普利组.建立阿霉素肾硬化大鼠模型,分别采用相应药物干预;8周后观察各组大鼠肾脏病理改变,PAS观察肾小球系膜基质,免疫组化观察肾脏组织纤连蛋白(FN),Western blot观察转化生长因子β(TGF-β)和金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 FPS能减轻肾小球系膜基质增生,且能减少TGF-β、FN表达,上调肾皮质MMP-9的表达.相关性分析研究显示,TGF-β值与FN、系膜基质指数呈正相关;MMP-9值与FN、系膜基质指数呈负相关.结论 FPS可能通过调控TGF-β及MMP-9表达,减轻FN沉积,从而抑制肾小球硬化.     

大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病Ⅷ因子相关抗原及纤维蛋白原的影响

目的:探讨大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病(DN)Ⅷ因子相关抗原(vWF:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)的治疗作用.方法:选择Ⅳ期DN患者60例,用美国IL公司生产ACL-200自动凝血机检测vWF:Ag、Fbg的变化,并随机分为治疗组和对照组,治疗组用大黄(庶虫)虫丸,对照组用潘生丁干预治疗,观察大黄(庶虫)虫丸对Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg的影响.结果:Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg含量显著增高,与正常对照组比较有极显著差异(P＜0.001).用大黄(庶虫)虫丸治疗后,vWF:Ag、Fbg浓度显著降低(P＜0.05;P＜0.005),明显优于潘生丁组.结论:大黄(庶虫)虫丸能显著降低Ⅳ期糖尿病肾病患者血vWF:Ag、Fbg含量,改善高凝状态.     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠两种肝纤维化模型的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸抗肝纤维化作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)和免疫损伤(BSA)模型,观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝功能及肝组织病理学影响.结果:大黄(庶虫)虫丸组肝功能明显改善,肝纤维化程度明显低于模型组(P＜0.05).结论:提示大黄(庶虫)虫丸有抗肝纤维化的作用.     

大黄(庶虫)虫丸对实验性子宫内膜异位症大鼠免疫功能的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对EMT大鼠免疫功能的影响.方法:采用大鼠子宫内膜异位症(EMT)动物模型,造模成功后按照异位内膜体积将大鼠随机分为大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组、模型组,并以假手术组为对照,灌胃治疗4周后检测指标.结果:①大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组对异位子宫内膜有明显抑制作用,与治疗前异位内膜体积(V1)相比,异位内膜体积(V2)明显缩小(P<0.01);②大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显提高EMT大鼠胸腺、脾脏重量指数(P<0.01),降低血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平(P<0.01);③病理组织学分析显示:大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显增加胸腺皮质厚度、脾小节大小及淋巴细胞数,明显降低异位内膜腺体体密度、提高腺腔值、降低淋巴结生发中心体密度(P<0.01).结论:大黄(庶虫)虫丸治疗子宫内膜异位症的部分机制可能改善子宫内膜异位症大鼠免疫功能有关.     

辛通畅络法对系膜增生性肾炎模型大鼠IL-1、IL-6和细胞外基质的影响

目的:观察辛通畅络中药复方肾苏Ⅱ对系膜增生性肾炎(MsPGN)模型大鼠肾组织白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)及肾小球细胞外基质(ECM)的影响,探讨中医药防治MsPGN的有效途径。方法:采用抗Thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物,于治疗6周末,分别观察各组大鼠肾组织IL-1、IL-6和肾小球纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的变化情况。结果:治疗6周末,中药组在抑制MsPGN大鼠肾组织IL-1、IL-6表达,减少肾小球FN、LN、ColⅣ表达量等方面显示疗效优势,且均明显优于西药组。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾苏Ⅱ,具有减轻MsPGN模型大鼠肾小球ECM积聚,改善肾小球硬化的作用。     

大黄(庶虫)虫丸抑制动脉粥样硬化斑块及TNF-α表达

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对动脉粥样硬化(AS)斑块及肿瘤致死因子-α(TNF-α)表达的影响,对进一步研究动脉粥样硬化的发病机制,努力找到干预其机制的方法及对AS防治有着非常重要的意义.方法:大鼠高脂饲料喂养8周后,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 、肿瘤致死因子-α(TNF-α)含量的变化;剥离主动脉,进行病理学检查.结果:与模型组比较,大黄(庶虫)虫丸组大鼠血清TG、TC、LDL、MDA含量明显降低,HDL-C升高, TNF-α 含量明显降低;模型组大鼠主动脉壁内膜显著增厚向管腔突起,可见粥样斑块形成,给大黄(庶虫)虫丸的大鼠在一定程度上减轻动脉粥样硬化程度.结论: 大黄(庶虫)虫丸具有抗动脉粥样硬化作用,其机制可能与降血脂和下调TNF-α表达有关.     

谊肾颗粒对腺嘌呤致肾衰竭大鼠细胞外基质的影响

目的:观察谊肾颗粒对腺嘌呤致肾衰竭大鼠血清及肾小球细胞外基质含量的影响。方法:腺嘌呤灌服制作大鼠肾衰竭模型,随机将动物分为正常对照组,模型组及谊肾颗粒高、低剂量组,两用药组给谊肾颗粒灌胃。治疗6周后检测大鼠血清纤维联接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)含量,图像分析肾组织Col-Ⅳ、FN的表达量。结果:谊肾颗粒能降低血LN、Col-Ⅳ、PC-Ⅲ,提高血FN含量;减少肾衰竭大鼠肾小球细胞外基质FN、Col-Ⅳ的病理性聚集,降低肾小球硬化指数。结论:谊肾颗粒能通过减少肾小球细胞外基质的增生,减轻肾小球硬化程度。     

大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病患者Ⅷ因子相关抗原及纤维蛋白原的影响

目的:探讨大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病(DN)患者Ⅷ因子相关抗原(vWF:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)的治疗作用。方法:选择Ⅳ期DN患者60例,用自动凝血机检测vWF:Ag、Fbg的变化,并随机分为治疗组和对照组。治疗组用大黄(庶虫)虫丸,对照组用潘生丁干预治疗,观察大黄(庶虫)虫丸对Ⅳ期DN患者vWF:Ag、Fbg的影响。结果:Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg含量显著增高,与正常对照组比较有极显著差异(P<0.01)。用大黄(庶虫)虫丸治疗后,vWF:Ag、Fbg浓度显著降低(P<0.05或P<0.01),明显优于潘生丁组。结论:大黄(庶虫)虫丸能显著降低Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg含量,改善高凝状态。     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的: 探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.     

大黄(庶虫)虫丸抗血小板活化的机制研究

目的:探讨大黄(庶虫)虫丸抗血小板活化的作用.方法:用大黄(庶虫)虫丸含药血浆孵育血小板,然后用ADP诱导活化,血小板膜糖蛋白GPⅡ/b/Ⅲa复合物纤维蛋白原受体(PAC-1)单克隆抗体标记,流式细胞术分析血小板的活化.同时,冠心病及脑梗死患者服用大黄(庶虫)虫丸,治疗1疗程(30d)后,取患者血小板,采用流式细胞术分析患者血小板的活化.结果:大黄(庶虫)虫丸药物体外血浆组血小板活化率为20.82%,阿司匹林组血小板活化率为51.71%,大黄(庶虫)虫丸组血小板活化明显低于阿司匹林组(P<0.01).在临床治疗冠心病试验中,服用大黄(庶虫)虫丸患者血小板活化率为14.78%,明显低于服用阿司匹林患者血小板活化率67.74%(P<0.01);对于脑梗塞患者,服用大黄(庶虫)虫丸患者血小板活化率为5.65%,低于阿司匹林患者组77.91%(P<0.01).结论:大黄(庶虫)虫丸能较好的抑制血小板活化,可能是理想的抗动脉血栓形成药物.     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞间质胶原酶(MMP-1)基因表达及分泌到培养基中的明胶酶A(MMP-2)活性的影响.方法分离培养大鼠肝星状细胞(HSC),制备大黄(庶虫)虫丸大鼠药物血清,温育HSC.逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法观察MMP-1的表达.酶谱法检测MMP-2的活性.结果大黄(庶虫)虫丸药物血清可明显促进HSC对MMP-1的基因表达,同时可明显增加HSC合成的MMP-2的含量和活性(P＜0.05).结论大黄(庶虫)虫丸的抗肝纤维化作用与其促进HSC的MMP-1基因表达,增加MMP-2的含量和活性有关.     

大黄(庶虫)虫丸中大黄素的含量测定

目的:建立大黄(庶虫)虫丸中大黄素的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定了大黄(庶虫)虫丸中大黄素的含量.采用YWGC18柱,以甲醇-0.05%磷酸(75:25),用三乙胺调PH至3为流动相,检测波长254nm,流速1.0 mL/min.结果:平均回收率98.9%,RSD1.02%.结论:该法具有操作简单,灵敏度高,重现性好等特点,可作为大黄(庶虫)虫丸的质量控制方法.     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用及对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MCs)及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验(ELAIS)检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN、ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.